3.1 菊花的组织培养

(共23张PPT)
专题3 植物的组织培养
课题1 菊花的组织培养
课题目标
1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花的组织培养。
4.通过查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，拓展视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。
课题重点
1.植物组织培养的相关概念和过程
2.影响植物组织培养的因素
3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
课题难点
1.影响植物组织培养的因素。
2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
课时安排：2课时
课题1 菊花的组织培养
细胞分化
愈伤组织
细胞的全能性
脱分化
再分化
阅读教材32页，回顾以上基本知识。
细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、 结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
植物细胞的全能性：
概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。
原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质。
（一）植物组织培养的基本过程
基本概念
为什么在植物体中细胞不表现全能性？
细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。
脱分化：又叫去分化，指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，重新分化成根或芽等器官的过程。
愈伤组织：
脱分化和再分化
指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术（原理：细胞的全能性）。
又称：植物离体培养
植物组织培养的概念
图3-1 植物组织培养的流程图
植物组织培养的基本过程
（二）影响植物组织培养的因素
1、内部因素：植物材料的选择
（1）、不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。
（2）、同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝
2、外部因素
不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基
（1）、培养基的选择
MS培养基：
A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
（2）植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
使用顺序 实验结果
先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化
先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化
同时使用 分化频率高
生长素
细胞分裂素：
>
有利于根的分化,抑制芽的形成
生长素
细胞分裂素：
<
有利于芽的分化，抑制根的分化
生长素
细胞分裂素：
＝
促进愈伤组织生长
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日用日光灯照射12h
（3）pH、温度、光照
植物组织培养过程:
离体组织或细胞
植物体
脱分化
细胞分裂素≈生长素
愈伤组织
芽
根
细胞分裂素>生长素
细胞分裂素<生长素
再分化
植物细胞培养
不需要光
需要光
（三）植物组织培养的应用
1、植物微型繁殖
2、培育无病毒植株（作物脱毒）
3、制备人工种子
4、培养紫草愈伤组织,提取紫草素等
5、基因工程的基础
人工种子
实验操作
(一)、配制MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备
1、配置各种母液
2、配置培养基
① 配制培养液
② 调PH
③分装
由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素
分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml
3、灭菌
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
2、消毒
①流水冲洗
② 酒精处理
③消毒液处理
（三）接种
（四）培养
（五）移栽
（六）栽培
结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
（三）是否进行了统计、对照与记录
（四）生根苗的移栽是否合格
菊花的组织培养