分子生物学3

（8）一、名词解释（共20分，每题2分）
二、填空题（共30分,每空1.5分）
1．大肠杆菌碱基错配修复系统所识别的核苷酸序列为（ ），被甲基化的碱基是（ ）。
2．基因突变可能造成的后果（ ），（ ），（ ），（ ）。
3．原核生物mRNA与基因是（ ），顺反子是（ ）；真核mRNA与基因是（ ），顺反子是（ ）。
4．蛋白质合成时，起始密码子通常是（ ），起始tRNA上的反密码子是（ ）。
5．真核生物起始tRNA是（ ）；原核生物起始tRNA是（ ）。
6．PCR的反应体系要具有以下条件：（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。
7．Lac 阻遏蛋白由（ ）基因编码，结合（ ）序列对 Lac 操纵子（元）起阻遏作用。
三、选择题（共15分，每题1分）
1．DNA合成需要有一段RNA为引物，合成该引物的酶是（ ）。
A. DNA聚合酶 B. 引发酶 C. RNA聚合酶Ⅰ D. 复制酶
2．真核生物RNA聚合酶Ⅱ完成下列基因的转录（ ）。
A．rRNA编码基因 B．tRNA编码基因 C．mRNA编码基因 D．5StRNA编码基因
3．基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因，这是为了便于（ ）
A．外源基因插入质粒 B．宿主菌的生物繁殖
C．质粒的转化 D．带有目的基因的宿主菌的筛选
4．以下关于cAMP对原核基因转录的调控作用的叙述错误的是（ ）
A．cAMP可与CRP结合成复合物 B．cAMP-CRP复合物结合在启动子前方
C．葡萄糖充足时，cAMP水平不高 D．葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用乳糖
5．高等真核生物中的基因往往有内含子，但也有少数基因，根本不含内含子。这类典型例子如（ ）
A．组蛋白 B．珠蛋白 C．铁蛋白 D．白蛋白
6．紫外线照射对DNA分子的损伤主要是（ ）。
A．碱基替代 B．磷酸酯键断裂 C．碱基丢失 D．形成共价连接的嘧啶二聚体
7．原核生物基因组中没有（ ）。
A．内含子 B．外显子 C．转录因子 D．插入序列
8．蛋白质生物合成时（ ）。
A．mRNA 与核糖体的大亚基接合 B．mRNA与核糖体的小亚基结合
C．tRNA与核糖体的大亚基结合 D．tRNA先与mRNA结合再与氨基酸结合
9．反密码子IGC可以识别的密码子是（ ）。
A．GCG B．GCA C．ACG D．ICG
10．目前认为基因表达调控的主要环节是（ ）
A．基因激活 B．转录起始 C．转录后加工 D．翻印后加工
11．在真核生物染色体上的高度重复序列，其中一些重复几百次的基因如（ ）
A．组蛋白基因 B．珠蛋白基因 C．rRNA基因 D．细胞色素C基因
12．构成真核生物最简单的启动子由一个转录起始点及下列哪个功能组件构成（ ）
A．TATA盒 B．GC盒 C．CAAT盒 D．上游调控序列
13．高等真核生物中的基因往往有内含子，但也有少数基因，根本不含内含子。这类典型例子如（ ）
A．组蛋白 B．珠蛋白 C．铁蛋白 D．白蛋白
14．下面参与RNA剪接的RNA是：（ ）
A．HnRNA B．snRNA C．5SRNA D．tRNA
15．下面事件在真核转录不发生而在原核转录中发生的是（ ）
A．戴帽 B．加尾 C．内含子的去除 D．转录过程中核糖体结合mRNA进行翻译
四、判断题（共15分，每题1分）
1．色氨酸操纵子的表达调控除了阻遏作用外，还受到前导区的影响，即所谓的弱化作用。（ ）
2．mRNA的5’m7G帽子结构是mRNA核输出的关键信号。（ ）
3．原核细胞能在转录过程中进行蛋白质的翻译。（ ）
4．通过差示杂交后制备的cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的概率大为提高。（ ）
5．核酸杂交探针都是带有放射性标记的DNA分子。（ ）
6．基因组DNA复制时，前导链的引物是DNA，滞后链的引物是RNA。（ ）
7．活跃转录的基因均位于常染色质中（ ）
8．DNA的转录与mRNA序列相同的那条DNA链称为模板链。（ ）
9． micRNA是编码链或称为有意义链产生的。（ ）
10．一般来说编码某一氨基酸的密码子越多，该氨基酸在蛋白质中出现的频率就越高。（ ）
11．真核生物的起始因子大概有10种，能够识别帽子结构的是eIF-1。（ ）
12．真核生物的转录和翻译都是在细胞核中完成的。（ ）
13．弱化作用的调控模式不出现在真核生物的表达调控中。（ ）
