2020-2021学年高二生物北师大版选修一单元测试AB卷
第一章
微生物技术
A卷
夯实基础
1.下列关于微生物营养物质的描述，正确的是(
)
A.所有碳源都能为微生物生长提供能源
B.蛋白胨可提供碳源、氮源和维生素
C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐
D.营养物质越多，微生物生长繁殖越快
2.下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述中，正确的是(
)
A.倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理
B.应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C.为防止微生物落入培养基，要在酒精灯火焰旁进行操作
D.倒好培养基的培养皿，要立即将平板倒过来放置
3.下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是(
)
A.灭菌是指杀死环境中的原核生物
B.消毒可以杀死微生物细胞和全部芽孢
C.常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法
D.常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药物法
4.有关培养基配制原则表述正确的是(
)
A.细菌培养基中一般添加豆芽汁作为能源物质
B.为微生物生长提供氮源的物质一定不能为微生物提供碳源
C.配制培养基时，需要先调节pH，后进行处理
D.增加培养基中各种营养物质浓度能够提高微生物菌落数量
5.下列有关培养基的叙述，正确的是(
)
A.
按功能划分培养基，有液体培养基和固体培养基
B.
所有培养基都含有水、无机盐、碳源和氮源
C.
培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
D.
牛肉膏蛋白胨只能提供氮源，不能提供碳源和无机盐
6.下列有关涂布分离法的叙述错误的是(
)
A.从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液
B.接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃
C.培养后菌落在整个平板表面分散均匀
D.涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落
7.要筛选得到纯净的菌种，通常在固体培养基上划线分离，下列操作正确的是(
)
A.每次划线时，接种环都需蘸菌液一次
B.划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
C.在超净台中接种时要在酒精灯火焰旁进行
D.划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养
8.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如图所示。有关叙述错误的是(
)
A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
D.甲中a区域为划线的起始位置
9.勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒(2019-nCOV)期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前后，手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述正确的是(
)
A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法
B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养
C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌
D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状
10.在细菌培养实验中进行计数时，应计数的是(
)
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数
B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数
D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数
11.如图是研究人员从土壤中筛选高效分解石油的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是(
)
A.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解石油细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞分裂形成的菌落
C.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入石油
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解石油的能力
12.下列说法错误的是(
)
A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分离尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
13.下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是(
)
A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B.配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH
C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒
D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化
14.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题：
（1）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样本的平板置于_______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_______作为对照进行实验。
（2）培养20h后，观察到平板上有形态和颜色不同的_______，这说明水样品中有多种细菌。一般来说，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______（填“高”或“低”）。
（3）如图采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。
获得图A、B效果的接种方法分别是_________、_________。某同学在用图A所示方法纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是__________________，应当怎样操作？_________。
（4）如果在培养基中加入青霉素，可以用于筛选耐_________的真菌，这种培养基（按功能分）被称为__________________。
15.物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。
（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即____________________。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明______________________。
答案以及解析
1.答案：B
解析：有机碳源能为异养微生物提供碳源和能源，无机碳源只能为自养微生物提供碳源，不能提供能源，A错误；蛋白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素，B正确；硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等，C错误；培养基中的营养物质需要控制一定的含量和比例，营养物质含量太多会导致培养基渗透压过高，从而抑制微生物的生长，D错误。
2.答案：C
解析：本题考查培养基的制备过程。培养基和培养皿都应该在倒平板之前进行高压蒸汽灭菌，A错误；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；倒好培养基的培养皿，等培养基冷却凝固后，再将平板倒过来放置，D错误。
