2020-2021学年高二生物人教版选修一单元测试AB卷
第二章
微生物的培养与应用A卷
1.下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是(
)
A.应根据微生物代谢类型选择合适的培养基并控制好培养基的pH
B.实验操作时应避免已灭菌的材料用具与周围物品接触
C.待培养基冷却至室温后，在超净工作台内酒精灯火焰附近倒平板
D.使用过的培养基应进行灭菌，不应直接丢弃
2.下列有关微生物培养的叙述，错误的是(
)
A.在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌
B.分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
C.测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数
D.酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有定的抑制作用
3.漆酶属于木质素降解酶,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图表示分离、纯化和保存产漆酶菌株的过程,相关叙述不正确的是(
)
A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品
B.筛选培养基中应以漆酶的底物为唯一碳源,可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C.在涂布的平板上长出的菌落,需要通过划线进一步纯化
D.斜面培养基中含有营养物,可临时保存菌株
4.下列有关微生物实验室培养的叙述，不正确的是(
)
A.在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊
B.灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术
C.统计样品中活菌数量时，接种方法应采用平板划线法
D.用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置
5.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列选项错误的是(
)
A.过程①②合称为稀释涂布平板法
B.甲乙试管中的液体均为选择培养基
C.Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法
D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
6.如图是研究人员从土壤中筛选高效分解尿素的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是(
)
A.在配制步骤②、③的培养基时，应注意防止杂菌污染
B.步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，获得单细胞菌落
C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④应挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
7.分离土壤中尿素分解菌的实验操作中，无法分离得到尿素分解菌的原因最可能是(
)
A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层
B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
C.使用牛肉膏蛋白胨培养基并在其中添加了尿素
D.未对土壤样液进行稀释就进行涂布培养
8.用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照，对于对照组的要求不包括哪项(
)
A.对照组培养基也严格灭菌，且不接触任何微生物
B.对照组和实验组培养基放在相同的条件下培养
C.所用培养基成分及pH完全与实验组一致
D.培养基的量的大小与实验组必须完全相同
9.无菌操作是植物组织培养获得成功的关键，下列说法正确的是(
)
①植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差，对无菌操作的要求非常严格
②培养基灭菌时采用的灭菌方法可以是高压蒸汽灭菌
③对培养材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面还要考虑植物材料的耐受能力
④可用高压蒸汽灭菌锅对培养材料进行灭菌
⑤如果不小心引起污染，可能会造成培养工作前功尽弃
A.①②③④
B.①②③
C.①②③⑤
D.①②③④⑤
10.在自然环境中，多种微生物常常混杂在一起，要对其中的某种微生物进行研究，就必须获得其纯培养物。下列关于微生物纯培养的叙述，不正确的是(
)
A.纯培养微生物最常用的培养基之一是琼脂固体培养基
B.分离土壤中的乳酸杆菌时，要向培养基中加入维生素
C.平板划线法和稀释涂布平板法是微生物培养时常用的两种分离方法