14．基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA（ ）
15．人是最高等生物，其基因组碱基对数目2.9×109是动物界最大的。（ ）
（9）一、名词解释（共20分，每题2分）
二、填空题（共30分，每空1.5分）
1．在DNA链上形成去嘌呤或嘧啶位点，统称为（ ）位点。
2．紫外线照射可在相邻两个（ ）嘧啶间形成（ ）。
3．端粒酶由蛋白质和（ ）两部分组成。
4．与mRNA密码子ACG相对应的tRNA的反密码子是（ ）。
5．限制性内切酶的主要特点（ ），（ ），（ ）。
6．Trp 操纵子的精细调节包括（ ）及（ ）两种机制。
7．原核生物转录调节的基本类型包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。
8．质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（ ），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（ ）。
9．蛋白质与DNA结合常见的模体有（ ）；（ ）；（ ）；（ ）。
三、选择题（共15分，每题1分）
1．真核生物复制起始点的特征包括（ ）。
A. 富含G－C区 B. 富含A－T区 C. Z-DNA D. 无明显特征
2．下列有关TATA盒的叙述，哪个是正确的（ ）。
A．它位于第一个结构基因处 B．它和RNA聚合酶结合
C．它编码阻遏蛋白 D．它和反密码子结合
3．考斯质粒中，cos位点的功能是（ ）
A．用于筛选重组子 B．选择标记 C．参与包装进入病毒外壳 D．复制起点
4．操纵子一般是由（ ）组成的。
A．结构基因、启动子和调控基因 B．操纵基因、结构基因、启动子
C．操纵基因、结构基因和增强子 D．操纵基因、启动子、结构基因和调节基因
5．反式作用及因子中的DNA识别结合结构域有许多种，以下不属于此类结构域的是（ ）
A．螺旋－转角－螺旋结构 B．锌指结构 C．碱性－亮氨酸拉链 D．回文结构
6．紫外线照射对DNA分子的损伤主要是（ ）。
A．碱基替代 B．磷酸酯键断裂 C．碱基丢失 D．形成共价连接的嘧啶二聚体
7．原核生物基因组中没有（ ）。
A．内含子 B．外显子 C．转录因子 D．插入序列
8．蛋白质生物合成时（ ）。
A．mRNA 与核糖体的大亚基接合 B．mRNA与核糖体的小亚基结合
C．tRNA与核糖体的大亚基结合 D．tRNA先与mRNA结合再与氨基酸结合
9．反密码子IGC可以识别的密码子是（ ）。
A．GCG B．GCA C．ACG D．ICG
10．cAMP在转录的调控作用中（ ）
A．cAMP转变为CAP B．CAP转变为cAMP
C．cAMP－CAP形成复合物 D．cAMP是激素作用的第二信使，与转录无关。
11．在真核生物染色体上的高度重复序列，其中一些重复几百次的基因如（ ）
A．组蛋白基因 B．珠蛋白基因 C．rRNA基因 D．细胞色素C基因
12．构成真核生物最简单的启动子由一个转录起始点及下列哪个功能组件构成（ ）
A．TATA盒 B．GC盒 C．CAAT盒 D．上游调控序列
13．酪氨酸蛋白激酶的作用是（ ）
A．使蛋白质结合酪氨酸 B．使含有酪氨酸的蛋白质激活
C．使蛋白质中酪氨酸水解 D．使蛋白质中酪氨酸残基磷酸化
14．密码子的摆动性表现在（ ）
A．反密码子第一位与密码子第三位配对不严格
B．反密码子第三位与密码子第一位配对不严格
C．反密码子第二位与密码子第二位配对不严格
D．反密码子第三位与密码子第三位配对不严格
15．下面哪个元件在色氨酸操纵子的调控中发挥作用（ ）
A．启动子 B．增强子 C．弱化子 D．操纵子
四、判断题（共15分，每题1分）
1．真核细胞的DNA聚合酶和原核细胞的DNA聚合酶一样，都具有核酸外切酶活性。（ ）
2．大多数管家基因编码低丰度的mRNA。（ ）
3．cAMP是激素作用的第二信使，与转录无关。（ ）
4．基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA（ ）
5．人是最高等生物，其基因组碱基对数目2.9×109是动物界最大的。（ ）
6．原核细胞能在转录过程中进行蛋白质的翻译。（ ）
7．核酸杂交探针都是带有放射性标记的DNA分子。（ ）
8．lac操纵子的阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体。（ ）
9．CAP和CRP蛋白是相同的。（ ）
10．RNA聚合酶同操纵子基因结合。（ ）
11．在细胞的DNA复制中其主要作用的是DNA聚合酶Ⅰ。（ ）
