(共38张PPT)
历年高考题PPT版分类汇编
此套资料，依据天利38套2012高考真题单元专题训练整理而成
专题30
生物技术实践
C
1．（2010课标3）若要在普通显微镜下观察到质壁分离、RNA和脂肪，下列四组材料中应选择的一组是
A．水稻胚乳和花生子叶
B．天竺葵叶和水稻胚乳
C．紫色洋葱和花生子叶
D．天竺葵叶和紫色洋葱
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一、选择题
解析:本题考查果酒制作的知识。此考点在高考中出现的次数较少。在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，发酵时也不能通入空气，一般将发酵温度控制在18～25℃。
B
2.（2010北京1）在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是
Ａ．让发酵装置接受光照
Ｂ．给发酵装置适时排气
Ｃ．向发酵装置通入空气
Ｄ．酵母菌装置放在45℃处
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3．（2011江苏3）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
D
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C
4.（2009福建1）下列对有关实验的叙述，正确的是
A.在观察洋葱细胞有丝分裂实验中，将已经解离、漂洗、染色的根尖置于载玻片上，轻轻盖上盖玻片后即可镜检
B.对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检
C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机溶剂，如无水乙醇等
D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入适量斐林试剂后，摇匀并观察颜色变化
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【解析】考查课本实验基础知识。A.压片操作有误，应用镊子将根尖弄碎，盖上盖玻片，再加一载玻片，用拇指轻轻按压。B．应将酵母菌培养液稀释后再观察。D．用斐林试剂可以鉴定还原性糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖等）存在，而不能直接鉴定出葡萄糖的存在。另外，鉴定时应该用水浴加热。
C
【解析】在植物组织培养过程中，在外植体经脱分化形成愈伤组织的过程中，生长素和细胞分裂素是必要的；一定的细胞分裂素/生长素是促进愈伤组织再分化为根、芽的必需条件，所以没有植物激素，只是保留原样。
5．（2010浙江6）将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养中，在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后，应出现的现象是（ ）
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6．（2011上海22）下列关于植物组织培养的表述，错误的是 A．外植体可以来自于植物的任何细胞 B．培养应在无菌条件下进行 C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
( A )
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7．（2011江苏14）关于现代生物技术应用的叙述错误的是
A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质
B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体
C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒
D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养
B
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【解析】本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识。B选项固定化酶不像普通酶那样对环境要求那么高，耐受性比较好，和溶解氧没什么关系；C选项利用固定化酶降解水体中有机磷农药，纯粹的化学反应，不需要提供营养条件，固定化细胞发挥作用需要。D选项利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用作为反应底物也为碳源来调节酵母菌的代谢方式。
A
8．（2009江苏3）下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是
A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧
C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件
D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物
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【解析】本题要注意题干中的能体现体细胞全能型，玉米种子和小麦花粉都不属于体细胞，骨髓干细胞是多能干细胞，不能发育成一个个体，没有体现出全能性；胡萝卜的体细胞发育成一个新个体属于体细胞全能性
D
9．（2011山东2）下列发生了细胞分化且能体现体细胞全能性的生物学过程是
A．玉米种子萌发长成新植株
B．小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞
C．小麦花粉经离体培养发育成单倍体植株
D．胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株
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D
【解析】本题考察的是选修1专题2微生物的应用与培养的有关知识。确定对照组无菌后，选择菌落数在30—300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。
10.（2009安徽6）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
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【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过程。熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母细胞混合，A项错误；图1中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成凝胶珠，B项正确；图2中要进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到图2装置中，D项正确。
BCD
12．（2010江苏25）右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是A．剐溶化的海藻酸钠应迅速与活
化的酵母菌混合制备混合液
B．图1中X溶液为溶液，其作用是
使海藻酸钠形成凝胶珠
C．图2发酵过程中搅拌的目的是
为了使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
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二、多项选择题
AC
【解析】果酒的制备过程中先 让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。
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13．（2010广东25）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是( )
A.加入适量的酵母菌
B.一直打开阀b通气
C.一直关紧阀 a,偶尔打开阀b几秒钟
D.把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
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薄荷油是挥发性物质，鲜薄荷叶才含薄荷油
鲜
酒精
薄荷油易溶于有机溶剂酒精中
使溶液分层
分液漏斗
除水
过滤
14.（2011海南30）许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题：
（1） 薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用___(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因是_________________________________________。
（2） 用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是______，原理是_______________________________。
（3） 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是____________。常用于分离油层和水层的器皿是__________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是_____，除去固体硫酸钠的常用方法是_______。
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三、非选择题
易挥发、难溶于水、化学性质稳定
玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物
不是
蒸馏温度
在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加
15．（2010课标37）下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有________________________________的性质。蒸馏时收集的蒸馏液______(是、不是)纯的玫瑰精油，原因是____________________________________________________
