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专题23
现代生物科技专题
一、单选题
1.下列关于病毒的叙述，错误的是（??
）
A.?有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合
B.?适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可提高对新型冠状病毒的抵御能力
C.?在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞
D.?用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性
2.下列关于基因工程的叙述，正确的是（??
）
A.?若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B.?抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关
C.?抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA
D.?已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置
3.将某种海鱼的抗冻基因导入西红柿细胞中，培育成耐低温的西红柿新品种，这种导入外源基因的方法属于（??
）
A.?杂交育种????????????????????????B.?转基因技术????????????????????????C.?单倍体育种????????????????????????D.?多倍体育种
4.2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR--Cas9基因编辑技术，成功用基因敲除猴的体细胞通过克隆技术培育了
5只克隆疾病猴。下列叙述正确的是（???
）
A.???
为了获得更多的猴卵（母）细胞，要对供核的猴经超数排卵处理
B.?体外培养受精卵时，培养液中通常需加入动物血清、蔗糖等成分
C.?胚胎移入前要对受体猴注射免疫抑制剂，以减弱或消除免疫排斥反应
D.?克隆猴被用于人类疾病的治疗和药物检测可以减少个体差异对实验的干扰
5.下列关于动物细胞培养及融合技术的叙述，正确的是
（???
）
A.?细胞融合即细胞杂交，指由
2
个或多个细胞融合成
1
个细胞的现象
B.?一个脾细胞和一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞
C.?滋养层细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用
D.?“多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中
核基因表达的分子开关的启动
6.愈伤组织细胞通过液体悬浮培养可以分散形成胚性细胞，下列叙述正确的是（????
）
A.?液体悬浮培养过程中，需要营造封闭无氧环境
B.?胚性细胞细胞质丰富、液泡大、细胞核大，是一种相对没有分化的薄壁细胞
C.?拟南芥和小麦的胚性细胞再生成植株，多次继代培养后，都能保持细胞全能性
D.?胚性细胞经培养基中成分的诱导，可依次经历细胞团、球形胚、心形胚和胚状体等过程
7.下列有关生态系统的说法，错误的是（???
）
A.?可持续发展追求的是自然、经济、社会的持久和协调发展
B.?封山育林、治理荒漠体现了人类活动可以改变群落演替的速率和方向
C.?生态缸中生产者的种类、数量比例越大，生态缸保持稳定的时间就越长
D.?“绿水青山就是金山银山”的理念反映了生态系统中生物多样性的间接价值大于直接价值
8.从目前来看，下列哪一生物科技成果运用到了基因工程技术(???
)
A.?利用酵母菌生产人的胰岛素????????????????????????????????B.?单克隆抗体技术
C.?设计试管婴儿技术??????????????????????????????????????????????D.?微型繁殖和作物脱毒
9.如图表示用胸苷（TdR）双阻断法使细胞周期同步化，其中A表示正常的细胞周期，G1
，
S，G2
，
M期依次分别为10h，7h，3.5h，1.5h；B表示经第一次阻断，细胞都停留在S期；C表示洗去TdR恢复正常的细胞周期；D表示经第二次阻断，细胞均停留在G1/S交界处．下列说法正确的是（???
）
A.?实验中需要对细胞解离，漂洗，染色，制片，以便于显微镜下观察
B.?胸苷（TdR）很可能是通过阻碍核糖体与mRNA结合发挥作用的
C.?第二次阻断应该在第一次洗去TdR之后的7h到15h之间
D.?若改用秋水仙素处理，则细胞会停留在G2/M交界处
10.如图是某二倍体植物通过花药进行单倍体育种的过程示意图，下列叙述正确的是（???
）
A.?图中①②过程主要利用的生物学原理是基因重组和细胞增殖
B.?植物组织培养时在②过程中组织细胞的全能性增强
C.?图中③过程为了促进生根，可提高生长素浓度、增加MS培养基的浓度
D.?过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蛭石和草炭土的基质上
11.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（????
）
A.?胚胎干细胞培养时需要使用经处理失去增殖力的饲养层细胞
B.?利用基因敲除手段获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应
C.?胚胎分割后的胚胎或细胞可直接移植给受体
D.?成熟的精子获能后可与卵巢中取出的卵细胞受精获得受精卵
12.下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是（??
）
A.?囊胚的内细胞团和滋养层细胞的差异是转录水平上的差异引起的
B.?胚胎体外培养时，培养液中要加入胚胎成纤维细胞以促进其细胞生长
C.?采用胚胎分割技术产生同卵多胎的数量是有限的
D.?对试管动物中暂不移植的胚胎可使用冷冻方法保存
13.现代生物技术广泛的应用于各个领域，对人类的生活产生很大的影响，下列关于现代生物技术的叙述，错误的是（????
）
A.?转基因技术能解决传统育种的远缘亲本难以杂交的问题
B.?由于植物细胞具有全能性，不同种类的植物和同一植物的不同基因型个体的全能性的表达程度相同
C.?克隆多莉时，形成的重组卵细胞进行的第一次分裂有DNA的复制，但是转录并未开始
D.?原肠胚的中胚层是外胚层的部分细胞分裂后进入内、外胚层之间形成的
14.杂交瘤技术解决了抗血清的异质性问题，下列叙述错误的是（??
）
A.?用体细胞培养的方法可以筛除掉其中的一些杂交细胞
B.?两次及两次以上的抗体检测，有利于更好的得到单克隆细胞
C.?获得单克隆抗体必须将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内
D.?可以用仙台病毒介导，将免疫过的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合
15.充分利用环境各部分的不同属性和所涉及农作物及养殖物生存所需要的特定环境，将其有机的结合在一起的做法，属于农业生态工程的（???