12．DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键。 （ ）
13．所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的新的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。（ ）
14．真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA。
15．紫外线照射可引起DNA两条互补链上的T之间形成二聚体。（ ）
（10）一、名词解释（共20分，每题2分）
二、填空题（共30分每空1.5分）
1．假如将15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代，提取其DNA，进行CsCl密度梯度离心，其15N，14N－DNA分子与纯14N－DNA分子之比为（ ）。
2．基因突变单个碱基的改变，同类碱基之间取代称为（ ）；否则称（ ）。
3．真核生物中已发现三种RNA聚合酶，其中（ ）催化的转录产物是（ ）。
4．tRNA的反密码子为UGC，它识别的密码子为（ ）。
5．质粒DNA具有三种不同的构型，SC构型是（ ），oc构型是（ ），L构型是（ ），在电泳中跑在最前面的是（ ）。
6．CAP的存在能显著提高酶与启动子结合常数，主要表现在（ ），（ ）
7．gal操纵子具有两个启动子，双启动子的生理功能是因为半乳糖对细菌有双重作用，（ ）；（ ）。
8．真核生物RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有（ ）、（ ）、（ ）、（ ）他们的结合顺序是（ ）。其中TFII-D的功能是（ ）。
三、选择题（共15分，每题1分）
1．端粒酶与真核生物线形DNA末端的复制有关，它是一种（ ）。
A. RNA聚合酶 B. 逆转录酶 C. 核酸酶 D. 核糖核酸酶
2．真核生物mRNA的加工修饰不包括（ ）。
A．除去内含子部分 B．在mRNA的3’端加poly尾巴
C．经过较多的甲基化过程 D．在mRNA的5’端形成帽子结构
3．从细胞中分离DNA时加入蔗糖的目的是（ ）
A．抑制核酸酶的活性 B．保护DNA，防止断裂
C．有利于破碎细胞 D．加速蛋白质变性
4．原核生物基因调控主要发生在（ ）
A．转录水平 B．翻译水平 C．转录后水平 D．翻译后水平
5．将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录，这种方式称为基因重排。通过基因重排调节基因活性的典型例子是（ ）
A．免疫球蛋白结构基因 B．组蛋白基因 C．珠蛋白基因 D．rRNA基因
6．紫外线照射对DNA分子的损伤主要是（ ）。
A. 碱基替代 B. 磷酸酯键断裂 C. 碱基丢失 D. 形成共价连接的嘧啶二聚体
7．原核生物基因组中没有（ ）。
A. 内含子 B. 外显子 C. 转录因子 D. 插入序列
8．蛋白质生物合成时（ ）。
A．mRNA 与核糖体的大亚基接合 B．mRNA与核糖体的小亚基结合
C．tRNA与核糖体的大亚基结合 D．tRNA先与mRNA结合再与氨基酸结合
9．反密码子IGC可以识别的密码子是（ ）。
A．GCG B．GCA C．ACG D．ICG
10．一个操纵子通常含有（ ）
A．一个启动序列 B．一个启动序列和数个编码基因 C．启动序列和一个编码基因 D．数个启动序列和数个编码基因
11．在真核生物染色体上的高度重复序列，其中一些重复几百次的基因如（ ）
A．组蛋白基因 B．珠蛋白基因 C．rRNA基因 D．细胞色素C基因
12．构成真核生物最简单的启动子由一个转录起始点及下列哪个功能组件构成（ ）
A．TATA盒 B．GC盒 C．CAAT盒 D．上游调控序列
13．下面参与RNA剪接的RNA是：（ ）
A. HnRNA B. snRNA C. 5SRNA D. tRNA
14．下面事件在真核转录不发生而在原核转录中发生的是（ ）
A．戴帽 B．加尾 C．内含子的去除 D．转录过程中核糖体结合mRNA进行翻译
15．酪氨酸蛋白激酶的作用是（ ）
A．使蛋白质结合酪氨酸 B．使含有酪氨酸的蛋白质激活
C．使蛋白质中酪氨酸水解 D．使蛋白质中酪氨酸残基磷酸化
四、判断题（共15分，每题1分）
1．原核生物转录和翻译是同时进行的。（ ）
2．在蛋白质合成过程中，起始tRNA结合在核糖体的P位上。（ ）
3．蛋白质生物合成的整套密码，只适用于真核生物。（ ）
4．含α－螺旋丰富的蛋白质结构紧密而稳定少变，故蛋白质的功能区常不在α－螺旋区。（ ）