D.平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布
11.我国规定1L自来水中大肠杆菌数不得超过3个。某兴趣小组利用滤膜法（如图所示）对校内自来水中大肠杆菌数量进行检测。有关叙述错误的是(
)
A.取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样
B.滤膜的孔径应小于大肠杆菌，过滤水样应足量
C.伊红美蓝培养基属于选择培养基，培养基中含有琼脂
D.进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养
12.做微生物的分离与培养实验时，下列叙述正确的是(
)
A.所有培养基都必须含有碳源和氮源
B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.进行系列稀释操作时，用移液管吸取相应的菌液注入试管后，还要用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀
13.筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，错误的是(
)
菌种
菌落直径：C（mm）
透明圈直径：H（mm）
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
14.养殖池中存在的亚硝酸盐能被硝化细菌吸收利用,图一表示研究人员从养殖池沉积物中分离得到硝化细菌的流程,图二是选择培养时使用的培养基配方。请回答:
(1)图一中选择培养(步骤二)的作用是__________________,在培养过程对培养瓶进行振荡的目的是__________________,分离纯化(步骤三)时,常采用的接种方法是_____________。
(2)制备培养液时,应先调节pH再进行灭菌,原因__________________。制备用于分离纯化(步骤三)的培养基时,图二所示的配方中还应添加适量______。
(3)临时保藏菌种时,可将菌种接种到______上,在合适的温度下培养,待菌落长成后,将试管放入温度为____的冰箱中保藏。
(4)研究发现硝化细菌吸收利用亚硝酸盐的效果与环境中亚硝酸盐含量有关,若要研究两者的关系,请简要写出实验思路____________________________________。
15.有报道称单位面积智能手机屏幕的细菌数比马桶按钮上的多。如图是某校甲、乙两个生物兴趣小组展示的实验调查结果。回答下列相关问题：
（1）在制备该培养基的过程中，除了添加微生物所需的基本营养物质外，培养基还需满足微生物生长对___________等的要求。由图中2组培养结果可知，该实验接种微生物的方法为___________。
（2）通过观察菌落的___________（答两点）等特征，可对手机屏幕和马桶按钮上存在的微生物进行初步鉴定。但若要进一步确定是否存在大肠杆菌，可以加入___________指示剂进行鉴定，若培养基中出现___________菌落，则说明存在大肠杆菌。
（3）按图示面积取样，小组成员测定某手机屏幕上的细菌数量，将10
mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1
mL稀释倍数为102的培养液接种到四个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42、29，则该手机屏幕上的细菌数为___________个/厘米2，为了使该实验统计的数据更准确，应另外设置对照实验，实验设置为______________________。
答案以及解析
1.答案：C
解析：培养基需符合微生物的生长特点，故应根据微生物代谢类型选择合适的培养基并控制好培养基的pH，A正确；实验操作时应避免已灭菌的材料用具与周围物品接触，以防杂菌污染，B正确；待培养基冷却至50℃左右时，在超净工作台酒精灯火焰附近倒平板，冷却到室温时培养基已经凝固，C错误；使用过的培养基应进行灭菌处理后再丢弃，以防杂菌污染环境，D正确。
2.答案：A
解析：本题考查微生物的培养。对微生物进行培养前，需要对培养基和所有用具进行灭菌或消毒，A错误；选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，B正确；测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法计数，C正确；酒精具有杀菌和抑菌作用酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物的生长有一定的抑制作用，D正确。
3.答案：A
解析：生活污水中含木质素较少，不适于分离产漆酶菌株，A项错误；筛选培养基中应以漆酶的底物为唯一碳源，不同种微生物形成的菌落有不同的特征，可根据菌落特征挑出产漆酶的菌落，B项正确；在涂布的平板上长出的菌落，可能由连在一起的多种菌体形成，需要通过划线培养进一步纯化，C项正确；斜面培养基（含营养物）可用于菌种的临时保存，D项正确。
4.答案：C
