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人教版（2019版）选择性必修三1.2.1 微生物的基本培养技术同步练习
一、单选题
1．（2021高三上·疏附期中）分离出的微生物需要用鉴别培养基进行鉴定，下列不是鉴别培养基的是（ ）
A．加入酚红的培养基 B．加入刚果红的培养基
C．加入伊红—美蓝的培养基 D．加入纤维素粉的培养基
2．（2021·成都模拟）防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ）
A．实验室里可用紫外线或化学药物对物体表面或空气进行消毒
B．实验室里不可吃东西，离开时一定要洗手以防被微生物感染
C．接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌
D．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境
3．（2021高二下·自贡期末）微生物培养过程中消毒和灭菌环节非常重要，以下灭菌或消毒方法不正确的是（ ）
选项 A B C D
仪器或试剂 固体培养基 接种环（针） 菌种稀释液 滴管
消毒或灭菌方法 高压蒸汽灭菌 火焰灼烧 紫外光照射 酒精消毒
A．A
B．B
C．C
D．D
4．（2021高二下·自贡期末）下列有关培养基配制或使用中的先后顺序，错误的是（ ）
A．先调pH后灭菌 B．先灭菌后加特殊营养物质
C．先灭菌后倒平板 D．培养微生物时将平板倒置
5．（2021高二下·南充期末）下列关于无菌技术的叙述，错误的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒
B．对微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C．使用高压蒸汽灭菌时，到灭菌时间后，先打开排气阀再切断热源
D．为避免环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
6．（2021高二下·乐山期末）下列关于消毒和灭菌的叙述，正确的是（ ）
A．选择消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定
B．通过消毒或灭菌可以杀灭所有杂菌、孢子和芽孢等
C．对牛奶灭菌会破坏其营养成分因而只能采用煮沸消毒法
D．对玻璃器皿、接种环、操作者的衣着和双手等应进行灭菌处理
7．（2021高三上·辽宁开学考）下列有关无菌技术的说法，其中正确的是（ ）
①配制培养基和接种时，均需在酒精灯火焰旁操作；②接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒；③可以通过化学消毒法处理水源，还可通过生物消毒法净化污水④培养基需经高压蒸汽灭菌后方可调节pH；⑤高压蒸汽灭菌是在压力为101kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌的
A．①③ B．②⑤ C．②④ D．②③
8．（2021高二下·舟山期末）下列关于无菌操作的叙述，正确的是（ ）
A．制备培养基时，灭菌后需调节pH
B．加入培养基中的指示剂不需要灭菌
C．在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风
D．对动物培养基中的血清进行过滤除菌
9．（2021高二下·吉林期中）采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ）
A．接种环、培养皿、培养基、接种室
B．培养皿、接种环、培养基、接种箱
C．培养基、培养皿、接种环、接种箱
D．培养皿、接种箱、培养基、双手
10．（2021高二下·运城期中）据报道，在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动，在该餐馆采集样本，并进行培养，检测鉴定，最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒，大肠杆菌等多种细菌数量严重超标。据此判断，工作人员选用的培养基按功能分，应属于（ ）
A．选择培养基 B．液体培养基 C．固体培养基 D．鉴别培养基
11．（2021高二下·宣城期中）如图是酸奶制作的简易过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．用高压蒸汽灭菌锅对发酵瓶和鲜奶进行无菌处理
B．乳酸发酵菌种和醋酸发酵菌种都属于原核生物
C．保温发酵过程中要适时打开发酵瓶盖放出气体
D．酸奶发酵的适宜温度比果醋发酵的适宜温度要低
12．（2021高二下·东莞月考）下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（ ）
A．利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B．配制培养基时的步骤是计算、称量、溶化、灭菌，倒平板，再根据微生物的种类调整培养基的pH
C．实验者的双手和超净工作台都需要用紫外线消毒
D．适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化
13．（2021高二下·北京月考）下表是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，据表分析“血琼脂培养基”属于( )
蛋白胨 10 g
牛肉粉 3 g
氧化钠 5 g
脱纤维羊血 (含多种生长因子) 50 mL
琼脂 15 g
去离子水 1 000 mL
A．鉴别培养基 B．选择培养基 C．固体培养基 D．液体培养基
14．（2021高二下·北京月考）培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是( )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
15．（2021高二下·北京月考）将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（ ）
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基是否被杂菌污染
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
16．（2021高二下·北京月考）下列有关常见无菌操作的叙述，错误的是( )
A．用酒精擦拭双手
B．用氯气对水源消毒
C．实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭灭菌
17．（2021·宁波月考）新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯，提高公共卫生安全意识。下列相关叙述，错误的是（ ）
A．发现新冠肺炎病人及时隔离可有效预防疾病传播
B．戴口罩、勤洗手可降低感染风险
C．用酒精擦拭桌面的目的是防止新冠病毒在体外增殖
D．煮沸可杀死新冠病毒
18．（2021高二下·运城月考）下列关于高压蒸汽灭菌法的说法，错误的是（ ）
A．高压蒸汽灭菌法可杀灭酒精消毒无法杀灭的微生物
B．灭菌锅内的物品太多，摆放太挤，会降低灭菌效果
