(共49张PPT)
1.了解基因工程在植物、动物、制药、基因治疗等方面的应用
2.掌握乳腺生物反应器的构建过程,转基因动物器官培育过程。
3.掌握基因治疗方法,能解决实际应用问题。
教学目标
1.3 基因工程的应用
一、植物基因工程硕果累累
植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力,以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。
1.抗虫转基因植物
2.抗病转基因植物
3.其他抗逆转基因植物
4.利用转基因改良植物的品质
二、抗虫转基因植物
1.植物害虫:主要是昆虫类
2.抗虫基因: Bt毒蛋白、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因
3.抗虫转基因植物:水稻、棉花、玉米、马铃薯、大豆、烟草等
4.意义:减少化学农药使用,降低对环境的污染,节约 成本
三、抗病转基因植物(抗病植物不一定能抗虫)
1.引起植物生病的微生物:病毒、细菌、真菌
2.抗病转基因植物:
抗烟草花叶病毒的转基因烟草、抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等。
3.抗病基因:
病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因、几丁质酶基因、抗毒素合成基因
四、抗逆转基因植物
1.植物生长的不利环境:干旱、盐碱、低温、涝害等
2.方法:导入抗逆基因。
3.调节细胞渗透压的基因:作物抗盐碱、抗干旱
鱼的抗冻蛋白基因:耐寒烟草和番茄
抗除草剂基因:大豆、玉米等作物抗除草剂
五、利用转基因改良植物品质
①玉米中缺少赖氨酸,改良方法为:
将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物,改变必需氨基酸合成途径中某种关键酶的活性
②转基因延熟番茄的目的基因是什么?
控制番茄果实成熟的基因
③转基因矮牵牛的目的基因是什么?
与植物花青素代谢有关的基因
六、动物基因工程前景广阔
(五)基因工程药品异军突起
(一)用于提高动物生长速度
(二)用于改善畜产品的品质
(三)用转基因动物生产药物
(四)用转基因动物作器官移植的供体
(一)用于提高动物生长速度
导入外源生长激素基因
将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低。
(二)用于改善畜产品的品质
1、乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。
2、从乳汁中获取目的基因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。
3、从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可无限繁殖。
乳腺能成为基因药物最理想的表达场所的原因:
(三)用转基因的动物生产药物
A.概念:将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,将受精卵送入母体,使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。
4.乳腺生物反应器
B.优点:①产量高;②质量好;③成本低;④易提取。
①获取目的基因(例如血清白蛋白基因)
②构建基因表达载体(在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子)
③显微注射导入哺乳动物受精卵中
④形成胚胎
⑤将胚胎送入母体动物
⑥发育成转基因动物(只有在产下的雌性个体中,转入的基因才能表达)。
思考:用基因工程技术实现动物乳腺生物反应器的操作过程是怎样的?
(四)用转基因动物作器官移植的供体
利用基因工程对猪的器官进行改造
方法:将器官供体基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官
三、基因工程药品异军突起
利用转基因工程菌来生产细胞因子、抗体、疫苗、激素等等。
在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、干扰素直接生物体的哪些结构中提取?
药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。
传统生产方法的缺点
由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。
可利用什么方法来解决上述问题?
利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。
胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。
胰岛素分子结构
基因工程胰岛素(一)
将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!大规模工业化生产不但解决了这种比黄金还贵的药品产量问题,还使其价格降低了30%-50%!
胰岛素生产车间
基因工程胰岛素(一)
基因工程干扰素(一)
干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”!过去从人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍贵”程度自不用多说。
干扰素生产车间
干扰素分子结构
基因工程干扰素( 二)
基因工程人干扰素α-2b(安达芬) 是我国第一个全国产化基因工程人干扰素α-2b,具有抗病毒,抑制肿瘤细胞增生,调节人体免疫功能的作用,广泛用于病毒性疾病治疗和多种肿瘤的治疗,是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。
治疗侏儒症的唯一方法,是向人体注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前,要获得生长激素,需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。
现可利用基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。
基因工程药品 —— 生长激素
其它基因工程药物
人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产,均为解除人类的病苦,提高人类的健康水平发挥了重大的作用。
人造血液及其生产
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利用微生物生产药物的优越性何在?
