1.2:基因工程的基本操作程序
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一.新课程标准
1.简述基因工程的诞生(Ⅰ)。 2.简述基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
3.举例说出基因工程的应用(Ⅱ)。 4.简述蛋白质工程(Ⅰ)。
二.阅读思考(在书上找到答案并要求写出)
1. 基因工程的操作一般经历哪四个步骤?
2. 提取目的基因的两条途径是什么?
3. 常用的获取目的基因的方法有哪些?
4. 基因表达载体的构建需要经过怎样的处理?
5. 基因工程中常用的受体细胞有哪些?
6. 对于不同的受体应分别采取什么样的导入方法
7. 将重组质粒导入细菌时为什么要用氯化钙处理?
8. 目的基因的检测和鉴定包括哪些内容?
三.基础知识总结(要求能背诵并写出)
(一)目的基因的获取
1.目的基因的定义
目的基因主要是指编码 的基因和一些具有 作用的因子。
2.目的基因获取的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
基因文库: 将含有某种生物 基因的许多 ,导入 中储存,各个受体菌分别含有这种生物的 。
①基因组文库——“国家图书馆”: 包含了一种生物 基因。
②部分基因文库——“××市图书馆”: 包含了一种生物的 基因,如 。
(2)利用PCR技术扩增目的基因
①定义: PCR(聚合酶链式反应)是一项 的技术。
②原理: 。
例1:有关基因工程的叙述正确的是
A、质粒都可作为运载体 B、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料1.目的基因的定义
目的基因主要是指编码 的基因和一些具有 作用的因子。
2.目的基因获取的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
基因文库: 将含有某种生物 基因的许多 ,导入 中储存,各个受体菌分别含有这种生物的 。
①基因组文库——“国家图书馆”: 包含了一种生物 基因。
②部分基因文库——“××市图书馆”: 包含了一种生物的 基因,如 。
(2)利用PCR技术扩增目的基因
①定义: PCR(聚合酶链式反应)是一项 的技术。
②原理: 。
C、限制酶只在获得目的基因时才使用 D、重组质粒的形成是在细胞内完成
(二)基因表达载体的构建——基因工程的
1.基因表达载体的组成: 、 、 、 等。
2.启动子:
(1)定义: 是一段具有特殊结构的 ,位于 。
(2)作用:是 的识别和结合位点,能驱动 ,最终获得所需要的 。
3. 终止子:
(1)定义: 是一段具有特殊结构的 ,位于 。
(2)作用: 。
4. 标记基因: 鉴别受体细胞 ,从而将 的细胞筛选出来。
例2:基因与运载体结合所需的条件有 ①同一种限制酶②具有某些标记基因的质粒
③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP
A、①②③④⑤⑥⑦ B、①②④⑤⑦
C、①②③④⑤ D、①②③④⑤⑦
(三)将目的基因导入受体细胞
1.将目的基因导入植物细胞: 最常用的方法是 。
2.将目的基因导入动物细胞: 最常用的方法是 。
3.将目基因导入微生物细胞:
(1)原核生物的特点: 、 、 。
(2)大肠杆菌转化方法:用Ca2+ 处理细胞
例3: 基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等作为受体细胞,原因是
A、结构简单,操作方便 B、繁殖速度快
C、遗传物质少,简单 D、形状稳定,变异少
(四)目的基因的检测与鉴定
1.检测转基因生物染色体的DNA :检测方法是 。
2.检测目的基因 : 检测方法是 。
3.检测目的基因 : 检测方法是 。
例4: 苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花植株后是否已表达,其检测方法是
A、是否有抗药性 B、是否有相应的抗虫性状
C、是否能检测至标记基因 D、是否能分离到目的基因
例5: 下列有关生物工程中,人们对所需的对象进行筛选的叙述不正确的是
A、在基因工程中可依标记基因对工程菌进行筛选
B、在基因工程中利用病菌侵染对所育植物品种的抗病性进行筛选
C、微生物培养中利用无氮培养基可筛选出共生固氮菌
D、在细胞工程中利用双亲细胞的特性可对杂种细胞进行筛选