C．接通电源后，立即打开排气阀将锅内的冷空气排出
D．灭菌结束后，应立即关闭电源，并打开排气阀排气
二、综合题
19．在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题。
（1）在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒, 其原因是紫外线能 。在照射前,适量喷洒 ,可强化消毒效果。
（3）水厂供应的自来水通常是经过 (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
（4）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。
20．（2020·保定模拟）酿酒酵母普遍应用于白酒、红酒、啤酒和果汁饮料的生产，其生物合成过程会形成多种多样的代谢产物，从而对食品风味产生重要影响。以下是从酒曲样品中分离出酵母菌的过程：
处理酒曲样品→过滤→系列稀释至10-2—10-7→选择适宜稀释度→涂布固体培养基→28℃下培养48h→挑取典型菌落→镜检→菌种鉴定→菌种保藏。请回答下列有关问题：
（1）制备固体培养基时，采用 法灭菌15min~20min。
（2）通过稀释涂布平板法可以统计样品中活菌的数目。为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成 。涂布平板操作时应在 附近进行。
（3）菌种鉴定后要进行菌种保藏，具体方法是：将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法保存的时间不长，菌种容易 。若想长期保藏，可以采用 的方法，放在 的冷冻箱中保存。
（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在 ，常用 检测发酵后是否有酒精产生。
答案解析部分
1．【答案】D
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，所以加入酚红的培养基属于鉴别培养基，A正确；
B、纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使菌落周围出现无色的透明圈，所以加入刚果红的培养基属于鉴别培养基，B正确；
C、伊红-美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。所以加入伊红-美蓝的培养基属于鉴别培养基，C正确；
D、只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌能够生存，其他微生物不能生存，可以筛选纤维素分解菌，属于选择培养基，D错误。
故答案为：D。
【分析】培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氨源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
2．【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒等，实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确；
B、实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，B正确；
C、接种环、接种针等金属用具，应在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，C错误；
D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。
故答案为：C。
【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)的手段，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
3．【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、固体培养基应该用高压蒸汽灭菌，A正确；
B、接种环（针）应该采用灼烧灭菌，B正确；
C、菌种稀释液不能用紫外光照射，这样会导致目的菌死亡，C错误；
D、滴管应该用酒精消毒，D正确。
故答案为：C。
【分析】常见的灭菌方法：高压蒸汽灭菌法、灼烧法、紫外消毒法，要根据灭菌或消毒的对象选择正确的方法。
4．【答案】B
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、制备培养基需要先调节pH再进行灭菌，因为调pH可能会造成污染，A正确；
B、特殊营养物质例如氨基酸，需要加入培养基后再进行灭菌，B错误；
C、灭菌后将培养基取出，待不烫手时倒平板，C正确；
D、为防止培养皿盖上的冷凝水对培养基造成污染，所以培养微生物时要将平板倒置，D正确。
故答案为：B。
【分析】 培养基配制 过程：计算——称量——溶解——调pH——灭菌——倒平板。养微生物时要将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的冷凝水对培养基造成污染。
5．【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、为避免杂菌污染，对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B、传统生物制造利用微生物生产产品时，需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；
C、高压蒸汽灭菌到灭菌时间后，切断电源让灭菌锅内温度自然下降，待压力表压力降为零才能打开排气阀，C错误；
D、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，D正确。
故答案为：C。
【分析】实验室常用的消毒和灭菌方法的比较：
（1）消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高温的液体，如牛奶）、化学药剂消毒法（如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等）、紫外线消毒法（接种室、操作台）；
（2）灭菌：灼烧灭菌（接种工具）、干热灭菌（玻璃器皿、金属用具）、高压蒸汽灭菌（培养基及容器）
6．【答案】A
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】灭菌是将处理物中的一切生物全部杀灭，消毒是将物理中的微生物减少到不再影响实验对象的程度，故答案为：消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定，A选项正确；只有灭菌才能杀灭所有杂菌、孢子和芽孢等，B选项错误；牛奶中的蛋白质不耐高温，故不能煮沸消毒，应当采用巴氏消毒法，C选项错误；对玻璃器皿和接种环应采用灭菌处理，对操作者的衣着和双手应进行消毒处理，D选项错误。
【分析】1、常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
2、消毒与灭菌的区别：
