综合学业质量标准检测
本试卷分第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分。满分100分，考试时间90分钟。
第Ⅰ卷(选择题 共50分)
一、选择题(共25小题，每小题2分，共50分，在每小题给出的4个选项中，只有1项是符合题目要求的)
1．利用生物工程生产啤酒、果醋、酸奶、腐乳的常用菌种分别是( C )
A．酵母菌、枯草杆菌、乳酸菌、毛霉
B．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌
C．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉
D．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
[解析] 利用生物工程生产啤酒、果醋、酸奶、腐乳的常用菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉。
2．下列关于大肠杆菌的培养的叙述不正确的是( A )
A．配制固体培养基所加的琼脂是从红藻中提取的脂类
B．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌
C．用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要保证待测样品稀释的稀释度合适
D．使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃
[解析] 琼脂主要用海南的麒麟菜或石花菜制作出来的，其主要成分为膳食纤维和蛋白质，A错误；在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，B正确；用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要保证待测样品稀释的稀释度合适，C正确；使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，D正确。故选A。
3．下列关于酶的叙述中，正确的是( C )
A．酶都提取于动植物细胞
B．酶制剂能够重复利用
C．果酒和果汁能够用酶制剂澄清
D．酶固定化后被称为酶制剂
[解析] 酶制剂是指从生物(包括动物、植物、微生物)中提取的具有生物催化作用的物质，并辅以其他成分，用于加速食品加工合成和提高食品质量的制品，不能重复利用。固定化酶不属于酶制剂。
4．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是( A )
A．可以利用玫瑰精油无色透明、有诱人的橘香味判断是否成功提取玫瑰精油
B．水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏的基本原理都相同，只是蒸馏过程中原料放置的位置不同
C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功
D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素带
[解析] 很多植物芳香油都有无色透明、有诱人的橘香味等特点，因此不能利用该特点来判断，A错误；根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏，B正确；分解尿素的细菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红，因此在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可以说明分离成功，C正确；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点(带)，D正确。
5．下列有关生物技术应用的叙述中，错误的是( B )
A．腐乳制作中酒精含量过高会延长腐乳成熟时间
B．加酶洗衣粉中的酶制剂的作用都是直接洗去衣服上的污垢
C．若固定化酵母细胞时，CaCl2溶液浓度过低，将很难形成凝胶珠
D．制作果醋时中断通氧会引起醋酸菌死亡
[解析] 卤汤中酒精含量过低不足以杀菌，过高会延长腐乳成熟的时间，A正确；加酶洗衣粉中纤维素酶的作用主要是使纤维素的结构变得蓬松，从而使得渗入纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉接触，最终达到更好的去污效果，B错误；CaCl2溶液浓度过大，形成的凝胶珠硬度大、易开裂，CaCl2溶液浓度过低，将很难形成凝胶珠，C正确；果醋制备的菌种是醋酸菌，属于好氧型细菌，则中断通氧可能会引起醋酸菌死亡，D正确；故选B。
6．将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14
mol/L
NaCl溶液、2
mol/L
NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是( C )
A．P、Q、R
B．p、q、r
C．P、q、R
D．p、Q、r
[解析] 将粗提取的DNA丝状物加入0.14
mol/L
NaCl溶液中，DNA析出，过滤后存在于纱布上(p)，杂质存在于滤液中(P)；加入2
mol/L
NaCl溶液中，DNA溶解，过滤后存在于滤液中(Q)，杂质存在于纱布上(q)；加入体积分数为95%的酒精溶液中，DNA析出，过滤后存在于纱布上(r)，杂质存在于滤液中(R)。
7．下面关于DNA对高温的耐受性的说法错误的是( B )
A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B．超过80
℃后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C．不同生物的DNA的变性温度不一定相同
D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高
[解析] DNA的变性温度在80
℃以上，蛋白质一般在60
℃～80
℃时就会变性，且蛋白质高温变性后活性不可恢复，而DNA变性后在温度缓慢降低时，其生物活性可以恢复。深海热泉附近生活的生物的DNA对高温耐受性强的一个原因是其中的鸟嘌呤和胞嘧啶含量较高，所形成的氢键也较多，稳定性越高。
8．有关PCR技术，下列叙述错误的是( C )
A．是多聚酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C．PCR反应只需一定的缓冲溶液和提供DNA模板以及4种脱氧核苷酸
D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸三步
[解析] PCR反应还需要引物，耐热的DNA聚合酶等。
9．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是( D )
A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性
B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来
C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离
D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动
[解析] 透析的原理是透析袋半透膜，小分子杂质可以自由进出，大分子蛋白质则留在袋内，A正确；由A分析可知，采用透析法可以使蛋白质与其他小分子化合物分离开来，B正确；离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离的方法，C正确；蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，因此通过电泳可以将带电性质不同的蛋白质分离，D错误。
