1.1:DNA重组技术的基本工具
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一.考试大纲
1.简述基因工程的诞生(Ⅰ)。 2.简述基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
3.举例说出基因工程的应用(Ⅱ)。 4.简述蛋白质工程(Ⅰ)。
二.阅读思考(在书上找到答案并要求写出)
1.基因工程是怎么诞生的?
2.基因工程的原理是什么?
3.基因操作的工具——基因的“分子手术刀”、“分子缝合针”、“分子运输车”分别是指什么?
4.限制酶在基因工程中的作用是什么?作用的部位是哪里?作用的特点什么?
5.DNA连接酶的作用是什么?是两种不同的DNA分子被同一种限制酶切割后,两者的黏性末端碱基配对是在DNA连接酶的作用下实现的吗?DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
6.载体只有质粒吗?质粒仅存在于细菌中吗?
7. 大肠杆菌的质粒上通常含有哪些基因?质粒的存在对于宿主细胞的生存有决定性作用吗?
三.基础知识总结(要求能背诵并写出)
(一)基因工程的原理
别 称
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结 果
例1:下列关于基因工程的叙述正确的是
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
例2: 20世纪70年代创立了一种新兴的生物技术――基因工程,实施该工程的最终目的是
A、定向提取生物的DNA分子 B、定向地对DNA分子进行人工剪切
C、在生物体外对DNA进行改造 D、定向地改造生物的遗传性状
(二)基因操作的工具——酶和载体
1.基因的分子手术刀――限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)存在:主要在 中。
(2)作用: 特定的核苷酸序列,且在特定的切点上 DNA分子。
作用的部位是 。
(3)特性:专一性
(4)种类:目前已发现200多种。
(5)作用的结果:产生 末端和 末端。
2.基因的分子缝合针――DNA连接酶
(1)作用:用于将两段乃至数段DNA片段拼接起来的酶
(2)连接部位:两个 之间的缝隙“缝合”起来。实际上是把DNA分子片段之间的
和 连接起来。而不是碱基之间的连接。
3.基因的运载工具――载体
(1)具备的条件
①对宿主细胞生存没有 作用,且能够在宿主细胞中 并稳定地保存;
②具有 限制酶的切点(便于与多种外源目的基因连接而运载多种基因);
③具有某些 (便于对目的基因进行筛选和检测);
(2)常用载体:
①质粒:存在于许多细菌以及酵母菌等微生物,细胞质内小型环状DNA分子。
②噬菌体:主要利用温和性噬菌体,它侵入宿主细胞后,拼接于宿主细胞DNA上而为裂解宿主细胞
③动植物病毒:利用病毒侵染的特异性进行目的基因的导入
例3:下列关于质粒的叙述正确的是
A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B、质粒和质体是一回事
C、质粒是能自主复制的小型环状DNA分子 D、质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行
例4:质粒之所以能做基因的运载工具是因为
A、含蛋白质能完成生命活动 B、能够自我复制而保持连续性
C、是RNA能够指导蛋白质的合成 D、具有环状结构能够携带目的基因