概念常用方法适用对象7．【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】①配制培养基时，不需在酒精灯火焰旁操作，①错误；
②接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，②正确；
③可以使用化学药剂即通过化学消毒法处理水源，还可用微生物分解水体的有机物，即通过生物消毒法净化污水，③正确；
④培养基需先调节pH后经高压蒸汽灭菌，④错误；
⑤高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌的，⑤错误。
故答案为：D。
【分析】常用的消毒、灭菌方法：1.干热灭菌法：例，火焰灭菌，接种环等的灭菌。2.湿热灭菌：巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌（高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌）3.放射线灭菌。接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，培养基的配制时通常煮沸。
8．【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、制备培养基时，先调节pH再灭菌，A错误；
B、指示剂可能混有微生物，故加入培养基前需要灭菌，B错误；
C、在超净台操作前需要打开紫外灯，但在超净台操作时不能打开紫外灯，C错误；
D、避免灭菌的强烈的理化手段破坏培养液中血清等物质的活性，所以对动物培养基中的血清进行过滤除菌，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
2、具体操作：
（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
9．【答案】B
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】培养皿在使用前需保持干燥，需要用干热灭菌；
接种环属于接种用的金属工具，需要用灼烧灭菌；
培养基应该用高压蒸汽灭菌；
接种室、接种箱需要用紫外线照射灭菌；
双手可以用医用酒精消毒。
综上所述，B符合题意，ACD不符合题意。
故答案为：B。
【分析】常见灭菌方法的应用：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
10．【答案】D
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基，根据题意，食品卫生监督管理局的工作人员通过培养，使大肠杆菌等多种细菌数目增多，最后确定其中含有大肠杆菌等菌种，按功能分，该培养基属于鉴别培养基。
故答案为：D。
【分析】培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基；按照培养基的状态分可以分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基；按照培养基成分分可以分为天然培养基和合成培养基。
11．【答案】B
【考点】果酒果醋的制作；灭菌技术
【解析】【解答】A、玻璃器皿一般用干热灭菌法进行灭菌，A错误；
B、乳酸发酵菌种是乳酸菌，醋酸发酵菌种是醋酸杆菌，乳酸菌和醋酸菌都是原核生物，B正确；
C、乳酸发酵过程中没有气体产生，不需要适时打开发酵瓶盖放出气体，C错误；
D、果醋发酵的适宜温度范围为30~35℃，比酸奶发酵的温度要低，D错误。
故答案为：B。
【分析】制备酸奶的菌种是乳酸菌，条件是38-42℃无氧条件。灭菌是指利用强烈的理化因素杀灭物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子；高温杀菌可以破坏蛋白质、核酸等高分子化合物的活性，可分为灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；细菌培养过程中接种针、接种环等金属用具采用火焰灼烧灭菌，培养基用高压蒸气灭菌，玻璃器皿用干热灭菌。
12．【答案】D
【考点】培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】A.尿素固体培养基能抑制或阻止其他微生物生长，但不会迅速杀死其他微生物，A不符合题意；
B.配制培养基的步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，B不符合题意；
C.实验者的双手不能用紫外线消毒，可以用酒精擦拭消毒，C不符合题意；
D.醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，因此适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.消毒的方法
（1）煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
（2）巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min9(牛奶）
（3）化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源（酒精擦拭双手
（4）紫外线消毒（工作台、接种室）(能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构）
2.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1.计算：（根据微生物生长时对营养物质的需求）
2.称量：准确称取各种成分，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。
3.溶化：先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，再加入琼脂，不断用玻璃棒搅拌，原因：防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。待溶解后，加自来水定溶至100mL。（熔化后灭菌前应该调节PH)
4.灭菌：将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），连同培养皿（3～5套，用几层报纸包好）一起放到高压蒸汽灭菌锅内灭菌。
5.倒平板：待培养基冷却到50℃左右时倒平板。
13．【答案】C
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】该培养基没有加入特殊的营养物质或化学物质，不属于鉴别培养基和选择培养基。该培养基中有琼脂所以应该是固体培养基，C符合题意。
故答案为：C
【分析】1.选择培养基：根据某些微生物的特殊营养需求或对某些物质的敏感性，加入相应特殊的营养物质或化学物质，从众多微生物中分离所需的微生物。
2.鉴别培养基：在培养基中加入某种化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化。
3.液体培养基：液体状态的基质，为液体培养基。
4.固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂琼脂，可制成固体培养基。
14．【答案】A