解析：琼脂属于多糖，在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，A正确；灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，静止的空气常用紫外线照射等无菌技术进行灭菌，B正确；统计样品中活菌数量时，接种方法应采用稀释涂布平板法，C错误；用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝结成的水珠滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置，D正确。
5.答案：B
解析：A、根据I号培养基上菌落分布均匀，可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；
B、甲乙试管中的液体是用于样品稀释，应为无菌水，B错误；
C、由Ⅱ号培养基上上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法，C正确；
D、淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。
6.答案：C
解析：制备的培养基通常要用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，以防杂菌污染，A正确；步骤③采用稀释涂布平板法纯化分解尿素的细菌，可以将液体培养基中的细菌分散，获得单细胞菌落，B正确；筛选高效分解尿素的细菌的培养基只能以尿素为唯一氮源，牛肉膏蛋白胨培养基中本身含有氮源，不适合用来筛选分解尿素的细菌，C错误；为了筛选到能高效分解尿素的细菌，需挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。
7.答案：C
解析：该实验取样时一般取距离地表约3~8cm的土壤，而土壤的表层中微生物数量也很大，该操作可能获得尿素分解菌，A项不符合题意；涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌，这会导致杂菌污染，但一般来说在以尿素为唯一氮源的培养基上只有能分解尿素的微生物才能生长，故该操作仍可获得尿素分解菌，B项不符合题意；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基并在其中添加尿素作为氮源，否则大量的微生物都能生长，该培养基就无法起到选择的作用，即无法分离得到尿素分解菌，C项符合题意；未对土壤样液进行稀释，土壤样液中的尿素分解菌浓度大，可以分离得到尿素分解菌，D项不符合题意。
8.答案：D
解析：设置对照组时，对照组培养基也应严格灭菌，且不接触任何微生物，和实验组培养基放在相同的条件下培养，所用培养基成分及pH与实验组完全一致，A、B、C正确；对照组培养基的量的大小与实验组可不相同，D错误。
9.答案：C
解析：不同的材料或对象，所采用的灭菌或消毒方法不同，培养材料不能采用高压蒸汽灭菌，否则会导致培养材料死亡，④错误，故选C。
10.答案：D
解析：实验室中纯培养微生物最常用的培养基之一是琼脂固体培养基，A正确；在培养乳酸杆菌时，培养基中需要添加维生素，B正确；微生物培养时常用的两种分离方法是平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；釆用平板划线法时，在后几次划线的末端可得到单菌落，菌落（微生物）并非均匀分布，D错误。
11.答案：C
解析：为避免杂菌的污染，在取样时水龙头应用火焰灼烧杀灭杂菌，打开水龙头一段时间后再取样是避免温度过高杀死目的菌；实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，故滤膜的孔径应小于大肠杆菌；伊红美蓝培养基属于鉴别培养基，培养基中含有琼脂；为保证实验结果的科学性与准确性，实验的同时应设置对照，即进行细菌培养的同时需进行未接种培养基的培养。
12.答案：D
解析：培养微生物的培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐等，但是培养某些特殊微生物的时候可以缺少部分成分，如能利用空气中CO2的自养生物，培养基中不需要添加碳源；能进行固氮作用的微生物，培养基中不需要添加氮源，A错误。倒平板过程中，不能直接打开培养皿的皿盖并放到一边，应该用左手将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，B错误。接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌后，需冷却后才能快速挑选菌落，以免接种环温度过高，杀死细菌，C错误。进行系列稀释操作时，用移液管吸取相应的菌液注入试管后，还要用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀，D正确。
13.答案：C
解析：本题主要考查微生物的培养与筛选。本实验所用培养基是以淀粉为唯一碳源的选择性培养基，该培养基也应含有细菌生长所需的其他营养物质，如水、无机盐、氮源等，A正确；筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布，否则浓度过高，无法获取单个菌落，B正确；由题图可知，细菌Ⅰ、Ⅱ均出现以菌落为中心的透明圈，即两种细菌均可将淀粉酶分泌至细胞外将淀粉分解，C错误；H/C值不同是因细菌分解淀粉能力不同，H/C值越大，细菌分解淀粉能力越强，D正确。
