2021-2022学年高二下学期生物人教版（2019）选修3-3.1DNA重组技术的基本工具课件(共23张PPT)
文档属性
| 名称 | 2021-2022学年高二下学期生物人教版（2019）选修3-3.1DNA重组技术的基本工具课件(共23张PPT) |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 3.4MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2022-04-15 00:54:19 | ||
图片预览
文档简介
(共23张PPT)
专题1 基因工程
基因工程的产物
多彩小鱼
转基因小鼠
转基因小猪
辣椒香蕉
蓝色妖姬
黑籽番茄
“分子手术刀”—限制性核酸内切酶
A
A
G
T
T
C
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
EcoRⅠ
识别GAATTC序列，并在G和A之间切开
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
SmaⅠ
识别CCCGGG序列，并在G和C之间切开
限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶
限制酶所识别的序列有什么特点？
EcoRⅠ
SmaⅠ
GAATTC
CTTAAG
CCCGGG
GGGCCC
Hind Ⅲ
AAGCTT
TTCGAA
BamHⅠ
GGATCC
CCTAGG
呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列。
……GAATTC……
……CTTAAG……
……GAATTC……
……CTTAAG……
EcoRⅠ
切割
……GAATTC……
……CTTAAG……
不同来源的DNA片段混合
将不同种来源的DNA片段连接起来
生物A基因片段
生物B基因片段
……G AATTC……
……CTTAA G……
……G AATTC……
……CTTAA G……
E·coli DNA连接酶
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
T4 DNA连接酶
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
3、种类：
种类
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
来源
功能
大肠杆菌
T4噬菌体
只能连接黏性末端
能连接黏性末端和平末端
A
G
T
A
C
T
A
A
T
DNA
母链
DNA聚合酶
DNA聚合酶
T
T
A
G
A
T
A
T
C
C
G
A
C
G
G
T
T
T
A
A
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
…
DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？
迄今为止，所发现的DNA连接酶都不具有连接单链DNA的能力。
“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体
常用运载体：
质粒（最常用)
λ噬菌体的衍生物
动植物病毒等
大肠杆菌结构模式图
DNA
质粒载体结构模式图
质粒载体结构模式图
目的基因
插入位点
氨苄青霉素
抗性基因
复制原点
一个至多个限制酶切割位点
有标记基因
可以复制
对受体细胞无害
真正被用作载体的质粒，都是进行过人工改造的。
基因工程
的工具
限制酶
主要存在于原核生物中
具有专一性(识别序列)
切开DNA分子的磷酸二酯键
DNA连
接酶
连接磷酸二酯键
种类
E.coliDNA连接酶
T4 DNA连接酶
运载
工 具
具备的
条件
结构简单,大小适中
能在宿主细胞中自
我复制并稳定存在
具一个或多个限制酶切位点
具标记基因
质粒、 λ噬菌体衍生物 、动植物病毒
课堂小结
课堂小结
1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ）
同种限制酶 B. 两种限制酶
同种连接酶 D. 两种连接酶
下图为三种限制酶BamH Ⅰ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列及切点。它们切割出来的黏性末端可以互补配对的是：
GGATCC
CCTAGG
AAGCTT
TTCGAA
AGATCT
TCTAGA
BamH Ⅰ
Hind Ⅲ
Bgl Ⅱ
G
CCTAG
GATCT
A
GATCC
G
A
TCTAG
√
√
巩 固 提 高
2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNA
D
3、某DNA只有一个酶切位点，形成几个片段？
1或2
4、下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是
A．解旋酶、限制酶、DNA连接酶
B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶
C．DNA连接酶、限制酶、解旋酶
D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶
专题1 基因工程
基因工程的产物
多彩小鱼
转基因小鼠
转基因小猪
辣椒香蕉
蓝色妖姬
黑籽番茄
“分子手术刀”—限制性核酸内切酶
A
A
G
T
T
C
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
EcoRⅠ
识别GAATTC序列，并在G和A之间切开
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
SmaⅠ
识别CCCGGG序列，并在G和C之间切开
限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶
限制酶所识别的序列有什么特点？
EcoRⅠ
SmaⅠ
GAATTC
CTTAAG
CCCGGG
GGGCCC
Hind Ⅲ
AAGCTT
TTCGAA
BamHⅠ
GGATCC
CCTAGG
呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列。
……GAATTC……
……CTTAAG……
……GAATTC……
……CTTAAG……
EcoRⅠ
切割
……GAATTC……
……CTTAAG……
不同来源的DNA片段混合
将不同种来源的DNA片段连接起来
生物A基因片段
生物B基因片段
……G AATTC……
……CTTAA G……
……G AATTC……
……CTTAA G……
E·coli DNA连接酶
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
T4 DNA连接酶
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
3、种类：
种类
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
来源
功能
大肠杆菌
T4噬菌体
只能连接黏性末端
能连接黏性末端和平末端
A
G
T
A
C
T
A
A
T
DNA
母链
DNA聚合酶
DNA聚合酶
T
T
A
G
A
T
A
T
C
C
G
A
C
G
G
T
T
T
A
A
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…
DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？
迄今为止，所发现的DNA连接酶都不具有连接单链DNA的能力。
“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体
常用运载体：
质粒（最常用)
λ噬菌体的衍生物
动植物病毒等
大肠杆菌结构模式图
DNA
质粒载体结构模式图
质粒载体结构模式图
目的基因
插入位点
氨苄青霉素
抗性基因
复制原点
一个至多个限制酶切割位点
有标记基因
可以复制
对受体细胞无害
真正被用作载体的质粒，都是进行过人工改造的。
基因工程
的工具
限制酶
主要存在于原核生物中
具有专一性(识别序列)
切开DNA分子的磷酸二酯键
DNA连
接酶
连接磷酸二酯键
种类
E.coliDNA连接酶
T4 DNA连接酶
运载
工 具
具备的
条件
结构简单,大小适中
能在宿主细胞中自
我复制并稳定存在
具一个或多个限制酶切位点
具标记基因
质粒、 λ噬菌体衍生物 、动植物病毒
课堂小结
课堂小结
1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ）
同种限制酶 B. 两种限制酶
同种连接酶 D. 两种连接酶
下图为三种限制酶BamH Ⅰ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列及切点。它们切割出来的黏性末端可以互补配对的是：
GGATCC
CCTAGG
AAGCTT
TTCGAA
AGATCT
TCTAGA
BamH Ⅰ
Hind Ⅲ
Bgl Ⅱ
G
CCTAG
GATCT
A
GATCC
G
A
TCTAG
√
√
巩 固 提 高
2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNA
D
3、某DNA只有一个酶切位点，形成几个片段？
1或2
4、下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是
A．解旋酶、限制酶、DNA连接酶
B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶
C．DNA连接酶、限制酶、解旋酶
D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