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿用干热灭菌；接种环用灼烧灭菌；实验操作者的双手用化学消毒；空气用紫外线消毒；牛奶用巴氏消毒，A符合题意。
故答案为：A
【分析】1.常见消毒方法
（1）巴氏消毒法：适用于牛奶、啤酒等。
（2）煮沸消毒法
（3）化学药物消毒法：①酒精消毒（手）②氯气消毒（水源）
（4）紫外线消毒：接种室、接种箱、超净工作台
2.常见灭菌方法
（1）灼烧灭菌：接种环、接种针、接种钩、试管口等。
（2）干热灭菌：吸管、培养皿、金属用具
（3）高压蒸汽灭菌：培养基
15．【答案】B
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是对比分析培养基是否被杂菌污染，B符合题意。
故答案为：B
【分析】检验培养基的制作是否合格：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱中，培养12h和24h，分别观察记录，如果未接种的培养基无菌落生长，说明培养基的制备合格的，如果未接种的培养基有菌落生长，说明培养基的制备是不合格的，需要重新制备。
16．【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A.用酒精擦拭双手，A不符合题意；
B.用氯气对水源消毒，B不符合题意；
C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C不符合题意；
D.玻璃器皿（吸管、培养皿）可用干热灭菌，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.无菌操作范围
（1）对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒。
（2）对培养器皿、接种用具、培养基等进行灭菌。
（3）在酒精灯旁操作。
（4）已灭菌的材料与周围的物品分开。
2.常见消毒方法
（1）巴氏消毒法：适用于牛奶、啤酒等。
（2）煮沸消毒法
（3）化学药物消毒法：①酒精消毒（手）②氯气消毒（水源）
（4）紫外线消毒：接种室、接种箱、超净工作台
3.常见灭菌方法
（1）灼烧灭菌：接种环、接种针、接种钩、试管口等。
（2）干热灭菌：吸管、培养皿、金属用具
（3）高压蒸汽灭菌：培养基
17．【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、发现新冠肺炎病人及时隔离可以有效阻断病毒的传播途径，能有效预防疾病的传播，A正确；
B、戴口罩和勤洗手可以阻断病毒的传播途径，降低感染风险，B正确；
C、病毒无细胞结构，只能寄生于活细胞中生活，不能在体外增殖，C错误；
D、煮沸条件下可以使病毒的蛋白质失活而杀死病毒，D正确。
故答案为：C。
【分析】 新冠肺炎由新冠状病毒引起的急性呼吸道传染病。该传染病的传播途径有直接传播、气溶胶传播和接触传播等。由于伤害性极大，传染性极强，需要采取必要的防护措施、隔离措施等预防和治疗新冠肺炎。该病毒虽然存活能力极强，可以在非细胞生物上停活一段时间，但是需要寄生在活的宿主细胞内才能生存和繁殖。
18．【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、酒精消毒只能杀死物体表面的微生物，高压蒸汽灭菌法可以杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、灭菌锅内物品的摆放不能过挤，以利于蒸汽与物品充分接触，B正确；
C、接通电源加热后，先打开排气阀，以排尽灭菌锅内的冷空气，否则锅内温度达不到规定温度，C正确；
D、灭菌结束后，关闭电源，应使其自然降温，待压力表指针降为0后，打开灭菌锅盖，D错误。
故答案为：D。
【分析】 高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽孢、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。
19．【答案】（1）可以
（2）破坏DNA结构；消毒液
（3）氯气
（4）未将锅内冷空气排尽
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】本题考查的是微生物实验室培养的消毒和灭菌技术。实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的方法灭菌。紫外线能破坏微生物的DNA,进而杀死物体表面或空气中的微生物,照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可加强消毒效果。自来水通常是用氯气消毒的,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微生物。用高压蒸汽灭菌法灭菌,必须把锅内的冷空气彻底排除后才能达到设定的压力和相应的温度。
【分析】 1、干热灭菌的温度较高，适用于器皿、粉末、油脂的灭菌和金属的灭菌； 2、紫外线可能使DNA碱基发生替换、缺失或者增添，导致DNA结构改变； 3、氯气溶解于水产生次氯酸根离子，具有较强氧化性，使细菌表面蛋白质变性； 4、使用高压蒸汽灭菌时，培养基应在高压蒸汽灭菌锅内灭菌,压力为100 kPa,温度为121 ℃,时间为15~30 min。如果棉塞上沾有培养基,则很容易造成杂菌污染,应将此试管废弃不用。
20．【答案】（1）高压蒸汽灭菌
（2）单个菌落；酒精灯火焰
（3）被污染或产生变异；甘油管藏；-20℃
（4）18-25℃；重铬酸钾
【考点】果酒果醋的制作；培养基概述及其分类
【解析】【解答】（1）对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌。（2）通过稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目时，为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成单菌落。涂布平板操作时为防止杂菌污染，应在酒精灯火焰附近进行。（3）将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法是临时保藏法，其保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。若想长期保藏，可以采用甘油管藏的方法，放在-20℃的冷冻箱中保存。（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在18-25℃，常用酸性重铬酸钾检测发酵后是否有酒精产生。
【分析】实验室常用灭菌方法：1、灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。2、干热灭菌：将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2h可达到灭菌目的。能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以用这种方法灭菌。3、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min，如培养细菌用的培养基与培养皿。
