动物细胞融合和单克隆抗体
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(共24张PPT)
动物细胞融合与单克隆抗体
动物细胞融合
比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原 理
融合前处理
诱 导 方 法
用 途
细胞膜的流动性、
植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、
果胶酶去壁
用胰蛋白酶
使细胞分散
物理法、化学方法
物理法、化学法、
灭活的病毒
获得部分
或完整植株
主要用于制备
单克隆抗体
1、二者的区别？
原理不同 诱导融合的方法和手段不同
2、打破物种界限的生物工程技术手段有：
基因工程、植物体细胞杂交、核移植和动物细胞融合
3、动物细胞融合最重要的用途？
制备单克隆抗体
回 顾
1、抗体的化学本质？
2、抗体由什么细胞产生？
3、抗体的作用特点？
4、抗体的分布？
（二）单克隆抗体的制备
1、抗体的传统生产方法
再从动物血清中分离抗体
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。
某抗原注入某种生物体内
2、缺点
单克隆抗体
由杂交瘤细胞产生的性质单一、特异性强、灵敏度高的抗体
小鼠骨髓瘤细胞
B淋巴细胞
经免疫的小鼠
提取
杂交瘤细胞
第一次筛选
第二次筛选
体外培养
注射到小鼠腹腔
提取单克隆抗体
动物细胞融合
杂交细胞
能产生特定抗体杂交瘤细胞群
动物细胞培养
1、在制备单克隆抗体过程中用到的技术
手段有几种？
2、在制备单克隆抗体过程中有几次筛选？筛选的结果？
3、为什么要对小鼠注射抗原？
4、杂交瘤细胞有什么特征？原因？
5、两两融合形成的细胞有几种？
6、最后可以通过哪些途径大量获取抗体？
从培养液或小鼠腹水中提取
4、单克隆抗体的应用
１、可用于作为诊断试剂：
有准确，高效，简易、快速的优点
２、可用于疾病治疗
３、可用于运载药物
（作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹”。）
“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
A
2..动物细胞融合的目的中最重要的是--（ ）
A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体
C.培育新品种 D.生产杂种细胞
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
A
D
4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合
B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成
C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
D
5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ）
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.②④ B.①③⑤
C.①②③④ D.②③
C
6.动物细胞融合和植物原生质融合决定于( ) A.细胞膜的流动性 B．细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D．细胞质酶的活性
A
3.“生物导弹”是指（ ）
A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞
D.在单克隆抗体上连接抗癌药物
D
4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）
A．PEG B．灭活的病毒
C．电刺激 D．离心
A
右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：
⑴ 若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已
用 处理，除去了 ；
A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法
是 。
⑵ 若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应
用 技术把 D 培养成植株。
⑶ 若A、B是动物细胞，一般取自 ，
然后用 ，使其分散开来，
A、B到 C 的过程中，常用的不同于植物细胞的手
段是 ，所形成的D称为 。
⑷ 若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠，那么，
在获得此细胞之前，小鼠已被注射了 。
注射后小鼠身体产生了相应的 。图中B为 。
⑸ 若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的 C
有 种，用来培养的D细胞应该是 。从中选择出它的方法是 培养。获得D后，常用的培养方法是 。
（1）在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，
将抗原注射到小鼠体内，可获得(多选) （ ）
A．T淋巴细胞 B．效应B淋巴细胞
C．抗体 D．记忆细胞
（2）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，
正确的是 (多选) （ ）
A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台
病毒或聚乙二醇诱导
B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克
隆抗体
C．体外培养时，一个B淋巴细胞可以产生一种抗体，但不
能无限增殖
D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，
优越性明显
BCD
ACD
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出
杂种细胞，并说原理。
方法： 。
原理：
培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞
加入氨基嘌呤后,使D合成的途径阻断,所以仅D合成途径的骨髓瘤细胞或彼此融合的细胞就不能增殖,但杂种细胞则可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖
右图是某同学根据杂交瘤技术的方法，
设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。
据图回答：
(1)该方案能达到预期效果吗？
原因是什么？ (2)图中②为什么过程？
(3)图中③进行细胞培养，目的是什么
(4)图中④的细胞培养目的是什么
