荧光水母
第三章
基 因 的 本 质
第一节 DNA是主要的遗传物质
20世纪中叶,科学家发现染色体主要是由蛋白质和DNA组成的。在这两种给物质中,究竟哪一种是遗传物质呢?这个问题曾引起生物学界激烈的争论。
问题探讨:
DNA分子
蛋白质
染色质
染色体
染色体=DNA+蛋白质
?
讨论:1.你认为遗传物质可能具有什么特点?
2.你认为证明某一种物质是遗传物质的可行方法有哪些?
结构比较稳定;能储存大量遗传信息;可准确复制,传递给下一代等。
蛋白质是生物体的
遗传物质。
一、对遗传物质的早期推测
蛋白质是遗传物质的观点占主导地位。
大多数科学家认为——蛋白质是遗传物质
“我们表示怀疑!”
艾弗里
赫尔希
格里菲思
噬菌体侵染大肠杆菌的实验
(3)
格里菲斯的肺炎链球菌转化实验
(1)
艾弗里的肺炎链球菌转化实验
(2)
二、肺炎链球菌转化实验
{5940675A-B579-460E-94D1-54222C63F5DA}项目
S型细菌
R型细菌
菌落
菌体
有无毒性
表面光滑
表面粗糙
有
无
(一)肺炎链球菌
多糖类的荚膜
何为荚膜?P43
注射
R型
活细菌
小鼠不死亡
第一组
注射
S型
活细菌
小鼠死亡,从小鼠体内分离出S型活细菌
第二组
注射加热致死的S型细菌
小鼠不死亡
第三组
小鼠死亡,从小鼠体内分离出S型活细菌
第四组
将R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后注射
(二)肺炎链球菌转化实验——体内转化
结论:加热杀死的S型细菌中,含有某种促R型活细菌转化为S型细菌的活性物质——“转化因子”
①第一、二组的实验现象,这说明了什么?
④什么使活R型细菌转变成活的S型细菌?
由于体内有活的S型细菌的作用。
活的R型细菌转变成了活的S型细菌。
加热杀死的S型细菌使活的R型细菌发生了转化。
②第四组小鼠为什么会死亡呢?
③第四组活的S型细菌如何出现?
S型活细菌会使小鼠死亡。
艾弗里(O.Avery)
“转化因子”是什么?我来继续研究。
多糖
脂质 蛋白质
RNA DNA……
多糖
蛋白质
RNA
DNA
脂质
S型细菌
要确定“转化因子”是什么,关键思路是什么?
有R型细菌的培养基
S型细菌的细胞提取物
第一组
+
S型细菌
R型细菌
有R型细菌的培养液
S型细菌的细胞提取液
第二至四组
+
S型细菌
R型细菌
混合
混合
有R型细菌的培养液
S型细菌的细胞提取液
第五组
+
混合
只长R型细菌
DNA酶
蛋白酶(或RNA酶、酯酶)
(三)肺炎链球菌转化实验——体外转化
蛋白酶
二
RNA酶
三
酯酶
四
去除绝大部分糖类、蛋白质和脂质
DNA酶
核酸等有机物
特异性的去除一种物质。
艾弗里等人进一步分析了细胞提取物的理化性质,发现这些特性与DNA极为相似。
结论:DNA才是使R型菌产生稳定遗传变化的物质。
思考:
1、分析实验变量?
2、对照实验如何进行的?
自变量:是否加入酶及酶的种类;
因变量:培养基中是否有活的S菌。
第一组为空白对照组。第二至五组为实验组。
每组特异性的去除一种物质,观察S菌的活性。
科学方法:自变量控制中的“减法原理”(P46)
“加法原理”?(P46)
1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记的技术,完成了另一个有说服力的实验。
思考:有没有更好的材料、更好的方法能够将DNA和蛋白质分开,单独去观察它们的作用呢?
赫尔希 蔡斯
噬菌体结构模式图
(四)噬菌体侵染细菌的实验
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒,它的头部和尾部的外壳都是由蛋白质构成的,头部含有DNA。
1.噬菌体的结构
放射性同位素标记法
2. 研究方法:
?
DNA和蛋白质,应分别标记哪一种元素?
