动物细胞融合与单克隆抗体

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动物细胞融合与单克隆抗体
教学目标：
1、了解并能简述动物细胞培养的过程、条件及应用
2、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用
教学重点和难点：
1.动物细胞培养的过程及条件
2.单克隆抗体的制备和应用
复习回顾：
1、植物体细胞杂交的过程是怎样的？
2、动物细胞和植物细胞有何不同 ？
一、动物细胞融合：
1、概念：也称 ，是指 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成的单核细胞称为 。
2、过程：不同 的两个细胞→ 细胞
细胞杂交
两个
多个
杂交细胞
DNA
杂交
3、 动物细胞融合原理与植物原生质体融合的基本原理是否相同？
诱导方法： 、 、 。
思考：为什么灭活病毒能够作为诱导剂？不灭活的是否可以？
4、动物细胞融合的意义：克服了 杂交的不亲和性。
物理法
化学法
生物法
远缘
灭活的病毒对细胞没有感染能力。
动物细胞融合
杂种细胞
愈伤组织
杂种植株
植物细胞A
植物细胞B
原生质体A
原生质体B
植物体细胞杂交
去壁
融合
组培
物理法
化学法
生物法：
灭活的病毒
动物细胞A
动物细胞B
杂种细胞
5、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法
植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 去壁后诱导原生质体融合 物理法（离心、振动、电激）化学法（聚乙二醇 获得杂种植株
动物细胞融合 细胞膜的流动性
使细胞分散后诱导细胞融合 除以上方法，还有生物法 制备单克隆抗体
二、单克隆抗体：
1.其由何种细胞产生？
2.主要分布在哪里？
3.如何得到抗体？
提问
？
动物细胞A
动物细胞B
杂种细胞
用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体
试一试
聚乙二醇　或灭活的病毒
杂交瘤细胞
细胞培养
提取抗体
效应Ｂ细胞
肿瘤细胞
单克隆抗体制备过程示意图
注意：
①对小鼠做何处理？
②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？
③杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产生 。
思考： 产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的？
注射特定的抗原蛋白
五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨－骨、杂交瘤细胞）
其中三种融合细胞。
繁殖
专一的抗体
提示：抑制骨髓瘤细胞的DNA复制。
单克隆抗体的优点和应用
单克隆抗体的优点
强， 高， 大。
单克隆抗体的应用：
①作为诊断试剂：准确识别各种 物质的细微差别，并跟 的结合，具有 、 、 、 的优点。
②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗 ，可制成“ ”，也有少量用于治疗其他疾病。
特异性
灵敏度
产量
抗原
一定抗原发生特异性
准确 高效 简易 快速
癌症
生物导弹
1、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 ( ) A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙
2．（2004年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
B
B
3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 （ ）
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成杂种细胞
A.①② B.①③ C.②④ D.③④
4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　⑤杂交瘤细胞
A． ②④ B．①③⑤　　
C． ①②③④ 　 D．②③
C
A
创新应用训练
5．右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：
　　（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是　　 　 　。
　
（2）图中②为　　　过程，常用　　　　作为诱导剂。该细胞继承了　 　 　，因此不仅能分泌　 　　，还有　　 　　本领。
（3）该方案的目的是　　。
不能
没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞.
细胞融合
灭活病毒
双亲细胞的遗传物质
特异性抗体
在体外培养条件下大量增殖
制备单克隆抗体
作业：
1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较。
2、单克隆抗体制备过程。