基因工程测试
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基因工程测试卷
姓名 得分
Ⅰ 选择题
1、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( )
A．反转录酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶 D．解旋酶
2、下列不可作为基因工程中的标记基因的是( )
A．抗性基因 B．发光基因 C．产物具有颜色反应的基因 D．贮藏蛋白的基因
3、在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，最主要原因是( )
A.结构简单，操作方便 B.遗传物质含量少 C. 繁殖速度快 D.性状稳定，变异少
4．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 ( )
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
5．已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链，可以推断该处( )
A A+T的比例较高 B .C+G的比例较高
C .位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位
D .位于基因的尾端，是转录停止的信号
6．下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是( )
A．在特定的切点上切割 B．活性受温度的影响
C．能识别和切割RNA D．可从原核生物中提取
7．下列有关基因结构的叙述，正确的是( )
A.真核细胞的基因中，编码区也含有不能编码蛋白质的序列
B.原核细胞的基因中，编码区的外显子是连续的
C.非编码区是两个基因之间没有遗传效应的区段
D.终止密码子的作用是阻碍RNA聚合酶的移动
8.关于右图中DNA分子片段的说法不正确的是( )
A.把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含15N
的DNA单链占总链的7/8
B.②处的碱基对缺失导致基因突变
C.该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+C）/（T+G）
的比例上
D.限制性内切酶作用于①部位，解旋酶作用于③部位
9.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( )
A.基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B.重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过DNA分子杂交技术来确定的
10．PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是( )
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
11、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。根据图示,判断下列操作正确的是( )
A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
12、下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
13、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果在该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( )
A．3 B．4 C．9 D．12
14、质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是( )
细菌在含青霉素培养基上生长情况 细菌在含四环素培养基上生长情况
① 能生长 能生长
② 能生长 不能生长
③ 不能生长 能生长
A．①是c；②是b；③是a B．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a D．①是c；②是a；③是b
15、科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是( )
A．采用反转录的方法得到的目的基因有内含子
B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D．同一种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA
分子
16、细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，“+”代表加有还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表已知分子量的蛋白质，右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果，右列哪个图案最能代表该细菌原本的多肽结构（注意：“一”代表二硫键）( )
17、碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中( )
①种子的萌发 ②病毒的增殖过程 ③细菌的二分裂过程 ④目的基因与运载体的结合
⑤DNA探针的使用 ⑥分泌蛋白的加工和运输
A．①②③④⑤ B．①②③④⑤⑥ C．②④⑤ D．②③⑤⑥
18、某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及( )
A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞
B.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径
C.细菌的DNA分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中
D.目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞
19、质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是( )
①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA
⑦能“友好”地“借居”
A．①③⑤⑦ B．①④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦
20、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案
Ⅱ 非选择题
21．苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
(1)将图中①的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有_______种DNA片段。
(2)图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______种重组质粒；如果换用Bst I与BamH I酶切，目的基因与质粒连接后可获得_______种重组质粒。
(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_______。
(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_______对T—DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_ _____ _ 。
（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_____ __基因频率的增长速率。
22、（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有_______________________________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________
____________________________________________________________。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________
________________________________________________作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与_________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
23．多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开，每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子，进行了下面的实验：
步骤①：获取该基因的双链DNA片段及其mRNA；
步骤②：加热DNA双链使之成为单链，并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子；
步骤③：制片、染色、电镜观察，可观察到图中结果。
请回答：
（1）图中凸环形成的原因是 ，说明该基因有 个内含子。
（2）如果现将步骤①所获得的mRNA逆转录得到DNA单链，然后该DNA单链与步骤②中的单链DNA之一按照碱基配对原则形成双链分子，理论上也能观察到凸环，其原因是逆转录得到的DNA单链中不含有 序列。
（3）DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有 种，分别是 。
24、水稻种子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。
（1）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答：
①图中基因组文库____________（小于/等于/大于）cDNA文库。
②B过程需要的酶是______________；A、C过程中_____________（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中___________。和_____________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_________________________。
4、已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 。
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和
酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的 和 连接起来。
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能 ，也不能 。
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可
用 与 进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列 （相同，不同），根本原因是 。
答案
选择题（每题1.5分，共30分）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C D C D A C A C D C
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 A D C A A B A A C D
非选择题（每空2分，共70分）
21、 (1)4 (2)2 1 (3)复制 (4)DNA水解酶
(5)表面无相应的特异性受体 （6）抗性
22、 （1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株 ②3：1 ③100
23、（1）DNA中有内含子序列， mRNA中没有其对应序列，变性后形成的DNA单链之一与mRNA形成双链分子时，该单链DNA中无法与mRNA配对的序列能形成凸环 7
（2）内含子
（3）3 A—U T—A C—G
24、①大于 ②逆转录酶 可以 ③ DNA cDNA 耐高温
25、（1）逆转录 （2）DNA连接 载体 S基因
（3）复制 合成S基因的mRNA
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清
（5）相同 表达蛋白质所用的基因相同
b b
A
b
B
b b
C
b
侵
染
抗虫基因
含kan质粒
重组质粒
土壤农杆菌
含重组质粒土壤农杆菌
A
构建
导入
B
培养选择
转基因抗虫植株
再生植株
愈伤组织
离体棉花叶片组织
C
诱导选择
分化
D
检测
③
④
原核细胞表达的S蛋白
导入大肠杆菌
携带S
基因的重组表达载体A
选择性
扩增
S基因
①
提取
②
DNA
RNA
SARS
病毒
携带S