3.答案：C
解析：A项，灭菌是指杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子；B项，消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物；C项，常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法等；D项，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。
4.答案：C
解析：细菌培养基中一般添加蛋白胨或酵母提取物，A错误；为微生物生长提供氮源的物质也可以为微生物提供碳源，如蛋白胨，B错误；配制培养基时，需要先调节pH，后进行高压蒸汽灭菌处理，C正确；在培养基中，营养物质的浓度过高，会导致微生物不能吸水而死亡，因此，营养物质的浓度要适宜，而不是越高越好，D错误。
5.答案：C
解析：A、按物理性质划分培养基，有液体培养基和固体培养基，A错误；
B、并不是所有培养基都含有水、无机盐、碳源和氮源，如培养自生固氮菌的培养基不需要氮源，B错误；
C、培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，C正确；
D、牛肉膏蛋白胨既能提供氮源，也能提供碳源和无机盐，D错误。
故选：C。
6.答案：A
解析：从土壤稀释液中取样时，只取悬液，A错误；接种时，由于玻璃刮刀用前浸泡在70%酒精中，因此涂布时需将玻璃刮刀在酒精灯上引燃，去除玻璃刮刀上的酒精，B正确；涂布分离后菌种均匀分布于培养基表面，C正确；由于涂布法操作之前，菌种已经过梯度稀释，菌种密度相对较低，更容易获得单菌落，D正确。
7.答案：C
解析：采用划线分离时，菌种只蘸取一次，A错误；划线分离时，接种环在培养基表面进行划线操作，B错误；微生物培养的关键是无菌操作，因此，在超净台上接种时，需要在酒精灯火焰旁进行，以防止空气中微生物的污染，C正确；划线分离结束后，培养皿倒置于37℃恒温培养箱中培养，D错误。
8.答案：D
解析：培养基一般用高压蒸汽灭菌，A正确；菌液经过连续划线，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，B正确；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序（d→c→b→a），整个划线过程中至少需要对接种环灼烧5次，C正确；每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落多，由图乙可知，甲中d区域菌落多，为划线的起始位置，D错误。
9.答案：B
10.答案：D
解析：在细菌培养实验中进行计数时，应对样品进行不同程度的稀释，再涂布到培养基上进行培养，然后对合理稀释度样品的培养基上的菌落数进行计数。细菌培养实验中，一般难以对固体培养基上的细菌数进行统计。本题选D。
11.答案：C
解析：在配制培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌，A正确；步骤③纯化分解石油细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞分裂形成的菌落，B正确；要筛选出能高效分解石油的细菌，所选用的培养基要以石油为唯一碳源，但牛肉膏蛋白胨培养基本身可以提供碳源，因此步骤③所用的培养基不能是牛肉膏蛋白胨培养基，C错误；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解石油的能力，D正确。
12.答案：D
解析：土壤中不同类型的微生物的数量不同，因此在测定其数量时，不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离，选用的稀释范围也不同，A、B正确；用稀释涂布平板法进行计数时，得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，能够用于菌落的计数，C正确；在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目明显多于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D错误。
13.答案：A
解析：尿素固体培养基是选择培养基，不能利用尿素的微生物不能生长，而非被杀死，A错误；不同的微生物对pH的要求不同，例如细菌通常在中性偏碱的环境中生长，霉菌通常在中性偏酸的环境中生长，所以需要调整培养基的pH，B正确；酵母菌先将糯米淀粉分解成葡萄糖，再通过无氧呼吸将葡萄糖转化为酒精，C正确；醋化醋杆菌能将酒精转化成为醋酸，故适宜浓度的酒精可促进其活化，D正确。
14.答案：（1）恒温培养箱；无菌水
（2）菌落；高
（3）稀释涂布平板法；平板划线法；菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染）；增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）
（4）青霉素；选择培养基
解析：（1）微生物的培养在恒温培养箱中进行。要使该实验所得结果可靠，还应设置对照实验，即同时在另一平板上接种无菌水作为对照，以判断培养基制作是否合格。
（2）培养20h后，不同微生物在平板培养基上会形成形态和颜色不同的菌落。菌落总数越多，说明湖水中的微生物数量越多，湖水遭受细菌污染的程度越高。
（3）根据图中菌落的分布可以判断接种方法。图A中菌落均匀分布，获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法。图B中菌落分布在不同区域的平行线上，获得图B效果的接种方法是平板划线法。培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高或培养过程被杂菌污染，可以通过增大稀释倍数或严格无菌操作的方法解决。
（4）加入青霉素的培养基可作为筛选耐青霉素的真菌的选择培养基。
15.答案：（1）W
（2）乙；乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W
（3）将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源
（4）①缓冲液；②缓冲液不能降解W；酶E与天然酶降解W的能力相近
解析：本题考查了土壤中目标菌的筛选等，意在考查考生的理解能力。
（1）要从土壤中分离出能降解含氮有机物W的目标菌，所用选择培养基应以该特定物质W为氮源。
（2）图示信息显示，在乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W，若要得到目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化。
（3）若要通过设计实验确定甲、乙两种细菌能否利用空气中的氮气作为氮源，需将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若某细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氦气作为氮源。
（4）①实验应遵循单一变量原则，故C处应滴加缓冲液。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明缓冲液不能降解W；若A、B处形成的透明圈大小相近，说明酶E与天然酶降解W的能力相近。2020-2021学年高二生物北师大版选修一单元测试AB卷
第一章
微生物技术
B卷
能力提升
1.研究人员利用无机盐、琼脂和石油配制的培养基，欲培养出石油降解菌，以修复被石油污染的土壤。下列相关叙述中，不正确的是(
)
A.这种培养基是一种选择培养基
B.这种培养基的唯一碳源是石油
C.能在该培养基上生长的微生物就是石油降解菌
D.石油降解菌在未被石油污染的土壤中含量较高
2.下列有关培养基配制的描述，正确的是(
)
A.液体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定
B.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐等成分
C.是依据人们的需求，配制出的供微生物生长繁殖的营养基质
D.微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、渗透压等影响
3.下列操作中不是获得较纯菌种的措施的是(
)
A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
B.土壤样品要灭菌处理后才能使用
C.适宜环境条件下培养
D.如果培养皿中的是固体培养基，则需倒置培养
4.下列有关微生物培养基制备的叙述,正确的是(??
