(共54张PPT)
家
运输工具
A
T
磷酸二酯键
G
C
手术刀
T
A
抗虫基因
缝合针
图1抗虫棉(左侧为对照)
图2双链DNA结构和
磷酸二酯键位置
G
AATTC
GAATTC
①
EcoR I
CTTAA
G
CTTAAG
C
C
GGG
CCCGGG
②
G
GGGCCC
拟核DNA
质粒
大肠杆菌细胞
氨苄青霉素
目的基因
抗性基因
插入位点
复制
原点
AmpR
进入受
在含有氨苄青霉素
体细胞
的培养基上培养
只有含有载体,并
含有氨苄青
且载体上的基因表
霉素抗性基
大肠杆菌中有的
达的大肠杆菌才能
因的质粒
有载体进入,有的
存活并增殖
没有载体进入
Amp
Amp
R
Amp
Amp
R
orl
ort
ort
orl
Tet R
Tetr
Tet R
Tet R
..
A
B
C
D
取材、
取30g洋葱→切碎放入研体>倒人10mL
研磨
充分研磨
过滤后取滤液→4℃冰箱放置→离心
过滤
取
上清液加入体积相等的、预冷的
溶
析出
液>静置2~3min>用玻璃棒卷起丝状物
取两支试管,各加入
溶液
5mL将丝状物溶于其中一支试管→各
鉴定
加人4mL的
试剂沸水浴加热
5min>冷却比较溶液颜色的变化
各加4mL二苯胺试剂
95%酒精
试管1
试管2
(冷却,50m)
溶液b
DNA溶液
丝状物
溶液a
图1
图2
leu2
BamHIl BamHII
BglⅡ
BamHl
质粒X
Y
(2800bp)
-AGATCT-GGATCC-
-TCTAGA-一CCTAGG-
目的基因Y
(500bp)
BglⅡ和BamII I的
(包含KunR)
BglⅡ
识别序列及酶切位点
图1
图2
图3