10．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是( A )
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
[解析] 在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入3
mol/L的硫酸3滴，混匀后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察到橙色的重铬酸钾变成灰绿色，A错误；在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养，B正确；检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功，C正确；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点(带)，D正确。
11．各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。可以通过比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的差异来判断动物之间亲缘关系的远近。下列各种实验方法中，不可以采用的方法是( D )
A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列
B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列
C．用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带
D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH
[解析] 生物是由共同的原始祖先进化而来的。各种生物之间都有或近或远的亲缘关系。亲缘关系越近，则其对应基因的碱基序列相似程度就越高，而基因控制蛋白质的合成，故其对应的蛋白质的氨基酸序列相似程度也越高。因此，可以采用测定基因中碱基序列或蛋白质中氨基酸序列的方法进行判断。若蛋白质的相似程度高，则进行电泳时，电泳带的相似程度也高。不同动物的乳酸脱氢酶同工酶组成虽不同，但不能说明其pH就一定不同。
12．(2020·北京海淀实验中学高三上学期开学考试)淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是( D )
A．将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理
B．制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进行灭菌处理
C．把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养
D．观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株
[解析]
本实验的目的是利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株，需要有对照实验，所以对照组是不做处理的菌株，实验组是用一定剂量的诱变剂处理菌株，A正确。培养基中至少要包括水、无机盐、氮源和碳源，因为是分解淀粉的酶，所以要以淀粉为碳源，培养基要进行高压蒸汽灭菌，B正确。因为诱变育种利用的是基因突变，基因突变具有不定向性，所以实验组应多做几个，即把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养，C正确。观察两组菌株的菌落周围透明圈大小，选择透明圈比对照组大的为所需菌株，D错误。
13．(2020·四川省成都市高中毕业班摸底测试)下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是( B )
A．参与发酵的微生物都是原核生物，没有成形的细胞核
B．发酵全过程都需要防止杂菌污染，以免降低产品品质
C．发酵过程都需在适宜温度下进行，腐乳制作温度最高
D．产品中都需添香辛料和盐等佐料，以提高产品的口感
[解析]
参与果酒发酵的微生物是酵母菌，而酵母菌属于真核生物，参与腐乳制作的毛霉也属于真核生物，它们都有成形的细胞核，A错误；发酵全过程都需要防止杂菌污染，以免降低产品品质，B正确；制作果酒的适宜温度是18～25
℃，制作果醋的适宜温度是30～35
℃，制作腐乳的适宜温度是15～18
℃，因此制作果醋所需的适宜温度最高，C错误；只有腐乳制作的产品中需添香辛料和盐等佐料，D错误。
14．下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是( D )
A．制作果酒时瓶口先通气后密封，而制作果醋时需要通入氧气
B．使用加酶洗衣粉时用温水洗涤效果比用冷水洗涤效果好
C．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法
D．提取DNA可选用哺乳动物成熟的红细胞
[解析] 哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，故不能用于提取DNA，故D错。
15．下列说法不正确的是( C )
A．固定化酶的方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法
B．固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法
C．由于酶分子很小，因此多采用包埋法固定
D．反应物是大分子物质应采用固定化酶
[解析] 个体小的酶分子容易从包埋材料中漏出。因此，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定。
16．橘皮精油的提取中，用压榨法得到压榨液，为了使橘皮油易于与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量的两种物质，并调节pH至7～8，这两种物质是( B )
A．0.25%的小苏打和0.25%的硫酸钠
B．0.25%的小苏打和5%的硫酸钠
C．5%的小苏打和5%的硫酸钠
D．5%的小苏打和0.25%的硫酸钠
[解析] 分别加入相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸钠，目的是使橘皮油易于与水分离。
17．下列有关实验的叙述不正确的是( A )
A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入
B．腐乳制作过程中，前期发酵温度过低，腐乳“皮”不易形成
C．研究人类某遗传病的发病率，在人群中随机取样调查
D．酵母菌计数时，应先盖上盖玻片再用滴管吸取培养液，从盖玻片边缘滴入计数室
[解析] 醋酸菌是好氧菌，在发酵时不能封闭充气口；温度过低影响毛霉等微生物发酵，则腐乳“皮”不易形成；调查人类某遗传病的发病率，在人群中随机取样调查。
18．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是( B )
A．用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小
B．制备果酒过程中，每隔一段时间拧松瓶盖，目的是向瓶中通气保证发酵顺利
C．测定发酵过程中样品的亚硝酸盐含量时，需要与标准显色液进行比色
D．以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌
