专题综合检测二 细胞工程
时间：90分钟 满分：100分
一、选择题(每小题2分，共20分)
1．[2019·河北高二期末]下图表示用某二倍体植株进行植物组织培养的过程，下列说法正确的是( )
①②③―→④
A．①→②进行的是减数分裂
B．②的分化程度高于①的
C．③是具有分裂、分化能力的薄壁细胞
D．该过程体现了植物细胞的全能性
2．[2019·河北高二期末]下列有关动物细胞培养的说法，正确的是( )
A．克隆动物不需要经过动物细胞培养
B．培养10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型
C．动物细胞应置于含95%的O2和5%的CO2的培养箱中供养
D．动物细胞培养时无需在培养基中添加天然成分
3．[2019·河北高二期末]植株甲的基因型为Bb，植株乙的基因型为BB，分别取植株甲和植株乙的体细胞获得原生质体后，在溶液中诱导这两个原生质体融合，融合形成的细胞的基因型不可能是( )
A．BBbb B．Bbbb
C．BBBB D．BBBb
4．[2019·河北高二期末]下列有关细胞核移植中的供体细胞的说法，正确的是( )
A．只能是分化程度低、全能性高的细胞
B．一般选择传代培养10～50代的细胞
C．供体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期
D．供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能
5．[2019·河北高二期末]动物细胞培养要处于无菌、无毒的环境中，下列操作与其无关的是( )
A．对培养液和培养用具进行无菌处理
B．在培养液中添加一定量的抗生素
C．定期更换培养液，防止代谢产物积累
D．向培养液中添加促生长因子等成分
6．[2019·河北高二期末]下列有关植物组织培养的应用的说法，错误的是( )
A．微型繁殖能保持亲本的优良性状
B．作物脱毒时应选择植物的分生区细胞进行组织培养
C．欲获得大量的细胞产物，可大规模培养愈伤组织细胞
D．获得突变体时，诱导突变的对象是用于组织培养的外植体
7．[2019·江苏高二期末]科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述错误的是( )
A．图示技术涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等
B．过程②可用灭活的病毒诱导原生质体融合
C．过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等
D．f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同
8．[2019·瓦房店市高级中学高二期末]下列有关生物细胞工程的叙述正确的是( )
A．细胞核移植和动物细胞培养均可获得动物个体
B．用于治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作为抗癌药物定向杀死癌细胞
C．动物细胞培养出现的癌变一般发生于传代培养过程中
D．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，依据的原理、诱导融合的方法都相同
9．[2019·榆林市第二中学高二期末]下列有关植物体细胞杂交的叙述，错误的是( )
A．用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体
B．再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志
C．植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物
D．植物体细胞杂交技术可以克服不同物种间远缘杂交不亲和的障碍
10．[2019·泉州第十六中学高二期末]关于动物细胞工程的说法，正确的是( )
A．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
B．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
C．动物细胞融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞核
D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
二、非选择题(每小题10，共80分)
11．[2019·河北高二期末]玉米(2N＝20)和水稻(2M＝24)均为二倍体植物，某实验小组拟用体细胞杂交技术培育富含β?胡萝卜素的“黄金大米”植株，过程设计如下图所示。请回答下列问题：
(1)①为原生质体的制备过程，该过程需要的酶是________，制备原生质体的过程不能在清水中进行，以防止________________。
(2)原生质体融合过程体现了细胞膜________的结构特点。
(3)图中融合的杂种细胞中含有________个染色体组，该杂种细胞培育形成的植株的精原细胞在减数分裂过程中能产生________个四分体。
(4)③过程________(填“需要”或“不需要”)在光下进行，④过程中愈伤组织分化的方向与培养基中________________有关。
12．[2019·北京高二期末]紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图：(注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R－6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)
(1)据图可知，本研究主要利用________技术。
(2)在实验前需通过预实验来研究R－6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，实验的设计思路是：________________________________________________________________________。
(3)图中①过程可使用________________作为诱导剂，推测在融合后只有异源融合产物能够存活的原因是________________________________________。
(4)图中③过程愈伤组织经过________形成再生植株，这一过程的原理________________。请谈谈利用此项技术进行育种的优点：________________________________。
13．[2019·延安市宝塔区第四中学高二期末]花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图所示。
请据图回答下列问题：