14.答案：（1）筛选出硝化细菌，并增加硝化细菌的浓度；使细胞与培养液充分接触以利于吸收营养物质，增加溶解氧；平板划线法或稀释涂布平板法
（2）防止其他微生物的污染；琼脂
（3）固体斜面培养基4℃
（4）将等量的硝化细菌分别接种到等体积的不同浓度梯度的亚硝酸盐的培养液中，在相同的条件下培养相同的时间后，检测并比较亚硝酸盐的剩余量
解析：(1)进行选择培养的目的是增加目的菌的数量。振荡的目的是增加溶氧量、使菌体与营养物质充分接触。分离纯化常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
(2)先调pH后灭菌的目的是防止杂菌污染分离纯化目的菌需用固体培养基,因此培养基中需添加适量的琼脂。
(3)临时保存菌种,应将菌种接种在固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,待菌落长出后,将试管放在4℃的冰箱中保存。
15.答案：（1）pH、特殊营养物质、氧气；稀释涂布平板法
（2）形状、大小、隆起程度、颜色（两点即可）；伊红美蓝；黑色
（3）1.6×104；取空白培养基涂布0.1
mL无菌水，在相同环境下培养
解析：本题考查微生物的培养和计数，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力。
（1）在制备该培养基的过程中，除了添加微生物所需的基本营养物质外，培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气等的要求；由图中2组培养结果可知，该实验接种微生物的方法为稀释涂布平板法。
（2）通过观察菌落的形态、大小、隆起程度、颜色等特征，可对手机屏幕和马桶按钮上存在的微生物进行初步鉴定。若要进一步确定是否存在大肠杆菌，可以加入伊红美蓝指示剂进行鉴定，若培养基中出现黑色菌落，则说明存在大肠杆菌。
（3）该手机屏幕上的细菌数为（38+40+42）÷3÷0.1×102×10÷（5×5）=1.6×104（个/厘米2）。为了使该实验统计的数据更准确，应设置对照组，即取空白培养基涂布0.1
mL无菌水，置于与实验组相同的条件下进行培养。2020-2021学年高二生物人教版选修一单元测试AB卷
第二章
微生物的培养与应用B卷
1.地衣芽孢杆菌具有调节动物肠道微生态平衡，增加动物机体抗病力的功能。仔兔饲喂地衣芽孢杆菌20-40天后，其免疫器官生长发育迅速，血中T淋巴细胞值较对照组高。下列叙述不正确的是(
)
A.地衣芽孢杆菌若长期保存需置于4℃冷藏
B.可用液体培养基对地衣芽孢杆菌扩大培养
C.使用后的培养基在丢弃前要经过灭菌处理
D.地衣芽孢杆菌改变了仔兔肠道菌群的结构
2.培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是(
)
A.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质及琼脂
B.不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
C.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的菌落数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落
3.利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而可以减少对石油资源的依赖，如图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析，错误的是(
)
A.微生物A和微生物B所利用的碳源相同
B.图中过程②常用的微生物B是酵母菌
C.要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样
D.微生物A的同化作用类型为异养型
4.为了满足生产与生活的需要，我们可以利用微生物的特殊要求，按照人们的意愿从自然界中分离出特定微生物。如图表示从土壤中分离能降解纤维素的微生物的实验过程。有关叙述错误的是(
)
A.该实验所用培养基均以纤维素为唯一碳源
B.过程①不能提高所选微生物在培养物中的比例
C.过程②可采用稀释涂布平板法将菌种涂布到平板表面
D.④的操作是挑取单菌落进行菌种鉴定
5.下列说法错误的是(
)
A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分离尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
6.组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的,自身不能合成组氨酸。将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养,有极少量菌落形成。2-氨基苏是一种致突变剂,将沾有2-氨基苏的滤纸片放到上述平板培养基中,再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养,会有较多菌落出现。以下叙述不正确的是(
