第2节
第1课时
微生物的基本培养技术分层训练
层级一--课堂基础练
1.关于微生物的营养,下列说法正确的是( )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
2.(2020·山西临汾一中月考)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量的蔗糖和琼脂,用蒸馏水定容后灭菌,得到M培养基。下列有关叙述不正确的是( )
A.若在M培养基中加入青霉素,可用于真菌的筛选
B.培养细菌时,需要将培养基调至酸性
C.M培养基中马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐
D.倒平板时,应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙
3.下列选项中不含有微生物的是( )
A.洗干净的脸上
B.洗完澡后的皮肤
C.刷完牙后的口腔
D.灼烧之后的接种环
4.下列关于倒平板的叙述,错误的是( )
A.右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞,为避免污染需在酒精灯火焰附近进行
B.倒平板整个过程应在火焰旁进行
C.完全打开培养皿皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖
D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置
5.(2020·江苏苏州月考)微生物接种的方法很多,平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是( )
A.划线操作时,将蘸有菌液的接种环插入培养基
B.平板划线后培养微生物时要倒置培养
C.不能将第④次的划线与第①次的划线相连
D.在第②~④次划线前都要对接种环进行灭菌
1-5
DBDCA
6.如表是某种微生物培养基的配方,回答下列问题:
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
水
0.5
g
1
g
0.5
g
2
g
定容至200
mL
(1)此培养基的营养成分有四类,其中蛋白胨提供的营养物质是______________________。
(2)微生物培养最基本的要求是无菌操作。液体培养基应选用的灭菌方法是_____________(填“湿热灭菌”或“干热灭菌”);与煮沸消毒法相比,巴氏消毒法的优点是_______________。
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平板培养后,第一次的划线上长满了菌,第二次划线的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。
答案 (1)氮源和维生素等 (2)湿热灭菌 达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 (3)接种环 接种环灼烧后未冷却,划线未从第一次划线的末端开始
层级二--课时提升练
题组一 培养基的配制
1.下列有关培养基的叙述,正确的是( )
A.培养基只能是天然物质
B.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌
C.固体培养基上可形成肉眼可见的菌落
D.培养基只能培养细菌
2.(2019·北京期中)已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是( )
A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D.培养该细菌的培养基中不需要添加氮源
3.(2020·四川成都月考)如表所示为某培养基的配方,下列叙述错误的是( )
成分
NaNO3
K2HPO4
MgSO4·7H2O
(CH2O)
蒸馏水
青霉素
含量
3
g
1
g
0.5
g
30
g
定容至1
000
mL
0.1万单位
A.根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基
B.该培养基不能用于培养大肠杆菌
C.根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
题组二 无菌技术
4.下列对于灭菌和消毒的理解,不正确的是( )
A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物,包括芽孢和孢子
B.消毒和灭菌的实质是相同的
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用的灭菌方法有干热灭菌、湿热灭菌、灼烧灭菌
5.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,实验中下列做法错误的是( )
A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经湿热灭菌后才能倒掉
C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉
D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭
6.防止外来杂菌的入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用煮沸消毒法或巴氏消毒法进行消毒
B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧灭菌
C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染
D.玻璃器皿和金属用具等可以采用干热灭菌
题组三 微生物的纯培养
7.下列有关平板划线操作的叙述错误的是( )
A.将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红
B.接种环在平板上随机划线时不要划破培养基
C.在蘸取菌液前后均要将盛有菌液的试管口通过火焰
D.平板冷却后倒置,放入恒温培养箱中培养
8.如图是平板划线示意图,划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是( )
A.操作前不用进行任何处理
B.划线操作必须在火焰上进行
C.在5区域中才可以得到所需菌落
D.在1、2、3、4、5次划线的前后都要对接种环灭菌
9.在平板划线法操作中,错误的是( )
A.将接种环放在酒精灯火焰上灼烧,直到接种环烧红
B.将烧红的接种环在酒精灯火焰旁边冷却
C.接种环在平板上的划线位置是随机的
D.在蘸取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰
1-9
CBDBC
BBDC
10.请回答下列与酵母菌的纯培养有关的问题:
(1)制备培养基:培养基在接种前要进行______________灭菌。
(2)接种和分离酵母菌:通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到单菌落,这种方法称为__________。
(3)讨论分析:
①纯化酵母菌时,__________(填“可以”或“不可以”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。