蛋白质的组成元素:DNA的组成元素:
C、H、O、N、S
C、H、O、N、P
(标记32P)
(标记35S)
T2噬菌体中60%是蛋白质,40%是DNA。
仅蛋白质中含有硫,磷几乎都存在于DNA中。
②细菌+含32P的培养基
含32P的细菌
①噬菌体+含35S的细菌
②噬菌体+含32P的细菌
3. T2噬菌体的标记
第一步:标记大肠杆菌
含35S的细菌
①细菌+含35S的培养基
第二步:标记噬菌体
含35S的噬菌体
含32P的噬菌体
侵入别的细菌
注入
复制、合成
吸附
组装
释放
吸附
注入
复制、合成
组装
释放
4. 噬菌体侵染细菌的过程
搅拌的目的:
使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离
离心的目的:
让上清液中析出T2噬菌体颗粒,沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌
结果说明:
侵染的大肠杆菌时T2噬菌体的蛋白质外壳留在细胞外
结果说明:
侵染的大肠杆菌时T2噬菌体的DNA进入细菌的细胞中
(1)被35S标记的噬菌体+大肠杆菌
混合培养
搅拌,离心
上清液
放射性很高
沉淀物
放射性很低
新噬菌体中不含35S
(2)被32P标记的噬菌体+大肠杆菌
混合培养
搅拌,离心
上清液
沉淀物
放射性很低
放射性很高
新噬菌体中含32P
2.实验能否用32P和35S同时标记噬菌体?
不能,因为放射性检测时只能检测到放射部位,不能确定是哪种元素的放射性;若用32P和35S同时标记噬菌体,则上清液和沉淀物中均会具有放射性,无法判断噬菌体遗传物质的成分。
1.能否在含放射性同位素的培养基中标记噬菌体?
不能,噬菌体只能寄生在活细胞中,不能在培养基上存活。
思考.讨论
搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
4.用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌时,发现上清液中放射性也较高,可能是什么原因造成的?
(1)保温时间过短,部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中。
(2)保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放出子代,经离心后分布于上清液中。
3.用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌时,发现沉淀物中也有少量放射性,可能是什么原因造成的?
赫尔希和蔡斯的实验表明:
实验结论
DNA才是噬菌体的遗传物质。
噬菌体侵染细菌时,DNA进入细菌的细胞中,而蛋白质外壳仍留在细胞外。因此,子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的DNA遗传的。
注意:这个实验不能证明蛋白质不是遗传物质。
证明DNA是遗传物质的实验
1.艾弗里与赫尔希等人选用细菌或病毒作为实验材料,
以细菌或病毒作为实验材料具有哪些优点?
个体很小,结构简单,易于观察由遗传物质改变导致的结构和功能的变化;繁殖快,细菌20-30min就可以繁殖一代,病毒可在短时间内大量繁殖。
2.从控制变量的角度,艾弗里实验的基本思路是什么?
在实际操作过程中最大的困难是什么?
巧妙运用减法原理,最大的困难是如何彻底去除细胞中含有的某种物质(糖类、脂质、蛋白质等)。
思考 讨论:P46
艾弗里主要运用了细胞培养技术、物质的提纯和鉴定技术等。
赫尔希等人主要采用了噬菌体的培养技术、同位素标记法、物质的提取和分离等技术。
科学成果的取得需有技术手段作保证,两者相互支持、相互促进。
3.艾弗里和赫尔希等人都分别采用了哪些技术手段来实现他们的实验
设计?这对于你认识科学与技术之间的相互关系有什么启示?
DNA是生物界唯一的遗传物质吗?
思考: 下面这些生物的遗传物质是什么?
流感病毒
SARS病毒
烟草花叶病毒
新型冠状病毒
蛋白质
RNA
分
离
感染
烟草
感染
烟草
实验
结果
出现病斑
不出现病斑
实验
结果
四、烟草花叶病毒的感染和重建实验
正常叶片
感染烟草花叶病素的叶片
TMV A
TMV B
烟草花叶病毒的重建实验所繁殖的病毒类型取决于?
烟草花叶病毒的遗传物质是?
实验结论
烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。
(含有DNA和RNA)
(含有DNA或RNA)
DNA病毒
RNA病毒
细胞生物
无细胞生物(如病毒)
遗传物质为RNA
遗传物质为DNA
真核生物
原核生物
核酸是一切生物的遗传物质,核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),绝大多数生物都是以 DNA作为遗传物质的,因此DNA是主要的遗传物质。
转化实质:肺炎链球菌转化的实质是S型细菌的DNA片段整合到R型细菌的DNA中,使受体细胞获得了新的遗传信息,即发生了基因重组。
【拓展】加热致死的S型细菌中DNA仍能起作用的原因:
由于DNA的热稳定性比蛋白质要高,所以加热杀死S型细菌的过程中,其蛋白质永久变性失活,DNA的结构也会被破坏,但DNA在加热结束后随温度的降低又逐渐恢复活性,但蛋白质却不能恢复。
DNA或RNA
DNA
DNA
(2)烟草的遗传物质是什么?
DNA
(1)动物和人体的遗传物质是什么?
(3)细菌的遗传物质是什么?
(4)一切生物的遗传物质是什么?
(5)病毒的遗传物质是什么?
核酸(DNA或RNA)
课堂练习: