2020-2021学年高二生物人教版选修一专题2-1 微生物实验室培养 课件(24张)

(共24张PPT)
专题2
微生物的培养与应用
课题1
微生物的实验室培养
微生物
原核:
真核
非细胞类：
细菌、放线菌、支原体、蓝藻等
酵母菌、霉菌等
真菌：
原生生物
病毒、类病毒、朊病毒等
微生物的类群
显微藻类：衣藻、小球藻等
原生动物：草履虫、变形虫等
微生物研究和应用的前提
如何获得纯净培养物？
①合适的营养和环境条件
②确保其他微生物无法混入
培养基
无菌技术
一、培养基
1.基本成分：
碳源、氮源、水、无机盐
⑴碳源
无机碳源：
有机碳源：
CO2、CO32-、HCO3-
牛肉膏、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
⑵氮源
无机氮源：
有机氮源：
NH4＋、NO3-
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
※蛋白胨:动物蛋白初步消化的产物，富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类。主要提供氮源和维生素。
※牛肉膏：新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而成，含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。提供碳源、氮源、能源、磷酸盐和维生素。
病毒培养
动物接种
鸡胚接种（常用的病毒培养法之一
）
组织培养（应用最广的方法
）
HeLa细胞是病毒实验室最常使用的细胞之一。
2.
配制原则
(1)目的明确：
(2)营养全面:浓度适宜、比例恰当
(3)适宜的pH值：
有机碳源
异养型：
根据微生物的种类、培养目的选择原料
自养型：
不加碳源
加入缓冲剂
细菌偏碱，真菌偏酸
（CO2碳源）
生产
科研
3.培养基类型和用途：
按物理性质划分：
按化学成分划分：
按用途划分：
按物理性质
固体培养基:加琼脂；用于分离、鉴定、计数
液体培养基：不加凝固剂；用于工业生产。
半固体培养基：加少量琼脂；可用于观察运动，鉴定菌种、保藏菌种。
固体培养基
有
无
凝固剂琼脂
液体培养基
按化学成分
合成培养基：成分明确；分类鉴定。
天然培养基：成分不明确；用于工业生产。
天然培养基：
培养多种细菌的牛肉膏蛋白胨培养基，
培养酵母菌的麦芽汁培养基等。
按目的用途分
鉴别培养基：培养基中加入某种试剂或化学药品，区别出不同类型的微生物。
选择培养基：在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长，如用青霉素选出酵母菌等。
选择培养基
选择培养基
应用
加入青霉素
分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐
分离金黄色葡萄球菌
不加氮源
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基
分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素
分离导入了目的基因的受体细胞
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点在培养基加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同的微生物
只起鉴别作用，并不能抑制其他微生物
如：大肠杆菌在伊红美蓝培养基上典型特征
紫黑色，并带有金属光泽
琼脂
葡萄糖
尿素
选择
合成
异养型
1、下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿。
已知只有能合成脲酶
的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类
型上看，用该培养基培养的细菌属于＿。
二、无菌技术
1.哪里需要无菌？
2.如何控制无菌？
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
（1）消毒
（2）灭菌
概念
较为温和理化方法
杀死部分有害微生物
(不包括芽孢和孢子)
强烈的理化因素
杀死所有的微生物
包括芽孢和孢子
常用方法
①煮沸消毒法
②巴氏消毒法
③化学药剂消毒法
④紫外线消毒法
①灼烧消毒法
②干热灭菌
③高压蒸汽灭菌
适用对象
操作空间、液体、双手等
接种环、接种针、玻璃器皿，培养基等
2.无菌的方法
※芽孢：在某些细菌生长的一定阶段，细胞内形成一个圆形、椭圆形或柱形的，抗逆性强的休眠体。
※孢子：真菌所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞，能直接发育成新个体。
接种室内空气、接种箱、超净工作台
用紫外线照射30min
紫外线消毒
实验者的手臂、实验台等
酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液
化学药剂消毒
牛奶等不宜高温消毒灭菌的
70
～75℃,30min；
80℃,15min
巴氏消毒
日常食物、罐装食品
100℃,5～6min
煮沸消毒法
适用范围
条件
方法
（1）消毒
15～30min
100kPa，121
℃
培养基、实验器材
高压蒸汽灭菌
1～2h
干热灭菌箱（160℃～170
℃
）
耐高温需干燥的物品（玻璃器皿等）
干热灭菌
烧红
酒精灯火焰充分燃烧层灼烧
接种的工具、试管口、瓶口
灼烧灭菌
灭菌时间
所需条件
适用对象
灭菌方法
灼烧灭菌
干热灭菌箱
高压蒸汽灭菌锅
（2）灭菌