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_________当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是
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下降
部分精油会随水蒸气挥发而流失
较低
减少挥发
a
(6)从薄荷叶中提取薄荷油时 _____(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是
能
薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似
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（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会_______，原因是_______________________________。
（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度______的地方，目的是__________。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为____天左右。
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16．（2007北京30）发醉法生产酒精后的废液 ( PH = 4.3 ）含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下：
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请据图分析回答问题：
（1）实验过程中培养白地霉的培养基是____________。培养基定量分装前，先调节_____, 分装后用棉塞封瓶口，最后_____处理。
废液上清液
灭菌
PH
接种
扩大培养
异养需氧型
（2）图中 ① 过程称为_____，从甲到丁的培养过程是为了__________。白地霉的代谢类型为__________。
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( 3 ）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量_____的质量。过滤后需反复烘干称量，直至______________________。所得菌体干重等于____________________________。
恒重时的质量与滤纸质量之差
恒重（质量基本不变）
滤纸
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电荷
迁移速度
碳源
氮源
数量
平板划线法
稀释涂布平板法
灭菌
17、(2008山东34)
科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗苗能力，受到研究者重视。
(1)分离该抗苗蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的__________、大小及形状不同，在电场中的___________不同而实现分离。
(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_______和________。
(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白质的抗菌效果。
(4)细菌培养常用的接种方法有 ____________和_________。 实验结束后，对使用过的培养基应进行_________处理。
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【解析】（1）电泳法是常用的蛋白质的分离技术。电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。因为多肽具有可解离的基团，在一定的pH下基团会带上电荷。因此，在电场的作用下会向与所带电荷相反的电极移动。因为待分离样品种各种分子的所带电荷的性质以及本身分子大小不同，使得带电分子产生不同的迁移速度，从而达到分离的目的。
（2）～（4）牛肉膏和蛋白胨具有丰富的碳和氮，所以在培养基中是重要的碳源和氮源。检验抗菌蛋白的抗菌效果，可以设置对照实验，实验组中加入抗菌蛋白，对照组不加入抗菌蛋白，通过比较菌落多少可以确定抗菌效果：如果实验组的菌落数量明显少于对照组或者实验组没有菌落，则确定该蛋白抗菌效果良好；如果两组菌落数量相当，说明该蛋白抗菌效果不好。
原油
选择
平板划线法
稀释涂布平板法
强
18．（2011课标39）
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以
为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。
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干热灭菌
高压蒸汽灭菌
火焰
18．
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
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（1）柚皮易焦糊，宜采用_________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过_________除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或______________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是__________________。实验前需对超净工作台进行______处理
压榨
过滤
稀释涂平板法
高压蒸汽灭菌锅
消毒
19．（2011山东34）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
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氮源
越慢
直径大小
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供_________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度_________。
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的____________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
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橘（橙）黄
胡萝卜素是脂类物质
新脂性有机溶剂（或有机溶剂）
萃取
过滤
温度
温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解
萃取
浓缩
时间
20.（2008宁夏37）
根据从极萝卜中提取的胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
(1)胡萝卜素是 色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用 作为溶剂，原因是 。
(2)从胡萝卡中提取胡萝卜素常用的方法是 法。
用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、 、 、 。
(3)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将____和______控制在一定范围内，原因是
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【解析】本题合考查有关胡萝卜素的特点和鉴定、提取方法、提取注意事项等知识，识记性质的内容，难度较小。
标准样品
反
纸层析
(4)提取的胡萝卜素可通过 法进行鉴定，在鉴定过程中需要用 对照。
(5)一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。
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21．（2009江苏32）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。
(2)气室中充入5％C02：气体的主要作用是__________________。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。
吸收氧气和营养物质、排出代谢废物
维持培养液适宜的pH
种类和剂量
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(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。
实验过程：①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。
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向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块
染色体形态和数量
肝脏小块对有机物X具有解毒作用
上表中还需进行的操作是 _______________ 。
③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察__________________，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 ________ 。
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【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物（2）气室中充入5％C02的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH。（3）同时也要注意选择抗生素的种类和数量来抑制细菌生长。（4）乙组或丁组没有处理向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块作为对照实验，有机物X有毒性，可诱发染色体断裂所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用，所以甲组正常。(共64张PPT)
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专题31