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人教版（2019版）选择性必修三1.2.1 微生物的基本培养技术同步练习
一、单选题
1．（2021高三上·疏附期中）分离出的微生物需要用鉴别培养基进行鉴定，下列不是鉴别培养基的是（ ）
A．加入酚红的培养基 B．加入刚果红的培养基
C．加入伊红—美蓝的培养基 D．加入纤维素粉的培养基
【答案】D
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，所以加入酚红的培养基属于鉴别培养基，A正确；
B、纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使菌落周围出现无色的透明圈，所以加入刚果红的培养基属于鉴别培养基，B正确；
C、伊红-美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。所以加入伊红-美蓝的培养基属于鉴别培养基，C正确；
D、只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌能够生存，其他微生物不能生存，可以筛选纤维素分解菌，属于选择培养基，D错误。
故答案为：D。
【分析】培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氨源、生长因子、无机盐和水。培养基按物理性质可分为固体培养基和液体培养基，液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基；固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数，液态培养基常用于扩大化生产，观察细菌运动。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分为选择培养基、鉴别培养基。
2．（2021·成都模拟）防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ）
A．实验室里可用紫外线或化学药物对物体表面或空气进行消毒
B．实验室里不可吃东西，离开时一定要洗手以防被微生物感染
C．接种环、接种针等用具应在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌
D．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境
【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒等，实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确；
B、实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，B正确；
C、接种环、接种针等金属用具，应在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，C错误；
D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。
故答案为：C。
【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)的手段，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
3．（2021高二下·自贡期末）微生物培养过程中消毒和灭菌环节非常重要，以下灭菌或消毒方法不正确的是（ ）
选项 A B C D
仪器或试剂 固体培养基 接种环（针） 菌种稀释液 滴管
消毒或灭菌方法 高压蒸汽灭菌 火焰灼烧 紫外光照射 酒精消毒
A．A
B．B
C．C
D．D
【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、固体培养基应该用高压蒸汽灭菌，A正确；
B、接种环（针）应该采用灼烧灭菌，B正确；
C、菌种稀释液不能用紫外光照射，这样会导致目的菌死亡，C错误；
D、滴管应该用酒精消毒，D正确。
故答案为：C。
【分析】常见的灭菌方法：高压蒸汽灭菌法、灼烧法、紫外消毒法，要根据灭菌或消毒的对象选择正确的方法。
4．（2021高二下·自贡期末）下列有关培养基配制或使用中的先后顺序，错误的是（ ）
A．先调pH后灭菌 B．先灭菌后加特殊营养物质
C．先灭菌后倒平板 D．培养微生物时将平板倒置
【答案】B
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】A、制备培养基需要先调节pH再进行灭菌，因为调pH可能会造成污染，A正确；
B、特殊营养物质例如氨基酸，需要加入培养基后再进行灭菌，B错误；
C、灭菌后将培养基取出，待不烫手时倒平板，C正确；
D、为防止培养皿盖上的冷凝水对培养基造成污染，所以培养微生物时要将平板倒置，D正确。
故答案为：B。
【分析】 培养基配制 过程：计算——称量——溶解——调pH——灭菌——倒平板。养微生物时要将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的冷凝水对培养基造成污染。
5．（2021高二下·南充期末）下列关于无菌技术的叙述，错误的是（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒
B．对微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C．使用高压蒸汽灭菌时，到灭菌时间后，先打开排气阀再切断热源
D．为避免环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、为避免杂菌污染，对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B、传统生物制造利用微生物生产产品时，需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；
C、高压蒸汽灭菌到灭菌时间后，切断电源让灭菌锅内温度自然下降，待压力表压力降为零才能打开排气阀，C错误；
D、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，D正确。
故答案为：C。
【分析】实验室常用的消毒和灭菌方法的比较：
（1）消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高温的液体，如牛奶）、化学药剂消毒法（如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等）、紫外线消毒法（接种室、操作台）；
（2）灭菌：灼烧灭菌（接种工具）、干热灭菌（玻璃器皿、金属用具）、高压蒸汽灭菌（培养基及容器）
6．（2021高二下·乐山期末）下列关于消毒和灭菌的叙述，正确的是（ ）
A．选择消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定
B．通过消毒或灭菌可以杀灭所有杂菌、孢子和芽孢等
C．对牛奶灭菌会破坏其营养成分因而只能采用煮沸消毒法
D．对玻璃器皿、接种环、操作者的衣着和双手等应进行灭菌处理