[解析] 稀释涂布平板法在培养基上形成的一个菌落有可能是由两个或多个重叠在一起的细胞形成的，因此测定值比实际值小；制作果酒实验，拧松瓶盖是为了放出CO2；鉴定亚硝酸盐含量，需与标准显色液进行比色；以尿素为唯一氮源的培养基可以选择分离出分解尿素的细菌，加入酚红指示剂可鉴定出分解尿素的细菌。
19．关于蒸馏装置进水口和出水口的说法，正确的是( B )
A．水充满冷凝管后，要封闭进水口和出水口
B．出水口的位置高于进水口
C．进水口的水温高于出水口
D．玫瑰油从进水口进入，从出水口排出
[解析] 水蒸气蒸馏装置中，冷水源源不断地从进水口进入，吸收了蒸馏气体的热量后，从出水口源源不断地排出。出水口的位置高于进水口。冷凝管中的水通道和蒸馏气体通道并不相通。
20．(2019·盐城质检)下列与生物技术实践相关实验的叙述，正确的是( B )
A．制作果酒的温度一般要略高于果醋的制作温度
B．制作固定化酵母细胞实验中，需将凝胶珠置于CaCl2溶液中处理适宜的时间
C．制作固定化酶的最佳方法是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定
D．腐乳制作的全过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用
[解析] 制作果酒的温度一般要低于果醋的制作温度；由于细胞较大，适于用包埋法固定，而酶分子较小，故制作固定化酶的最佳方法用吸附法或交联法；腐乳制作的过程中密封腌制时毛霉不再发挥作用，起作用的是前期产生的各种酶。
21．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是( D )
A．培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌
B．实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触
C．实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染
D．将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种
[解析] 本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”，因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触，B正确；实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染，C正确；本实验将固体培养基得到的菌重复多次上述实验是为提纯目的菌，D错误。故选D。
22．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些物质溶于酒精溶液。下图为“DNA的粗提取”实验的相关操作步骤，其操作目的错误的是( A )
A．①是洗涤红细胞、去除红细胞表面的杂质
B．②是稀释NaCl溶液至0.14
mol/L，析出DNA
C．③是选用2
mol/L
NaCl溶液，溶解黏稠物中的DNA
D．④是纯化DNA，去除溶于95%酒精的杂质
[解析] ①鸡血细胞中加入蒸馏水是使红细胞吸水涨破，释放核物质，A错误；②向含有DNA的氯化钠中加入蒸馏水是降低氯化钠溶液的浓度，使DNA析出，B正确；③2
mol/L
NaCl溶液是为了溶解粘稠物质中的DNA，C正确；④向含DNA的氯化钠溶液中加入95%的酒精的目的是除去溶解于酒精的杂质，获得较纯净的DNA，D正确。
23．下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是( C )
A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2
B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精
C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰
D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板
[解析] 酵母菌细胞呼吸产生的二氧化碳可用溴麝香草酚蓝检测，A正确；酵母菌发酵产生的酒精可用酸性重铬酸钾检测，B正确；探究酵母菌群数量变化实验中形成前后对照，不需要设置空白对照，C错误；用稀释涂布平板法培养计数，应选择30～300菌落数的平板，以减少实验误差，D正确。
24．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是( B )
A．步骤①后需将培养基灭菌并调节pH
B．步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行
C．步骤③到④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
D．图中步骤①结束后需倒置平板，④结束后不需要
[解析] 步骤①为倒平板操作，应在调节pH并灭菌之后进行，A项错误。倒平板、接种等操作均应进行无菌操作，因此步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行，B项正确。由图④可知，该接种操作共在5个区域进行划线，应灼烧接种环6次，C项错误。倒平板、接种后均应将平板倒置放置，D项错误。
25．在生物实践中，颜色的变化能帮助我们作出正确的判断，下列说法不正确的是( C )
A．发酵后的果汁在酸性条件下与重铬酸钾反应呈灰绿色，证明发酵后的果汁中有酒精
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，可鉴定尿素分解菌
C．提取的丝状物若是DNA，将其溶解于NaCl溶液中再加入二苯胺试剂，混匀后就变蓝
D．纤维素培养基中加入刚果红，周围产生透明圈的菌落很可能是纤维素分解菌
[解析] 提取的丝状物若是DNA，将其溶解于NaCl溶液中再加入二苯胺试剂，混匀后并水浴加热，可观察颜色变蓝。
第Ⅱ卷(非选择题 共50分)
二、非选择题(共50分)
26．(10分)番茄红素是一种类胡萝卜素，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，化学性质稳定。番茄红素可以从番茄中提取，具有抗氧化、抗癌与抑癌的功效。某科研小组按如下步骤进行了相关实验：
①提取番茄红素；②将等量癌细胞分别接种在甲、乙两组培养瓶内，适宜条件下培养24
h后除去上清液；③向两组培养瓶中分别加入适量番茄红素培养液和等量生理盐水，适宜条件下继续培养；
④2
h后统计并计算两组的癌细胞增殖抑制率。回答下列问题：
(1)提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是__番茄红素不易挥发__。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行__粉碎、干燥__后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，应选择__石油醚__作为番茄红素的萃取剂。
(2)根据步骤②～④分析，科研小组的探究目的是__探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用__。若要进一步探究番茄红素的浓度与细胞增殖抑制率的关系，请写出简要实验思路：
__用不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率__。
(3)新技术新工艺——超临界CO2萃取法：利用超临界状态下的CO2流体对天然有机物具有特殊溶解作用而进行，具有无需高温加热、无残留等特点。其过程如下：
