2020-2021学年高二生物人教版选择性三1.2.2 微生物的选择培养和计数分层训练（含答案）

第2节
第2课时
微生物的选择培养和计数分层训练
层级一--课堂基础练
1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为(　　)
A．鉴别培养基
B．加富培养基
C．选择培养基
D．基础培养基
2．(2020·四川广安月考)为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是(　　)
A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
3．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是(　　)
A．都只能用于固体培养基接种
B．都需要对菌液进行梯度稀释
C．接种培养后均可获得单菌落
D．接种工具使用后均需要灭菌
4．图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙所示是平板划线法的操作结果。下列相关叙述错误的是(　　)
A．图甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能涂布菌液
B．对于浓度较高的菌液，若图甲中的最高稀释倍数仅为102，则所得到的菌落不一定是由单一的细胞繁殖而成的
C．图乙所示培养皿中每个划线区域都可得到符合要求的菌落
D．图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端(除第一次划线外)
5．(2019·福建泉州月考)用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括(　　)
A．对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物
B．培养基的量与实验组必须绝对相同
C．所用培养基成分及pH大小与实验组完全一致
D．对照组和实验组培养基放在相同且适宜的条件下培养
1-5
CBBCB
6．(2020·黄冈重点中学调考)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类、数量繁多，某生物小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示，培养基成分如下表所示。请分析回答下列问题：
成分
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
含量
1.4
g
2.1
g
0.2
g
10
g
1
g
15
g
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的__________和__________，实验中需要振荡培养，目的是__________________________________________。
(3)转到固体培养基上时，常采用__________________法接种，获得单个菌落后继续筛选。
(4)下列材料或用具中，需要灭菌的是________；需要消毒的是________(填序号)。
①培养细菌用的培养基与培养皿
②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管
③实验操作者的双手
(5)在做分解尿素的细菌的分离与计数实验时，A同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填字母)。
①土样不同　②培养基被污染　③操作失误　④没有设置对照
A．①②③
B．②③④
C．①③④
D．①②④
答案　(1)目的菌　选择
　(2)尿素　葡萄糖　为目的菌提供氧气　(3)稀释涂布平板(或平板划线)　(4)①②　③　(5)A
解析　(1)培养基中加入尿素作为唯一氮源能够筛选出能分解尿素的细菌，此培养基属于选择培养基。(2)尿素为目的菌提供氮源，葡萄糖为目的菌提供碳源。振荡培养可为培养的目的菌提供必需的氧气。(5)A同学比其他同学得到的实验结果数据大，可能是由于选取的土样不同，培养基灭菌不彻底或操作过程中受到杂菌污染，也可能是由操作失误引起的，如稀释不够准确等。培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。
层级二--课时提升练
题组一　选择培养基和微生物的选择培养
1．(2020·山西大同月考)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)
选项
尿素
琼脂
葡萄糖
硝酸盐
A
＋
＋
＋
＋
B
－
－
－
－
C
＋
＋
＋
－
D
＋
－
－
＋
注：“＋”表示加入，“－”表示不加。
2．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时(　　)
A．葡萄糖在培养基中越多越好
B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮
C．尿素在培养基中越少越好
D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮
3．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出(　　)
①大肠杆菌　②霉菌　③放线菌　④固氮细菌
A．①②③
B．④②③
C．①③
D．①②④
4．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是(　　)
A．采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往多于实际的活菌数
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好
5．(2019·四川资阳期中)平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述中错误的是(　　)
A．平板划线法要求在培养基表面连续划线，且除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点
B．除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌
C．如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数
D．“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落
题组二　微生物的数量测定
6．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是(　　)
A．3号试管中样品液的稀释倍数为104倍
B．对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为1.7×108
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
7．(2019·河北清河中学段考)下列是关于测定土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是(　　)
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经湿热灭菌后倒平板
B．取1×104、1×105、1×106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1
mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37
℃恒温培养24～48
h
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
8．(2020·启东测试)下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(　　)
A．显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和
B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果
9．(2019·宜宾期中)下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是(　　)