【答案】A
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】灭菌是将处理物中的一切生物全部杀灭，消毒是将物理中的微生物减少到不再影响实验对象的程度，故答案为：消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定，A选项正确；只有灭菌才能杀灭所有杂菌、孢子和芽孢等，B选项错误；牛奶中的蛋白质不耐高温，故不能煮沸消毒，应当采用巴氏消毒法，C选项错误；对玻璃器皿和接种环应采用灭菌处理，对操作者的衣着和双手应进行消毒处理，D选项错误。
【分析】1、常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
2、消毒与灭菌的区别：
概念常用方法适用对象7．（2021高三上·辽宁开学考）下列有关无菌技术的说法，其中正确的是（ ）
①配制培养基和接种时，均需在酒精灯火焰旁操作；②接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒；③可以通过化学消毒法处理水源，还可通过生物消毒法净化污水④培养基需经高压蒸汽灭菌后方可调节pH；⑤高压蒸汽灭菌是在压力为101kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌的
A．①③ B．②⑤ C．②④ D．②③
【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】①配制培养基时，不需在酒精灯火焰旁操作，①错误；
②接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，②正确；
③可以使用化学药剂即通过化学消毒法处理水源，还可用微生物分解水体的有机物，即通过生物消毒法净化污水，③正确；
④培养基需先调节pH后经高压蒸汽灭菌，④错误；
⑤高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌的，⑤错误。
故答案为：D。
【分析】常用的消毒、灭菌方法：1.干热灭菌法：例，火焰灭菌，接种环等的灭菌。2.湿热灭菌：巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌（高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa，温度为121℃的条件下维持15-30min来灭菌）3.放射线灭菌。接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，培养基的配制时通常煮沸。
8．（2021高二下·舟山期末）下列关于无菌操作的叙述，正确的是（ ）
A．制备培养基时，灭菌后需调节pH
B．加入培养基中的指示剂不需要灭菌
C．在超净台操作时需打开紫外灯和过滤风
D．对动物培养基中的血清进行过滤除菌
【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、制备培养基时，先调节pH再灭菌，A错误；
B、指示剂可能混有微生物，故加入培养基前需要灭菌，B错误；
C、在超净台操作前需要打开紫外灯，但在超净台操作时不能打开紫外灯，C错误；
D、避免灭菌的强烈的理化手段破坏培养液中血清等物质的活性，所以对动物培养基中的血清进行过滤除菌，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
2、具体操作：
（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
9．（2021高二下·吉林期中）采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌（ ）
A．接种环、培养皿、培养基、接种室
B．培养皿、接种环、培养基、接种箱
C．培养基、培养皿、接种环、接种箱
D．培养皿、接种箱、培养基、双手
【答案】B
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】培养皿在使用前需保持干燥，需要用干热灭菌；
接种环属于接种用的金属工具，需要用灼烧灭菌；
培养基应该用高压蒸汽灭菌；
接种室、接种箱需要用紫外线照射灭菌；
双手可以用医用酒精消毒。
综上所述，B符合题意，ACD不符合题意。
故答案为：B。
【分析】常见灭菌方法的应用：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
10．（2021高二下·运城期中）据报道，在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动，在该餐馆采集样本，并进行培养，检测鉴定，最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒，大肠杆菌等多种细菌数量严重超标。据此判断，工作人员选用的培养基按功能分，应属于（ ）
A．选择培养基 B．液体培养基 C．固体培养基 D．鉴别培养基
【答案】D
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基，根据题意，食品卫生监督管理局的工作人员通过培养，使大肠杆菌等多种细菌数目增多，最后确定其中含有大肠杆菌等菌种，按功能分，该培养基属于鉴别培养基。
故答案为：D。
【分析】培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基；按照培养基的状态分可以分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基；按照培养基成分分可以分为天然培养基和合成培养基。
11．（2021高二下·宣城期中）如图是酸奶制作的简易过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．用高压蒸汽灭菌锅对发酵瓶和鲜奶进行无菌处理
B．乳酸发酵菌种和醋酸发酵菌种都属于原核生物
C．保温发酵过程中要适时打开发酵瓶盖放出气体
D．酸奶发酵的适宜温度比果醋发酵的适宜温度要低
【答案】B
【考点】果酒果醋的制作；灭菌技术
【解析】【解答】A、玻璃器皿一般用干热灭菌法进行灭菌，A错误；
B、乳酸发酵菌种是乳酸菌，醋酸发酵菌种是醋酸杆菌，乳酸菌和醋酸菌都是原核生物，B正确；
C、乳酸发酵过程中没有气体产生，不需要适时打开发酵瓶盖放出气体，C错误；
D、果醋发酵的适宜温度范围为30~35℃，比酸奶发酵的温度要低，D错误。
故答案为：B。
【分析】制备酸奶的菌种是乳酸菌，条件是38-42℃无氧条件。灭菌是指利用强烈的理化因素杀灭物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子；高温杀菌可以破坏蛋白质、核酸等高分子化合物的活性，可分为灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；细菌培养过程中接种针、接种环等金属用具采用火焰灼烧灭菌，培养基用高压蒸气灭菌，玻璃器皿用干热灭菌。
12．（2021高二下·东莞月考）下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（ ）