(1)过程①所需的酶是________。过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体________________(填一种细胞器名称)的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(2)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________。
(3)对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
14．[2019·云南师大附中高三月考]2018年诺贝尔生理学或医学奖授予了美国的詹姆斯·艾利森和日本的本庶佑，以表彰他们在癌症免疫负调控机制，尤其是免疫检查点的研究中取得的成就。免疫检查点分子众多，PD－1/PD－L1作为一个最关键的免疫检查点，利用抗PD－1或PD－L1单克隆抗体类制剂阻断PD－1/PD－L1途径的治疗已经成为癌症免疫治疗的焦点。图为制备上述单克隆抗体的过程，请回答下列相关问题：
(1)①过程采用的实验技术为________________，促进该过程常使用________________诱导。
(2)在细胞培养过程中，首先应保证被培养细胞处于________________环境中，细胞培养还应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是______________________________。
(3)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了________________________________________________________________________。
15．[2019·黑龙江哈尔滨市第六中学校高二期末]通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势，培育高产、耐盐的杂种植株。请完善图1实验流程并回答问题：
(1)A是________________酶，C是具有________性状的胚状体。
(2)若二倍体的甲种植物细胞内含a条染色体，四倍体的乙种植物细胞内含b条染色体，通过上述实验流程，得到的目的植株细胞中应含________条染色体(假设能成功)，杂种植株为________倍体。
(3)植物体细胞杂交与杂交育种比较，突出的优点是______________________。
(4)若C包裹上________，制成如图2的人工种子，则能解决杂种植株繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。获得图2中的结构②，需要经过的两个核心步骤是________和________，图2中结构________(填写①、②、③)的主要作用是提供胚状体发育所需要的营养，为了有利于幼苗茁壮成长，提高农作物产量，在③结构中可以添加固氮菌、防病虫农药、除草剂和植物激素类似物等。
16．[2019·福建高二期末]如图为植物体细胞杂交过程示意图，据图回答：
(1)步骤①是________，最常用的方法是________________________________________________________________________。
(2)步骤②采用的化学试剂是________________(中文名称)，目的是________________。
(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是__________________，其中步骤⑤是__________________过程。
(4)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？________。为什么？________________________________________________________________________。
17．[2019·广东佛山一中高二期末]香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。但南方冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒(BBTV，单链环状DNA病毒)引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。目前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高香蕉的品质，具有重要意义。
(1)脱毒香蕉苗的获得，可选取________________为材料进行组织培养，依据是________________。
(2)建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请指出两种检测病毒存在的方法①________________________；②________________。
(3)结合诱变育种从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及步骤：____________________________________________________。
18．[2019·福建省泉州市泉港区第一中学高二期末]有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：
(1)若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是________________________________________________________________________。
(2)若a，b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用________________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是________________。
(3)若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________________________。在特定的________________上培养以获得d细胞，再经________培养和________________检测，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是____________________。
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专题综合检测二 细胞工程
时间：90分钟 满分：100分
一、选择题(每小题2分，共20分)
1．[2019·河北高二期末]下图表示用某二倍体植株进行植物组织培养的过程，下列说法正确的是( )
