1903年萨顿研究蝗虫的精子和卵细胞形成过程
1910年摩尔根进行果蝇杂交实验
提出假说:基因在染色体上
找到基因在染色体上的实验证据
1866年孟德尔的豌豆杂交实验
发现了遗传因子 (基因)
基因究竟是什么物质呢?
假说—演绎
类比推理
假说—演绎
第三章 基因的本质
第一节 DNA是主要的遗传物质
对遗传物质的早期推测
20世纪20年代,人们认识到蛋白质是由多种氨基酸连接而成的生物大分子,而且氨基酸多种多样的排列顺序中可能蕴藏着遗传信息。
脱氧核苷酸的种类
20世纪30年代:认识到DNA的分子的组成
蛋白质
DNA
20世纪中叶,染色体由蛋白质和DNA组成已经为人们所知,但是对于谁是遗传物质仍然存在争议。
肺炎链球菌转化实验
肺炎链球菌:
{5C22544A-7EE6-4342-B048-85BDC9FD1C3A}类型
R型肺炎双球菌
S型肺炎双球菌
菌体
菌落
毒性
粗糙
光滑
无荚膜
有荚膜
可致病,使人和小鼠患肺
炎,小鼠并发败血症死亡
不致病
一.肺炎链球菌的体内转化实验:
(1928年,格里菲思)
R型菌
S型菌
加热杀
死的S型菌
加热杀死的S型菌
+R型细菌
小鼠不死亡
小鼠不死亡
小鼠死亡,从小鼠体内分理出S型活细菌
小鼠死亡,从小鼠体内分理出S型活细菌
由此推断 : 已经加热杀死的S型细菌,含有某种促使R活细
菌转化为S型活细菌的活性物质——转化因子。
多糖 脂类 蛋白质 DNA
加热杀死的S型细菌
但究竟哪一个才是转化因子呢?
哪种物质是转化因子?
二.肺炎链球菌的体外转化实验:
(20世纪40年代,艾弗里)
DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质(转化因子)。
实验思路::
(破碎加热杀死的S型细菌,设法去除绝大部分的糖类、蛋白质和脂质)
2. 实验过程:
3. 实验结论:
分离。
自变量控制中的“加法原理” 和“减法原理”
在对照实验中控制自变量,可以采用“加法或减法原理”;
与常态比较,人为增加某种影响因素的称为加法原理。例如在必修一酶一节中“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验中,与对照组相比,实验组分别做了加温、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液的处理,利用了“加法原理”;
与常态相比,人为去除某种影响因素的称为减法原理。例如在艾弗里的肺炎链球菌转化实验中,每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质,这利用了“减法原理”。
艾弗里实验细胞提取物不够纯
当时科学界深信蛋白质是遗传物质
有没有比细菌更简单的实验材料及更有说服力的实验呢?
1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记的新技术,完成了另一个更具有说服力的实验。
T2噬菌体的结构模式图
(二)、噬菌体浸染细菌实验
1、成分只有蛋白质和DNA
2、仅能在大肠杆菌内繁殖。
3、繁殖时,仅将遗传物质导入大肠杆菌,其他物质保留在体外。
蛋白质外壳
DNA
4. 病毒侵染细菌的过程:
吸附
注入
合成
组装
释放
T2噬菌体只提供遗传物质,合成子代噬菌体所需原料(氨基酸、核苷酸、酶、ATP等)均由大肠杆菌提供。
(二)、噬菌体浸染细菌实验
3、DNA和蛋白质,应分别标记哪一种元素?
2、用什么方法确定导入细菌的物质?
1、要证明噬菌体里面蛋白质和DNA谁是遗传物质,只需证明:
导入细菌体内的是噬菌体的哪一物质!
蛋白质的组成元素:
DNA 的组成元素:
C、H、O、N、S
C、H、O、N、P
(标记 35S)
(标记 32P)
同位素标记法
(二)、噬菌体浸染细菌实验
大肠杆菌
大肠杆菌
噬菌体
噬菌体
4、怎样将35S和32P标记到噬菌体的蛋白质和DNA上?
分别用35S或32P标记噬菌体与大肠杆菌混合
经短时间保温后用搅拌器搅拌
离心检测上清液和沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
32P标记的噬菌体
35S标记的噬菌体
:
上清液放射性很高,
沉淀物放射性很低。
上清液放射性很低,
沉淀物放射性很高。
子代噬菌体中无35S
子代噬菌体中含32P
35S标记的实验
32P标记的实验
标记部位
放射性情况
上清液
沉淀物
有无放射性原因
蛋白质
很高
DNA
很低
蛋白质未进入细菌中
DNA进入细菌中
很高
很低
3. 实验结果:
(二)、噬菌体浸染细菌实验
搅拌和离心的目的是什么?
离心后的上清液和沉淀物里的物质主要是什么?
阅读教材P45的实验过程,思考下列问题:
上清液主要是噬菌体的未被注入的部分,沉淀物主要是被侵染的大肠杆菌
将噬菌体未被注入部分与大肠杆菌分离
(二)、噬菌体浸染细菌实验
35S标记的实验
32P标记的实验
标记部位
放射性情况
上清液
沉淀物
有无放射性原因
蛋白质
很高
DNA
很低
蛋白质未进入细菌中
DNA进入细菌中
很高
很低
3. 实验结果:
(二)、噬菌体浸染细菌实验
细菌裂解后,在释放的子代T2噬菌体中,可检测到32P标记的DNA,却不能检测到35S标记的蛋白质。说明了什么?
噬菌体的DNA进入大肠杆菌,并复制出若干DNA,合成子代噬菌体,噬菌体的蛋白质外壳没有进入大肠杆菌中。
DNA能自我复制、能控制蛋白质合成、在亲子代间具有连续性,是遗传物质!
(二)、噬菌体浸染细菌实验
搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
2.用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌时,发现上清液中放射性也较高,可能是什么原因造成的?
(1)保温时间过短,部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中。
(2)保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放出子代,经离心后分布于上清液中。
1.用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌时,发现沉淀物中也有少量放射性,可能是什么原因造成的?
(二)、噬菌体浸染细菌实验
2. 实验能否用32P和35S同时标记噬菌体?
不能,因为放射性检测时只能检测到放射部位,不能确定是哪种元素的放射性;若用32P和35S同时标记噬菌体,则上清液和沉淀物中均会具有放射性,无法判断噬菌体遗传物质的成分。
1.能否在含放射性同位素的培养基中标记噬菌体?
不能,噬菌体只能寄生在活细胞中,不能在培养基上存活。
RNA是遗传物质的实验证据
蛋白质
RNA
分别侵染健康烟草植株
患病
不患病
得到全新病毒
不能得到病毒
烟草花叶病毒组分单独侵染烟草实验
烟草花叶病毒的遗传物质是RNA
:
烟草花叶病毒
细胞生物含有:
病毒
DNA病毒
RNA病毒
遗传物质
是DNA
遗传物质
是RNA
绝大多数生物的遗传物质是DNA
DNA是主要的遗传物质
生物的遗传物质
DNA和RNA
作业布置
《课时作业》P139-141