2007-2011生物高考题分类汇编（课件）：选修专题31现代生物科技专题

(共64张PPT)
此套资料，依据天利38套2012高考真题单元专题训练整理而成
专题31
现代生物科技专题
D
【解析】人工将供体的精子和卵子在体外受精、体外培养胚胎，然后将发育到一定程度的胚胎移植入受体，从而生产出各种动物。包括体外受精和胚胎移植。
1.（2011广东3）华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有（ ）
①转基因 ②核移植 ③体外受精 ④体细胞克隆 ⑤胚胎移植
A. ①③ B. ①④ C. ②⑤ D. ③⑤
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一、选择题
A
【解析】解析：本题考查基因工程的有关知识，基因工程中用限制性核酸内切酶切割含目的基因的DNA分子（除草剂基因）和运载体（质粒）。
2.（2010浙江2）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
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3．（2011江苏16）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养而选而获得
D
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4.（2006北京）以下不能说明细胞全能性的实验
A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株（ ）
B.紫色糯性玉米种子培育出植株
C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株
D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株
B
5.（2010浙江4）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B.克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变
C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养
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D
6.（2006全国Ⅰ）采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（ ）
A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目等于凝血因子氨基酸数目的3倍
B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C.在转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中
D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
B
C
解析：植物组织培养中不需要CO2培养箱，一般用固体培养基，所以A、B错误；动物细胞培养获得的是细胞株或细胞系，没有获得新的个体，所以没有体现细胞全能性，D错误。
7.（2009浙江1）用动、植物成体的体细胞进行离体养，下列叙述正确的是（ ）
A．都需用CO2培养箱
B．都须用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行
D．都可体现细胞的全能性
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8．（2011江苏18）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精
B．受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
D．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术
B
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A
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9.（2011浙江2）培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是（ ）
A 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵
B 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟
C 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内
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【解析】首先是精子的采集和获能，卵母细胞的采集和培养，在此过程中为了让雌性动物排出更多的卵母细胞，甲应为对雌性动物采用注射促性腺激素让其超数排卵，乙过程是促进其完成体外受精，丙过程是早期胚胎发育过程，丁过程是在母体内完成胚胎发育全过程；所以A选项是正确的；乙过程是完成受精作用，所以B选项是错误的；C选项是乙过程在专用获能培养液或受精溶液中，而丙过程是细胞培养过程，所以培养液的成分是不同，C错误；D选项中早期胚胎移植到与供体处于同期发情即同时采用促性腺激素处理的母体内，所以D选项是错误的。
D
10、（2007天津5）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )
A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
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11.（2004天津）下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子探针诊断疾病（ ）
②B淋巴细胞于骨髓瘤细胞的杂交
③快速灵敏地检测饮用水中的病毒含量
④目的基因于运载体结合形成重组DNA分子
A.②③ B.①③ C.③④ D.①④
B
D
12.（2008全国Ⅰ5）下列关于细胞工和的叙述，错误的是( )
A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
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【解析】本题考查细胞工程中的动物细胞融合和植物细胞杂交方面的内容。植物体细胞杂交和动物体细胞融合时，均可采用离心、电刺激、振动等物理方法或化学促融剂如聚乙二醇等方法；植物细胞杂交时用纤维素酶或果胶酶去除细胞壁，而动物细胞培养过程中存在接触抑制，故需要用胰蛋白酶进行处理；单克隆抗体的制备就是利用经抗原免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合再经筛选制成的；甲乙两个品种的植物体细胞杂交相当于形成了异源四倍体，而常规杂交形成的是二倍体。所以选D。
13.（2004全国Ⅱ）用动物细胞工程技术获取但克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）
A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
B
C
【解析】将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。已经表达了就说明导入成功。所以A、B和D正确，C错误。
14.（2011浙江6）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ）
A． 每个大肠杆菌细胞至少含一个重细胞质粒
B． 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C． 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D． 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
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BD
【解析】本题主要考查学生的理解能力。PCR技术只能用来扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；利用光学显微镜无法观察到叶绿体。
15．（2010广东24）新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是
A.PCR技术——扩增蛋白质
B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体
C.光学显微镜——观察叶绿体的基粒
D.花粉离体培养——培育单倍体植物
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二、多项选择题
a
a
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三、非选择题
16.(2008山东35)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____处，DNA连接酶作用于____处。(填“a”或“b”)
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基因枪法（花粉管通道法）
植物组织培养
脱分化
再分化
耐盐基因（目的基因）
一定浓度盐水浇灌
(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_________________________________法。
(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用___________技术，该技术的核心是________和__________。
(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________________作探针进行分子杂交检测．又要用_________________
方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
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【解析】本题以社会的热点和科技新进展为背景，通过转基因水稻的培育综合考查了基因工程的基本工具、基本操作程序和植物细胞工程等知识，属于识记内容，要求简单。