5．原核mRNA与基因是共线的，产生的是多顺反子（ ）
6．mRNA的5’m7G帽子结构是mRNA核输出的关键信号。（ ）
7．通过差示杂交后制备的cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的概率大为提高。（ ）
8．色氨酸操纵子的表达调控除了阻遏作用外，还受到前导区的影响，即所谓的弱化作用。
9．弱化作用的调控模式不出现在真核生物的表达调控中。（ ）
10．端粒酶与真核细胞内染色体DNA末端复制有关，它是一种逆转录酶。
11．基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA（ ）
12．原核细胞能在转录过程中进行蛋白质的翻译。（ ）
13．核酸杂交探针都是带有放射性标记的DNA分子。（ ）
14．lac操纵子的阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体。（ ）
15．在细胞的DNA复制中其主要作用的是DNA聚合酶Ⅰ。（ ）
（8）一、名词解释
二、填空题
1．（GATC），（A）2．（可能使生物更有利适应环境，引起生物进化），（导致生物体的死亡），（引起结构、形态和功能的异常，产生疾病），（不发生任何变化和影响）3．（共线的），（多顺反子）；（不是共线），（单顺反子）4．（AUG），（CAU）5．（甲硫氨酸Met-tRNAmet）；（甲酰甲硫氨酸fmet-tRNAfMet）6．（DNA模板）、（TagDNA酶）、（4种 dNTP）、（引物）7．（I）、（O）
三、选择题1．（B）2．（C）3．（D）4．（D）5．（A）6．（D）7．（A）8．（B）9．（B）10．（B）11．（C）12．（A）13．（A）14．（ B ）15．（ D ）
四、判断题1．（√）2．（√）3．（√）4．（√）5．（×）6．（×）7．（√）8．（×）9．（√）10．（√）11．（×）12．（×）13．（√）14．（×）15．（×）
五、简答题（共20分，每题5分）
1．cDNA的扣除文库的构建？
① 将两种不同组织来源的mRNA进行比较，用扣除杂交排除相同部分，即共同表达的那部分mRNA，选出有差异的、特异表达的mRNA，构建成的cDNA文库。 3分
② 构建过程：从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA，T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA，向T细胞 cDNA中过量加入D细胞总mRNA，两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子，余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。
2．基因移动的方式及其遗传学效应？
① 插入序列（insertion sequence，IS），转座子（Transposon,Tn）。
② 引起插入突变，可导致基因表达失活。
③ 产生新的基因。
④ 产生的染色体畸变，引起生物的进化，产生新的功能基因。
3．色氨酸操纵子的结构和调控特征？
a、在色氨酸操纵元Ptrp-o与第一个结构基因trpE之间有162bp的一段先导序列(leadingsequence, L)
b、当色氨酸达一定浓度时，RNA聚合酶的转录会在这里终止。
c、这段序列中含有编码由14个氨基酸组成的短肽，其序列中有2个色氨酸相连，在此前有核糖体识别结合位点(RBS)序列。
d、在先导序列的后半段含有3对反向重复序列，在被转录生成mRNA时都能够形成发夹式结构，使转录终止。
4．蛋白质多亚基形式的优越性？
⑴节省DNA序列；
⑵减小错误排列对蛋白功能的影响；
⑶蛋白质的活性调节灵活。
（9）一、名词解释
二、填空题1．（AP）2．（胸腺）（嘧啶二聚体）3．（RNA）4．（CGU）5．（位点专一），（4、6、8个bp），（回文序列的DNA）6．（阻遏机制）（弱化机制）7．（代谢产物对基因活性的调节）、（弱化子对基因活性的影响）、（降解物对基因活性的调节）、（细菌的应急反应）8．（严谨型），（松弛型）9．（锌指模体）；（螺旋转角螺旋模体）；（螺旋环螺旋模体）；（亮氨酸拉链模体）
三、选择题1．（B）2．（B）3．（C）4．（B）5．（D）6．（D）7．（A）8．（B）9．（B）10．（C）11．（C）12．（A）13．（D）14．（A）15．（C）
四、判断题（共15分，每题1分）
1．（×）2．（√）3．（×）4．（×）5．（×）6．（√）7．（×）8．（√）9．（√）10．（×）11．（×）12．（ √ ）13．（√）14．（√）15．（×）