)
A.培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分
B.在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生糊底
C.在微生物的实验室培养中,培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌
D.倒平板时需将培养基冷却至室温,再在酒精灯火焰旁倒平板
5.为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是(
)
A.未接种的选择培养基、未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
B.未接种的培养基、接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基、接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.接种了的培养基、未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
6.用划线分离法或涂布分离法都可以纯化大肠杆菌，二者的共同点有(
)
①可以用相同的培养基
②都要使用接种针进行接种
③都需要在酒精灯火焰旁进行接种
④都可以用来计数活菌
A.①②
B.③④
C.①③
D.②④
7.如图是平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列叙述正确的是(
)
A.划线操作须在火焰上进行
B.在5区域中才可以得到所需菌落
C.在5区域划线后，要对接种环进行灭菌
D.操作完后，将培养皿倒置于4℃培养箱中培养
8.甲烷氧化菌生产的某种蛋白具有较高的经济效益。某研究小组利用污泥，经过浓缩培养，最终分离出以甲烷为碳源和能源的菌株。下列说法不正确的是(
)
A.在培养过程中，可先用液体培养基进行多次选择培养，以增大该菌浓度
B.浓缩培养后，为了得到单菌落，可直接用灼烧后冷却的接种环蘸取菌液进行平板划线
C.若用稀释涂布平板法对菌种纯化并计数，则各梯度应该分别涂布3个平板
D.对已分离的菌株，可采用斜面保藏法在-20
℃的冷冻冰箱中长期保存
9.图甲表示稀释涂布平板法中的部分操作，图乙表示平板划线法的操作结果。下列叙述错误的是(
)
A.甲中涂布前先要将涂布器灼烧，待冷却后才能涂布菌液
B.甲、乙操作相比较，甲涂布后可以用显微镜直接计数
C.在接种前后，乙中接种环共需要灼烧6次
D.乙中的连续划线的起点都是上一次划线的末端
10.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(
)
A.采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数目
B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
D.显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法
11.下图表示培养硝化细菌的部分操作步骤，下列有关叙述正确的是(
)
A.
可以用不加碳源的培养基培养硝化细菌
B.
步骤①是倒平板，冷却后再盖上培养皿的皿盖
C.
步骤②中接种环在火焰上灼烧后立即蘸取菌液
D.
经步骤③培养后可根据出现的单个菌落来计数
12.下列有关微生物实验室培养的叙述,不正确的是(??