）
A.?物质的良性循环技术???????????????????????????????????????????B.?洁净可再生的新能源开发技术
C.?立体养殖技术?????????????????????????????????????????????????????D.?种植业与畜牧业合理优化技术
二、综合题
16.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与柑橘加工与再利用有关的问题：
Ⅰ.柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的________。为确定果胶酶的处理效果，对分别加入不同浓度果胶酶的果汁样品，可采用3种方法进行实验：①取各处理样品，添加相同体积的________，沉淀生成量较少的处理效果好。②对不同处理进行离心，用比色计对上清液进行测定，OD值________的处理效果好。③对不同处理进行________，记录相同体积果汁通过的时间，时间较短的处理效果好。
Ⅱ.加工后的柑橘残渣含有抑菌作用的香精油及较多的果胶等。为筛选生长不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，从腐烂残渣中分离得到若干菌株，分别用无菌水配制成________，再均匀涂布在LB固体培养基上。配制适宜浓度的香精油，浸润大小适宜并已________的圆形滤纸片若干，再贴在上述培养基上。培养一段时间后，测量滤纸片周围抑制菌体生长形成的透明圈的直径大小。从直径________的菌株中取菌接种到含有适量果胶的液体培养基试管中培养，若有果胶酶产生，摇晃试管并观察，与接种前相比，液体培养基的________下降。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
Ⅰ.天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的________。
Ⅱ.结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、________及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用________的转基因方法。
Ⅲ.利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间________，且不经历________过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。
Ⅳ.与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加________，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成________，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如________（A.提高蔗糖浓度B.降低培养基浓度C.提高大量元素浓度D.不添加琼脂）。
17.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与泡菜制作有关的问题：
Ⅰ.用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生________，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是________。
Ⅱ.泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使________菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使________菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
Ⅲ.从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行________，再用________的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有________，以便于观察是否产酸。
Ⅳ.自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加________。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
Ⅰ.为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经________处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法有________（答出2点即可）。
Ⅱ.若要获得已知序列的抗病基因，可采用________或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用________，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的粘性末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中________，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。
Ⅲ.原生质体在培养过程中，只有重新形成________后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过________或器官发生的途径再生植株。
18.某沿海地区的生态系统以森林群落为主体，对维持当地生态平衡有着重要作用。回答下列问题：
（1）从生态系统的营养结构分析，森林群落中所生存的众多生物种群相互之间组成了复杂的________，因而该生态系统具有较强的自我调节能力。该森林群落在不同季节存在明显的外貌变化，即群落的________明显，这也是群落________结构的一种表现。
（2）在森林群落中，大气
的含量通常存在昼夜变化和季节变化，这与植物的________直接相关。
可在大气圈和________的界面上进行交换而保持相对平衡。通常情况下，没有被消费者利用的有机物中的碳，大部分是在生物死亡后________通过作用而重返大气。
（3）在该生态系统的农业生产区，通过采用农业生态工程的________技术，发展立体养殖，调整作物的品种和种植面积，提高了经济效益和生态效益。
19.回答下列小题：
（1）回答与果胶和果胶酶有关的问题：
①通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为________。
②为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行________。
③在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使________。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入________。使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
④常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有________和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有________和________。
（2）回答与利用生物技术培育抗病品种有关的问题：
①通过抗病性强的植株获取抗病目的基因有多种方法。现已获得纯度高的抗病蛋白（可作为抗原），可通过________技术获得特异性探针，并将________中所有基因进行表达，然后利用该探针，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得与之对应的目的基因。
②将上述抗病基因通过转基因的方法导入植物的分生组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间用分子水平方法判断抗病基因是否表达，应检测________（A.质粒载体?
B.转录产物?
C.抗性基因?
D.病原微生物）。
③植物细胞在培养过程中往往会发生________，可利用这一特性筛选抗致病真菌能力强的细胞。筛选时在培养基中加入________，并将存活的细胞进一步培养至再生植株。若利用________培养建立的细胞系用于筛选，则可快速获得稳定遗传的抗病植株。
④用抗病品种与高产品种进行杂交育种过程中，有时会遇到因胚发育中止而得不到可育种子的情况。若要使该胚继续发育获得植株，可采用的方法是________。
20.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：
某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。
①果胶提取工艺研究结果表明，原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率（提取得到的果胶占原料质量的百分率）显著高于常温水漂洗的果胶得率，最主要原因是沸水漂洗________
(A．有助于清洗杂质和去除可溶性糖?
B．使植物组织变得松散?
C．使有关酶失活?
D．有利细胞破裂和原料粉碎制浆)。
②在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用________，进行单菌落分离，然后将其________，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。
③在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题,可添加________使果胶彻底分解成半乳糖醛酸，再添加________，以解决汁液浑浊和沉淀问题。
④在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的________（答出2点即可）、反应液pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过________来调节。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题。
①将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶EcoR
I酶切，在切口处形成________。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接。在两个片段相邻处形成________，获得重组质粒。
②已知用CaCl2处理细菌，会改变其某些生理状态。取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成________实验。在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，其目的是________，从而表达卡那霉素抗性基因，并大量增殖。
③取田间不同品种水稻的幼胚，先进行________，然后接种到培养基中培养，幼胚发生________形成愈伤组织，并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织，再培养愈伤组织，以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及________（答
2点即可）。
21.（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术．其中“过腹还田”的具体途径是________．将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术．
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益．“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复．使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向．
22.若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和乙各1头，具体见下表．
绵羊
性别
转入的基因
基因整合位置
表现型
普通绵羊
♀、♂
﹣
﹣
白色粗毛
绵羊甲
♂
1个A+
1号常染色体
黑色粗毛
绵羊乙
♂
1个B+
5号常染色体
白色细毛
注：普通绵羊不含A+
，
B+基因，基因型用A﹣A﹣B﹣B﹣表示．
请回答：
（1）A+基因转录时，在________的催化下，将游离核苷酸通过________键聚合成RNA分子．翻译时，核糖体移动到mRNA的________，多肽合成结束．
（2）为选育黑色细毛的绵羊，以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得F1
，
选择F1中表现型为________的绵羊和________的绵羊杂交获得F2
．
用遗传图解表示由F1杂交获得F2的过程．________
（3）为获得稳定遗传的黑色细毛绵羊，从F2中选出合适的1对个体杂交得到F3
，
再从F3中选出2头黑色细毛绵羊（丙、丁）并分析A+和B+基因的表达产物，结果如图所示．不考虑其他基因对A+和B+基因表达产物量的影响，推测绵羊丙的基因型是________，理论上绵羊丁在F3中占的比例是________.