五、简答题
1．设计一个实验来证明DNA复制是以半保留方式进行的？
①15N 和14N分别标记DNA。 1分
②由于15N DNA的密度比14N DNA的密度大，在氯化铯密度梯度离心时，两种密度不同的DNA分布在不同的区带。 1分
③15N重密度带，14N轻密度带，15N 和14N -DNA中密度带。 1分
④变性前的杂交分子为一条中密度带，变性后则分为两条区带，即重密度带(15N DNA)及低密度带(14N DNA)。实验只有用半保留复制的理论才能得到圆满的解释。 2分
2．简述蛋白质跨膜运输的机制？
① 在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段---信号肽，他能引导蛋白质的肽链到达并通过内质网。 1分
② 然后被内质网中的信号肽酶切除，蛋白质N端并无信号肽。 1分
③ 在胞液中有一种信号识别颗粒（SRP），含有300个核苷酸的7S小分子RNA（小胞浆scRNA）及6种蛋白质的核糖核蛋白，在信号肽出现后，能识别并结合信号肽及核糖体，使翻译暂停，并与膜上的SRP受体蛋白（停靠蛋白）结合，引导肽链跨膜转运。 3分
3．分别说出5种以上RNA的功能？
tRNA 转运氨基酸 1分
rRNA 核蛋白体组成成 1分
mRNA 蛋白质合成模板 1分
hnRNA 成熟mRNA的前体 1分
snRNA 参与hnRNA的剪接 1分
4．举例说明差示筛选组织特异cDNA的方法？
① 制备两种细胞群体，目的基因在其中一种细胞中表达或高表达，在另一种细胞中不表达或低表达。 2分
② 然后通过杂交对比找到目的基因。 1分
③ 例如：在肿瘤发生和发展过程中，肿瘤细胞会呈现与正常细胞表达水平不同的mRNA，因此，可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的基因。也可利用诱导的方法，筛选出诱导表达的基因。 2分
（10）一、名词解释
二、填空题1．（1∶3）2．（转换）；（颠换）3．（ RNA聚合酶Ⅱ ）（mRNA）4．（GCA）。5．（DNA呈现超螺旋），（开环DNA），（线性分子），（SC构型）6．（取代-35区功能的作用），（抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合）7．（一方面可以作为碳源供细胞生长）；（另一方面它又是细胞壁的成分）8．（TFII-D）、（TFII-A）、（TFII-E）、（TFII-B）（D-A-B-E）（与TATA盒结合）。
三、选择题（共15分，每题1分）
1．（B）2．（C）3．（B）4．（A）5．（A）6．（D）7．（A）8．（B）9．（B）10．（B）11．（C）12．（A）13．(B)14．(D)15．（D）
四、判断题1．（√）2．（√）3．（×）4．（√）5．（√）6．（√）7．（√）8．（√）9．（√）10．（√）11．（×）12．（√） 13．（×）14．（√）15．（×）
五、简答题
1．简述激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？
① cAMP与CRP结合后所形成的复合物激活蛋白CAP。
② 在缺乏葡萄糖时，CAP合成量增加。
③ CAP能提高酶与启动子结合常数，CAP起到取代-35区功能的作用。
④ CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，提高与其特定启动
子结合的概率。
2．反义RNA 的产生与基因的调节作用？
⑴双链DNA中的每一条链（有意义链、反意义链）转录各自的RNA；
⑵转录的RNA是互补的序列；
⑶RNA杂交分子；
⑷抑制DNA转录；
⑸抑制mRNA的翻译。
3．外源基因克隆质粒载体的过程？
① 目的基因的提取:供体生物基因或称外源基因的提取
② 限制性酶切：目的基因切成不同大小的片段
③ 酶接：连接到另一DNA分子上（克隆载体）
④ 转化:将这个重组DNA分子转入受体细胞
⑤ 筛选和鉴定:对吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定
4．真核生物转录的前体hnRNA如何加工为成熟的mRNA？
① 5’端加帽：7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）
② 3’端加尾：提高了mRNA在细胞质中的稳定性。
③ RNA的剪接：剪去内含子，外显子相连
④RNA的编辑：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。