（1）限制性核酸内切酶破坏的是相邻两个脱氧核苷酸的磷酸和脱氧核糖之间的化学键。DNA连接酶的作用部位也是该处，但作用与限制酶正好相反。
（2）重组DNA导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，也可以使用基因枪法或花粉管通道法。
（3）目的基因的受体细胞是植物体细胞或受精卵，因此，要经过植物组织培养过程才能成为植株。该过程的核心是脱分化和再分化。
（4）目的基因是否导入受体细胞，用DNA分子杂交技术进行检测，即以带有放射性的目的基因的单链为探针，检测受体细胞中是否含有能与探针进行配对杂交的DNA（目的基因）。检测目的基因是否表达，可以用个体检验的方法，将植物栽培到高浓度盐的环境中（如盐碱地），然后观察其生活状况。
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17．（2011上海57）回答下列有关基因工程的问题。
（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。（可多选） A．X－1 B．X－2 C．X－3 D．X－4
特异性的识别和切割DNA
ABC
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（3）若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿。
（4）如果X－1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X－2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为＿＿＿＿对碱基。
无质粒细胞
含X-3的细胞
4750
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（5）若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X－1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X－4的细胞数与含X－1的细胞数之比为13，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？＿＿＿。原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
不能
DNA连接酶对DNA片段没有选择性
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18.（2011海南31）回答有关基因工程的问题：
（1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。
（2） 利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_________________________________________________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为____________________。
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平
相同
提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录
Ca2+
DNA—RNA分子杂交
为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成_________________________，常用抗原-抗体杂交技术。
（3） 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目睹基因插入农杆菌Ti质粒的_________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______________上。
T—DNA
染色体
胰岛素原（蛋白质）
相互接触
接触抑制
单层（或一层）
胰蛋白酶
衰老甚至死亡
不死性
降低
减少
19.（2008宁夏38）回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面 时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进面出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
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由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）
冷冻（或超低温、液氮）
中
酶
新陈代谢
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是
(4) 检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。
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【解析】本题以“动物细胞培养”为主题综合考查了动物细胞培养的条件、特点、细胞分裂、免疫等有关知识，虽属于识记内容，但是综合了选修和必修，综合性较强。
抗原
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。
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（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从已处死的雌鼠________中获取。
卵巢
20．（2011山东35）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
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目的基因
载体
同种限制酶
体外受精
限制酶切割位点
检测到体内有相关蛋白
出现高血压
（2）图中的高血压相关基因作为 ，质粒作为_______ 二者需用 切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有 有关。
（3）子代大鼠如果 和___________ ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。
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21．（2011新课程40）现有一生活污水净化处理系统，处理流程为“厌氧沉淀池 曝光池 兼氧池 植物池”，其中植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。污水经净化处理后，可用于浇灌绿地。回答问题：
（1）污水流经厌氧沉淀池、曝气池和兼氧池后得到初步净化。在这个过程中，微生物通过 呼吸将有机物分解
（2）植物池中，水生植物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了 （生态系统、群落、种群）。在植物池的食物网中，植物位于第 营养级。植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于 所固定的 能。
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无氧和有氧
群落
一
生产者
太阳
（3）生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、 和 等原理。
（4）一般来说，生态工程的主要任务是
进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。
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物质循环再生
物种多样性
已被破坏的生态环境（或受损的生态环境）
22.（2007山东）继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。
（2）进行基因转移是，通常要将外源基因转入______________________中，原因是______________________。
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显微注射
受精卵
受精卵具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达。
（3）通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的____________细胞中特异表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的_ __ ___ 转入_____________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为___ _ ____。
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DNA分子杂交（核酸探针）
膀胱上皮
细胞核
去核的卵
核移植
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23、(2007天津30）（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
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限制性内切酶和DNA连接酶
具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存
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请据图回答：
（1）A过程需要的__________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是__________________________ ___ 。
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卡那霉素
放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因