②用该方法分离酵母菌时,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线,并划线数次,其原因是___________________________________________________________
________________________________________________________________________。
③大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是_______________________________________________
________________________________________________________________________。
答案 (1)湿热 (2)平板划线法 (3)①可以 ②线条末端的细菌数量少,最终可得到单菌落 ③大肠杆菌无以核膜为界限的细胞核
层级三--综合加强练
11.下列有关微生物培养与应用的叙述,正确的是( )
A.同一种物质可能既作为碳源又作为氮源,所有碳源都能提供能量
B.接种前需对培养皿、接种环进行灭菌处理,对操作者的双手等进行消毒处理
C.培养不同的微生物,用同种成分的培养基即可
D.微生物生长不可缺少的微量有机物有氨基酸、维生素和蛋白胨等
12.高温灭菌的原理是( )
A.每种微生物生长的最适温度是一定的
B.微生物对于高温环境不适应
C.高温破坏了微生物的蛋白质等生物大分子,影响其生命活动
D.高温降低了环境中氧的浓度
13.下列常用的无菌操作中,错误的是( )
A.无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌
B.牛奶可用巴氏消毒法消毒
C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行
D.玻璃器皿(如吸管、培养皿)可用酒精擦拭进行灭菌
14.下列依次表示倒平板、接种的位置以及平板划线法接种的路径的示意图,其中错误的是( )
15.下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述,正确的是(不定项)( )
A.倒好的培养基和培养皿要进行干热灭菌
B.应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为防止微生物侵入培养基,要在酒精灯火焰旁进行操作
D.倒好培养基后,等培养基冷却凝固后再将平板倒过来放置
16.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上,加盖后,以不同的方式处理,并放置在不同温度的环境中,培养24小时后,所得结果如表:
编号
a
b
c
d
e
f
处理方法
接种大肠杆菌
接种大肠杆菌,并覆一吸有抗生素X的圆纸片
接种大肠杆菌,并覆一吸有抗生素Y的圆纸片
接种大肠杆菌,表面全被醋覆盖
接种大肠杆菌
无接种菌
温度
40
℃
40
℃
40
℃
40
℃
0
℃
40
℃
观察结果
全表面呈浑浊
纸片周围呈现一片清晰区,其余表面呈浑浊
全表面呈浑浊
全表面清晰
全表面清晰
全表面清晰
根据上述实验结果所作出的判断,正确的是(不定项)( )
A.编号a和f比较可知,有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊
B.根据编号b和c的观察结果,可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强
C.将编号e和a的结果比较可知,0
℃的环境不适合大肠杆菌生长
D.若揭开编号f的盖子,24小时后培养基表面会出现浑浊
11-16
BCDD;CD;ACD
17.为了检测饮用水中是否含有某种微生物,配制的培养基的配方如下,请分析回答下列问题(注:伊红美蓝是由两种染色剂组成的细胞染料):
蛋白胨
牛肉膏
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
10
g
5
g
5
g
5
g
2
g
0.4
g
0.065
g
1
000
mL
将培养基pH调至7.2
(1)该培养基所含碳源有____________________________,其功能是__________________。
(2)该培养基所含氮源有__________,其功能是________________________________。
(3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是________________。
(4)该细菌在同化作用上的代谢类型是__________型。
(5)该培养基可用来培养________(填“霉菌”或“细菌”)。
答案 (1)乳糖、蔗糖、牛肉膏 主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 (2)蛋白胨 主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 (3)水、无机盐(或K2HPO4) (4)异养 (5)细菌
解析 培养微生物需碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。由该培养基的pH为7.2,呈弱碱性,可判断该培养基可用来培养细菌。
18.在微生物连续培养时,一部分旧的液体培养基以一定的速度流出,同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中,连续培养多代,然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题:
(1)液体培养基中除了把葡萄糖作为________外,还应该含有__________________________。
(2)样品中还发现了CV101、CV103新品种,对其菌株的代谢差异进行分析发现,CV103对葡萄糖吸收率最高,代
谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明,CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长,据此作出的推测是_____________________________________________________________。
请设计并完成下列实验,来验证你的观点:
①配制______________________的固体培养基(A组)和不含碳源的固体培养基(B组);
②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间,并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在________________条件下进行。
③预期实验结果:___________________________________________。
答案 (1)碳源 氮源、水和无机盐等营养物质
(2)CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源 ①以醋酸盐为唯一碳源 ②无菌(或适宜的温度等)
③A组菌株生长(形成菌落),B组菌株不能生长(无菌落)