答案解析部分
一、单选题
1.C
【考点】人体免疫系统在维持稳态中的作用，细胞融合的方法，病毒
【解析】A、有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合，如灭活的病毒，
A正确；
B、适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可以参与免疫调节中的体液和细胞免疫，尽可能杀死更多的病毒，可提高对新型冠状病毒的抵御能力，B正确；
C、在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，是因为病毒浸入细胞后大量繁殖，病毒从细胞中释放出来，不能说明该病毒的增殖不依赖于宿主细胞，C错误；
D、用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质在高温高压下，空间结构发生变化，肽链松散，发生了变性，D正确。
故答案为：C。
【分析】诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心、
震动、
电刺激）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白，可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。
2.D
【考点】基因工程的应用，基因工程的操作程序（详细）
【解析】A、若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则该酶会对进入受体的重组质粒进行切割，不利于其保持结构稳定，A错误；
B、抗除草剂基因转入抗盐植物，获得了抗除草剂抗盐品系和抗除草剂不抗盐品系，不抗盐品系的产生可能是转入的抗除草剂基因插入到抗盐基因内，影响其表达造成，B错误；
C、转基因植物中均含抗除草剂基因，但存在抗除草剂和不抗除草剂两种植株，前者表达了抗性蛋白，后者可能抗除草剂基因未转录出mRNA，或转录出的mRNA未能翻译成蛋白质，C错误；
D、某种限制性内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带，即3种不同分子量DNA，因此环状质粒上至少有3个酶切位点，D正确。
故答案为：D。
【分析】基因工程中通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按一定的程序进行操作，包括目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。
3.B
【考点】育种方法综合，基因工程的概述
【解析】A、杂交育种是将具有不同优良性状的同种生物通过杂交和自交等方法培育新品种的过程，A不符合题意；
B、转基因技术是将一种生物的某种基因导入到另一种生物细胞中，培育出具有前者某性状的后者新品种，打破了种的界限。B符合题意；
C、单倍体育种是通过花药离体培养和诱导染色体加倍的方法来快速培育纯种的过程，C不符合题意；
D、多倍体育种是因为需要利用多倍体的优点而培育多倍体的育种方法，D不符合题意。
故答案为：B
【分析】只有转基因技术和体细胞杂交技术可以打破种的界限，其中转基因技术培育出了同物种的新品种，体细胞杂交技术培育的是新物种。
4.D
【考点】动物细胞核移植技术，胚胎移植
【解析】A、供核的猴提供的是体细胞的细胞核，无需超数排卵处理，A错误；
B、动物细胞培养的培养液中不能加蔗糖，B错误；
C、子宫是免疫特赦区，胚胎移入前不需要对受体猴注射免疫抑制剂，C错误；
D、克隆猴被用于人类疾病研究与治疗中所具有的突出优点是：亲缘关系近，克隆猴的遗传物质基本相同，可以减少个体差异对实验的干扰，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。保证无菌无毒环境的措施：培养基进行灭菌，添加一定量的抗生素，定期更换培养液。2、进行体细胞克隆选择去核卵母细胞作为受体细胞，可能原因是：去核卵母细胞的体积较大，易于进行实验操作；含有较多的营养物质，可以满足早期胚胎发育的需要；含有使已经分化的细胞核恢复分裂能力的物质。克隆猴被用于人类疾病研究与治疗中所具有的突出优点是：亲缘关系近，克隆动物能减少个体差异的影响。
5.D
【考点】动物细胞培养技术，细胞融合的方法
【解析】A、动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交，A错误；
B、抗体生成细胞和瘤细胞的融合叫做杂交瘤技术，据此可知，一个经过免疫的脾细胞与一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞，B错误；
C、滋养细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用，不是滋养层细胞支持生长，C错误；
D、多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中核基因表达的分子开关的启动，D正确。
故答案为：D。
【分析】细胞融合可以在基因型相同或不同的细胞间进行，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交。由于细胞杂交中染色体容易丢失,动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。
6.D
【考点】植物组织培养的过程
【解析】解：A、液体悬浮培养过程中，需要营造有氧环境，A错误；
B、胚性细胞具有旺盛分裂能力，
细胞质丰富，细胞核大，
核仁明显，但没有液泡，B错误；
C、拟南芥和小麦的胚性细胞再生成植株，多次继代培养后，遗传物质可能发生改变，不一定都能保持细胞全能性；C错误。
D、表达单个的植物细胞在液体培养条件下，可以发生类似受精卵发育成胚的过程，从单细胞→细胞团→球形胚→心形胚→胚状体，然后再生出完整的小植株，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的过程，脱分化的结果是形成愈伤组织，愈伤组织是高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织，细胞分化程度低，全能性高，液体培养条件下的单细胞可依次到细胞团、球形胚、心形胚和胚状体，最后再生出完整的植株。
2、植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养，在培养过程中能够保持良好的分散状态。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并在振荡条件下培养一段时间后，可形成分散悬浮培养物。
?
7.C
【考点】种间关系，生态系统的稳定性，生物多样性保护的意义和措施，生态工程依据的生态学原理
【解析】解：A、可持续发展追求的是自然、经济、社会的持久和协调发展，A正确；
B、封山育林、治理沙漠体现了人类活动可以改变群落演替的方向和速度，B正确；
C、生态缸中各营养级生物的种类和数量要保持合适的比例，这样有利于其稳定，C错误；
D、“绿水青山就是金山银山”的理念深刻揭示了经济发展和生态环境保护的关系，也反映了生态系统中生物多样性的间接价值大于直接价值，D正确。
?故答案为：C。
【分析】1、生物的多样性：生物圈内所有的植物、动物和微生物，它们所拥有的全部基因以及各种各样的生态系统，共同构成了生物多样性。生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性。?2、生物多样性的价值：（1）直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的。（2）间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）。（3）潜在价值：目前人类不清楚的价值。3、人类活动会改变群落演替的方向和速度。
8.【答案】A
【考点】基因工程的应用
【解析】利用酵母菌生产人的胰岛素采用了基因工程技术，A?
