人教版高中生物选修1专题3课题1菊花的组织培养 （共30张PPT）

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　　精益生产的三大要素：按节拍生产、单件流、拉动式生产　　精益生产的三大目标：高品质、低成本、短交期　　精益生产的灵魂：持续改善、追求尽善尽美　　精益生产的七大浪费：等待、搬运、不良品、库存、生产过剩、动作、加工及流程　　精益生产的两大支柱：及时生产和自动化　　精益生产的基础和保障：5S和标准作业　　精益生产就是用最少的资源在客房需要的时间生产客户需要的产品和数量　　精益生产的根基：均衡生产　　精益化生产概念 什么是精益生产？　　精益生产又称精良生产，其中“精”表示精良、精确、精美；“益”表示利益、效益等等。精益生产就是及时制造，消灭故障，消除一切浪费，向零缺陷、零库存进军。它是美国麻省理工学院在一项名为“国际汽车计划”的研究项目中提出来的。它们在做了大量的调查和对比后，认为日本丰田汽车公司的生产方式是最适用于现代制造企业的一种生产组织管理方式，称之为精益生产，以针对美国大量生产方式过干臃肿的弊病。精益生产综合了大量生产与单件生产方式的优点，力求在大量生产中实现多品种和高质量产品的低成本生产。　　精益生产方式的作用　　精益生产主要研究时间和效率 ， 注重提升系统的稳定性 ，50 多年
专题3:植物的组织培养技术
（一）植物组织培养的基本过程
一、基础知识
1、植物组织培养的原理：
概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成
完整新个体的潜能。
基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所
特有全套遗传物质，都有发育成为完整
个体所必需的全部基因。因为它们都是
由同一个受精卵细胞有丝分裂分化而来。
细胞的全能性
有丝分裂
受精卵
细胞分化
在个体发育中，细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程叫做细胞分化。
细胞分化
1.离体
2.一定的营养物质
3.植物激素：主要是生长素和细胞分裂素
4.适宜的外界环境条件，例如无菌、适宜的温度、PH值、湿度、光照等
细胞全能性大小：
受精卵>生殖细胞>体细胞
植物细胞>动物细胞
分化程度低的细胞>分化程度高的细胞
2、植物组织培养的条件：
从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官。
2、植物组织培养的相关概念：
①外植体：
由高度分化的植物器官、组织或细 胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。
脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程.
细胞排列疏松而无规则,是高度液
泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.
②脱分化：
③再分化：
④愈伤组织:
（1）不同的植物，培养的难易程度差别很大：
①烟草和胡萝卜的组织培养较为容易；
②枸杞愈伤组织的芽诱导比较难；
（2）同一种植物材料的年龄、保存时间的长短
等也会影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
（二）影响植物组织培养的因素：
1．植物材料的影响：
2、营养---MS培养基
A、大量元素: N、P、K、Ca、Mg、S
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖
D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
Ｎ、Ｐ主要影响蛋白质、核酸的合成；
K、 Ca、Mg、S主要影响酶的活性。
蔗糖既是碳源也是调节渗透压的物质；
维生素能促进细胞分裂和诱导器官分化；
甘氨酸是蛋白质的组成成分，也是有机氮源。
常用植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素
生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素
在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势
激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向
3、植物激素的影响
生长素类：
2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类：
激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类：
赤霉酸（GA3）
激素的使用顺序影响植物细胞的发育方向：
使用顺序 实验结果
先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化
先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化
同时使用 分化频率高
思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？
有利于根的分化
有利于芽的分化，抑制根的分化
促进愈伤组织生长
4.pH、温度、光照
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22℃,每日用日光灯照射12h。
激素用量的比例影响植物细胞的发育方向：
离体组织或细胞
植物体
细胞分裂素≈生长素
愈伤组织
芽
根
细胞分裂素>生长素
细胞分裂素<生长素
植物细胞培养
不需要光
需要光
制备MS固体培养基
外植体消毒
接种
培养
栽培

三、实验具体操作过程
移栽
（一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备
1、配制各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量
2、配制培养基
分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml
① 配制培养液
② 调PH
③ 培养基的分装
由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素
3、灭菌
分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
琼脂加水并加热熔化，加蔗糖和各种母液
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
（二）外植体消毒
2、消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗
③消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
（三）接种
污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精擦洗工作台并用紫外线照射20分钟。
1、接种室消毒
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成0.5～1cm的小段，用镊子夹取菊花茎段接种。
4、接种注意事项
①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件
③插入时应注意方向，形态学上端朝上，形态学下端朝下，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分
正常苗
污染苗
1、外植体带菌
2、培养基及接种器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
污染途径
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养

接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒
培养温度控制在18-22℃
每日用日光灯光照12h
（五）移栽
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。一般放置在20～25℃的遮荫环境中，适应5～7d。试管苗不萎蔫，有新生长的趋势，便可移栽。
1、打开封口膜
2、清洗转移
用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间
3、移栽
幼苗长壮后，移栽到土壤中
固体基质型，含水量高、
蓄水性强、透性好，适合栽培
珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩 。
蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。
（六）栽培
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花
1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）
2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）
3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）
4、无菌箱中的培养；
5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。
在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
四、结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
（三）是否进行了统计、对照与记录
（四）生根苗的移栽是否合格