现代生物科技专题
D
【解析】人工将供体的精子和卵子在体外受精、体外培养胚胎，然后将发育到一定程度的胚胎移植入受体，从而生产出各种动物。包括体外受精和胚胎移植。
1.（2011广东3）华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有（ ）
①转基因 ②核移植 ③体外受精 ④体细胞克隆 ⑤胚胎移植
A. ①③ B. ①④ C. ②⑤ D. ③⑤
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一、选择题
A
【解析】解析：本题考查基因工程的有关知识，基因工程中用限制性核酸内切酶切割含目的基因的DNA分子（除草剂基因）和运载体（质粒）。
2.（2010浙江2）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
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3．（2011江苏16）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（ ）
A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养而选而获得
D
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4.（2006北京）以下不能说明细胞全能性的实验
A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株（ ）
B.紫色糯性玉米种子培育出植株
C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株
D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株
B
5.（2010浙江4）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B.克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变
C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养
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D
6.（2006全国Ⅰ）采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（ ）
A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目等于凝血因子氨基酸数目的3倍
B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C.在转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中
D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
B
C
解析：植物组织培养中不需要CO2培养箱，一般用固体培养基，所以A、B错误；动物细胞培养获得的是细胞株或细胞系，没有获得新的个体，所以没有体现细胞全能性，D错误。
7.（2009浙江1）用动、植物成体的体细胞进行离体养，下列叙述正确的是（ ）
A．都需用CO2培养箱
B．都须用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行
D．都可体现细胞的全能性
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8．（2011江苏18）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精
B．受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
D．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术
B
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A
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9.（2011浙江2）培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是（ ）
A 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵
B 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟
C 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内
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【解析】首先是精子的采集和获能，卵母细胞的采集和培养，在此过程中为了让雌性动物排出更多的卵母细胞，甲应为对雌性动物采用注射促性腺激素让其超数排卵，乙过程是促进其完成体外受精，丙过程是早期胚胎发育过程，丁过程是在母体内完成胚胎发育全过程；所以A选项是正确的；乙过程是完成受精作用，所以B选项是错误的；C选项是乙过程在专用获能培养液或受精溶液中，而丙过程是细胞培养过程，所以培养液的成分是不同，C错误；D选项中早期胚胎移植到与供体处于同期发情即同时采用促性腺激素处理的母体内，所以D选项是错误的。
D
10、（2007天津5）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )
A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
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11.（2004天津）下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子探针诊断疾病（ ）
②B淋巴细胞于骨髓瘤细胞的杂交
③快速灵敏地检测饮用水中的病毒含量
④目的基因于运载体结合形成重组DNA分子
A.②③ B.①③ C.③④ D.①④
B
D
12.（2008全国Ⅰ5）下列关于细胞工和的叙述，错误的是( )
A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
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【解析】本题考查细胞工程中的动物细胞融合和植物细胞杂交方面的内容。植物体细胞杂交和动物体细胞融合时，均可采用离心、电刺激、振动等物理方法或化学促融剂如聚乙二醇等方法；植物细胞杂交时用纤维素酶或果胶酶去除细胞壁，而动物细胞培养过程中存在接触抑制，故需要用胰蛋白酶进行处理；单克隆抗体的制备就是利用经抗原免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合再经筛选制成的；甲乙两个品种的植物体细胞杂交相当于形成了异源四倍体，而常规杂交形成的是二倍体。所以选D。
13.（2004全国Ⅱ）用动物细胞工程技术获取但克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）
A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
B
C
【解析】将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。已经表达了就说明导入成功。所以A、B和D正确，C错误。
14.（2011浙江6）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ）
A． 每个大肠杆菌细胞至少含一个重细胞质粒
B． 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C． 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D． 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
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BD
【解析】本题主要考查学生的理解能力。PCR技术只能用来扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；利用光学显微镜无法观察到叶绿体。
15．（2010广东24）新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是
A.PCR技术——扩增蛋白质
B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体
C.光学显微镜——观察叶绿体的基粒
D.花粉离体培养——培育单倍体植物
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二、多项选择题
a
a
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三、非选择题
16.(2008山东35)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____处，DNA连接酶作用于____处。(填“a”或“b”)
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基因枪法（花粉管通道法）
植物组织培养
脱分化
再分化
耐盐基因（目的基因）
一定浓度盐水浇灌
(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_________________________________法。
(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用___________技术，该技术的核心是________和__________。
(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________________作探针进行分子杂交检测．又要用_________________
方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
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【解析】本题以社会的热点和科技新进展为背景，通过转基因水稻的培育综合考查了基因工程的基本工具、基本操作程序和植物细胞工程等知识，属于识记内容，要求简单。
（1）限制性核酸内切酶破坏的是相邻两个脱氧核苷酸的磷酸和脱氧核糖之间的化学键。DNA连接酶的作用部位也是该处，但作用与限制酶正好相反。