)
A.在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊
B.灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术
C.样品中活菌数量统计时,接种方法应采用平板划线法
D.用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置
13.某小组的同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关的叙述中，正确的是(
)
A.实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉
B.利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数
C.观察细菌培养的实验中，最好是在另一平板上接种清水作为对照实验
D.培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培养提供氮源和碳源
14.下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方。
甲
乙
KH2PO4
1.4g
纤维素粉
5.0g
Na2HPO4
2.1g
NaNO3
1.0g
MgSO4·7H2O
0.2g
Na2HPO4
1.2g
葡萄糖
10.0g
KH2PO4
0.9g
尿素
1.0g
MgSO4·7H2O
0.5g
琼脂
15.0g
KCl
0.5g
酵母膏
0.5g
水解酪素
0.5g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
（注：水解酪素即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到）
（1）配制的培养基必须经过灭菌过程，即将培养基置于__________条件下维持15~30分钟，目的是杀死培养基中的____________________。
（2）甲培养基中能提供氮源的物质是__________。
（3）为了判断甲培养基是否具有筛选作用，还应在牛肉膏蛋白胨培养基上接种__________土壤稀释液，并在相同且适宜条件下培养。如果__________，则证明甲培养基具有筛选作用。
（4）在乙培养基中生长的微生物__________（填“一定”或“不一定”）都能分解纤维素，理由是____________________。
（5）使用乙培养基培养同种微生物时，发现振荡培养条件下纤维素分解菌增殖速度比静置培养时快。分析其原因，可能是振荡培养提高了培养基中__________的含量，同时可以使纤维素分解菌与液体培养基充分接触，提高____________________的利用率。
15.为获得产脂肪酶量高的菌株，并将之用于工业生产，某研究小组进行了一些实验。请回答下列相关问题：
（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应配制__________碳源的培养基，这种培养基从功能上看属于__________培养基。
（2）经过稀释，在平板上接种0.1mL稀释液并涂布，经适当时间培养后，统计平板上的菌落数目，据此可计算出每毫升培养液中的活菌数。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小，原因可能是______________________________。
（3）经上述实验得到如表所示的结果，为保证结果准确，一般选择稀释倍数为__________的平板进行统计。有同学认为进行稀释操作时，可以将1mL培养液加适量无菌水直接稀释至上述稀释倍数，这样可以简化步骤，省去梯度稀释的麻烦。你认为这种方法是否合理？说明理由。______________________________。
稀释倍数
101
102
103
104
105
106
培养结果
计数（平均值）
难以计数
难以计数
难以计数
159
17
2
答案以及解析
1.答案：D
解析：A.选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能，A正确；
B.石油降解菌能分解石油，为分离该菌株，需要以石油作为唯一碳源，B正确；
C.石油中所含的稠环芳香烃对生物体有剧毒，可导致绝大部分的生物死亡，C正确；
D.石油降解菌是在含油污水及含油土壤中存在着能够降解利用有机物的微生物菌群,所以其在被石油污染的土壤中含量较高，D错误。
2.答案：D
解析：固体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定，A错误；培养基不一定含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基不需加碳源，分离自生固氮菌的培养基不需加氮源，B错误；人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质叫培养基，C错误；微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧气、渗透压等的影响，D正确。
3.答案：B
解析：A、要获得纯净的菌种，在培养细菌的整个过程中都严格要求无菌，所有用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需要进行灭菌，A正确；
B、土壤样品不能进行灭菌，否则得不到要分离纯化的菌种，B错误；
C、操作过程要严格无菌，培养菌种需要在其适宜的条件下培养，如乳酸菌需要在无氧条件下培养，C正确；
D、倒置培养能避免水珠滴入培养基中造成污染，D正确。
故选：B。
4.答案：B
解析：微生物培养基的主要营养物质一般有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊的营养,固体和半固体培养基需要加人琼脂,液体培养基不谣要加人琼脂,A错误;在熔化琼脂时,耑要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊,B正确;在微生物的实验室培养中,培养皿要用干热灭菌法进行彻底火菌,C错误;倒平板时需待培养基冷却至50℃左右而不是室温,D错误。
5.答案：B
解析：要判断培养基是否被杂菌污染，可将未接种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后，若有菌落产生，说明培养基被污染，若无菌落产生，说明培养基没有被污染。要判断选择培养基是否起到了选择作用，接种了的选择培养基是实验组，将等量的稀释相同倍数的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，作为对照组，在相同的条件下进行培养，观察比较对照组和实验组中的菌落数，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。综上所述，B正确。