)
A.在接种前,2-氨基芴和滤纸片需进行灭菌处理
B.基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关
C.若用平板划线法接种,可以根据菌落数计算活菌数量
D.此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂
7.为分离土壤中分解纤维素的微生物，某同学设计了以下两种培养基配方（用蒸馏水定容到1000mL）：
其中，酵母膏的主要作用是提供维生素等物质，水解酪蛋白可提供氮源，请判断下列说法，错误的是(
)
A.上述两种培养基中，乙培养基是固体培养基
B.若采用甲培养基进行初步选择，则需要再添加一定量纤维素
C.经初步选择后，在甲培养基中能够分离出目的微生物菌落
D.可以采用稀释涂布平板法在添加了刚果红染料的乙培养基上分离目的微生物
8.将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。下列有关叙述不正确的是(
)
A.若在M培养基中加入青霉素，可用于真菌的筛选
B.制备培养细菌的培养基时应将pH调至酸性
C.M培养基中马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐
D.倒平板时，应将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙
9.图甲表示稀释涂布平板法中的部分操作，图乙表示平板划线法的操作结果。下列叙述错误的是(
)
A.甲中涂布前先要将涂布器灼烧，待冷却后才能涂布菌液
B.甲、乙操作相比较，甲涂布后可以用显微镜直接计数
C.在接种前后，乙中接种环共需要灼烧6次
D.乙中的连续划线的起点都是上一次划线的末端
10.空气中的微生物在重力等作用下会有一定程度的沉降。某生物兴趣小组欲利用平板培养基测定教室内不同高度空气中微生物的分布情况。下列关于该实验的叙述不正确的是(
)
A.在配制培养基时必须添加琼脂等凝固剂成分
B.将平板培养基放置在教室相同地点的不同高度
C.本实验需要设置不开盖的平板培养基作为对照，计数时需用实验组的菌落数减去对照组的菌落数
D.为保证结果准确，需设置重复组
11.日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用微生物培养技术进行实验，过程及结果如下。下列叙述错误的是(
)
A.培养细菌时，需将培养基的pH调至酸性
B.为排除实验操作过程中产生的污染，需要设置对照组
C.本实验采用稀释涂布平板法接种
D.两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同
12.噬菌斑是指噬菌体侵染细菌细胞，导致宿主细胞溶解死亡，因而在培养基表面形成肉眼可见的透明小圆斑。噬菌斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体计数。下列关于噬菌斑的产生和应用，叙述错误的是(
)
A.接种细菌的培养基中应加入凝固剂琼脂
B.接种细菌可采用平板划线法，但该方法不能对细菌进行计数
C.培养基为噬菌体的繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养物质
D.实验结束后，产生噬菌斑的培养基需进行灭菌处理
13.将同一土壤样本经灭菌和未灭菌处理后.分别放在两个培养皿中,在土壤表面分别放3张
废纸(主要成分是纤维素)。然后将两个培养皿放在有较高湿度的培养室中,4~6周后观察两个培养皿的变化情况(如下图)。下列相关叙述错误的是(
)
A.土壤微生物能够将废纸中的有机物分解成无机物
B.将培养皿和土壤灭菌的方法可以是高压蒸汽灭菌
C.若土壤湿度不够，可加入些清水以控制无关变量
D.若某酵母菌不能利用废纸，可能是由于缺乏相应分解酶系
14.在微生物的研究中，培养基的配制是一个重要的环节。如表是筛选纤维素分解菌时用到的两个培养基的配方，回答下列问题：
培养基一的配方
培养基二的配方
纤维素粉
5g
CMC-Na
5~10g
NaNO3
1g
酵母膏
1g
Na2HPO4·7H2O
1.2g
KH2PO4
0.25g
KH2PO4
0.9g
琼脂
15g
MgSO4·7H2O
0.5g
土豆汁
100mL
KCl
0.5g
酵母膏
0.5g
水解酪素
0.5g
将上述两组营养物质溶解后，分别用蒸馏水定容至1000mL
(1)配制培养基时，在各成分都溶化后要进行分装，分装前要进行的步骤是________和灭菌。为了检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是________。
(2)根据培养基的物理性质，培养基一和培养基二分别属于________培养基。培养基一能够筛选出纤维素分解菌的原因在于________。
(3)在培养基二中加入________染料，可通过培养基上是否出现________来鉴别纤维素分解菌的存在。
(4)纤维素分解菌通过产生的纤维素酶将纤维素分解成葡萄糖，纤维素酶是一种复合酶，其中________酶将纤维二糖分解成葡萄糖。现筛选到了几种纤维素分解菌，为了比较它们分解纤维素的能力，通常检测每种菌种的发酵液中纤维素含量的变化作为观察指标，不采用检测葡萄糖含量变化作为观察指标的原因是________。