①②③―→④
A．①→②进行的是减数分裂
B．②的分化程度高于①的
C．③是具有分裂、分化能力的薄壁细胞
D．该过程体现了植物细胞的全能性
解析：①→②为脱分化的过程，该过程进行的是有丝分裂，A错误；②是①脱分化形成的，其分化程度低于①，B错误；②是愈伤组织，是具有分裂、分化能力的薄壁细胞，而③是胚状体，C错误；植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，D正确。
答案：D
2．[2019·河北高二期末]下列有关动物细胞培养的说法，正确的是( )
A．克隆动物不需要经过动物细胞培养
B．培养10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型
C．动物细胞应置于含95%的O2和5%的CO2的培养箱中供养
D．动物细胞培养时无需在培养基中添加天然成分
解析：克隆动物培养过程中，核移植形成的重组细胞需要进行动物细胞培养，A错误；培养10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，B正确；动物细胞应置于含95%的空气和5%的CO2的培养箱中供养，以维持培养液的pH，C错误；动物细胞培养时，需要在培养基中添加动物血清、血浆等天然成分，D错误。
答案：B
3．[2019·河北高二期末]植株甲的基因型为Bb，植株乙的基因型为BB，分别取植株甲和植株乙的体细胞获得原生质体后，在溶液中诱导这两个原生质体融合，融合形成的细胞的基因型不可能是( )
A．BBbb B．Bbbb
C．BBBB D．BBBb
解析：根据以上分析已知，溶液中存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，当基因型为Bb与Bb的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBbb，A正确；已知溶液存在基因型为Bb和BB的两种原生质体，但是不存在基因型bb的原生质体，因此融合后形成的细胞中不可能出现3个b基因，即不可能出现基因型为Bbbb的细胞，B错误；当基因型为BB与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBB，C正确；当基因型为Bb与BB的原生质体融合后得到的细胞的基因型为BBBb，D正确。
答案：B
4．[2019·河北高二期末]下列有关细胞核移植中的供体细胞的说法，正确的是( )
A．只能是分化程度低、全能性高的细胞
B．一般选择传代培养10～50代的细胞
C．供体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期
D．供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能
解析：核移植技术分为体细胞核移植和胚胎细胞核移植，因此分化程度高、全能性低的体细胞也可以作为供体细胞，A错误；核移植时一般都选用传代10代以内的细胞，因为正常细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，B错误；受体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期，C错误；供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能，D正确。
答案：D
5．[2019·河北高二期末]动物细胞培养要处于无菌、无毒的环境中，下列操作与其无关的是( )
A．对培养液和培养用具进行无菌处理
B．在培养液中添加一定量的抗生素
C．定期更换培养液，防止代谢产物积累
D．向培养液中添加促生长因子等成分
解析：对培养液和培养用具进行无菌处理，可以为动物细胞培养提供无菌环境，A正确；在培养液中添加一定量的抗生素可以杀灭细菌，为动物细胞培养提供无菌环境，B正确；定期更换培养液，防止代谢产物积累，可以为动物细胞培养提供无菌、无毒的环境，C正确；向培养液中添加促生长因子等成分可以促进微生物生长、发育和繁殖，不能为动物细胞培养创造无菌、无毒的环境，D错误。
答案：D
6．[2019·河北高二期末]下列有关植物组织培养的应用的说法，错误的是( )
A．微型繁殖能保持亲本的优良性状
B．作物脱毒时应选择植物的分生区细胞进行组织培养
C．欲获得大量的细胞产物，可大规模培养愈伤组织细胞
D．获得突变体时，诱导突变的对象是用于组织培养的外植体
解析：微型繁殖技术运用了植物组织培养技术，属于无性繁殖，可以保持亲本的优良性状，A正确；利用植物分生组织(刚刚产生，病毒很少，甚至无毒)进行培养可以使新长成的植株脱去病毒，B正确；愈伤组织具有旺盛的分裂能力和代谢能力，因此欲获得大量的细胞产物，可大规模培养愈伤组织细胞，C正确；在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种，D错误。
答案：D
7．[2019·江苏高二期末]科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述错误的是( )
A．图示技术涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等
B．过程②可用灭活的病毒诱导原生质体融合
C．过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等
D．f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同
解析：图示为植物体细胞杂交技术，涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等，A正确；过程②为人工诱导原生质体融合，可用物理法(包括离心、振动、电激等)或化学法(一般是用聚乙二醇作为诱导剂)来诱导融合，但不能用灭活的病毒来诱导融合，B错误；过程④、⑤分别表示脱分化、再分化，需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等，C正确；在e培养基中，杂种细胞经过脱分化形成愈伤组织，在f培养基中，愈伤组织通过再分化形成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株，因此f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同，D正确。
答案：B
8．[2019·瓦房店市高级中学高二期末]下列有关生物细胞工程的叙述正确的是( )
A．细胞核移植和动物细胞培养均可获得动物个体
B．用于治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作为抗癌药物定向杀死癌细胞
C．动物细胞培养出现的癌变一般发生于传代培养过程中
