广西钦州市第四中学2021年春季学期高二生物第五周周测试卷一.选择题
1.草甘膦是一种低毒性的广谱除卓剂,其除草原理是抑制植物体内EPSPS合成酶的合成,最终导致植物死亡。科学家将从抗草甘膦的微生物中分离出EPSPS基因(控制EPSPS合成酶合成的基因)转入小麦,以提高其对草甘瞬的耐受性。为达成其目的,需要从土壤中筛选和分离出抗草甘膦的菌种,下面有关叙述正确的是( )
A.分离土壤中的抗草甘膦菌株实验中,采集的土样经高温灭菌后,可以用于制取土壤稀释液
B.在培养基中加入EPSPS酶,可以筛选出土壤中含EPSPS合成酶基因的抗草甘膦菌株
C.筛选获得的菌株进行扩大培养时需采用液体培养基进行振荡培养D.稀释涂布平板法和平板划线法均可用于统计待测菌液中的活菌数目,且前者的估计值往往比实际值偏小
2.尿素是一种重要的农业氮肥料,但尿素并不能直接被植物吸收,需要经过土壤中分解尿素的细菌将其分解为氨之后才能被大量利用,下列有关尿素分解菌的叙述正确的是( )
A.尿素分解菌能分解尿素是因为其能利用核糖体、内质网、高尔基体等细胞器合成脲酶
B.因为培养基中只有尿素一种氮源,所以筛选出来的微生物一定只是分解尿素的微生物
C.对提取出来的微生物进行检测时,可用酚红指示剂
D.尿素分解的过程不需要水的参与
3.某生物兴趣小组做了如下实验,先在培养皿底部倒入以尿素为唯一氮源的基本培养基,待凝固。利用稀释涂布平板法接种菌液,培养一段时间后,基本培养基上生长出菌落。再向培养皿内轻轻倒上一薄层完全培养基,再次培养后实验结果如图所示。下列说法错误的是( )
A.虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐
B.再经培养后,会长出形态较小的新菌落,它们都是能分解尿素的菌株
C.若用基本培养基分离纤维素的分解菌,则配方中应该以纤维素作为唯一碳源
D.若用含特定生长因子的完全培养基作第二层,也可直接分离到相应的营养缺陷型菌株
4.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数,原因是( )
A.菌落中的细菌数目是固定的B.平板上的一个菌落就是一个细菌C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同
D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
5.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述,错误的是( )
A.土壤取样时应选取距地表约3~8cm的土壤层
B.测定细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液
C.土壤中能合成脲酶的细菌能分解尿素
D.向以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红溶液可以鉴定出分解尿素的细菌
6.关于测定土壤中细菌的数量,正确叙述是( )
A.一般选用103~107倍的稀释液分别涂布
B.测定放线菌的数量,一般选用103、104和105倍稀释
C.测定真菌的数量,一般选用104、105和106倍稀释
D.当第一次测量某种细菌的数量,可以将101~107倍的稀释液分别涂布在平板上培养
7.某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2760、295和16,则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1mL)( )
A.2.76×104个/mL B.2.95×105个/mL
C.4.6×104个/mL D.3.775×104个/mL
8.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述,其中错误的是( )
A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度B.选择菌落数在30﹣300之间的实验组平板进行计数
C.将实验组和对照组平板倒置,25℃恒温培养24﹣48小时
D.若要判断选择培养基是否起到了选择作用,需设置接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照
9.下列关于微生物培养和分离的说法中,正确的是( )
A.先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,立即出现有透明圈的菌落
B.筛选纤维素分解菌的实验流程中不可省略选择培养这一步
C.菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种肉眼鉴定的依据
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可初步鉴定尿素分解菌
10.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是( )
?
A.3号试管中的菌落稀释倍数为103倍
B.4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×107个
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
11.某同学将1mL土壤样液稀释100倍,在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57和58.下列叙述错误的是( )
A.可得出土壤样液中活菌数大约为5.7×107个/L
B.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低
C.一般选择菌落数在30﹣300的平板进行计数
D.显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数
12.关于微生物的分离与计数的叙述,错误的是( )
A.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
B.平板划线时最后一个区域的画线不能与第一区域相连
C.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落
D.对细菌进行计数,常采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数
13.下列关于生物技术实践方面叙述正确的是( )
A.稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时,测定值可能比实际值大
B.利用电泳的方法可以将蛋白质和DNA进行分离和纯化
C.在血红蛋白提取过程中通过透析法来去除DNA分子
D.用固定化酵母细胞进行酒精发酵之前需要对制作好的凝胶珠进行高温灭菌
14.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,下列叙述错误的是( )
A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素
B.图中逐级稀释的程度会直接影响细菌培养基上的菌落数量
C.培养基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以提供无机盐和作为缓冲剂
D.培养基①应以尿素为唯一氮源,培养基②的作用是纯化培养产脲酶细菌
15.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述,错误的是( )
A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
C.培养基应以尿素为唯一氮源并加入酚红作为指示剂
D.应选择菌落数在300以上的平板进行计数,并求其平均值
二.填空题
16.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数过程:土壤取样→ →将稀疏液涂布到以尿素为唯一氮肥的培养基上→ .
