2．2．2动物细胞融合和单克隆抗体的制备（共32张PPT）
文档属性
| 名称 | 2．2．2动物细胞融合和单克隆抗体的制备（共32张PPT） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 2.6MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（新课程标准） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2020-05-15 20:56:18 | ||
图片预览
文档简介
(共78张PPT)
一、动物细胞融合的概念、过程
二、单克隆抗体的制备过程和应用
一、概念、动物细胞融合也称 ，是指两个或多个动物结合形成一个的过程，
细胞杂交
物理法
化学法
生物法：
灭活的病毒
仙台病毒
丧失感染性
（不感染细胞）
保留融合活性
（诱导细胞融合）
1.过程：
主要用于制备
单克隆抗体
获得杂种植株
用途
物理、化学方法
（同左）
灭活的病毒
物理（离心、振动、电刺激）
化学（聚乙二醇）
诱导方法
使细胞分散后诱
导细胞融合
去除细胞壁后诱
导原生质体融合
细胞融合的方法
细胞膜的流动性
细胞膜的流动性、
植物细胞全能性
原理
动物细胞融合
植物体细胞杂交
比较项目
植物、动物细胞融合的比较
1.过程：
二、动物细胞融合（细胞杂交）－2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
细胞A
细胞B
杂种细胞
灭活的病毒
物理法
化学法
仙台病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病毒
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
动物细胞的融合与植物细胞之间融合
植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较
细胞膜
流动性
比较
项目 原理 方法 诱导手段 用途
植物
动物
制备单克隆抗体
1、常规抗体获得的方法及其特点
2、单克隆抗体制备的原理
◆ 利用 产生特异性抗体的功能。
◆ 利用 无限增殖的特性。
◆ 利用 技术将两种细胞融合获得
杂交瘤细胞。
◆ 利用 技术大量培养杂交瘤细胞。
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
动物细胞融合
动物细胞培养
3、单克隆抗体的制备
4、单克隆抗体的应用
（选择培养基）
（抗体检测）
植物体细胞杂交的意义：
打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种
1.其由何种细胞产生？
2.主要分布在哪里？
3.如何得到抗体？
抗体
1。抗原 动物体内
抗原不纯
抗体不纯
2。特异性差、纯度低；
产量低、反应不够灵敏
设计方案：
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
-化学性质单一、特异性强的抗体。
杂种细胞
？
？
诱导其融合的方法有哪些？
抗原
效应
B细胞
2.制备过程：
B BB B瘤 瘤瘤 瘤
细胞融合后培养液中有几种细胞
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增值。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增值，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。
3.单克隆抗体的应用：
①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有
特异性高、灵敏度高等优越性。
③生物导弹
一种诱导细胞融合的新方法
一种新细胞
一个优势
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
A
2..动物细胞融合的目的中最重要的是----------------（ ）
A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体
C.培育新品种 D.生产杂种细胞
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
A
D
4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合
B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成
C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
D
（MⅡ卵母细胞）
减数第二次分裂中期
去核的卵母细胞
供体细胞注入去核卵母细胞
受体细胞激活，完成减数分裂、发育
胚胎移植
P49
读下面一段文字资料，思考以下问题：
长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。
怎样才能获得单克隆抗体？
仅用细胞培养技术可行吗？
我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？
单克隆抗体制备过程
细胞融合、筛选
足够数量的、能产生特定抗体的细胞群
单克隆抗体
思考：
1、本过程利用了哪些原理？
免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理
2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体
单克隆抗体的应用
与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。
1、作为诊断试剂
单克隆抗体的应用
2、用于治疗疾病和运载药物
作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤
资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。
小结
两个过程
动物细胞培养过程
单克隆抗体制备过程
三个“一”
一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒
一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案
制备单克隆抗体
B细胞
抗体
细胞融合
灭活病毒
双亲细胞
分泌抗体
无限增殖
原代
传代
50
一、动物细胞融合的概念、过程
二、单克隆抗体的制备过程和应用
一、概念、动物细胞融合也称 ，是指两个或多个动物结合形成一个的过程，
细胞杂交
物理法
化学法
生物法：
灭活的病毒
仙台病毒
丧失感染性
（不感染细胞）
保留融合活性
（诱导细胞融合）
1.过程：
主要用于制备
单克隆抗体
获得杂种植株
用途
物理、化学方法
（同左）
灭活的病毒
物理（离心、振动、电刺激）
化学（聚乙二醇）
诱导方法
使细胞分散后诱
导细胞融合
去除细胞壁后诱
导原生质体融合
细胞融合的方法
细胞膜的流动性
细胞膜的流动性、
植物细胞全能性
原理
动物细胞融合
植物体细胞杂交
比较项目
植物、动物细胞融合的比较
1.过程：
二、动物细胞融合（细胞杂交）－2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
细胞A
细胞B
杂种细胞
灭活的病毒
物理法
化学法
仙台病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病毒
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
动物细胞的融合与植物细胞之间融合
植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较
细胞膜
流动性
比较
项目 原理 方法 诱导手段 用途
植物
动物
制备单克隆抗体
1、常规抗体获得的方法及其特点
2、单克隆抗体制备的原理
◆ 利用 产生特异性抗体的功能。
◆ 利用 无限增殖的特性。
◆ 利用 技术将两种细胞融合获得
杂交瘤细胞。
◆ 利用 技术大量培养杂交瘤细胞。
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
动物细胞融合
动物细胞培养
3、单克隆抗体的制备
4、单克隆抗体的应用
（选择培养基）
（抗体检测）
植物体细胞杂交的意义：
打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种
1.其由何种细胞产生？
2.主要分布在哪里？
3.如何得到抗体？
抗体
1。抗原 动物体内
抗原不纯
抗体不纯
2。特异性差、纯度低；
产量低、反应不够灵敏
设计方案：
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
-化学性质单一、特异性强的抗体。
杂种细胞
？
？
诱导其融合的方法有哪些？
抗原
效应
B细胞
2.制备过程：
B BB B瘤 瘤瘤 瘤
细胞融合后培养液中有几种细胞
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增值。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增值，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。
3.单克隆抗体的应用：
①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有
特异性高、灵敏度高等优越性。
③生物导弹
一种诱导细胞融合的新方法
一种新细胞
一个优势
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
A
2..动物细胞融合的目的中最重要的是----------------（ ）
A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体
C.培育新品种 D.生产杂种细胞
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
A
D
4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合
B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成
C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
D
（MⅡ卵母细胞）
减数第二次分裂中期
去核的卵母细胞
供体细胞注入去核卵母细胞
受体细胞激活，完成减数分裂、发育
胚胎移植
P49
读下面一段文字资料，思考以下问题：
长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。
怎样才能获得单克隆抗体？
仅用细胞培养技术可行吗？
我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？
单克隆抗体制备过程
细胞融合、筛选
足够数量的、能产生特定抗体的细胞群
单克隆抗体
思考：
1、本过程利用了哪些原理？
免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理
2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体
单克隆抗体的应用
与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。
1、作为诊断试剂
单克隆抗体的应用
2、用于治疗疾病和运载药物
作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤
资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。
小结
两个过程
动物细胞培养过程
单克隆抗体制备过程
三个“一”
一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒
一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案
制备单克隆抗体
B细胞
抗体
细胞融合
灭活病毒
双亲细胞
分泌抗体
无限增殖
原代
传代
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