番茄粉碎，干燥→通入超临界CO2进行萃取→粗产品→无水乙醇→真空抽滤→高纯度番茄红素，据题干分析可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免__有机溶剂残留/有机溶剂易燃易爆/产品纯度低/高温下有效成分分解/溶剂污染环境__(填一点即可)。
(4)对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是__纸层析法__。现有两份不同的番茄红素萃取样品鉴定结果(如图所示)。由图可知，__C__(填“B”或“C”)萃取样品纯度更高。
[解析] (1)提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是番茄红素不易挥发。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行粉碎、干燥后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，乙醇与水互溶，应选择石油醚作为番茄红素的萃取剂。
(2)由题意可知，科研小组的探究目的是探究番茄红素对癌细胞的增殖是否有抑制作用。可以设计不同浓度的番茄红素分别处理癌细胞，统计各组的癌细胞增殖抑制率，探究番茄红素的最适浓度。
(3)由题意可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免高温下有效成分分解以及有机溶剂易燃易爆等缺点。
(4)对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是纸层析。由图可知，C萃取样品与标样层析结果相同，纯度更高。
27．(10分)为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA。实验步骤如下：
①取500
mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40
mg加酶洗衣粉和1．5
mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24
h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25∶24∶1)混合液抽提。
③加0.2
mg/mL的RNA水解酶于37
℃水浴1
h。
④加醋酸钠和无水乙醇，4
℃高速离心15
min。
⑤用70
mg乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA。
请回答有关问题：
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是__洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜__。
(2)步骤②的目的是__使蛋白质变性，抽提蛋白质__。步骤③的目的是__水解RNA__。
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是__析出DNA，提取含杂质较少的DNA__，高速离心时温度保持在4
℃的原因有__降低核酸水解酶的活性，防止DNA降解__、__降低分子运动，易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韧性，减少断裂)__等。
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路。__将上述实验步骤中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K，其他实验步骤相同，得到DNA后，测定DNA的量、纯度__。
(5)若是从血细胞中提取DNA，则选择__鸡血__(选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”)。破碎细胞时，向血细胞液中加入一定量的__蒸馏水__，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
[解析] (1)洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜，因此加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞。(2)步骤③的目的是水解RNA，去除杂质；(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是析出DNA，提取含杂质较少的DNA。酶的活性受温度影响，低温会抑制DNA酶的活性，减少DNA降解，因此离心时温度保持在4
℃。(4)要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，可将加酶洗衣粉换成蛋白酶K，重复上述实验步骤，得到DNA后，测定DNA的量和纯度，并与加酶洗衣粉组比较。(5)略。
28．(10分)某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下：
①活化酵母细胞：称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌，使酵母细胞活化。
②配制CaCl2溶液：将无水CaCl2溶解在定量蒸馏水中，配制成一定浓度的CaCl2溶液。
③配制海藻酸钠溶液：将定量的海藻酸钠直接溶解在定量的蒸馏水中，配制成溶液。
④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合：将活化的酵母细胞迅速加入刚配制成的海藻酸钠溶液中，充分搅拌混合均匀。
⑤固定化酵母细胞：用注射器以恒定的速度缓慢将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察凝胶珠的形成。
(1)请你改正其中两处错误的操作：
第一处：__配制海藻酸钠溶液应用小火或间断加热至完全溶化__。
第二处：__海藻酸钠溶液冷却至室温再加入酵母细胞__。
(2)刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30
min左右，目的是__让凝胶珠形成稳定的结构__。
(3)如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度__过低__(填“过低”或“过高”)。
(4)研究发现，固定化强度强的酵母颗粒发酵效果好，且稳定性高、使用寿命长。某机构利用上述装置，将2%、2.5%、3%的海藻酸钠分别用2%、3%、4%的X溶液进行凝胶处理，所得到的固定化酵母颗粒的强度在28
℃下发酵48
h后的酒精产量见下表。
海藻酸钠(%)
2
2.5
3
2
2.5
3
2
2.5
3
X溶液(%)
2
2
2
3
3
3
4
4
4
固定化强度(g/30个)
930
950
990
1
030
1
100
1
140
1
170
1
170
1
160
酒精量(%)
6.7
6.5
6.5
6.7
6.4
6.2
6.7
6.4
6.3
可以看出，随着X溶液浓度的增加，__固定化强度__增加；凝胶固定化效果较好的海藻酸钠与X溶液的浓度分别是__2%__、__4%__。
[解析] (1)操作步骤中的错误为：第一处海藻酸钠溶解应适当加热至完全溶化；第二处海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞，否则会杀死酵母菌。(2)刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30