基因的重组表达载体B
真核细胞表达的S蛋白
导入培养动物细胞
⑥
⑤
姓名 得分
Ⅰ 选择题
1、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( )
A．反转录酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶 D．解旋酶
2、下列不可作为基因工程中的标记基因的是( )
A．抗性基因 B．发光基因 C．产物具有颜色反应的基因 D．贮藏蛋白的基因
3、在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，最主要原因是( )
A.结构简单，操作方便 B.遗传物质含量少 C. 繁殖速度快 D.性状稳定，变异少
4．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 ( )
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
5．已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链，可以推断该处( )
A A+T的比例较高 B .C+G的比例较高
C .位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位
D .位于基因的尾端，是转录停止的信号
6．下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是( )
A．在特定的切点上切割 B．活性受温度的影响
C．能识别和切割RNA D．可从原核生物中提取
7．下列有关基因结构的叙述，正确的是( )
A.真核细胞的基因中，编码区也含有不能编码蛋白质的序列
B.原核细胞的基因中，编码区的外显子是连续的
C.非编码区是两个基因之间没有遗传效应的区段
D.终止密码子的作用是阻碍RNA聚合酶的移动
8.关于右图中DNA分子片段的说法不正确的是( )
A.把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含15N
的DNA单链占总链的7/8
B.②处的碱基对缺失导致基因突变
C.该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+C）/（T+G）
的比例上
D.限制性内切酶作用于①部位，解旋酶作用于③部位
9.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( )
A.基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B.重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过DNA分子杂交技术来确定的
10．PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是( )
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
11、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。根据图示,判断下列操作正确的是( )
A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
12、下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
13、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果在该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( )
A．3 B．4 C．9 D．12
14、质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是( )
细菌在含青霉素培养基上生长情况 细菌在含四环素培养基上生长情况
① 能生长 能生长
② 能生长 不能生长
③ 不能生长 能生长
A．①是c；②是b；③是a B．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a D．①是c；②是a；③是b
15、科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是( )
A．采用反转录的方法得到的目的基因有内含子
B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D．同一种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA
分子
16、细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，“+”代表加有还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表已知分子量的蛋白质，右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果，右列哪个图案最能代表该细菌原本的多肽结构（注意：“一”代表二硫键）( )
17、碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中( )
①种子的萌发 ②病毒的增殖过程 ③细菌的二分裂过程 ④目的基因与运载体的结合
⑤DNA探针的使用 ⑥分泌蛋白的加工和运输
A．①②③④⑤ B．①②③④⑤⑥ C．②④⑤ D．②③⑤⑥
18、某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及( )
A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞
B.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径
C.细菌的DNA分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中
D.目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞
19、质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是( )
①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA
⑦能“友好”地“借居”
A．①③⑤⑦ B．①④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦
20、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案
Ⅱ 非选择题
21．苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
(1)将图中①的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有_______种DNA片段。
(2)图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______种重组质粒；如果换用Bst I与BamH I酶切，目的基因与质粒连接后可获得_______种重组质粒。
(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_______。
(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_______对T—DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_ _____ _ 。
（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_____ __基因频率的增长速率。
22、（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有_______________________________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________
____________________________________________________________。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________
________________________________________________作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与_________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
23．多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开，每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子，进行了下面的实验：
步骤①：获取该基因的双链DNA片段及其mRNA；
步骤②：加热DNA双链使之成为单链，并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子；
步骤③：制片、染色、电镜观察，可观察到图中结果。
请回答：
（1）图中凸环形成的原因是 ，说明该基因有 个内含子。
（2）如果现将步骤①所获得的mRNA逆转录得到DNA单链，然后该DNA单链与步骤②中的单链DNA之一按照碱基配对原则形成双链分子，理论上也能观察到凸环，其原因是逆转录得到的DNA单链中不含有 序列。
（3）DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有 种，分别是 。
24、水稻种子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。
（1）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答：
①图中基因组文库____________（小于/等于/大于）cDNA文库。
②B过程需要的酶是______________；A、C过程中_____________（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中___________。和_____________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_________________________。
4、已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 。
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和
酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的 和 连接起来。
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能 ，也不能 。
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可
用 与 进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列 （相同，不同），根本原因是 。
答案
选择题（每题1.5分，共30分）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C D C D A C A C D C
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 A D C A A B A A C D
非选择题（每空2分，共70分）
21、 (1)4 (2)2 1 (3)复制 (4)DNA水解酶
(5)表面无相应的特异性受体 （6）抗性
22、 （1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株 ②3：1 ③100
23、（1）DNA中有内含子序列， mRNA中没有其对应序列，变性后形成的DNA单链之一与mRNA形成双链分子时，该单链DNA中无法与mRNA配对的序列能形成凸环 7
（2）内含子
（3）3 A—U T—A C—G
24、①大于 ②逆转录酶 可以 ③ DNA cDNA 耐高温
25、（1）逆转录 （2）DNA连接 载体 S基因
（3）复制 合成S基因的mRNA
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清
（5）相同 表达蛋白质所用的基因相同
b b
A
b
B
b b
C
b
侵
染
抗虫基因
含kan质粒
重组质粒
土壤农杆菌
含重组质粒土壤农杆菌
A
构建
导入
B
培养选择
转基因抗虫植株
再生植株
愈伤组织
离体棉花叶片组织
C
诱导选择
分化
D
检测
③
④
原核细胞表达的S蛋白
导入大肠杆菌
携带S
基因的重组表达载体A
选择性
扩增
S基因
①
提取
②
DNA
RNA
SARS
病毒
携带S
基因的重组表达载体B
真核细胞表达的S蛋白
导入培养动物细胞
⑥
⑤