15.野生型菌株能在基本培养基中生长，氨基酸营养缺陷型菌株（突变株）由于基因突变失去合成某种氨基酸的能力，只能在完全培养基或补充了相应氨基酸的基本培养基中生长，突变株在生产实践中有广泛应用。如图是实验人员获取高丝氨酸突变株的部分流程示意图，请据图回答下列问题：
（1）图1中，诱变处理的野生型菌母液经扩大培养后才能作为样品，扩大培养所用培养基是________________（填“液体”或“固体”）培养基，与基本培养基相比，其特有成分是_____________，扩大培养的目的是______________。
（2）为了保证同种菌株的接种位置相同，实验人员利用影印法转移菌种（如图2），过程①所用的接种方法是________________，丝绒布要灭菌处理的原因是_____________。进行②过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，然后再转印至完全培养基上。经28
℃，2天培养后，对比基本培养基和完全培养基中菌落的生长状况，可以初步检测出高丝氨酸突变株是菌落__________（用图中字母作答）。②过程中两种培养基中菌落生长状况不同的原因是__________________。
（3）培养基的常用灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，刚开始加热灭菌锅时，要打开排气阀，使水沸腾一段时间后再关排气阀，这样操作的目的是_______________________，使锅内温度能上升到要求的温度（121
℃），达到良好的灭菌效果。
答案以及解析
1.答案：A
解析：A、地衣芽孢杆菌若长期保存，可用甘油管藏法，需置于-20℃冷冻，A错误；
B、液体培养基会使菌种与培养液更好的接触，有利于菌种的培养，B正确；
C、使用后的培养基在丢弃前要经过灭菌处理，防止对环境造成污染，C正确；
D、地衣芽孢杆菌调节动物肠道微生态平衡，改变了仔兔肠道菌群的结构，D正确。
故选：A。
2.答案：A
解析：
3.答案：A
解析：微生物A所利用的碳源为纤维素，微生物B所利用的碳源为纤维素降解物，A错误；题图中过程②表示生产乙醇的过程，常用的微生物是酵母菌，B正确；根据题图可知，微生物A利用的碳源是纤维素，故要获得微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样，C正确；微生物A可利用纤维素作为碳源，故其同化作用类型为异养型，D正确。
4.答案：B
解析：A、由于该实验需从土壤中分离能降解纤维素的微生物，故所用培养基均以纤维素为唯一碳源，A正确；
B、过程①利用以纤维素为唯一碳源的培养基进行培养，可进一步提高能降解纤维素的微生物在培养物中的比例，B错误；
C、过程②可采用稀释涂布平板法将菌种涂布到平板表面，C正确；
D、出现菌落后，还需挑取单菌落进行菌种鉴定，D正确。
故选：B。
5.答案：D
解析：土壤中不同类型的微生物的数量不同，因此在测定其数量时，不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离，选用的稀释范围也不同，A、B正确；用稀释涂布平板法进行计数时，得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，能够用于菌落的计数，C正确；在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目明显多于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D错误。
6.答案：C
解析：在微生物培养过程中，培养基、实验材料、实验用具都要进行灭菌处理,A正确；由题可知，2-氨基苏可使沙门氏菌中野生型增多，说明用该致突变剂处理缺陷型细菌可使其变为野生型，但题意不能说明该致突变剂可使野生型突变成缺陷型，且根据致突变剂可提高基因突变的频率，但不能决定突变的方向，可判断基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关,B正确;计算活菌的数目常用稀释涂布平板法，而不是用
平板划线法,C错误;根据菌落的变化情况，可检测环境中的化学致突变剂,D正确。
7.答案：C
解析：根据培养基的成分中是否有琼脂来判断是否为固体培养基，有琼脂成分的为固体培养基，A正确；土壤中分解纤维素的微生物数量较少，为提高其浓度，可以初步选择培养，为确保能分离到纤维素分解菌，需要配制加入纤维素作为碳源的培养基，培养纤维素分解菌的同时抑制其他杂菌生长，B正确；甲培养基不是固体培养基，也缺乏纤维素作为碳源，在甲培养基中无法形成纤维素分解菌单菌落，即无法分离出目的微生物，C错误；鉴定纤维素分解菌的方法是刚果红染色法，利用稀释涂布平板法进行接种，能够获取由单个细胞形成的菌落，D正确。
8.答案：B
解析：培养基中一般含碳源、氮源、水、无机盐。由马铃薯浸出液制成的培养基中含有水、碳源、氮源、无机盐等，可用来培养酵母菌等真菌，加入青霉素可以抑制细菌生长，A正确；大多数细菌生长适宜的pH是7.0~76，培养细菌时需将培养基pH调至中性或微碱性，B错误；M培养基中马铃薯浸出液可以为微生物提供碳源、氮源、无机盐等，C正确；倒平板时，用左手将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，D正确。