min左右，目的是让凝胶珠形成稳定的结构。(3)如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度过低，包埋的酵母菌数量少。(4)从表中可以看出，随着X溶液浓度的增加，固定化酵母颗粒强度增强；在海藻酸钠2%、X溶液浓度4%时，固定化酵母颗粒强大、酒精量最高，故凝胶固定化效果较好的海藻酸钠与X溶液浓度分别是2%、4%。
29．(10分)(江苏省如皋市高三第一学期教学质量调研)营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
(1)过程①的接种方法为__稀释涂布平板法__，与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比，待测培养皿中的特有的成分有__氨基酸__。
(2)进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，原因是__防止将特定营养成分带入培养基__。从__完全__培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。釆用影印法培养的优点是__同种菌株的接种位置相同__。
(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取__菌落A__(选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中，28
℃振荡培养1～2天后，离心，取沉淀物用__无菌水__洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1
mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15
mL融化并冷却至__45～50__
℃的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域，标记为A、B、C、D、E。
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示)，经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
组别
所含氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
天冬氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
苯丙氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
天冬氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
苯丙氨酸
丙氨酸
丝氨酸
在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于__天冬氨酸缺陷型__。
[解析]
(1)根据过程①培养的效果图可以判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。图示为实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，据此可知：与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比，待测培养皿中的特有的成分有氨基酸。(2)为了防止将特定营养成分带入培养基，进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培养基或补充了相应的氨基酸的基本培养基中生长，因此应从题图中完全培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。釆用影印法培养的优点是同种菌株的接种位置相同。(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，结合对(2)的分析可知：①用接种针挑取菌落A接种并培养；离心后菌株存在于沉淀物中，为了防止杂菌污染，需取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。②加入菌悬液的无菌培养皿中应倾注15
mL融化并冷却至45～50
℃的基本培养基。③表中信息显示：A、D区域含有、其他区域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而实验结果只有A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于天冬氨酸缺陷型。
30．(2020·河南测试)在盛产柿子的某地，生物小组开展柿子酒、柿子醋生产的相关活动。
(1)土壤中的酵母菌计数：
在秋季的柿子园中，落地的柿子流出果汁的周围土壤中有酵母菌大量生长繁殖。
①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在__(酒精灯)火焰__旁称取10
g土样，加入盛有90
mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。而后进行系列稀释操作；吸取锥形瓶中土壤液的上清液__1__
mL，转移至盛有9
mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至101、102、103、104倍的土壤液的稀释液。
②为测定土壤中酵母菌的数量，选用第①步中所获得的102、103、104倍的土壤液的稀释液，并依次分别吸取0.1
mL进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对各稀释度涂布的三个平板进行菌落计数(如表)。
序号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
稀释度104倍
5
8
3
稀释度103倍
178
191
156
稀释度102倍
418
511
389
则每克土壤样品中的酵母菌数量约为__1.75×107__个。要使该实验所得数据可靠，还应该实施的操作是__同时在各稀释度组中，另加一个平板接种无菌水作为对照__。
(2)柿子醋生产菌的制备：去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于__30～35__
℃进行纯化培养，获得如图1所示菌落分布。应从__丙__(填“甲”“乙”或“丙”)区域中挑取部分菌落制玻片观察，选择所需菌种。
(3)柿子酒、柿子醋的制作(发酵装置如图2所示)：
①排气口弯管设置的目的是__在酒精发酵时用来排出CO2，防止空气中微生物的污染__。
②可通过装置中的__出料口__对发酵情况进行及时监测。此时，若采用血细胞计数板对发酵液的酵母菌观察计数，与(1)中计数方法相比，该计数方法测得的酵母菌数目较__多__。
③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变__菌种和发酵条件(温度、氧气等)__进行生产。
[解析] (1)①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在酒精灯火焰旁称取土壤；系列稀释时，吸取锥形瓶中土壤液的上清液1
mL，转移至盛有9
mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至101、102、103、104倍的土壤液的稀释液。②选取菌落数在30～300之间的平板计数，符合条件的稀释倍数是103，所以0.1
mL的稀释液中含有活菌数为(178＋191＋156)÷3＝175个，本题的稀释是从土壤上清液开始的，故每克土壤样品中约含酵母菌175÷0.1×103×10＝1．75×107个；要使该实验所得数据可靠，还应该设置对照实验，即同时在各稀释度组中，另加一个平板接种无菌水作为对照。(2)因为酵母菌生长的适宜温度是20