17.为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌,配制如下培养基进行实验:
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4?7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 1000mL
若在上述培养基中加入酚红指示剂,该培养基能对培养的细菌起到 的作用。若取土样4g,应加入 ml的无菌水,因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,将104﹣107倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上,在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:219、212、256,则每克该土壤样品中的菌株数为 。
三.解答题
18.圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为氨,是异养需氧型微生物。某同学欲通过实验从土壤中分离获得圆褐固氮菌并对其计数。请回答下列问题:
(1)进行分离实验所用培养基含有的营养成分应包括碳源、 。配制好的培养基常用 法进行灭菌。
(2)接种时需要在酒精灯火焰旁进行,其目的是 ,培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气的理由是 (答出两点)。
(3)该同学将10g土壤制成100mL悬液,采用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在进行涂布前,需要进行梯度稀释,其目的是 。若该同学从样品悬液中取出1mL,稀释100倍,在3个平板上分别涂布0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为256,258和260,则土壤中细菌密度为 个/g。
(4)若要将分离得到的圆褐固氮菌长期保存,可以采用 的方法。
19.研究人员欲从土壤中分离出高效分解尿素的尿素小球菌,进行了一系列操作。回答下列相关问题:
(1)为了获得尿素小球菌,可在含尿素较多的土壤中取样,并应选用以 为唯一氮源的培养基进行选择培养。除氮源外,培养液还应含有 等营养物质。
(2)培养基中的琼脂属于多糖类物质,但是它并不能为尿素小球菌提供碳源,原因是 。
(3)对采集的土壤样品一般先用 进行稀释,再进行平板培养,从中选出菌落数在 间的平板计数。该方法计数的结果往往偏小,原因是 。
(4)对分离得到的尿素小球菌作进一步鉴定时,可在上述培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红的原因是 ,再结合菌落的特征等进行确定。
(5)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在相同的选择培养基中培养,其他营养物质充裕、条件适宜,观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为23h、17h、29h,则应选择微生物 作为菌种进行后续培养。
20.尿素是一种高浓度氮肥,通过土壤中某些细菌分解为氨后,被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下:
KH2PO4 Na2HPO4 MgS04?7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g l.0g 15.0g
(1)根据培养基的成分分析,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌? (填能或不能),原因是 。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底,常用的检测方法是 。
(2)要统计每克土壤样品中活菌数目,最好采用 法接种。某同学取稀释倍数为106倍的菌液0.2mL接种后,测得平板上菌落数为156、178和191,则每毫升样品中的菌落数为 。
(3)某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是 ,为避免此种现象发生,正确的操作方法是 。
(4)尿素分解菌因为能合成 ,从而能将尿素分解成
和 。
参考答案
一.选择题
1.C2.C3.B4.D5.D6.B7.B8.C9.D10.B11.D12.A13.B14.B15.D
二.填空题
16.样品的稀释 挑选能生长的菌落、鉴定
17.选择和鉴别 36 1.145×109
三.解答题
18.(1)水、无机盐 高压蒸汽灭菌
(2)防止空气中的杂菌污染培养基 圆褐固氮菌为需氧型微生物,且属于固氮生物,需要空气中的氮气作为氮源
(3)使样品中的微生物细胞分散开来 2.58×106
(4)甘油管藏
19.(1)尿素 碳源、水、无机盐
(2)尿素小球菌细胞中缺乏分解琼脂的酶
(3)无菌水 30~300 当两个或多个菌落连在一起时,平板上观察到的只是单个菌落数
(4)尿素小球菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,使培养基的碱性增强
(5)乙
20.(1)不能 尿素不是唯一氮源 将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间,观察是否有菌落产生
(2)稀释涂布平板 8.75×108
(3)菌液浓度过高 对菌液进行梯度稀释(或加大稀释倍数)
(4)脲酶 CO2 NH3