9.答案：B
解析：图甲中涂布前要将涂布器灼烧灭菌，待冷却后才能涂布菌液，A正确；图甲中的操作属于稀释涂布平板法的一部分，稀释涂布平板法可以用于微生物的计数，但不需要用到显微镜，B错误；乙中接种环每次划线前都需要灼烧一次，最后一次划线结束后需要再灼烧一次，一共需要灼烧6次，C正确；在做第二次以及其后的划线操作时，每次划线的起点都是上一次划线的末端，D正确。
10.答案：C
解析：平板为固体培养基，故需要加入琼脂等凝固剂成分，A正确；根据实验目的可知，自变量是教室相同地点的不同高度，所以需将平板培养基放置在教室相同地点的不同高度，B正确；本实验需要设置不开盖的平板培养基作为对照，以确定培养基是否被污染，若空白对照组中出现菌落，则说明培养基被污染，数据无效，需重新制作培养基进行实验，C错误；为了保证结果准确，需设置重复组，D正确。
11.答案：A
解析：A、培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A错误；
B、需要设立对照组，因为不能排除实验操作、培养过程中、灭菌中等环节是否产生污染，而设置对照组则可以体现是否存在污染和污染程度，以确保实验过程的可靠，B正确；
C、由图可知，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，C正确；
D、取样环境不同、取样时间不同、取样量的差异都可能影响最终的实验结果，D正确。
故选A。
12.答案：C
解析：分析题意可知，接种细菌的培养基应加入凝固剂琼脂，A叙述正确；接种细菌可采用平板划线法，因为在开始划线时，不能很好地分离单个细菌，因此无法对细菌进行计数，
B叙述正确；培养基为细菌的生存提供碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，噬菌体必须寄生在细菌中才能繁殖，C叙述错误；微生物培养实验结束后，所用到的培养基需进行灭菌处理，以防培养物污染环境和感染操作者，D叙述正确。
13.答案：C
解析：废纸的主要成分是纤维素,土壤中分解纤维素的微生物可以利用废纸中的纤维素获取物质和能量,A正确;培养皿和土壤既可以采用干热灭菌,又可以采用高压蒸汽灭菌,B正确;若土壤湿度不够,可加入些无菌水,以控制湿度对实验结果的影响,C错误;某酵母菌不能利用废纸,可能的原因是缺乏相应分解酶系(即缺乏纤维素酶和半纤维素酶),D正确
14.答案：(1)调整pH；将未接种的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生
(2)液体和固体；纤维素为唯一碳源（或只有纤维素这一种碳源）
(3)刚果红；透明圈
(4)葡萄糖苷；分解产生的葡萄糖会被微生物利用导致检测结果不准（合理即可）
解析：(1)配制培养基时，在各成分都溶化后要进行分装，分装前要进行pH调整和灭菌。为了检测培养基灭菌是否彻底，将未接种的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生，若无菌落生长，则培养基灭菌合格，反之培养基灭菌不合格。
(2)从培养基成分看，培养基一没有琼脂等凝固剂，属于液体培养基；培养基二中含有凝固剂琼脂，属于固体培养基。培养基一以纤维素为唯一碳源，纤维素分解菌能够在此培养基上生长，其他杂菌不能生长，从而将纤维素分解菌筛选出来。
(3)鉴别纤维素分解菌需在培养基中加入刚果红染料，它可以与纤维素形成红色复合物。纤维素分解菌能分解纤维素而形成透明圈。
(4)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，分别为C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素分解菌将纤维素分解，产生的葡萄糖会被微生物利用，故检测发酵液中纤维素含量的变化来判断纤维素分解菌的分解能力较为准确。
15.答案：（1）液体；高丝氨酸；增加（高丝氨酸）突变株的浓度
（2）稀释涂布平板法；避免外来杂菌对培养物造成污染；A、C；高丝氨酸突变株能在完全培养基上生长，不能在基本培养基上生长
（3）排尽锅内冷空气
解析：（1）微生物的诱变育种常常需要使用理化因子对微生物进行处理，扩大培养所使用的培养基为液体培养基；要获得高丝氨酸突变菌株，该培养基要比基本培养基额外添加高丝氨酸，能在该培养基中生长的菌落为高丝氨酸的突变种；筛选后进行扩大培养，可以增加（高丝氨酸）突变株的浓度。
（2）分析题图可知，过程①使菌落均匀分布，因此该方法为稀释涂布平板法；丝绒布灭菌处理的目的是避免外来杂菌对培养物造成污染；经过程②培养可知，B菌落在基本培养基上能生长繁殖，说明它能合成高丝氨酸，不可能是高丝氨酸缺陷型菌株。菌落A、C只能在完全培养基上生长繁殖，说明它们不能合成高丝氨酸，可能为高丝氨酸缺陷型菌株；两种培养基上菌落生长发育状况不同的原因是在基本培养基中，高丝氨酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长。
（3）使用高压蒸汽灭菌锅加热时，需同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