℃左右，所以制备柿子醋生产菌(即醋酸菌)时应去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于30～35
℃进行纯化培养；平板划线法接种应在最后一个区域即丙区域挑选单个菌落。(3)①在酒精发酵时排气口用来排出CO2，弯管设置是为了防止空气中微生物的污染。②可通过装置中的出料口处取样对发酵情况进行及时监测；血细胞计数板计数时无论死菌、活菌都会被统计，所以结果会比稀释涂布平板法统计的数目多。③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变菌种和发酵条件(温度、氧气等)进行生产。
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-综合学业质量标准检测
本试卷分第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分。满分100分，考试时间90分钟。
第Ⅰ卷(选择题 共50分)
一、选择题(共25小题，每小题2分，共50分，在每小题给出的4个选项中，只有1项是符合题目要求的)
1．利用生物工程生产啤酒、果醋、酸奶、腐乳的常用菌种分别是( )
A．酵母菌、枯草杆菌、乳酸菌、毛霉
B．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌
C．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉
D．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌
2．下列关于大肠杆菌的培养的叙述不正确的是( )
A．配制固体培养基所加的琼脂是从红藻中提取的脂类
B．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌
C．用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要保证待测样品稀释的稀释度合适
D．使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃
3．下列关于酶的叙述中，正确的是( )
A．酶都提取于动植物细胞
B．酶制剂能够重复利用
C．果酒和果汁能够用酶制剂澄清
D．酶固定化后被称为酶制剂
4．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是( )
A．可以利用玫瑰精油无色透明、有诱人的橘香味判断是否成功提取玫瑰精油
B．水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏的基本原理都相同，只是蒸馏过程中原料放置的位置不同
C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功
D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素带
5．下列有关生物技术应用的叙述中，错误的是( )
A．腐乳制作中酒精含量过高会延长腐乳成熟时间
B．加酶洗衣粉中的酶制剂的作用都是直接洗去衣服上的污垢
C．若固定化酵母细胞时，CaCl2溶液浓度过低，将很难形成凝胶珠
D．制作果醋时中断通氧会引起醋酸菌死亡
6．将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14
mol/L
NaCl溶液、2
mol/L
NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是( )
A．P、Q、R
B．p、q、r
C．P、q、R
D．p、Q、r
7．下面关于DNA对高温的耐受性的说法错误的是( )
A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B．超过80
℃后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C．不同生物的DNA的变性温度不一定相同
D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高
8．有关PCR技术，下列叙述错误的是( )
A．是多聚酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C．PCR反应只需一定的缓冲溶液和提供DNA模板以及4种脱氧核苷酸
D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸三步
9．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是( )
A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性
B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来
C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离
D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动
10．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是( )
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
11．各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。可以通过比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的差异来判断动物之间亲缘关系的远近。下列各种实验方法中，不可以采用的方法是( )
A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列
B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列
C．用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带
D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH
12．(2020·北京海淀实验中学高三上学期开学考试)淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是( )
A．将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理
B．制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进行灭菌处理
C．把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养
D．观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株
13．(2020·四川省成都市高中毕业班摸底测试)下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是( )
A．参与发酵的微生物都是原核生物，没有成形的细胞核
B．发酵全过程都需要防止杂菌污染，以免降低产品品质
C．发酵过程都需在适宜温度下进行，腐乳制作温度最高
D．产品中都需添香辛料和盐等佐料，以提高产品的口感
14．下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是( )
