1.2.1微生物的基本培养技术 （共17张ppt）生物人教版（2019）选择性必修3

(共17张PPT)
第2节　微生物的培养技术及应用（1）
一、培养基的配置
1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3．培养基种类
4．培养基的营养构成
(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5 g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10 g 氮源和维生素等
NaCl 5 g 无机盐
H2O 定容至1 000 mL 水
(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
[思考1]1．按物理性质划分上述两种培养微生物的培养基的种类。
2．分析上述两种培养微生物的培养基的营养构成。
3．为什么培养基需要氮源？
提示　由于琼脂是凝固剂，所以培养酵母菌的培养基是固体培养基，而牛肉膏蛋白胨培养基未加凝固剂，是液体培养基
提示　都含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等，
其中培养酵母菌的培养基中主要由糖类提供碳源，蛋白质提供氮源;，牛肉膏蛋白胨培养基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。
提示　培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
二、无菌技术
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，主要包括消毒和灭菌。
1．消毒
(1)概念：指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
(2)适用对象：操作的空间、操作者的衣着和手等。
(3)常用方法：煮沸消毒、巴氏消毒等。
2．灭菌
(1)概念：指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
(2)适用对象：用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等。
(3)常用方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。
项目 消毒 灭菌
作用强度 较为温和 强烈的物理、化学因素
消灭微生物 的数量 物体表面或内部一部分微生物 物体内外的
所有微生物
能否消灭 芽孢、孢子 消灭部分芽孢 能消灭全部
芽孢和孢子
适用对象 操作空间、操作 者的衣着和手等 接种环、接种针、
玻璃器皿、培养基等
常用方法 煮沸消毒法、巴氏 消毒法、化学药剂 消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、
湿热灭菌
【思考2】二．比较消毒和灭菌
三、微生物的纯培养
三．微生物的纯培养
1．概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
2．步骤
微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
[思考3]1．培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。可用什么办法来估计培养基的温度？
2．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
提示　可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。
提示　既可以防止水分过快蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
3．为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
灼烧时期 目的
取菌种前 杀死接种环上原有微生物
每次划线前 杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞
接种结束后 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
4.若要按照如图d进行划线，那么在接种划线的操作过程中，共灼烧了几次接种环？
5．在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因是：划线后，线条末端酵母菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使酵母菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落。
。
提示　图中共划了5个区域，在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此共需要灼烧接种环6次。
6．为什么最后一次划线与第一次的划线不能相连？
7．设置未接种平板组的意义是什么？
提示　最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。
提示　通过观察未接种平板是否有菌落存在以确定培养基是否被污染或灭菌是否彻底
巩固反馈
答案：(1)√　(2)×　(3)× (4)×　(5)√　(6)√ (7)×　(8)√ (9)√　(10)√
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