符合题意；
单克隆抗体技术、微型繁殖和作物脱毒都属于细胞工程技术的范畴，B、D
不符合题意
；
设计试管婴儿主要采用了的核移植技术，没有采用基因工程技术，C不符合题意。
故答案为：A
【分析】审题是关键，题目要求运用基因工程，明确基因工程有外源基因的导入。易混点细胞工程和胚胎工程。
9.C
【考点】基因工程的操作程序（详细）
【解析】解：A、实验中需要对细胞用胸苷（TdR）处理后再进行制片，A错误；
B、胸苷（TdR）很可能是通过阻碍DNA的复制发挥作用的，B错误；
C、由于S期时间为7h，G1+G2+M=15h，故第二次阻断后应该在第一次洗去TdR之后的7h到15h之间，C正确；
D、若改用秋水仙素处理，则细胞会停留在M期，D错误．
故选：C．
【分析】G1期主要进行RNA和蛋白质的生物合成，并且为下阶段S期的DNA合成做准备；S期最主要的特征是DNA的合成；G2期主要为M期做准备，但是还有RNA和蛋白质的合成，不过合成量逐渐减少．细胞周期：连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始到下次分裂完成时为止；包分裂间期和分裂期；分裂间期历时长，占细胞周期的90%﹣﹣95%，则选观察细胞有丝分裂的材料，选分裂期长，占细胞周期比例大的．
10.B
【考点】花药培养
【解析】A.图中①②过程主要利用的生物学原理是细胞增殖，这一过程中细胞增殖的方式是有丝分裂，没有发生基因重组，A不符合题意；
B.植物组织培养时在②过程中因脱分化，组织细胞的分化程度降低，全能性增强，B符合题意；
C.图中③过程为了促进生根，可提高生长素浓度，降低MS培养基的浓度，C不符合题意；
D.过程④炼苗时已经将植物在含蛭石和草炭土的基质上培养，后续移栽到普通土壤即可，D不符合题意。
【分析】1.植物组织培养
2.脱分化：由已分化的细胞,经过诱导,失去其特有的结构和功能而转变为未分化的细胞,重新具有分裂能力而产生愈伤组织的过程。又叫去分化。
3.愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的具有分生能力的薄壁细胞。
11.D
【考点】动物胚胎发育的过程，胚胎分割，胚胎干细胞及其应用
【解析】本题考查胚胎工程相关内容。胚胎干细胞培养时需要使用经处理失去增殖力的饲养层细胞，故A正确；利用基因敲除手段获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，故B正确；胚胎分割后的胚胎或细胞可直接移植给受体，故C正确；卵巢中取出的卵母细胞需经培养成熟后，才可与获能的精子受精获得受精卵，故D错误。
【分析】胚胎分割
①材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。
②实质：胚胎分割可增加动物后代，其实质是动物的无性生殖即克隆。
③分割要求：对囊胚分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
12.B
【考点】动物胚胎发育的过程，胚胎移植，胚胎分割，胚胎的体外培养
【解析】A、囊胚的内细胞团和滋养层细胞出现分化，其差异是转录水平上的差异造成的，A正确；
B、胚胎成纤维细胞可以分泌一些抑制细胞分化的物质，不利于胚胎发育，B错误。
C、胚胎分割技术在同卵多胎层面上存活率偏低，因此数量有限，C正确；
D、冷冻方法可以在降低胚胎代谢的同时保持其活性，D正确。
故答案为：B。
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。
13.B
【考点】植物细胞的全能性及应用，动物体细胞克隆，动物胚胎发育的过程，转基因生物的安全性问题
【解析】A、转基因技术育种克服了传统育种的育种时间长、远缘亲本难以杂交的缺陷，A正确；
B、由于不同种类植物或同种植物不同基因型个体之间遗传性差异，所以细胞全能性的表达程度大不相同，B错误；
C、克隆“多莉”时重组卵细胞最初分裂时虽然复制了DNA，但基因的转录并未开始，C正确；
D、中胚层是由外胚层的细胞增殖分裂形成的，D正确。
故答案为：B。
【分析】由于不同种类植物或同种植物不同基因型个体之间遗传性差异，所以细胞全能性的表达程度大不相同；离体培养中通常把具有类似胚细胞性质、容易调控分化表达全能性的一类细胞称为胚性细胞，在某些特殊原因的作用下，可能出现缺乏成胚性的细胞，但概率较低；某些作物在多次继代培养后，会丧失细胞全能性的表达能力，原因有：①有染色体畸变，细胞核变异或非整倍体产生，且其结果是不可逆的②细胞或组织中激素平衡被打破③细胞对外源生长物质的敏感性发生该改变④由于其他各种原因产生了缺乏成胚性的细胞系。
14.C
【考点】单克隆抗体的制备过程
【解析】A、用体细胞培养的方法在选择性培养基上可以筛除掉其中的一些杂交细胞，如同种细胞的融合体，A正确；
B、杂交瘤细胞的第一次筛选是选择骨髓瘤细胞和浆细胞形成的杂交细胞，第二次及以后的筛选是选择能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故两次及两次以上的抗体检测，有利于更好的得到单克隆细胞，B正确；
C、获得单克隆抗体可将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内或在体外培养，C错误；
D、动物细胞融合过程中可用灭活的病毒作为诱导融合的试剂，D正确。
故答案为：C。
【分析】杂交瘤细胞是由经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合并经过筛选得到的细胞，杂交瘤细胞能产生特异性抗体和无限增殖。
15.C
【考点】生态农业工程
【解析】充分利用环境各部分的不同属性和所涉及农作物及养殖物生存所需要的特定环境，将其有机的结合在一起的做法，属于农业生态工程立体养殖技术。
故答案为：C。
【分析】立体养殖是在传统养殖模式的基础上发展起来的，可以看做多种传统养殖模式的一种高效结合，它充分利用环境的各部分的不同属性和所涉及农作物及养殖物生存所需要的特定环境，将其有机的结合在一起，完整的利用了环境的各个不同的部分，在相同面积的土地上发挥最大效益，如桑基鱼田。
二、综合题
16.（1）澄清度；95%乙醇；较小；抽滤；细菌悬液；灭菌；较小；粘性
（2）抗性基因；全能性表达充分；显微注射；短；脱分化；生长素；根的分生组织；B
【考点】微生物的分离和培养，果胶酶的活性测定，组织培养基的成分及作用，基因工程的操作程序（详细）
【解析】（1）Ⅰ.由于植物细胞壁和植物细胞间果胶的存在时，果汁的澄清度受到一定的影响，因此可以加入果胶酶使果胶降解为可溶性的半乳糖醛酸，提高果汁的澄清度。判断果胶酶的处理效果，可采用三种方法，①看果胶的剩余量，果胶不溶于乙醇，加入95%的乙醇，沉淀量少的即果胶的剩余量少，处理效果好，②进行离心处理，取上清液测OD值，OD值越小，说明降解越充分，果胶酶的处理效果越好，③对不同处理进行抽滤，记录相同体积果汁的通过时间，固形物含量越少，时间越短，处理效果越好。Ⅱ.为筛选不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，需从腐烂残渣中分离菌株，用无菌水配制成细菌悬液，再涂布在LB固体培养基上待筛选。由于目标是筛选不被香精油抑制的细菌，因此还需准备香精油，并将其制作成滤纸片贴在培养基上，香精油需灭菌处理。观察滤纸片周围的抑菌圈，直径越小说明该菌株越不易被香精油抑制，因而成为初步待选的菌株。再进一步接种到含果胶的液体培养基中培养，果胶使植物细胞粘连，若果胶被降解，则液体培养基的粘性下降。（2）Ⅰ.设计重组质粒时，除了要含有可表达的目的基因，还需要有可表达的抗性基因（如抗生素抗性基因），在添加抗生素的培养基上，含重组质粒的宿主细胞能够生长，因而被筛选出来。Ⅱ.转基因实验要求宿主细胞性状优良、遗传稳定性较高、全能性（细胞发育成个体的潜能）较高及易被农杆菌侵染等特点。若植物材料对农杆菌不敏感，可采用显微注射的方法。Ⅲ.利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程，比利用茎段诱导产生愈伤组织获得丛状苗的过程时间更短，因为不需要经历脱分化的过程，而且遗传性状稳定。植物器官的分化需要一定的营养物质及适宜的激素配比，配制丛状苗生根培养基需根据实际情况添加生长素，促进基部细胞形成愈伤组织，并进一步分化形成根的分生组织，最终形成根。比较发芽培养基和生根培养基可知MS培养基的浓度下降，因此可降低培养基的浓度促进生根。故答案为：B。
【分析】（1）果胶酶：果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。