（2）重组DNA导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，也可以使用基因枪法或花粉管通道法。
（3）目的基因的受体细胞是植物体细胞或受精卵，因此，要经过植物组织培养过程才能成为植株。该过程的核心是脱分化和再分化。
（4）目的基因是否导入受体细胞，用DNA分子杂交技术进行检测，即以带有放射性的目的基因的单链为探针，检测受体细胞中是否含有能与探针进行配对杂交的DNA（目的基因）。检测目的基因是否表达，可以用个体检验的方法，将植物栽培到高浓度盐的环境中（如盐碱地），然后观察其生活状况。
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17．（2011上海57）回答下列有关基因工程的问题。
（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。（可多选） A．X－1 B．X－2 C．X－3 D．X－4
特异性的识别和切割DNA
ABC
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（3）若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿。
（4）如果X－1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X－2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为＿＿＿＿对碱基。
无质粒细胞
含X-3的细胞
4750
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（5）若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X－1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X－4的细胞数与含X－1的细胞数之比为13，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？＿＿＿。原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
不能
DNA连接酶对DNA片段没有选择性
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18.（2011海南31）回答有关基因工程的问题：
（1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。
（2） 利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_________________________________________________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为____________________。
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平
相同
提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录
Ca2+
DNA—RNA分子杂交
为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成_________________________，常用抗原-抗体杂交技术。
（3） 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目睹基因插入农杆菌Ti质粒的_________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______________上。
T—DNA
染色体
胰岛素原（蛋白质）
相互接触
接触抑制
单层（或一层）
胰蛋白酶
衰老甚至死亡
不死性
降低
减少
19.（2008宁夏38）回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面 时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进面出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
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由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）
冷冻（或超低温、液氮）
中
酶
新陈代谢
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是
(4) 检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。
“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。
【解析】本题以“动物细胞培养”为主题综合考查了动物细胞培养的条件、特点、细胞分裂、免疫等有关知识，虽属于识记内容，但是综合了选修和必修，综合性较强。
抗原
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。
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（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从已处死的雌鼠________中获取。
卵巢
20．（2011山东35）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
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目的基因
载体
同种限制酶
体外受精
限制酶切割位点
检测到体内有相关蛋白
出现高血压
（2）图中的高血压相关基因作为 ，质粒作为_______ 二者需用 切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有 有关。
（3）子代大鼠如果 和___________ ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。
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21．（2011新课程40）现有一生活污水净化处理系统，处理流程为“厌氧沉淀池 曝光池 兼氧池 植物池”，其中植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。污水经净化处理后，可用于浇灌绿地。回答问题：
（1）污水流经厌氧沉淀池、曝气池和兼氧池后得到初步净化。在这个过程中，微生物通过 呼吸将有机物分解
（2）植物池中，水生植物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了 （生态系统、群落、种群）。在植物池的食物网中，植物位于第 营养级。植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于 所固定的 能。
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无氧和有氧
群落
一
生产者
太阳
（3）生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、 和 等原理。
（4）一般来说，生态工程的主要任务是
进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。
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物质循环再生
物种多样性
已被破坏的生态环境（或受损的生态环境）
22.（2007山东）继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。
（2）进行基因转移是，通常要将外源基因转入______________________中，原因是______________________。
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显微注射
受精卵
受精卵具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达。
（3）通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的____________细胞中特异表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的_ __ ___ 转入_____________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为___ _ ____。
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DNA分子杂交（核酸探针）
膀胱上皮
细胞核
去核的卵
核移植
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23、(2007天津30）（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
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限制性内切酶和DNA连接酶
具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存
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请据图回答：
（1）A过程需要的__________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是__________________________ ___ 。
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卡那霉素
放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因
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（3）过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用_____ _ 作为探针。