A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后湿热灭菌
B．步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单菌落
C．步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的能力
1-9
CDBDB
CDCC
10．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
实验步骤：
(1)制备稀释倍数为1×102、1×103、1×104、1×105、1×106的系列稀释液。
(2)选用____________法接种样品。
(3)适宜温度下培养。
结果分析：
(1)某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的活菌数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2
mL)____________个。
(2)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量__________，因为______________
________________________________________________________________________。
(3)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_______________________________________________。
答案　实验步骤：(2)稀释涂布平板
结果分析：(1)1.17×108　(2)多　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落　(3)不能。因为不能排除杂菌来自培养基或培养过程
解析　实验步骤：(2)若要对大肠杆菌进行计数，常用稀释涂布平板法接种样品。
结果分析：(1)每毫升样品中活菌数＝平均菌落数/稀释液体积×稀释倍数，即234÷0.2×105＝1.17×108(个)。(2)由于菌落可能由两个或多个细胞连在一起生长而成，所以实际活菌数量比测得的数量多。(3)污染的原因可能是菌种不纯，也可能是培养基灭菌不彻底或接种过程操作不当。
层级三---综合加强练
11．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的土壤稀释液接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是(　　)
①加抗生素　②不加抗生素　③加氮源　④不加氮源　⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖
A．①③⑤
B．②④⑥
C．②④⑤
D．①④⑥
12．(2020·荆州中学期末)下列有关微生物分离和培养的叙述，错误的是(　　)
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法
C．分离土壤中不同的微生物，需采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
13．下列有关稀释涂布平板法操作的叙述，不正确的是(　　)
A．若稀释梯度以10倍为单位，当用移液管取1
mL原始菌液进行稀释时，其余试管内的无菌水应为9
mL
B．每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀
C．在涂布过程中，每次变换涂布的方向和位置时，应对涂布器进行灼烧灭菌
D．将菌液涂布在培养基表面时，为使涂布均匀，应及时转动培养皿
14．下列有关稀释涂布平板法的说法中，错误的是(　　)
A．用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀
B．移液管需经过灭菌
C．试管口与移液管应在离火焰1～2
cm处
D．涂布时可转动涂布器，使菌液涂布均匀
15．下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关的叙述中不正确的是(不定项)(　　)
A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基
B．图中Ⅰ、Ⅱ过程实现了对目标微生物的稀释
C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数
D．在⑤处培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为自养型
16．下列有关微生物分离、培养和计数的叙述，正确的是(不定项)(　　)
A．分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养
B．测定土壤中细菌数量时，一般选用1×104～1×106倍的稀释液
C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数
D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
11-16
CACD
;BD;BD
17．塑料袋自然降解需20～1
000年不等，某生物小组依照下列实验方案从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月(如下图)。据此，请回答下列问题：
(1)Ⅰ号培养基属于________培养基(按功能分)，其中除水、无机盐、氮源外，还应添加________粉作为唯一碳源。
(2)图中“……”表示对土壤悬浮液进行充分地______________，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在Ⅱ号培养基表面形成单个________。
(3)Ⅱ号培养基上采用的接种方法为______________法，一般还需在Ⅱ号培养基上添加________等凝固剂。
(4)在培养过程中，可设置一个接种________的培养基作为对照组，证明培养过程中没有杂菌污染；可设置一个______________培养基作为对照组，说明Ⅰ号培养基的作用。
答案　(1)选择　聚乙烯塑料　(2)稀释　菌落　(3)稀释涂布平板　琼脂　(4)无菌水　牛肉膏蛋白胨(或含普通碳源的)
18．(2020·山东烟台一模)分解尿素的细菌广泛存在于农田等土壤中，某生物实验小组尝试对分解尿素的细菌进行分离与计数，请回答下列问题：
(1)分解尿素的细菌含有的酶是________________，为筛选出能分解尿素的细菌，配制培养基时应以__________作为唯一氮源，因此该培养基属于____________培养基。
(2)常用来统计样品中活菌数目的方法是____________________________________。
(3)该小组对分解尿素的细菌进行计数时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是__________________________。将1
mL样液稀释104倍，在3个平板上分别涂布0.1
mL稀释液；经适当培养后，统计活菌数目，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取______________________作为结果。如果3个平板的菌落数分别为39、42和45，据此可得出每毫升样液中活菌数为________。
答案　(1)脲酶　尿素　选择　(2)稀释涂布平板法　(3)检验平板灭菌是否彻底　菌落数目稳定时的记录　4.2×106
解析　(1)分解尿素的细菌含有脲酶，要筛选出能分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的选择培养基。(2)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物计数。(3)该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，用于检测平板灭菌是否彻底。经适当培养后，统计活菌数目，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。3个平板的菌落分别为39、42和45，据此可得出每毫升样液中活菌数＝(39＋42＋45)÷3÷0.1×104＝4.2×106。