①分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层；提高水果的出汁率
②使果胶水解为半乳糖醛酸，并使果汁变得澄清。
（2）发芽培养基：3000mLMS培养基+含1.5mgBA的溶液+含0.02mgNAA的溶液+30g蔗糖+40g琼脂，再加蒸馏水至4000mL，混合均匀加热至琼脂融化后，通过三角漏斗分装至100mL，三角瓶中每瓶40mL，共100瓶三角瓶，加上封口膜后1kg压力下在灭菌锅内灭菌20分钟。
（3）生根培养基：1000mLMS培养基+含0.38mgNAA的溶液+30g蔗糖+20g琼脂，再加蒸馏水至2000mL，混合均匀加热至琼脂融化后，通过三角漏斗分装至100mL，三角瓶中每瓶40mL，共50瓶三角瓶，加上封口膜后1kg压力下在灭菌锅内灭菌20分钟。
17.（1）果胶酶；细胞破裂，细胞内营养物质外流使乳酸菌快速地获得营养物质；喜好氧的；不耐酸的；稀释；涂布分离；酸碱指示剂；乙醇
（2）过滤灭菌；染色法，渗透吸水或失水；化学合成；两种限制性核酸内切酶；扩增；细胞壁；胚胎发生
【考点】泡菜的制作，基因工程的应用，植物细胞工程的应用
【解析】（1）Ⅰ.用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜时，为抑制某些微生物产生果胶酶，从而使成品泡菜口感较脆，可用热水短时处理。同时，该处理也会使细胞破裂，细胞内营养物质外流使乳酸菌快速地获得营养物质，从而使泡菜发酵时间缩短。Ⅱ.泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，形成无氧环境，会使喜好氧的菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，会使不耐酸的菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，又会抑制乳酸菌。Ⅲ.从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行稀释，再用涂布分离的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。为了便于观察是否产酸，该培养基必须含有酸碱指示剂。Ⅳ.自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。由于醋酸杆菌可以利用乙醇产生醋酸，若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加乙醇。（2）Ⅰ.为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经过滤灭菌处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。可采用染色法、渗透吸水或失水的方法测定该原生质体的活性。Ⅱ.可采用人工合成或PCR的方法获得已知序列的抗病基因。对含目的基因的DNA片段进行处理，为使其两端形成不同的粘性末端，需要选择使用两种限制性核酸内切酶，对质粒也进行相同的处理，为了提高目的基因和质粒重组的成功率，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中扩增，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。Ⅲ.原生质体在培养过程中，只有重新形成细胞壁后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过胚胎发生或器官发生的途径再生植株。
【分析】泡菜制作：①菌种：假丝酵母和乳酸菌；②发酵原理：在无氧条件下，微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵，发酵产物有有机酸和醇类物质等，还有亚硝酸。③亚硝酸盐的测定：亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量。
18.（1）食物网；季相；时间
（2）光合作用和呼吸作用；水圈；分解者的降解
（3）种植业和畜牧业合理优化
【考点】群落的结构特征，生态系统的结构，生态农业工程，生态系统的能量流动，生态系统的物质循环
【解析】（1）生态系统的营养结构包括食物链和食物网，森林群落中所生存的众多生物种群相互之间组成了复杂的食物网，生态系统自我调节能力的大小取决于营养结构的复杂程度。群落的组成和外貌随时间而发生的有规律的变化为群落的时间结构，群落的外貌在不同季节大不相同称为群落的季相，是群落时间结构的一种表现。（2）在森林群落中，植物的光合作用和呼吸作用影响着大气
的含量的变化。
可在大气圈和水圈的界面上通过扩散作用进行交换，来保持相对平衡。通常情况下，没有被消费者利用的有机物中的碳，大部分是在生物死亡后被分解者降解为无机物而重返大气。（3）农业主要包括种植业和畜牧业，在该生态系统的农业生产区，通过采用农业生态工程的种植业和畜牧业合理优化技术，发展立体养殖，调整作物的品种和种植面积，提高了经济效益和生态效益。
【分析】1、群落是指在一定空间内所有生物种群的集合体，它具有一定的结构、一定的种类构成和一定的种间相互关系。2、群落的结构包括群落的垂直结构、水平结构和时间结构。3、生态系统的结构包括：生态系统的组成成分（非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者）和营养结构（食物链和食物网）。4、我国农业生态工程的主要技术：物质的良性循环技术、洁净可再生的新能源开发技术、种植业和畜牧业合理优化技术。
19.（1）腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多；涂布分离（或划线分离）；水果组织软化疏松及细胞受损；95%乙醇；提高果胶酶的稳定性；固定化的方法；固定化所用的介质
（2）单克隆抗体；基因文库；B；变异；高浓度致病真菌；花粉离体；胚的离体培养
【考点】果胶酶的活性测定，基因工程的应用，固定化酶及其应用
【解析】解：（1）①腐烂的水果通常细胞壁被分解较多，所以含有能产生果胶酶的微生物较多；②获取单菌落的方式有划线分离法和涂布分离法两种，本题中两种方式均可；③果胶酶的作用是水解果胶，果胶位于植物细胞壁中，故水解果胶会使得水果组织软化疏松及使细胞受损；果胶不溶于酒精，故提取回收果胶需要使用95%乙醇，使果胶形成絮状物回收；④固定化的果胶酶在处理含果胶的污水时，可提高果胶酶的稳定性并可连续处理；在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的因素有固定化的方法和固定化所用的介质。（2）①抗病蛋白可作抗原，则特异性探针应为抗体，则需要通过单克隆抗体技术获得特异性探针；基因文库包含了某个DNA分子的所有基因，故是将基因文库中的所有基因进行表达，再利用探针获得目的基因；②质粒载体只能检测目的基因是否转入受体细胞，A不符合题意；转录产物为RNA，可以通过DNA-RNA分子杂交检测抗病基因是否表达，B不符合题意；检测抗性基因只能检测抗性基因是否导入受体细胞，无法检测该基因是否表达，C不符合题意；检测病原微生物是个体水平检测目的基因是否表达的方式，D不符合题意；故正确的选项选择B；③抗致病真菌基因是原本植物细胞不含的基因，则需要利用植物细胞在培养过程中的变异来筛选抗致病真菌能力强的细胞；由于需要筛选抗致病真菌能力强的细胞，故需要在培养基中加入高浓度致病真菌；快速稳定遗传的抗病植株需要通过单倍体培养获得，故需要利用花粉离体培养建立细胞系用于筛选；④要利用胚的发育获得植株，可利用胚细胞的全能性，采用胚的离体培养获得植株。
【分析】在变异品种的筛选中，要求获得的是抗致病真菌能力强的细胞，则只加入致病真菌只能筛选具有抗致病真菌能力的细胞，需要筛选抗致病真菌能力强的细胞，则需要添加高浓度的致病真菌，这对考查学生对筛选培养基的理解有一定的要求。
20.（1）C；划线分离法（或涂布分离法）；扩大培养；果胶酶和果胶甲酯酶；淀粉酶使淀粉分解；固定化酶的量、反应液温度；控制反应器液体流最（或体积）
（2）黏性末端；磷酸二酯键；转化；使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态；消毒；脱分化；水稻的基因型、愈伤组织继代的次数
【考点】加酶洗衣粉的洗涤效果及其影响因素，植物组织培养的过程，固定化酶及其应用
【解析】（1）①沸水漂洗，因高温会破坏蛋白质的空间结构，进而使有关酶失活，C不符合题意，A、C、D不符合题意。???
