人教版选修1高三生物《专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》（共79张PPT）

(共79张PPT)
专题2
微生物的培养与应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题2
微生物的培养与应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
两个主要目的
专题2
微生物的培养与应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
两个主要目的
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样
的细菌
专题2
微生物的培养与应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
两个主要目的
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样
的细菌
尿素:
CO（NH2）2
专题2
微生物的培养与应用
课题2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
两个主要目的
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样
的细菌
CO（NH2）2
+
H2O
CO2+2NH3
脲酶
一
研究思路
（一）筛选菌株
一
研究思路
（一）筛选菌株
耐高温的DNA聚合酶
一
研究思路
（一）筛选菌株
耐高温的DNA聚合酶
美国微生物学家布鲁克
1966年发现水生耐热细
菌Taq
分离到耐高温的Taq
DNA聚合酶
一
研究思路
（一）筛选菌株
自然界筛选：
一
研究思路
（一）筛选菌株
自然界筛选：
根据它对生存环境的要求，到相应的环境
中去寻找。
一
研究思路
（一）筛选菌株
自然界筛选：
根据它对生存环境的要求，到相应的环境
中去寻找。
实验室筛选：
一
研究思路
（一）筛选菌株
自然界筛选：
根据它对生存环境的要求，到相应的环境
中去寻找。
实验室筛选：
人为提供有利于目的菌株生长的条件（包
括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止
其他微生物生长。
一
研究思路
（一）筛选菌株
选择培养基：
一
研究思路
（一）筛选菌株
选择培养基：
在微生物学中，将允许特定种类的微生物
生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生
长的培养基。目的是从众多微生物中分离
所需要的微生物。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
先将待测样品制成悬液，然后取一定量的
悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微
镜下观察到的微生物数目来计算出单位体
积内的微生物总数
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
先将待测样品制成悬液，然后取一定量的
悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微
镜下观察到的微生物数目来计算出单位体
积内的微生物总数
优点：
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
先将待测样品制成悬液，然后取一定量的
悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微
镜下观察到的微生物数目来计算出单位体
积内的微生物总数
优点：
设备简单、能观察微生物的形态特征。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
先将待测样品制成悬液，然后取一定量的
悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微
镜下观察到的微生物数目来计算出单位体
积内的微生物总数
优点：
设备简单、能观察微生物的形态特征。
缺点：
一
研究思路
（二）统计菌落数目
1.显微镜直接计数：
先将待测样品制成悬液，然后取一定量的
悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微
镜下观察到的微生物数目来计算出单位体
积内的微生物总数
优点：
设备简单、能观察微生物的形态特征。
缺点：
不能区分死菌和活菌。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
应用：
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
应用：
统计样品中活菌的数目
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
应用：
统计样品中活菌的数目
原理：
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
应用：
统计样品中活菌的数目
原理：
当样品的稀释度足够高时，培养基表面
生长的一个菌落，来源于样品稀释液中
的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，
就能推测出样品中大约含有多少活菌。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
应用：
统计样品中活菌的数目
原理：
注意：
一般选择菌落数在30-300的平板进行记数。
当样品的稀释度足够高时，培养基表面
生长的一个菌落，来源于样品稀释液中
的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，
就能推测出样品中大约含有多少活菌。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
第一位同学只涂布了一个平板，没有设置
重复组，因此结果不具有说服力。
一
研究思路
（二）统计菌落数目
2.稀释涂布平板计数法:
第一位同学只涂布了一个平板，没有设置
重复组，因此结果不具有说服力。
第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂
布了3个平板，但是，其中1个平板的计数
结果与另
2个相差太远，说明在操作过程
中可能出现了错误，因此，不能简单地将
3个平板的计数值用来求平均值。
一
研究思路
（三）设置对照
一
研究思路
（三）设置对照
增强实验的说服力和准确性。
一
研究思路
（三）设置对照
增强实验的说服力和准确性。
将待测样品经过一系列的稀释，然后选择
三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然
后培养。
一
研究思路
（三）设置对照
增强实验的说服力和准确性。
将待测样品经过一系列的稀释，然后选择
三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然
后培养。
注意：为了结果接近真实值，可将同一稀
释度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，
经培养，计算出菌落的平均数。
一
研究思路
（三）设置对照
判断培养基中是否有杂菌污染：
一
研究思路
（三）设置对照
判断培养基中是否有杂菌污染：
将未接种的培养基同时进行培养。
一
研究思路
（三）设置对照
判断培养基中是否有杂菌污染：
将未接种的培养基同时进行培养。
判断选择培养基是否具有筛选作用：
一
研究思路
（三）设置对照
判断培养基中是否有杂菌污染：
将未接种的培养基同时进行培养。
判断选择培养基是否具有筛选作用：
对照培养基接种后培养观察菌落数目。
二
实验设计
二
实验设计
1.
实验设计的内容包括：
二
实验设计
1.
实验设计的内容包括：
实验方案、材料用具、实施步骤和时间
安排等。
二
实验设计
2.
实验流程：
土壤取样
样品系列稀释
涂布平板与培养
观察并记录结果
菌落计数
二
实验设计
2.