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（3）过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用_____ _ 作为探针。
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与__________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
非转基因植株
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
3:1
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____%。
100
遗传性
快
遗传信息
微生物
生根
细胞分裂素
2,4-D
24．（2010新课标）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_______，繁殖种苗的速度____。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部___________。
(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免________的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗______，而与___________配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是_________ (脱落酸、2，4-D)。
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（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。
据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是________，单株鲜重的变化趋势是_____________。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量_______(能、不能)满足自身最佳生长的需要。
(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应_______ (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
逐渐减小
先增加后下降
不能
降低
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25.（2010山东35）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
使卵母细胞成熟
获能
CO2
培养液的pH
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(1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是____________________；从良种公牛采集的精子需________后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持________________。
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胚胎移植
提高优良母畜的繁殖率
显微注射法
牛奶中含有人类白细胞介素
（3）图中过程A称为_______________，它在胚胎工程中的意义在于_________________________。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_____________；获得转基因母牛后，如果______________________________即说明目的基因已经表达。
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[解析]采集到的卵细胞都要在人工培养到成熟后才能与获能的精子受精，采集到的精子也需获能处理才能与卵子结合；培养基制备时要调pH以保证细胞的正常生活环境；早期胚胎移入受体子宫的过程为胚胎移植，胚胎移植充分发挥了雌性优良个体的繁殖潜力，大大提高了优良母畜的繁殖率；基因工程技术中，导入动物受体细胞的常用方法是显微注射法，导入成功后，如果检测到牛乳中含有人类白细胞介素，则证明目的基因已成功表达。
[易错点击]动物细胞培养也需调节pH，通常加如的物质是二氧化碳。
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26.(2011江苏33)请回答基因工程方面的有关问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基本因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物中为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
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①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
15/16
三
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（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
第一组：①_______________________________________
②_____________________________________
引物I和引物II局部发生碱基互补配对而失效
引物I′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
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（3）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能反映DNA聚合酶的功能，这是因为
DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双
链DNA片段的引物链上
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（4）用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。
（4 ）
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(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是_______，
③所指的物质是___________。
PCR
mRNA
rhEPO
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27．（2010福建32）
红细胞生成素（EPO）是体内促进
红细胞生成的一种糖蛋白，可用于
治逆子疗肾衰性贪血等疾病。由于
天然EPO来源极为有限，目前临订
、床上使用的红细胞生成素主要来
自于基因工程技术生产的重组人红
细胸生成素（rhEPO），其简要生
产流程如右图。请回答
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培养液
杂交瘤
(3)培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定其更换___________。
(4)检测rhEPO的体个活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的___________细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓癌细胞融合而成.
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28．（2008海南26）图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶且位点。
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目的基因-载体连接物
载体-载体连接物
目的基因-目的基因连接物
分离纯化
（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、
、 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 。
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启动子
mRNA
EcoRⅠ和BamHⅠ
（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。
（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。
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精子获能
胚胎移植
29. （2011福建32）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（1）过程①是指在体外进行
_____________的处理，从而使精
子与卵子结合形成受精卵；过程
②称为____________。
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限制酶
DNA
32. [现代生物科技专题]必答题（10分）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫
血症的产前基因诊断时，要先
从羊水中的胎儿细胞提取物质③
________进行PCR扩增。然后用Ⅱ
对扩增产物进行切割，产生多个
片段的酶切产物。据此判断，
Ⅱ是一种________________酶。
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32. [现代生物科技专题]必答题（10分）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（3）不同长度的酶切产物在电泳
时移动的速率不同，形成不同的
电泳条带。该家庭成员的镰刀型
细胞贫血症基因分析的电泳带谱
如④，据此判断胎儿为________
（正常/患者/携带者）。
正常