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专题2
:微生物的培养与应用
课题1
微生物的实验室培养
微生物包括五类
病毒
细菌
放线菌
真菌
原生动物
特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.
原核生物界
原生生物界
真菌界
病毒界
微生物基础知识
了解有关微生物及培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。
知识目标:
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。
无菌技术的操作。
课题重点和难点:
技能目标:
课时安排:3课时
1课时:基础知识;2无菌技术;3课时:大肠杆菌的纯化
基础知识:
一、培养基
人们按照微生物对营养物质的不同需
求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
划分标准
培养基种类
特点
用途
物理性质
化学成分
天然培养基
合成培养基
用途
鉴别培养基
不加凝固剂
工业生产
工业生产
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
划分标准
培养基种类
特点
用途
物理性质
化学成分
天然培养基
合成培养基
用途
鉴别培养基
培养基的类型和用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
固体培养基
液体培养基
半固体培养基
成分区别:琼脂
固体培养基:菌落
半固体培养基:
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
液体培养基:
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
选择培养基
加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基:
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物
根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。
合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低
缺点:
缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。
合成培养基:
天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。
优点:营养成分丰富,培养效果好
缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;
天然培养基:
二、菌
落
⑴.定义:
单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
⑵.特征:
大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。
⑶.功能:
每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。
几种菌落及其形态
三、培养基的成分
①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐
②其他物质pH、特殊营养物质
例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
:凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。
①无机碳源:CO2;NaHCO3等
②有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等
①构成细胞物质和一些代谢产物
②异养微生物的能源
⑴.概念
⑵.来源:
⑶.作用:
1.微生物的碳源
①无机氮源:N2、NH4+、NO3-、NH3等。
②有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等
凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。
2.微生物的氮源
⑴.概念:
⑵.来源:
⑶.作用:
3.生长因子
⑶.常见的生长因子:
⑴.概念:
⑵.作用:
微生物生长不可缺少的微量有机物。
酶和核酸的组成成分。
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
练习
1.不能作为异养微生物碳源的是(
)
A.牛肉膏 B.含碳有机物
C.石油 D.含碳无机物
D
2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是(
)
A.碳源 B.氮源
C.无机盐 D.生长因子
A
3.下列关于生长因子的说法中,不正确的一项是
(
)
A.是微生物生长不可缺少的微量有机物
B.是微生物生长不可缺少的微量矿质元素
C.主要包括维生素、氨基酸和碱基等
D.一般是酶和核酸的组成成分
B
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在碳源为纤维素的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素,可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( )
①大肠杆菌 ②霉菌
③放线菌 ④纤维素分解菌
A.④② B.①② C.①③ D.③④
A
编号
成分
含量
①
粉状硫
10g
②
(NH4)2SO4
0.4g
③
K2HPO4
4.0g
④
MgSO4
9.25g
⑤
FeSO4
0.5g
⑥
CaCl2
0.5g
⑦
H2O
100mL
例.右表是某微生物培养基成分,请据此回答:
(1)右表培养基可培养的微生物类型是
。
(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。
如不想浪费此培养基,可再加入
.
自养型微生物
含碳有机物
【典例解析】
(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养
。
(4)表中营养成分共有
类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是
。
(6)右表中各成分重量确定的原则是
。
(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是
。
固氮微生物
3
调整pH
依微生物的生长需要确定
琼脂(或凝固剂)