D．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，依据的原理、诱导融合的方法都相同
解析：动物细胞核移植技术可以得到动物个体，而动物细胞培养只能得到更多的动物细胞或细胞产品，A错误；“生物导弹”是单抗上连接抗癌药物，利用抗体和相应抗原(癌细胞)特异性结合的能力，利用抗癌药物或毒素杀伤和破坏癌细胞，B错误；原代培养过程中细胞能够保持二倍体核型，而传代培养超过50代后，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力，C正确；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，依据的原理、诱导融合的方法都不完全相同，D错误。
答案：C
9．[2019·榆林市第二中学高二期末]下列有关植物体细胞杂交的叙述，错误的是( )
A．用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体
B．再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志
C．植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物
D．植物体细胞杂交技术可以克服不同物种间远缘杂交不亲和的障碍
解析：由于植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交，因此在杂交之前必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得具有活力的原生质体，A正确；植物体细胞融合成功的标志是融合的原生质体形成新的细胞壁，进而成为杂种细胞，B正确；植物体细胞杂交的最终目的是获得杂种植株，C错误；植物体细胞杂交技术最大的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
答案：C
10．[2019·泉州第十六中学高二期末]关于动物细胞工程的说法，正确的是( )
A．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
B．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
C．动物细胞融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞核
D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
解析：克隆属于有丝分裂，其培养过程中细胞的基因型一般是不变的，A错误；培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上不会形成多层细胞，B错误；动物细胞融合后形成的杂交细胞中原来的细胞核将融合为一个细胞核，C错误；细胞融合技术突破了有性杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，D正确。
答案：D
二、非选择题(每小题10，共80分)
11．[2019·河北高二期末]玉米(2N＝20)和水稻(2M＝24)均为二倍体植物，某实验小组拟用体细胞杂交技术培育富含β?胡萝卜素的“黄金大米”植株，过程设计如下图所示。请回答下列问题：
(1)①为原生质体的制备过程，该过程需要的酶是________，制备原生质体的过程不能在清水中进行，以防止________________。
(2)原生质体融合过程体现了细胞膜________的结构特点。
(3)图中融合的杂种细胞中含有________个染色体组，该杂种细胞培育形成的植株的精原细胞在减数分裂过程中能产生________个四分体。
(4)③过程________(填“需要”或“不需要”)在光下进行，④过程中愈伤组织分化的方向与培养基中________________有关。
解析：(1)根据以上分析已知，①过程使用的酶是纤维素酶和果胶酶；由于原生质体失去了细胞壁的保护，因此在制备原生质体的过程不能在清水中进行，以防止原生质层吸水涨破。(2)图示原生质体A与原生质体B融合的过程利用了细胞膜的流动性特点。(3)由于原生质体A含有2个染色体组，原生质体B也含有2个染色体组，所以融合的杂种细胞中含有4个染色体组；由于原生质体A含有10对同源染色体，原生质体B含12对同源染色体，因此杂种细胞培育形成的植株的精原细胞在减数分裂过程中能产生10＋12＝22个四分体。(4)③过程表示脱分化，不需要光照；④过程表示再分化，愈伤组织分化的方向与培养基中植物激素的种类和比例有关。
答案：(1)纤维素酶和果胶酶 原生质层吸水涨破
(2)具有一定的流动性
(3)4 22
(4)不需要 植物激素的种类和比例
12．[2019·北京高二期末]紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图：(注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R－6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)
(1)据图可知，本研究主要利用________技术。
(2)在实验前需通过预实验来研究R－6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，实验的设计思路是：________________________________________________________________________。
(3)图中①过程可使用________________作为诱导剂，推测在融合后只有异源融合产物能够存活的原因是________________________________________。
(4)图中③过程愈伤组织经过________形成再生植株，这一过程的原理________________。请谈谈利用此项技术进行育种的优点：________________________________。
解析：(1)据图可知，本研究主要利用植物体细胞杂交技术。(2)将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R－6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，可获得R－6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度。(3)图中①表示人工诱导原生质体融合过程可使用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。融合后的细胞中，只有异源融合产物能够存活的原因可能是异源融合产物因代谢互补可恢复生长并获得再生能力。(4)图中③过程愈伤组织经过再分化形成再生植株，这一过程利用的细胞原理是：植物细胞的全能性。植物体细胞杂交技术的优点有：克服远缘杂交不亲和的障碍。