A．利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B．配制培养基时的步骤是计算、称量、溶化、灭菌，倒平板，再根据微生物的种类调整培养基的pH
C．实验者的双手和超净工作台都需要用紫外线消毒
D．适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化
【答案】D
【考点】培养基概述及其分类；灭菌技术
【解析】【解答】A.尿素固体培养基能抑制或阻止其他微生物生长，但不会迅速杀死其他微生物，A不符合题意；
B.配制培养基的步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，B不符合题意；
C.实验者的双手不能用紫外线消毒，可以用酒精擦拭消毒，C不符合题意；
D.醋化醋杆菌在有氧条件下利用酒精产生醋酸，因此适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.消毒的方法
（1）煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
（2）巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min9(牛奶）
（3）化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源（酒精擦拭双手
（4）紫外线消毒（工作台、接种室）(能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构）
2.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1.计算：（根据微生物生长时对营养物质的需求）
2.称量：准确称取各种成分，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。
3.溶化：先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，再加入琼脂，不断用玻璃棒搅拌，原因：防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。待溶解后，加自来水定溶至100mL。（熔化后灭菌前应该调节PH)
4.灭菌：将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），连同培养皿（3～5套，用几层报纸包好）一起放到高压蒸汽灭菌锅内灭菌。
5.倒平板：待培养基冷却到50℃左右时倒平板。
13．（2021高二下·北京月考）下表是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，据表分析“血琼脂培养基”属于( )
蛋白胨 10 g
牛肉粉 3 g
氧化钠 5 g
脱纤维羊血 (含多种生长因子) 50 mL
琼脂 15 g
去离子水 1 000 mL
A．鉴别培养基 B．选择培养基 C．固体培养基 D．液体培养基
【答案】C
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】该培养基没有加入特殊的营养物质或化学物质，不属于鉴别培养基和选择培养基。该培养基中有琼脂所以应该是固体培养基，C符合题意。
故答案为：C
【分析】1.选择培养基：根据某些微生物的特殊营养需求或对某些物质的敏感性，加入相应特殊的营养物质或化学物质，从众多微生物中分离所需的微生物。
2.鉴别培养基：在培养基中加入某种化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化。
3.液体培养基：液体状态的基质，为液体培养基。
4.固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂琼脂，可制成固体培养基。
14．（2021高二下·北京月考）培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是( )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
【答案】A
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿用干热灭菌；接种环用灼烧灭菌；实验操作者的双手用化学消毒；空气用紫外线消毒；牛奶用巴氏消毒，A符合题意。
故答案为：A
【分析】1.常见消毒方法
（1）巴氏消毒法：适用于牛奶、啤酒等。
（2）煮沸消毒法
（3）化学药物消毒法：①酒精消毒（手）②氯气消毒（水源）
（4）紫外线消毒：接种室、接种箱、超净工作台
2.常见灭菌方法
（1）灼烧灭菌：接种环、接种针、接种钩、试管口等。
（2）干热灭菌：吸管、培养皿、金属用具
（3）高压蒸汽灭菌：培养基
15．（2021高二下·北京月考）将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（ ）
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基是否被杂菌污染
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
【答案】B
【考点】培养基概述及其分类
【解析】【解答】将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是对比分析培养基是否被杂菌污染，B符合题意。
故答案为：B
【分析】检验培养基的制作是否合格：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱中，培养12h和24h，分别观察记录，如果未接种的培养基无菌落生长，说明培养基的制备合格的，如果未接种的培养基有菌落生长，说明培养基的制备是不合格的，需要重新制备。
16．（2021高二下·北京月考）下列有关常见无菌操作的叙述，错误的是( )
A．用酒精擦拭双手
B．用氯气对水源消毒
C．实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭灭菌
【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A.用酒精擦拭双手，A不符合题意；
B.用氯气对水源消毒，B不符合题意；
C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C不符合题意；
D.玻璃器皿（吸管、培养皿）可用干热灭菌，D符合题意。
故答案为：D
【分析】1.无菌操作范围
（1）对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒。
（2）对培养器皿、接种用具、培养基等进行灭菌。
（3）在酒精灯旁操作。
（4）已灭菌的材料与周围的物品分开。
2.常见消毒方法
（1）巴氏消毒法：适用于牛奶、啤酒等。
（2）煮沸消毒法
（3）化学药物消毒法：①酒精消毒（手）②氯气消毒（水源）
（4）紫外线消毒：接种室、接种箱、超净工作台
3.常见灭菌方法
（1）灼烧灭菌：接种环、接种针、接种钩、试管口等。
（2）干热灭菌：吸管、培养皿、金属用具
（3）高压蒸汽灭菌：培养基
17．（2021·宁波月考）新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯，提高公共卫生安全意识。下列相关叙述，错误的是（ ）