所谓利用微生物生产蛋白质类药物,是指将人们需要的某种蛋白质的编码基因,构建成表达载体后导入微生物,然后利用微生物发酵来生产蛋白质类药物。与传统的制药相比有以下优越性:
(1)利用活细胞作为表达系统,表达效率高。
(2)可以解决传统制药中原料来源的不足。
(3)降低生产成本,减少生产人员和管理人员。
转基因工程菌的其它应用
利用转基因微生物分解和降解污染物。
1)用基因工程产物——“超级细菌”分解石油,可以大大提高细菌分解石油的效率。具体方法:将能分解三种烃类的假单孢杆菌的基因都转移到能分解另一种烃类的假单孢杆菌内,创造出了能同时分解四种烃类的“超级细菌”。
2)用基因工程培养出“吞噬”汞和降解土壤中DDT的细菌。
3)通过基因重组构建新的杀虫剂,取代生产过程中耗能多、易造成环境污染的农药,并试图通过基因工程回收和利用工业废物。
基因诊断:
也称为DNA诊断或基因探针技术,即在DNA水平分析检测某一基因,从而对特定的疾病进行诊断。
探针制备:放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子;
原 理:利用DNA分子杂交原理;
四、基因治疗曙光初照
基因探针:
基因探针就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列。它包括整个基因,或基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。
基因诊断技术在什么方面发展迅速?
在诊断遗传性疾病方面发展迅速。目前已经可以对几十种遗传病进行产前诊断。
1)β—珠蛋白的DNA探针 → 镰刀状细胞贫血症
2)苯丙氨酸羧化酶基因探针 → 苯丙酮尿症
3)白血病患者细胞中分离出的癌基因制备的DNA探针 → 白血病
举例
1、基因治疗概念:
向有基因缺陷细胞(靶细胞)或组织中引入外源基因DNA或RNA片段,以纠正或补偿基因的缺陷,关闭或抑制异常表达的基因,从而达到治疗的目的
2、实例:
将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,再将这种淋巴细胞转入患者体内。
(1)对严重复合型免疫缺陷症的治疗
患者生存在无菌环境中
3、基因治疗的类型
体外基因治疗:先从病人体内获得某种细胞,进行培养,然后在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。
体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移的治病方法。(如将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者肺组织)
4、基因治疗的发展现状:处于初期的临床试验阶段
基因治疗SCID的过程
体外基因治疗
体内基因治疗
用于基因治疗的基因种类
1。用正常基因代替缺陷基因,或依靠其表达产物来弥补病变基因带来的缺陷。如血友病、地中海贫血病的治疗。
2。反义基因。用mRNA分子与病变的mRNA分子进行互补,阻断蛋白质的合成。
3。自杀基因。编码可杀死癌变细胞的蛋白酶基因。
将目的DNA用自动化设备点在固体支持物上,DNA经固定后,用不同颜色的荧光标记的探针对这些DNA同时进行杂交。
五、基因芯片
基本原理:DNA分子杂交
应用:
研究基因型(利用基因芯片进行序列分析,包括识别DNA序列的突变和研究基因的多态性);
分析基因表达(利用基因芯片检测转录产物,研究基因功能);
基因诊断(针对靶基因而特别设计,利用分子杂交进行特定基因的确定)
优点:实现基因信息的大规模检测
基因工程与食品业
基因工程为人类开辟新的食物来源。
1)鸡蛋白基因在大肠杆菌和酵母菌中表达获得成功。这表明,未来能用发酵罐培养的大肠杆菌或酵母菌来生产人类所需要的卵清蛋白。
2)用基因工程的方法从微生物中获得人们所需要的糖类、脂肪和维生素等产品。
基因工程为食品工业中提供了什么前景?