答案：(1)植物体细胞杂交
(2)将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R－6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
(3)聚乙二醇(PEG) 异源融合产物因代谢互补可恢复生长并获得再生能力
(4)再分化 植物细胞的全能性 克服远缘杂交不亲和的障碍
13．[2019·延安市宝塔区第四中学高二期末]花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图所示。
请据图回答下列问题：
(1)过程①所需的酶是________。过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体________________(填一种细胞器名称)的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(2)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________。
(3)对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
解析：(1)利用酶的专一性除去植物细胞的细胞壁，过程①所需的酶是纤维素酶和果胶酶。图示过程中，抗病型黑芥叶肉细胞经紫外线处理后染色体片段化，不会长时间存活，但含有叶绿体；易感型花椰菜幼根细胞没有叶绿体，过程②叶肉细胞原生质体和根部细胞原生质体融合后，在显微镜下观察融合的活细胞中如果有供体叶绿体的存在，说明属于杂种细胞。(2)原生质体没有细胞壁，容易吸水涨破，在其培养液中加入适宜浓度的甘露醇，可以保持一定的渗透压，维持原生质体一定的形态。(3)筛选具有高抗性的杂种植株，可对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，若能抗病，说明培育成功。
答案：(1)纤维素酶和果胶酶 叶绿体
(2)保持原生质体的完整性
(3)黑腐病菌
14．[2019·云南师大附中高三月考]2018年诺贝尔生理学或医学奖授予了美国的詹姆斯·艾利森和日本的本庶佑，以表彰他们在癌症免疫负调控机制，尤其是免疫检查点的研究中取得的成就。免疫检查点分子众多，PD－1/PD－L1作为一个最关键的免疫检查点，利用抗PD－1或PD－L1单克隆抗体类制剂阻断PD－1/PD－L1途径的治疗已经成为癌症免疫治疗的焦点。图为制备上述单克隆抗体的过程，请回答下列相关问题：
(1)①过程采用的实验技术为________________，促进该过程常使用________________诱导。
(2)在细胞培养过程中，首先应保证被培养细胞处于________________环境中，细胞培养还应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是______________________________。
(3)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了________________________________________________________________________。
解析：(1)①过程诱导动物细胞融合的过程，利用的是动物细胞融合技术，常用PEG作为诱导剂。(2)动物细胞培养需要无毒、无菌的环境，还需要一定的气体环境，即95%空气和5%的CO2，其中CO2的作用是维持培养液的pH。(3)“生物导弹”利用了抗原与抗体之间结合的高度特异性，因此其注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞。
答案：(1)细胞融合 聚乙二醇(PEG)(或灭活的病毒)
(2)无毒、无菌 维持培养液的pH
(3)抗原与抗体之间结合的高度特异性
15．[2019·黑龙江哈尔滨市第六中学校高二期末]通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势，培育高产、耐盐的杂种植株。请完善图1实验流程并回答问题：
(1)A是________________酶，C是具有________性状的胚状体。
(2)若二倍体的甲种植物细胞内含a条染色体，四倍体的乙种植物细胞内含b条染色体，通过上述实验流程，得到的目的植株细胞中应含________条染色体(假设能成功)，杂种植株为________倍体。
(3)植物体细胞杂交与杂交育种比较，突出的优点是______________________。
(4)若C包裹上________，制成如图2的人工种子，则能解决杂种植株繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。获得图2中的结构②，需要经过的两个核心步骤是________和________，图2中结构________(填写①、②、③)的主要作用是提供胚状体发育所需要的营养，为了有利于幼苗茁壮成长，提高农作物产量，在③结构中可以添加固氮菌、防病虫农药、除草剂和植物激素类似物等。
解析：(1)图1中A表示纤维素酶和果胶酶；C表示胚状体，由于用浓度较高的钠盐培养基进行了培养，因此其具有耐盐的特性。(2)已知甲是二倍体植株，含有a条染色体，乙是四倍体植株，含有b条染色体，因此两者体细胞杂交获得的目的植株含有a＋b条染色体，属于异源六倍体。(3)与杂交育种相比，植物体细胞杂交突出的优点是可以克服远缘杂交不亲和障碍。(4)C是胚状体，包裹上人工种皮可以制成人工种子。图2中的结构②是胚状体，是离体的组织细胞经过脱分化和再分化形成的；③是人造胚乳，主要作用是提供胚状体发育所需要的营养。
答案：(1)纤维素酶和果胶酶 耐盐
(2)a＋b 六
(3)克服远缘杂交不亲和的障碍
(4)人工种皮(或人工薄膜) 脱分化 再分化 ③
16．[2019·福建高二期末]如图为植物体细胞杂交过程示意图，据图回答：
(1)步骤①是________，最常用的方法是________________________________________________________________________。
(2)步骤②采用的化学试剂是________________(中文名称)，目的是________________。
(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是__________________，其中步骤⑤是__________________过程。
(4)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？________。为什么？________________________________________________________________________。