A．发现新冠肺炎病人及时隔离可有效预防疾病传播
B．戴口罩、勤洗手可降低感染风险
C．用酒精擦拭桌面的目的是防止新冠病毒在体外增殖
D．煮沸可杀死新冠病毒
【答案】C
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、发现新冠肺炎病人及时隔离可以有效阻断病毒的传播途径，能有效预防疾病的传播，A正确；
B、戴口罩和勤洗手可以阻断病毒的传播途径，降低感染风险，B正确；
C、病毒无细胞结构，只能寄生于活细胞中生活，不能在体外增殖，C错误；
D、煮沸条件下可以使病毒的蛋白质失活而杀死病毒，D正确。
故答案为：C。
【分析】 新冠肺炎由新冠状病毒引起的急性呼吸道传染病。该传染病的传播途径有直接传播、气溶胶传播和接触传播等。由于伤害性极大，传染性极强，需要采取必要的防护措施、隔离措施等预防和治疗新冠肺炎。该病毒虽然存活能力极强，可以在非细胞生物上停活一段时间，但是需要寄生在活的宿主细胞内才能生存和繁殖。
18．（2021高二下·运城月考）下列关于高压蒸汽灭菌法的说法，错误的是（ ）
A．高压蒸汽灭菌法可杀灭酒精消毒无法杀灭的微生物
B．灭菌锅内的物品太多，摆放太挤，会降低灭菌效果
C．接通电源后，立即打开排气阀将锅内的冷空气排出
D．灭菌结束后，应立即关闭电源，并打开排气阀排气
【答案】D
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】A、酒精消毒只能杀死物体表面的微生物，高压蒸汽灭菌法可以杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；
B、灭菌锅内物品的摆放不能过挤，以利于蒸汽与物品充分接触，B正确；
C、接通电源加热后，先打开排气阀，以排尽灭菌锅内的冷空气，否则锅内温度达不到规定温度，C正确；
D、灭菌结束后，关闭电源，应使其自然降温，待压力表指针降为0后，打开灭菌锅盖，D错误。
故答案为：D。
【分析】 高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽孢、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。
二、综合题
19．在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题。
（1）在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒, 其原因是紫外线能 。在照射前,适量喷洒 ,可强化消毒效果。
（3）水厂供应的自来水通常是经过 (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
（4）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。
【答案】（1）可以
（2）破坏DNA结构；消毒液
（3）氯气
（4）未将锅内冷空气排尽
【考点】灭菌技术
【解析】【解答】本题考查的是微生物实验室培养的消毒和灭菌技术。实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的方法灭菌。紫外线能破坏微生物的DNA,进而杀死物体表面或空气中的微生物,照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可加强消毒效果。自来水通常是用氯气消毒的,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微生物。用高压蒸汽灭菌法灭菌,必须把锅内的冷空气彻底排除后才能达到设定的压力和相应的温度。
【分析】 1、干热灭菌的温度较高，适用于器皿、粉末、油脂的灭菌和金属的灭菌； 2、紫外线可能使DNA碱基发生替换、缺失或者增添，导致DNA结构改变； 3、氯气溶解于水产生次氯酸根离子，具有较强氧化性，使细菌表面蛋白质变性； 4、使用高压蒸汽灭菌时，培养基应在高压蒸汽灭菌锅内灭菌,压力为100 kPa,温度为121 ℃,时间为15~30 min。如果棉塞上沾有培养基,则很容易造成杂菌污染,应将此试管废弃不用。
20．（2020·保定模拟）酿酒酵母普遍应用于白酒、红酒、啤酒和果汁饮料的生产，其生物合成过程会形成多种多样的代谢产物，从而对食品风味产生重要影响。以下是从酒曲样品中分离出酵母菌的过程：
处理酒曲样品→过滤→系列稀释至10-2—10-7→选择适宜稀释度→涂布固体培养基→28℃下培养48h→挑取典型菌落→镜检→菌种鉴定→菌种保藏。请回答下列有关问题：
（1）制备固体培养基时，采用 法灭菌15min~20min。
（2）通过稀释涂布平板法可以统计样品中活菌的数目。为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成 。涂布平板操作时应在 附近进行。
（3）菌种鉴定后要进行菌种保藏，具体方法是：将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法保存的时间不长，菌种容易 。若想长期保藏，可以采用 的方法，放在 的冷冻箱中保存。
（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在 ，常用 检测发酵后是否有酒精产生。
【答案】（1）高压蒸汽灭菌
（2）单个菌落；酒精灯火焰
（3）被污染或产生变异；甘油管藏；-20℃
（4）18-25℃；重铬酸钾
【考点】果酒果醋的制作；培养基概述及其分类
【解析】【解答】（1）对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌。（2）通过稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目时，为保证结果准确，一般选择的稀释浓度要保证涂布后在培养基表面形成单菌落。涂布平板操作时为防止杂菌污染，应在酒精灯火焰附近进行。（3）将菌种接种于固体斜面培养基上，28℃培养后，将试管于4℃的冰箱保存。这种方法是临时保藏法，其保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。若想长期保藏，可以采用甘油管藏的方法，放在-20℃的冷冻箱中保存。（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精发酵时一般将温度控制在18-25℃，常用酸性重铬酸钾检测发酵后是否有酒精产生。
【分析】实验室常用灭菌方法：1、灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。2、干热灭菌：将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2h可达到灭菌目的。能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以用这种方法灭菌。3、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min，如培养细菌用的培养基与培养皿。
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