A．制作果酒时瓶口先通气后密封，而制作果醋时需要通入氧气
B．使用加酶洗衣粉时用温水洗涤效果比用冷水洗涤效果好
C．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法
D．提取DNA可选用哺乳动物成熟的红细胞
15．下列说法不正确的是( )
A．固定化酶的方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法
B．固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法
C．由于酶分子很小，因此多采用包埋法固定
D．反应物是大分子物质应采用固定化酶
16．橘皮精油的提取中，用压榨法得到压榨液，为了使橘皮油易于与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量的两种物质，并调节pH至7～8，这两种物质是( )
A．0.25%的小苏打和0.25%的硫酸钠
B．0.25%的小苏打和5%的硫酸钠
C．5%的小苏打和5%的硫酸钠
D．5%的小苏打和0.25%的硫酸钠
17．下列有关实验的叙述不正确的是( )
A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入
B．腐乳制作过程中，前期发酵温度过低，腐乳“皮”不易形成
C．研究人类某遗传病的发病率，在人群中随机取样调查
D．酵母菌计数时，应先盖上盖玻片再用滴管吸取培养液，从盖玻片边缘滴入计数室
18．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是( )
A．用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小
B．制备果酒过程中，每隔一段时间拧松瓶盖，目的是向瓶中通气保证发酵顺利
C．测定发酵过程中样品的亚硝酸盐含量时，需要与标准显色液进行比色
D．以尿素为唯一氮源并加入酚红指示剂的培养基可分离并鉴定土壤中分解尿素的细菌
19．关于蒸馏装置进水口和出水口的说法，正确的是( )
A．水充满冷凝管后，要封闭进水口和出水口
B．出水口的位置高于进水口
C．进水口的水温高于出水口
D．玫瑰油从进水口进入，从出水口排出
20．(2019·盐城质检)下列与生物技术实践相关实验的叙述，正确的是( )
A．制作果酒的温度一般要略高于果醋的制作温度
B．制作固定化酵母细胞实验中，需将凝胶珠置于CaCl2溶液中处理适宜的时间
C．制作固定化酶的最佳方法是采用海藻酸钠溶液进行包埋固定
D．腐乳制作的全过程都离不开以毛霉为主的微生物发挥作用
21．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是( )
A．培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌
B．实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触
C．实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染
D．将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种
22．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些物质溶于酒精溶液。下图为“DNA的粗提取”实验的相关操作步骤，其操作目的错误的是( )
A．①是洗涤红细胞、去除红细胞表面的杂质
B．②是稀释NaCl溶液至0.14
mol/L，析出DNA
C．③是选用2
mol/L
NaCl溶液，溶解黏稠物中的DNA
D．④是纯化DNA，去除溶于95%酒精的杂质
23．下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误的是( )
A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2
B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精
C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰
D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板
24．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是( )
A．步骤①后需将培养基灭菌并调节pH
B．步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行
C．步骤③到④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
D．图中步骤①结束后需倒置平板，④结束后不需要
25．在生物实践中，颜色的变化能帮助我们作出正确的判断，下列说法不正确的是( )
A．发酵后的果汁在酸性条件下与重铬酸钾反应呈灰绿色，证明发酵后的果汁中有酒精
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，可鉴定尿素分解菌
C．提取的丝状物若是DNA，将其溶解于NaCl溶液中再加入二苯胺试剂，混匀后就变蓝
D．纤维素培养基中加入刚果红，周围产生透明圈的菌落很可能是纤维素分解菌
第Ⅱ卷(非选择题 共50分)
二、非选择题(共50分)
26．(10分)番茄红素是一种类胡萝卜素，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，化学性质稳定。番茄红素可以从番茄中提取，具有抗氧化、抗癌与抑癌的功效。某科研小组按如下步骤进行了相关实验：
①提取番茄红素；②将等量癌细胞分别接种在甲、乙两组培养瓶内，适宜条件下培养24
h后除去上清液；③向两组培养瓶中分别加入适量番茄红素培养液和等量生理盐水，适宜条件下继续培养；
④2
h后统计并计算两组的癌细胞增殖抑制率。回答下列问题：
(1)提取番茄红素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是（
）。根据番茄红素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，为了提高萃取效果，应对番茄进行（
）后用有机溶剂进行浸泡提取。根据番茄红素化学性质，在乙醇和石油醚两种溶剂中，应选择（
）作为番茄红素的萃取剂。
(2)根据步骤②～④分析，科研小组的探究目的是（
）。若要进一步探究番茄红素的浓度与细胞增殖抑制率的关系，请写出简要实验思路：
（
）。
(3)新技术新工艺——超临界CO2萃取法：利用超临界状态下的CO2流体对天然有机物具有特殊溶解作用而进行，具有无需高温加热、无残留等特点。其过程如下：
番茄粉碎，干燥→通入超临界CO2进行萃取→粗产品→无水乙醇→真空抽滤→高纯度番茄红素，据题干分析可知，超临界CO2替代传统有机溶剂的突出优点是能避免（
）(填一点即可)。
(4)对提取的粗品进行鉴定时，可以采用的方法是（
）。现有两份不同的番茄红素萃取样品鉴定结果(如图所示)。由图可知，（
）(填“B”或“C”)萃取样品纯度更高。
27．(10分)为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA。实验步骤如下：
①取500
mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40
mg加酶洗衣粉和1．5
mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24