②为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用划线分离法（或涂布分离法）进行单菌落分离，然后将其扩大培养，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。???
③蛋白酶和纤维素酶可分别催化蛋白质和纤维素分解。在将以上提取过果胶和淀粉后的剩渣制成的汁液，经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，仍存在浑浊和沉淀问题，说明该汁液中仍有少量的果胶和淀粉，可添加果胶酶和果胶甲酯酶使果胶彻底分解成半乳糖醛酸，再添加淀粉酶使淀粉分解，以解决汁液浑浊和沉淀问题。??
④在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的固定化酶的量、反应液温度、反应液pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过控制反应器液体流最（或体积）来调节。
(2)
①用限制性核酸内切酶EcoR
I酶切含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121，可在切口处形成黏性末端。用DNA连接酶连接含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121，可在两个片段相邻处形成磷酸二酯键，获得重组质粒。
②取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成转化实验。在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，其目的是：使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态。
③在进行植物组织培养时，取田间不同品种水稻的幼胚，先进行消毒，以清除其表面附着的微生物；然后接种到培养基中培养，幼胚发生脱分化形成愈伤组织，并进行继代培养。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及水稻的基因型、愈伤组织继代的次数等。
【分析】（1）酶的特性：专一性，高效性，作用条件较温和（最适温度，最适pH），高温使酶失活。低温降低酶的活性，在适宜温度下酶活性可以恢复。
（
2
）基因工程的基本操作程序:
第一步：目的基因的获取
第二步：基因表达载体的构建
第三步：将目的基因导入受体细胞常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。
将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，
最常用的原核细胞是大肠杆菌
，
其转化方法是：先用Ca2+
处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
第四步：目的基因的检测和表达
（
3
）植物组织培养的过程：离体的植物器官、组织或细胞→愈伤组织→试管苗→植物体
21.（1）物质的良性循环；秸秆→家畜→粪便→农田；洁净可再生的新能源开发
（2）合理优化；水土流失；生物多样性；种间关系
【考点】生态农业工程
【解析】解：（1）根据对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图可知，贯穿全过程的核心技术是物质的良性循环技术．其中“过腹还田”的具体途径是秸秆→家畜→粪便→农田．将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的洁净可再生的新能源开发技术．（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的合理优化技术提高经济和社会效益．“退耕还林”后，林地的增加可以减少水土流失，更有利于受损生态系统的恢复．使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的生物多样性减少，因此利用生物的种间关系进行生物防治是今后的发展方向．
故答案为：（1）物质的良性循环?????????
秸秆→家畜→粪便→农田???????
洁净可再生的新能源开发（2）合理优化????????
水土流失???????
生物多样性????
种间关系
【分析】生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益．它也是农、林、牧、副、渔各业综合起来的大农业，又是农业生产、加工、销售综合起来，适应市场经济发展的现代农业．生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理．
22.（1）RNA聚合酶；磷酸二酯；终止密码子
（2）黑色粗毛；白色细毛；
（3）A+A+B+B﹣；
【考点】基因的分离规律的实质及应用，基因的自由组合规律的实质及应用，基因工程的操作程序（详细）
【解析】解：（1）基因转录时是在RNA聚合酶催化下将游离的核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接成单链RNA分子，翻译结束是在核糖体移动到终止密码子的位置．（2）根据表格信息可知A+控制的是黑色性状，可知B+控制的是细毛性状．绵羊甲的基因型为A+A﹣B﹣B﹣
，
绵羊乙的基因型为A﹣A﹣B+B﹣
，
普通绵羊的基因型为A﹣A﹣B﹣B﹣
，
为了得到基因型为A+_B+_的黑色细毛绵羊，因为绵羊甲和乙都是雄性，所以应选择绵羊甲或绵羊乙与普通绵羊杂交，再选择出F1中的黑色粗毛绵羊（A+A﹣B﹣B﹣）和白色细毛绵羊（A﹣A﹣B+B﹣）杂交获得基因型为A+A﹣B+B﹣的黑色细毛绵羊，如图所示：．3）绵羊甲和绵羊乙都是分别只有一个A+或B+基因，根据图中信息可知基因的表达量和A+或B+基因的数量有关，所以绵羊丙的基因型为A+A+B+B﹣），绵羊丁的基因型为A+A+B+B+
，
所以理论上绵羊丁在F3中所占的比例是
×
=
．
故答案为：（1）RNA聚合酶?
磷酸二酯?
终止密码子（2）黑色粗毛?
白色细毛
（3）A+A+B+B﹣
【分析】根据表格信息可知A+控制的是黑色性状，可知B+控制的是细毛性状．绵羊甲的基因型为A+A﹣B﹣B﹣
，
绵羊乙的基因型为A﹣A﹣B+B﹣
，
普通绵羊的基因型为A﹣A﹣B﹣B﹣
，
为了得到基因型为A+_B+_的黑色细毛绵羊，因为绵羊甲和乙都是雄性，所以应选择绵羊甲或绵羊乙与普通绵羊杂交．由于A、B位于非同源染色体上，符合自由组合定律．本题综合考查了基因工程和自由组合定律等相关内容，意在考查学生的理解和应用能力，试题难度中等．
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精品试卷·第
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专题23
现代生物科技专题
一、单选题
1.下列关于病毒的叙述，错误的是（??