(5)破伤风杆菌的抗体最终可从什么中提取
(6)该方案的目的是什么
动物细胞融合与单克隆抗体
动物细胞融合
比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原 理
融合前处理
诱 导 方 法
用 途
细胞膜的流动性、
植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、
果胶酶去壁
用胰蛋白酶
使细胞分散
物理法、化学方法
物理法、化学法、
灭活的病毒
获得部分
或完整植株
主要用于制备
单克隆抗体
1、二者的区别？
原理不同 诱导融合的方法和手段不同
2、打破物种界限的生物工程技术手段有：
基因工程、植物体细胞杂交、核移植和动物细胞融合
3、动物细胞融合最重要的用途？
制备单克隆抗体
回 顾
1、抗体的化学本质？
2、抗体由什么细胞产生？
3、抗体的作用特点？
4、抗体的分布？
（二）单克隆抗体的制备
1、抗体的传统生产方法
再从动物血清中分离抗体
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。
某抗原注入某种生物体内
2、缺点
单克隆抗体
由杂交瘤细胞产生的性质单一、特异性强、灵敏度高的抗体
小鼠骨髓瘤细胞
B淋巴细胞
经免疫的小鼠
提取
杂交瘤细胞
第一次筛选
第二次筛选
体外培养
注射到小鼠腹腔
提取单克隆抗体
动物细胞融合
杂交细胞
能产生特定抗体杂交瘤细胞群
动物细胞培养
1、在制备单克隆抗体过程中用到的技术
手段有几种？
2、在制备单克隆抗体过程中有几次筛选？筛选的结果？
3、为什么要对小鼠注射抗原？
4、杂交瘤细胞有什么特征？原因？
5、两两融合形成的细胞有几种？
6、最后可以通过哪些途径大量获取抗体？
从培养液或小鼠腹水中提取
4、单克隆抗体的应用
１、可用于作为诊断试剂：
有准确，高效，简易、快速的优点
２、可用于疾病治疗
３、可用于运载药物
（作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹”。）
“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
A
2..动物细胞融合的目的中最重要的是--（ ）
A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体
C.培育新品种 D.生产杂种细胞
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
A
D
4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合
B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成
C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
D
5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ）
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.②④ B.①③⑤
C.①②③④ D.②③
C
6.动物细胞融合和植物原生质融合决定于( ) A.细胞膜的流动性 B．细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D．细胞质酶的活性
A
3.“生物导弹”是指（ ）
A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞
D.在单克隆抗体上连接抗癌药物
D
4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）
A．PEG B．灭活的病毒
C．电刺激 D．离心
A
右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：
⑴ 若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已
用 处理，除去了 ；
A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法
是 。
⑵ 若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应
用 技术把 D 培养成植株。
⑶ 若A、B是动物细胞，一般取自 ，
然后用 ，使其分散开来，
A、B到 C 的过程中，常用的不同于植物细胞的手
段是 ，所形成的D称为 。
⑷ 若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠，那么，
在获得此细胞之前，小鼠已被注射了 。
注射后小鼠身体产生了相应的 。图中B为 。
⑸ 若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的 C
有 种，用来培养的D细胞应该是 。从中选择出它的方法是 培养。获得D后，常用的培养方法是 。
（1）在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，
将抗原注射到小鼠体内，可获得(多选) （ ）
A．T淋巴细胞 B．效应B淋巴细胞
C．抗体 D．记忆细胞
（2）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，
正确的是 (多选) （ ）
A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台
病毒或聚乙二醇诱导
B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克
隆抗体
C．体外培养时，一个B淋巴细胞可以产生一种抗体，但不
能无限增殖
D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，
优越性明显
BCD
ACD
已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出
杂种细胞，并说原理。
方法： 。
原理：
培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞
加入氨基嘌呤后,使D合成的途径阻断,所以仅D合成途径的骨髓瘤细胞或彼此融合的细胞就不能增殖,但杂种细胞则可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖
右图是某同学根据杂交瘤技术的方法，
设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。
据图回答：
(1)该方案能达到预期效果吗？
原因是什么？ (2)图中②为什么过程？
(3)图中③进行细胞培养，目的是什么
(4)图中④的细胞培养目的是什么
(5)破伤风杆菌的抗体最终可从什么中提取
(6)该方案的目的是什么