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与__________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
非转基因植株
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
3:1
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（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____%。
100
遗传性
快
遗传信息
微生物
生根
细胞分裂素
2,4-D
24．（2010新课标）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_______，繁殖种苗的速度____。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部___________。
(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免________的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗______，而与___________配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是_________ (脱落酸、2，4-D)。
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（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。
据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是________，单株鲜重的变化趋势是_____________。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量_______(能、不能)满足自身最佳生长的需要。
(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应_______ (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
逐渐减小
先增加后下降
不能
降低
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25.（2010山东35）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
使卵母细胞成熟
获能
CO2
培养液的pH
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(1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是____________________；从良种公牛采集的精子需________后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持________________。
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胚胎移植
提高优良母畜的繁殖率
显微注射法
牛奶中含有人类白细胞介素
（3）图中过程A称为_______________，它在胚胎工程中的意义在于_________________________。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_____________；获得转基因母牛后，如果______________________________即说明目的基因已经表达。
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[解析]采集到的卵细胞都要在人工培养到成熟后才能与获能的精子受精，采集到的精子也需获能处理才能与卵子结合；培养基制备时要调pH以保证细胞的正常生活环境；早期胚胎移入受体子宫的过程为胚胎移植，胚胎移植充分发挥了雌性优良个体的繁殖潜力，大大提高了优良母畜的繁殖率；基因工程技术中，导入动物受体细胞的常用方法是显微注射法，导入成功后，如果检测到牛乳中含有人类白细胞介素，则证明目的基因已成功表达。
[易错点击]动物细胞培养也需调节pH，通常加如的物质是二氧化碳。
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26.(2011江苏33)请回答基因工程方面的有关问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基本因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物中为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
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①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
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三
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（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
第一组：①_______________________________________
②_____________________________________
引物I和引物II局部发生碱基互补配对而失效
引物I′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
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（3）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能反映DNA聚合酶的功能，这是因为
DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双
链DNA片段的引物链上
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（4）用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。
（4 ）
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(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是_______，
③所指的物质是___________。
PCR
mRNA
rhEPO
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27．（2010福建32）
红细胞生成素（EPO）是体内促进
红细胞生成的一种糖蛋白，可用于
治逆子疗肾衰性贪血等疾病。由于
天然EPO来源极为有限，目前临订
、床上使用的红细胞生成素主要来
自于基因工程技术生产的重组人红
细胸生成素（rhEPO），其简要生
产流程如右图。请回答
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培养液
杂交瘤
(3)培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定其更换___________。
(4)检测rhEPO的体个活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的___________细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓癌细胞融合而成.
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28．（2008海南26）图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶且位点。
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目的基因-载体连接物
载体-载体连接物
目的基因-目的基因连接物
分离纯化
（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、
、 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 。
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启动子
mRNA
EcoRⅠ和BamHⅠ
（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。
（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。
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精子获能
胚胎移植
29. （2011福建32）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（1）过程①是指在体外进行
_____________的处理，从而使精
子与卵子结合形成受精卵；过程
②称为____________。
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限制酶
DNA
32. [现代生物科技专题]必答题（10分）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫
血症的产前基因诊断时，要先
从羊水中的胎儿细胞提取物质③
________进行PCR扩增。然后用Ⅱ
对扩增产物进行切割，产生多个
片段的酶切产物。据此判断，
Ⅱ是一种________________酶。
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32. [现代生物科技专题]必答题（10分）
一对表现型正常的夫妇，生了一
个镰刀型细胞贫血症（常染色体
隐性遗传病）患儿。在他们欲生
育第二胎时，发现妻子的双侧输
卵管完全堵塞，不能完成体内受
精。医生为该夫妇实施了体外受
精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（3）不同长度的酶切产物在电泳
时移动的速率不同，形成不同的
电泳条带。该家庭成员的镰刀型
细胞贫血症基因分析的电泳带谱
如④，据此判断胎儿为________
（正常/患者/携带者）。
正常