）
A.?有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合
B.?适当增加机体内参与免疫的细胞数量与活性，可提高对新型冠状病毒的抵御能力
C.?在某人的分泌物中检测到新型冠状病毒，推测该病毒的增殖不依赖于宿主细胞
D.?用高温高压处理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白质发生了热变性
2.下列关于基因工程的叙述，正确的是（??
）
A.?若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B.?抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关
C.?抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA
D.?已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置
3.将某种海鱼的抗冻基因导入西红柿细胞中，培育成耐低温的西红柿新品种，这种导入外源基因的方法属于（??
）
A.?杂交育种????????????????????????B.?转基因技术????????????????????????C.?单倍体育种????????????????????????D.?多倍体育种
4.2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR--Cas9基因编辑技术，成功用基因敲除猴的体细胞通过克隆技术培育了
5只克隆疾病猴。下列叙述正确的是（???
）
A.???
为了获得更多的猴卵（母）细胞，要对供核的猴经超数排卵处理
B.?体外培养受精卵时，培养液中通常需加入动物血清、蔗糖等成分
C.?胚胎移入前要对受体猴注射免疫抑制剂，以减弱或消除免疫排斥反应
D.?克隆猴被用于人类疾病的治疗和药物检测可以减少个体差异对实验的干扰
5.下列关于动物细胞培养及融合技术的叙述，正确的是
（???
）
A.?细胞融合即细胞杂交，指由
2
个或多个细胞融合成
1
个细胞的现象
B.?一个脾细胞和一个骨髓瘤细胞融合而成的杂交细胞称为杂交瘤细胞
C.?滋养层细胞可对细胞克隆起到支持生长的作用
D.?“多莉”克隆过程中，营养限制性培养的目的是使细胞周期同步化，最终有利于重组细胞中
核基因表达的分子开关的启动
6.愈伤组织细胞通过液体悬浮培养可以分散形成胚性细胞，下列叙述正确的是（????
）
A.?液体悬浮培养过程中，需要营造封闭无氧环境
B.?胚性细胞细胞质丰富、液泡大、细胞核大，是一种相对没有分化的薄壁细胞
C.?拟南芥和小麦的胚性细胞再生成植株，多次继代培养后，都能保持细胞全能性
D.?胚性细胞经培养基中成分的诱导，可依次经历细胞团、球形胚、心形胚和胚状体等过程
7.下列有关生态系统的说法，错误的是（???
）
A.?可持续发展追求的是自然、经济、社会的持久和协调发展
B.?封山育林、治理荒漠体现了人类活动可以改变群落演替的速率和方向
C.?生态缸中生产者的种类、数量比例越大，生态缸保持稳定的时间就越长
D.?“绿水青山就是金山银山”的理念反映了生态系统中生物多样性的间接价值大于直接价值
8.从目前来看，下列哪一生物科技成果运用到了基因工程技术(???
)
A.?利用酵母菌生产人的胰岛素????????????????????????????????B.?单克隆抗体技术
C.?设计试管婴儿技术??????????????????????????????????????????????D.?微型繁殖和作物脱毒
9.如图表示用胸苷（TdR）双阻断法使细胞周期同步化，其中A表示正常的细胞周期，G1
，
S，G2
，
M期依次分别为10h，7h，3.5h，1.5h；B表示经第一次阻断，细胞都停留在S期；C表示洗去TdR恢复正常的细胞周期；D表示经第二次阻断，细胞均停留在G1/S交界处．下列说法正确的是（???
）
A.?实验中需要对细胞解离，漂洗，染色，制片，以便于显微镜下观察
B.?胸苷（TdR）很可能是通过阻碍核糖体与mRNA结合发挥作用的
C.?第二次阻断应该在第一次洗去TdR之后的7h到15h之间
D.?若改用秋水仙素处理，则细胞会停留在G2/M交界处
10.如图是某二倍体植物通过花药进行单倍体育种的过程示意图，下列叙述正确的是（???
）
A.?图中①②过程主要利用的生物学原理是基因重组和细胞增殖
B.?植物组织培养时在②过程中组织细胞的全能性增强
C.?图中③过程为了促进生根，可提高生长素浓度、增加MS培养基的浓度
D.?过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蛭石和草炭土的基质上
11.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（????
）
A.?胚胎干细胞培养时需要使用经处理失去增殖力的饲养层细胞
B.?利用基因敲除手段获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应
C.?胚胎分割后的胚胎或细胞可直接移植给受体
D.?成熟的精子获能后可与卵巢中取出的卵细胞受精获得受精卵
12.下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是（??
）
A.?囊胚的内细胞团和滋养层细胞的差异是转录水平上的差异引起的
B.?胚胎体外培养时，培养液中要加入胚胎成纤维细胞以促进其细胞生长
C.?采用胚胎分割技术产生同卵多胎的数量是有限的
D.?对试管动物中暂不移植的胚胎可使用冷冻方法保存
13.现代生物技术广泛的应用于各个领域，对人类的生活产生很大的影响，下列关于现代生物技术的叙述，错误的是（????
）
A.?转基因技术能解决传统育种的远缘亲本难以杂交的问题
B.?由于植物细胞具有全能性，不同种类的植物和同一植物的不同基因型个体的全能性的表达程度相同
C.?克隆多莉时，形成的重组卵细胞进行的第一次分裂有DNA的复制，但是转录并未开始
D.?原肠胚的中胚层是外胚层的部分细胞分裂后进入内、外胚层之间形成的
14.杂交瘤技术解决了抗血清的异质性问题，下列叙述错误的是（??
）
A.?用体细胞培养的方法可以筛除掉其中的一些杂交细胞
B.?两次及两次以上的抗体检测，有利于更好的得到单克隆细胞
C.?获得单克隆抗体必须将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内
D.?可以用仙台病毒介导，将免疫过的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合
15.充分利用环境各部分的不同属性和所涉及农作物及养殖物生存所需要的特定环境，将其有机的结合在一起的做法，属于农业生态工程的（???