实验流程：
（1）土壤取样
二
实验设计
2.
实验流程：
（1）土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层
土3
cm左右，再取样，将样品装入事先准
备好的信封中。
二
实验设计
2.
实验流程：
（1）土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层
土3
cm左右，再取样，将样品装入事先准
备好的信封中。
（2）样品的稀释
二
实验设计
2.
实验流程：
（1）土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层
土3
cm左右，再取样，将样品装入事先准
备好的信封中。
（2）样品的稀释
因为不同微生物在土壤中含量不同，其
目的是保证获得菌落数在30～300之间。
不同。
某同学在稀释倍数为106
的培养基中测得
平板上菌落数的平均数为234，那么每克样
品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液
的体积为0.1ml）
(
)
A.
2.34×108
B.
2.34×109
C.
234
D.
23.4
某同学在稀释倍数为106
的培养基中测得
平板上菌落数的平均数为234，那么每克样
品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液
的体积为0.1ml）
(
)
A.
2.34×108
B.
2.34×109
C.
234
D.
23.4
B
某同学在稀释倍数为106
的培养基中测得
平板上菌落数的平均数为234，那么每克样
品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液
的体积为0.1ml）
(
)
A.
2.34×108
B.
2.34×109
C.
234
D.
23.4
B
计算公式：
某同学在稀释倍数为106
的培养基中测得
平板上菌落数的平均数为234，那么每克样
品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液
的体积为0.1ml）
(
)
A.
2.34×108
B.
2.34×109
C.
234
D.
23.4
B
计算公式：
每克样品中的菌株数
=（C÷V）×M
二
实验设计
2.
实验流程：
（3）微生物的培养与观察
二
实验设计
2.
实验流程：
（3）微生物的培养与观察
①培养皿编号：104、105、106各编号三个
培养皿。
二
实验设计
2.
实验流程：
（3）微生物的培养与观察
①培养皿编号：104、105、106各编号三个
培养皿。
②每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
15ml。
二
实验设计
2.
实验流程：
（3）微生物的培养与观察
①培养皿编号：104、105、106各编号三个
培养皿。
②每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
15ml。
③用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤
稀释液各0.
1ml，转动培养皿，使土壤稀释
液与培养基混合均匀。
二
实验设计
2.
实验流程：
（3）微生物的培养与观察
①培养皿编号：104、105、106各编号三个
培养皿。
②每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
15ml。
③用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤
稀释液各0.
1ml，转动培养皿，使土壤稀释
液与培养基混合均匀。
④冷却倒置放入30~37摄氏度的恒温培养箱中
培养。观察纪录。
三
操作提示
三
操作提示
1.
无菌操作
2.
做好标记
3.
规划时间
四
操作提示
三
操作提示
1.
无菌操作
2.
做好标记
3.
规划时间
四
结果分析与评价
五
课题延伸
五
课题延伸
对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生
物化学的方法。
五
课题延伸
对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生
物化学的方法。
2.
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的
脲酶将尿素分解成了氨
。氨会使培养基的碱性
增强，pH升高
。因此，我们可以通过检测培养
基pH变化来判断该化学反应是否发生。
五
课题延伸
对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生
物化学的方法。
2.
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的
脲酶将尿素分解成了氨
。氨会使培养基的碱性
增强，pH升高
。因此，我们可以通过检测培养
基pH变化来判断该化学反应是否发生。
3.
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指
示剂。培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂
将变红
，说明该细菌能够分解尿素。
练习
1.
用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的
数目，其结果与实际值相比
A.
比实际值高
B.
比实际值低
C.
和实际值一致
D.
比实际值可能高也可能低
1.
用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的
数目，其结果与实际值相比
A.
比实际值高
B.
比实际值低
C.
和实际值一致
D.
比实际值可能高也可能低
2.
下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是
A.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
葡萄糖、尿素、琼脂、水
B.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
葡萄糖、琼脂、水
C.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
尿素、琼脂、水
D.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
2.
下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是
A.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
葡萄糖、尿素、琼脂、水
B.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
葡萄糖、琼脂、水
C.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
尿素、琼脂、水
D.
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、
牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
4
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
4
葡萄糖
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
尿素
4
葡萄糖
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
尿素
4
葡萄糖
固体
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
请根据以上配方，回答下列问题：
(1)该培养基含有微生物所需要的______类营
养物质。其中最主要的碳源是________，氮源
是______。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养
基；按培养基的作用划分是______培养基。
4
葡萄糖
尿素
固体
选择
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(3)该培养基具有选择作用的原因是
。
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(3)该培养基具有选择作用的原因是
。
该培养基中，唯一的氮源是尿素，只有能分解
尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(4)该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素
是否被分解，依据的原理是
。
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(4)该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素
是否被分解，依据的原理是
。
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(5)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能分解
尿素，可在培养基中加入______指示剂，尿素
被分解后指示剂变______色。
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(5)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能分解
尿素，可在培养基中加入______指示剂，尿素
被分解后指示剂变______色。
酚红
3.下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方
(5)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能分解
尿素，可在培养基中加入______指示剂，尿素
被分解后指示剂变______色。
酚红
红