基因工程与环境监测(一)
基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。
1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来
基因工程与环境监测(二)
利用基因工程培育的指示生物能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。
基因工程与环境污染治理
基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。
1、转基因技术在植物品种改良方面应用广泛,其中一项基因工程就是改造CO2固定酶。其目
的是( A )
A、提高光合作用效率 B、延长果实的储藏期
C、培育新作物品种 D、提高植物的抗性
2、上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白基因的转基因牛,他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法,使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍。“转基因动物”是指( B )
A、提供基因的动物
B、基因组中增加外源基因的动物
C、能产生白蛋白的动物
D、能表达基因信息的动物
3、治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是( D )
A、口服化学药物
B、注射化学药物
C、利用辐射或药物诱发治病基因突变
D、采用基因治疗法纠正或弥补缺陷基因
带来的影响
4.聚合酶链式反应可表示为( D )
A.PEC B.PER
C.PDR D.PCR
5. 下列可作为基因工程技术中载体的是(A) A.动物病毒 B. 大肠杆菌 C.叶绿体 D.线粒体 6. DNA探针能检测到标本上的(C) A.细胞结构 B.遗传密码 C.遗传信息 D.蛋白质序列 7.在抗虫棉产生过程中,毒蛋白基因的受体细胞是(A) A.棉花受精卵细胞 B.棉花分裂旺盛的体细胞C.棉花的花粉粒 D.棉花任何细胞
8.下列有关质粒的叙述,正确的是(D) A.质粒只有在侵入宿主细胞后才能复制 B.细菌的抗性基因一般位于拟核DNA上 C.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器 D.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 9.细菌抗药性基因存在于(A) A.质粒 B.RNA
C.核DNA D.小的直线型DNA
10.基因治疗是指(D)
A.用DNA探针修复缺陷基因 B.将外源基因导入受体细胞
C.用DNA探针检测疾病 D.将正常基因导入有基因缺陷的细胞中
11.下列有关基因工程的叙述,正确的是(C)
A.质粒都可以作为运载体B.重组质粒的形成在细胞内完成
C.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
D.限制性核酸内切酶只在获得目的基因时才用
12.实施基因工程的最终目的是(B)
A.在生物体外对DNA分子进行改造
B.定向地改造生物的遗传性状
C.定向提取生物体的DNA分子
D.定向地对DNA分子进行人工剪切
13.在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最佳方法是(A)
A.化学合成法 B.基因组文库法
C.cDNA文库法 D.聚合酶链式反应
14.科学家已能运用基因工程技术,让羊合成并分泌抗体。下列叙述不正确的是 ( C )
A.该技术将导致定向的变异 B.受精卵是理想的受体细胞
C.垂体分泌的催乳素能促进浆细胞产生抗体 D.可采用DNA合成仪获得目的基因
15.科学家将含有人的胰岛素基因的DNA片段注入羊的受精卵中,该受精卵发育的羊能分泌人的胰岛素。下列对这一过程的叙述,错误的是 ( C )
A.如果用反转录法人工合成人的胰岛素基因,应从人的胰腺组织中获得相应的RNA
B.人的胰岛素基因在羊的细胞内复制、转录和翻译
C.该羊称为“克隆羊”,其细胞内会发生RNA的复制
D.该过程定向地改造了生物的遗传性状
8.下列有关质粒的叙述,正确的是(D) A.质粒只有在侵入宿主细胞后才能复制 B.细菌的抗性基因一般位于拟核DNA上 C.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器 D.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 9.细菌抗药性基因存在于(A) A.质粒 B.RNA
C.核DNA D.小的直线型DNA
16.人的糖蛋白必须经过内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 ( B )
A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.T4噬菌体 D.质粒DNA
17.基因治疗的过程从变异角度分析属于 ( C )
A.基因突变 B.染色体变异C.基因重组D.不遗传的变异
18.要在根本上治疗白化病须采用 ( A )
A.基因治疗 B.医学手术 C.射线照射D.一般药物
19.近几年我国植物基因工程的研究和开发进展十分迅速。下列哪项不属于植物基因工程的研究成果? ( D )
A.转基因抗病毒土豆 B.抗除草剂大豆
C.富含赖氨酸的玉米 D.生物反应器生产生长激素
20.利用基因工程技术将生长激素基因导入绵羊体内,转基因绵羊生长速率比一般的绵羊提高30%,体型增大50%,在基因操作过程中生长激素基因的受体细胞最好采用( C )
A.乳腺细胞 B.体细胞 C.受精卵 D.精巢
21.下列不属于利用基因工程技术制取的药物是 ( C )
A.从大肠杆菌体内制取白细胞介素 B.在酵母菌体内获得干扰素
C.利用青霉菌获取青霉素 D.在大肠杆菌内获得胰岛素
22.基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的。在基因操作的步骤中,不进行碱基互补配对的是 ( C )
A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测和表达
23.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是 ( C )
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体
B.DNA连接酶的作用是使互补的黏性末端对应碱基之间形成氢键
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要原因是细菌繁殖快
D.只要目的基因进入受体细胞就能成功地实现表达