）
A.?物质的良性循环技术???????????????????????????????????????????B.?洁净可再生的新能源开发技术
C.?立体养殖技术?????????????????????????????????????????????????????D.?种植业与畜牧业合理优化技术
二、综合题
16.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与柑橘加工与再利用有关的问题：
Ⅰ.柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的________。为确定果胶酶的处理效果，对分别加入不同浓度果胶酶的果汁样品，可采用3种方法进行实验：①取各处理样品，添加相同体积的________，沉淀生成量较少的处理效果好。②对不同处理进行离心，用比色计对上清液进行测定，OD值________的处理效果好。③对不同处理进行________，记录相同体积果汁通过的时间，时间较短的处理效果好。
Ⅱ.加工后的柑橘残渣含有抑菌作用的香精油及较多的果胶等。为筛选生长不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，从腐烂残渣中分离得到若干菌株，分别用无菌水配制成________，再均匀涂布在LB固体培养基上。配制适宜浓度的香精油，浸润大小适宜并已________的圆形滤纸片若干，再贴在上述培养基上。培养一段时间后，测量滤纸片周围抑制菌体生长形成的透明圈的直径大小。从直径________的菌株中取菌接种到含有适量果胶的液体培养基试管中培养，若有果胶酶产生，摇晃试管并观察，与接种前相比，液体培养基的________下降。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
Ⅰ.天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的________。
Ⅱ.结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、________及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用________的转基因方法。
Ⅲ.利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间________，且不经历________过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。
Ⅳ.与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加________，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成________，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如________（A.提高蔗糖浓度B.降低培养基浓度C.提高大量元素浓度D.不添加琼脂）。
17.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与泡菜制作有关的问题：
Ⅰ.用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生________，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是________。
Ⅱ.泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使________菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使________菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
Ⅲ.从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行________，再用________的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有________，以便于观察是否产酸。
Ⅳ.自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加________。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
Ⅰ.为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经________处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法有________（答出2点即可）。
Ⅱ.若要获得已知序列的抗病基因，可采用________或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用________，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的粘性末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中________，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。
Ⅲ.原生质体在培养过程中，只有重新形成________后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过________或器官发生的途径再生植株。
18.某沿海地区的生态系统以森林群落为主体，对维持当地生态平衡有着重要作用。回答下列问题：
（1）从生态系统的营养结构分析，森林群落中所生存的众多生物种群相互之间组成了复杂的________，因而该生态系统具有较强的自我调节能力。该森林群落在不同季节存在明显的外貌变化，即群落的________明显，这也是群落________结构的一种表现。
（2）在森林群落中，大气
的含量通常存在昼夜变化和季节变化，这与植物的________直接相关。
可在大气圈和________的界面上进行交换而保持相对平衡。通常情况下，没有被消费者利用的有机物中的碳，大部分是在生物死亡后________通过作用而重返大气。
（3）在该生态系统的农业生产区，通过采用农业生态工程的________技术，发展立体养殖，调整作物的品种和种植面积，提高了经济效益和生态效益。
19.回答下列小题：
（1）回答与果胶和果胶酶有关的问题：
①通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为________。
②为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行________。
③在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使________。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入________。使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
④常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有________和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有________和________。
（2）回答与利用生物技术培育抗病品种有关的问题：
①通过抗病性强的植株获取抗病目的基因有多种方法。现已获得纯度高的抗病蛋白（可作为抗原），可通过________技术获得特异性探针，并将________中所有基因进行表达，然后利用该探针，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得与之对应的目的基因。
②将上述抗病基因通过转基因的方法导入植物的分生组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间用分子水平方法判断抗病基因是否表达，应检测________（A.质粒载体?
B.转录产物?
C.抗性基因?
D.病原微生物）。
③植物细胞在培养过程中往往会发生________，可利用这一特性筛选抗致病真菌能力强的细胞。筛选时在培养基中加入________，并将存活的细胞进一步培养至再生植株。若利用________培养建立的细胞系用于筛选，则可快速获得稳定遗传的抗病植株。
④用抗病品种与高产品种进行杂交育种过程中，有时会遇到因胚发育中止而得不到可育种子的情况。若要使该胚继续发育获得植株，可采用的方法是________。
20.回答下列（1）、（2）小题：
（1）回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：
某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。
①果胶提取工艺研究结果表明，原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率（提取得到的果胶占原料质量的百分率）显著高于常温水漂洗的果胶得率，最主要原因是沸水漂洗________
(A．有助于清洗杂质和去除可溶性糖?
B．使植物组织变得松散?
C．使有关酶失活?
D．有利细胞破裂和原料粉碎制浆)。
②在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用________，进行单菌落分离，然后将其________，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。
③在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题,可添加________使果胶彻底分解成半乳糖醛酸，再添加________，以解决汁液浑浊和沉淀问题。
④在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的________（答出2点即可）、反应液pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过________来调节。
（2）回答与基因工程和植物克隆有关的问题。
①将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体pBI121均用限制性核酸内切酶EcoR
I酶切，在切口处形成________。选取含抗虫基因的DNA片段与切割后的pBI121用DNA连接酶连接。在两个片段相邻处形成________，获得重组质粒。
②已知用CaCl2处理细菌，会改变其某些生理状态。取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作，使重组质粒进入农杆菌，完成________实验。在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，其目的是________，从而表达卡那霉素抗性基因，并大量增殖。
③取田间不同品种水稻的幼胚，先进行________，然后接种到培养基中培养，幼胚发生________形成愈伤组织，并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织，再培养愈伤组织，以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及________（答
2点即可）。
21.（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术．其中“过腹还田”的具体途径是________．将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术．
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益．“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复．使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向．
22.若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和乙各1头，具体见下表．
绵羊
性别
转入的基因
基因整合位置
表现型
普通绵羊
♀、♂
﹣
﹣
白色粗毛
绵羊甲
♂
1个A+
1号常染色体
黑色粗毛
绵羊乙
♂
1个B+
5号常染色体
白色细毛
注：普通绵羊不含A+
，
B+基因，基因型用A﹣A﹣B﹣B﹣表示．
请回答：
（1）A+基因转录时，在________的催化下，将游离核苷酸通过________键聚合成RNA分子．翻译时，核糖体移动到mRNA的________，多肽合成结束．
（2）为选育黑色细毛的绵羊，以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得F1
，
选择F1中表现型为________的绵羊和________的绵羊杂交获得F2
．
用遗传图解表示由F1杂交获得F2的过程．________
（3）为获得稳定遗传的黑色细毛绵羊，从F2中选出合适的1对个体杂交得到F3
，
再从F3中选出2头黑色细毛绵羊（丙、丁）并分析A+和B+基因的表达产物，结果如图所示．不考虑其他基因对A+和B+基因表达产物量的影响，推测绵羊丙的基因型是________，理论上绵羊丁在F3中占的比例是________.
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精品试卷·第
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