解析：(1)步骤①是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，常用酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理。(2)步骤②是人工诱导原生质体融合的过程，常用的化学试剂是聚乙二醇(PEG)，其目的是诱导(植物体细胞的)原生质体融合。(3)将杂种细胞培养成杂种植株需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个过程，步骤⑤相当于再分化过程。(4)只有在生物进行有性生殖过程中才遵循孟德尔的遗传定律，而植物体细胞杂交育种不属于有性生殖。
答案：(1)去除细胞壁 酶解法
(2)聚乙二醇 诱导(植物体细胞的)原生质体融合
(3)植物组织培养 再分化
(4)不遵循 只有在生物进行有性生殖过程中才遵循孟德尔的遗传定律，而植物体细胞杂交育种不属于有性生殖
17．[2019·广东佛山一中高二期末]香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。但南方冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒(BBTV，单链环状DNA病毒)引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。目前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高香蕉的品质，具有重要意义。
(1)脱毒香蕉苗的获得，可选取________________为材料进行组织培养，依据是________________。
(2)建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请指出两种检测病毒存在的方法①________________________；②________________。
(3)结合诱变育种从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及步骤：____________________________________________________。
解析：(1)脱毒香蕉苗的获得，由于茎尖不带病毒，可选取茎尖为材料进行组织培养。(2)检测病毒存在的方法：①BBTV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术)；②BBTV病毒蛋白的检测(获得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在)。(3)可采用体细胞诱变育种，利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，在利用植物组织培养技术发育成完整植株，然后筛选培育出抗寒品种。
答案：(1)茎尖 茎尖不带病毒
(2)BBTV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术) BBTV病毒蛋白的检测(抗原－抗体的杂交)
(3)体细胞诱变育种，利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，在利用植物组织培养技术发育成完整植株，然后筛选培育出抗寒品种
18．[2019·福建省泉州市泉港区第一中学高二期末]有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：
(1)若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是________________________________________________________________________。
(2)若a，b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用________________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是________________。
(3)若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________________________。在特定的________________上培养以获得d细胞，再经________培养和________________检测，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是____________________。
解析：(1)若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。则a有2种可能性，即Hr、hr；b有两种可能性，即hR、hr，融合形成的杂种细胞可能为：HhRr、Hhrr、hhRr、hhrr，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。故在大于800 lx光照条件下培养，只有HhRr的杂种细胞可以存活，故可以从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞。(2)若a，b表示两种植物体的细胞，可以用PEG作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的过程中需要用到组织培养技术，原理是植物细胞的全能性。(3)若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞为杂交瘤细胞，它既能无限增殖，又可以产生专一抗体。获得d细胞需要在特定的选择培养基上进行筛选，只有杂交瘤细胞可以存活，再经克隆化培养和专一抗体检测(筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞)，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(4)单克隆抗体制备过程中，先用特定抗原对小鼠进行免疫，获得已免疫的B细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，获得杂交瘤细胞，经过两次筛选后，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过体外或体内培养，可以获得大量的单克隆抗体，过程图如下：
。
答案：(1)在大于800 lx光照条件下培养
(2)PEG 植物细胞的全能性
(3)既能无限增殖，又能产生专一抗体 选择培养基 克隆化 专一抗体(阳性)
(4)
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