6.答案：C
解析：①平板划线法或稀释平板涂布法都是在固体培养基上进行的，所以①描述正确；②平板划线法接种用接种针，稀释涂布平板法接种用涂布器，所以②错误；③不论是平板划线法还是稀释涂布评办法都需要进行无菌操作，在酒精灯火焰旁进行，所以③描述正确；④平板划线法不能用于计数活菌，只能用于分离菌种；稀释涂布平板法可以用来计数活菌，所以④描述错误。综上所述，正确的是①③，故选C。
7.答案：C
解析：划线操作需在酒精灯火焰旁进行，A错误；分析图示可知，划线顺序为1→2→3→4→5，划线分离操作的目的是随着接种环在培养基上连续划线，接种环上的菌液逐渐减少，在划线最后部分的细菌间距离加大，培养后可形成单菌落（可能在最后区域出现，也可能在中间区域出现），B错误；每次划线前要灼烧接种环，划线过程中灼烧是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，划线结束后需要灼烧接种环，目的是防止菌种污染操作者和环境，C正确；划线结束后，将培养皿倒置于37℃恒温培养箱中进行培养，D错误。
8.答案：D
解析：在培养过程中，可先用液体培养基进行多次选择培养（浓缩培养），以增大该菌浓度，A说法正确；浓缩培养后，可直接用灼烧后冷却的接种环蘸取菌液进行平板划线，经过多次划线，可以得到单菌落，B说法正确；若用稀释涂布平板法纯化菌种，各梯度应该分别涂布3个平板，C说法正确；对分离的菌株，可采用斜面保藏法在4
℃的冰箱中短期保存，也可采取甘油管藏法在-20
℃
的冷冻冰箱中长期保存，D说法错误。
9.答案：B
解析：图甲中涂布前要将涂布器灼烧灭菌，待冷却后才能涂布菌液，A正确；图甲中的操作属于稀释涂布平板法的一部分，稀释涂布平板法可以用于微生物的计数，但不需要用到显微镜，B错误；乙中接种环每次划线前都需要灼烧一次，最后一次划线结束后需要再灼烧一次，一共需要灼烧6次，C正确；在做第二次以及其后的划线操作时，每次划线的起点都是上一次划线的末端，D正确。
10.答案：C
解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数目，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数为30~300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。
11.答案：A
解析：A、硝化细菌能利用空气中的二氧化碳进行化能合成作用是自养生物，因此，可以用不加碳源的培养基培养硝化细菌，A正确；
B、步骤①是倒平板，倒完培养基即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C、步骤②中接种环在火焰上灼烧后待其冷却后蘸取菌液，避免灼伤菌种，C错误；
D、由步骤③可以看出，该平板所用的接种方法是平板划线法，平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，所以无法对其计数，D错误。
故选A。
12.答案：C
解析：琼脂属于多糖,熔化时,需要控制火力以免焦糊,A正确;灭菌和消毒都属于无菌技术,常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌,B正确;样品中活菌数量统计时,接种方法应采用稀释涂布平板法,C错误;用平板培养基培养微生物时,为防止水蒸气凝集滴入培养基造成污染,应将平板倒过来放置,D正确。
13.答案：D
解析：实验用过的带菌培养基，需要用高压蒸汽灭菌法灭菌后才能倒掉，以免污染环境，A错误；利用平板划线法可以对细菌进行分离纯化，但是不能计数，应利用稀释涂布平板法对细
菌进行分离纯化并计数，B错误；要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照实验，C错误；培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培养提供氮源和碳源，蛋白胨也可以提供碳源，D正确。
14.答案：（1）100kPa、121℃；所有微生物，包括芽孢和孢子
（2）尿素
（3）等量的、相应浓度的；甲培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数量
（4）不一定；培养基中纤维素被分解后产生的糖类可为其他微生物生长提供碳源
（5）溶解氧；营养物质
解析：（1）常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，将培养基置于100kPa、121℃条件下维持15~30分钟，可杀死培养基中的包括芽孢和孢子在内的所有微生物。
（2）甲培养基中含氮的物质是尿素，且以尿素作为唯一氮源。
（3）牛肉膏蛋白胨培养基属于基础培养基，在牛肉膏蛋白胨培养基上接种等量的、相应浓度的土壤稀释液，如果甲培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数量，说明有的微生物适合在牛肉膏蛋白胨培养基上生长，不适合在甲培养基上生长，则可以证明甲培养基具有筛选作用。
（4）因为乙培养基中纤维素被分解后产生的糖类可为其他微生物生长提供碳源，所以在乙培养基中生长的微生物不一定都能分解纤维素。
（5）由题意可知，振荡培养时纤维素分解菌增殖速度比静置培养时快，可能原因是振荡培养提高了培养基中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养基充分接触，提高了营养物质的利用率。
15.答案：（1）以脂肪为唯一；选择
（2）有的菌落是由2个及2个以上的细菌形成的
（3）104；不合理（否），在做梯度稀释之前不能确定哪个稀释倍数的平板上的菌落数目是在30~300之间（合理即可）
解析：（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，要在培养基中加入特定的碳源，即配制以脂肪为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上看属于选择培养基。
（2）在平板上滴加稀释液并涂布培养后，统计平板上菌落的数目，据此计算每毫升培养液中的活菌数。由于可能有的菌落是由2个及2个以上的细菌形成的，故这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小。
（3）根据表中结果可知，为保证结果准确，应选择104稀释倍数的平板进行统计。因为在做梯度稀释之前不能确定哪个稀释倍数的平板上的菌落数目是在30~300之间，故省去梯度稀释的做法不合理。