h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25∶24∶1)混合液抽提。
③加0.2
mg/mL的RNA水解酶于37
℃水浴1
h。
④加醋酸钠和无水乙醇，4
℃高速离心15
min。
⑤用70
mg乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA。
请回答有关问题：
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是（
）。
(2)步骤②的目的是（
）。步骤③的目的是（
）。
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是（
），高速离心时温度保持在4
℃的原因有（
）等。
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路。（
）。
(5)若是从血细胞中提取DNA，则选择（
）(选填“鸡血”或“哺乳动物红细胞”)。破碎细胞时，向血细胞液中加入一定量的（
），同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
28．(10分)某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下：
①活化酵母细胞：称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌，使酵母细胞活化。
②配制CaCl2溶液：将无水CaCl2溶解在定量蒸馏水中，配制成一定浓度的CaCl2溶液。
③配制海藻酸钠溶液：将定量的海藻酸钠直接溶解在定量的蒸馏水中，配制成溶液。
④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合：将活化的酵母细胞迅速加入刚配制成的海藻酸钠溶液中，充分搅拌混合均匀。
⑤固定化酵母细胞：用注射器以恒定的速度缓慢将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察凝胶珠的形成。
(1)请你改正其中两处错误的操作：
第一处：（
）。
第二处：（
）。
(2)刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30
min左右，目的是（
）。
(3)如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度（
）(填“过低”或“过高”)。
(4)研究发现，固定化强度强的酵母颗粒发酵效果好，且稳定性高、使用寿命长。某机构利用上述装置，将2%、2.5%、3%的海藻酸钠分别用2%、3%、4%的X溶液进行凝胶处理，所得到的固定化酵母颗粒的强度在28
℃下发酵48
h后的酒精产量见下表。
海藻酸钠(%)
2
2.5
3
2
2.5
3
2
2.5
3
X溶液(%)
2
2
2
3
3
3
4
4
4
固定化强度(g/30个)
930
950
990
1
030
1
100
1
140
1
170
1
170
1
160
酒精量(%)
6.7
6.5
6.5
6.7
6.4
6.2
6.7
6.4
6.3
可以看出，随着X溶液浓度的增加，（
）增加；凝胶固定化效果较好的海藻酸钠与X溶液的浓度分别是（
）、（
）。
29．(10分)(江苏省如皋市高三第一学期教学质量调研)营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：
(1)过程①的接种方法为（
），与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比，待测培养皿中的特有的成分有（
）。
(2)进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，原因是（
）。从（
）培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。釆用影印法培养的优点是（
）。
(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取（
）(选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中，28
℃振荡培养1～2天后，离心，取沉淀物用（
）洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1
mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15
mL融化并冷却至（
）
℃的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域，标记为A、B、C、D、E。
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示)，经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。
组别
所含氨基酸
A
组氨酸
苏氨酸
谷氨酸
天冬氨酸
亮氨酸
B
精氨酸
苏氨酸
赖氨酸
甲硫氨酸
苯丙氨酸
C
酪氨酸
谷氨酸
赖氨酸
色氨酸
丙氨酸
D
甘氨酸
天冬氨酸
甲硫氨酸
色氨酸
丝氨酸
E
半胱氨酸
亮氨酸
苯丙氨酸
丙氨酸
丝氨酸
在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于（
）。
30．(2020·河南测试)在盛产柿子的某地，生物小组开展柿子酒、柿子醋生产的相关活动。
(1)土壤中的酵母菌计数：
在秋季的柿子园中，落地的柿子流出果汁的周围土壤中有酵母菌大量生长繁殖。
①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在（
）旁称取10
g土样，加入盛有90
mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。而后进行系列稀释操作；吸取锥形瓶中土壤液的上清液（
）
mL，转移至盛有9
mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至101、102、103、104倍的土壤液的稀释液。
②为测定土壤中酵母菌的数量，选用第①步中所获得的102、103、104倍的土壤液的稀释液，并依次分别吸取0.1
mL进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对各稀释度涂布的三个平板进行菌落计数(如表)。
序号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
稀释度104倍
5
8
3
稀释度103倍
178
191
156
稀释度102倍
418
511
389
则每克土壤样品中的酵母菌数量约为（
）个。要使该实验所得数据可靠，还应该实施的操作是（
）。
(2)柿子醋生产菌的制备：去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于（
）
℃进行纯化培养，获得如图1所示菌落分布。应从（
）(填“甲”“乙”或“丙”)区域中挑取部分菌落制玻片观察，选择所需菌种。
(3)柿子酒、柿子醋的制作(发酵装置如图2所示)：
①排气口弯管设置的目的是（
）。
②可通过装置中的（
）对发酵情况进行及时监测。此时，若采用血细胞计数板对发酵液的酵母菌观察计数，与(1)中计数方法相比，该计数方法测得的酵母菌数目较（
）。
③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变（
）进行生产。
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