2021-2022学年高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3-1.2 微生物的培养技术及应用课件(29张ppt)

文档属性

名称 2021-2022学年高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3-1.2 微生物的培养技术及应用课件(29张ppt)
格式 zip
文件大小 11.1MB
资源类型 教案
版本资源 人教版(2019)
科目 生物学
更新时间 2022-07-28 08:31:26

图片预览

文档简介

(共29张PPT)
微生物的培养技术及应用
湖北 扫地生生物
--微生物的选择培养和计数
01
选择培养基
培养物
纯培养物
纯培养
将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体
由单一个体繁殖所获得的微生物群体
过程
配制培养基→灭菌→接种→分离→培养
菌落
如何从自然界中分离出需要的特定微生物?
01
选择培养基
美国黄石国家公园
水生栖热菌(Thermus aquaticus)
耐高温DNA聚合酶
提取
用于
聚合酶链式反应
体外DNA扩增
01
选择培养基
筛选原理:
水生栖热菌能在70~80℃高温条件下生存,而其他多数微生物不能生存
70℃ 大肠杆菌
70℃ 栖热菌
80℃ 栖热菌
100℃ 栖热菌
人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
选择培养基配方的设计
思考·讨论
★选择培养基
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基,称为选择培养基。(教材P16黑体字)
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素为,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
CO(NH2)2 + H2O
CO2 + 2NH3
脲酶
转化
NH4+
NO3-
01
选择培养基
选择培养基配方的设计
思考·讨论
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素为,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
讨论1.如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
设计一种选择培养基,以尿素作为唯一氮源,只允许以尿素作为氮源的微生物生长。
讨论2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
这种培养基与普通培养基相比,只是用尿素作为唯一氮源,培养基的其他营养成分基本相同。
01
选择培养基
01
选择培养基
★选择培养基
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基,称为选择培养基。(教材P16黑体字)
温度
提供70~80℃的培养温度
筛选出水生栖热菌
营养
筛选出石油分解菌
只提供石油为唯一碳源
营养
筛选出纤维素分解菌
只提供纤维素为唯一碳源
pH
选出耐高pH的细菌
提供高pH的生存环境
氧气
筛选出厌氧细菌
不提供氧气的生存环境
01
选择培养基
★选择培养基
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
葡萄糖做碳源
苯乙醇做碳源
选择培养基
在培养基中加入分离对象“嗜好”的营养物质。
①投其所好
在培养基中加入分离对象对能够抵抗的某种抗菌物质。
②取其所抗
02
微生物的选择培养
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素为,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
选择培养基配方的设计
思考·讨论
1g土壤中含有多少能分解尿素的细菌?
选择培养基
稀释涂布平板法
单菌落
+

02
微生物的选择培养
稀释涂布平板法
1×10
90mL无菌水
2
铲取土样,将样品装入纸袋中。
将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶,充分摇匀
1
2
取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中
02
微生物的选择培养
稀释涂布平板法
2
取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
1mL
1mL
1mL
1mL
1mL
1mL
1mL
02
微生物的选择培养
稀释涂布平板法
02
微生物的选择培养
稀释涂布平板法
待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d。在涂有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落
培养:
7
02
微生物的选择培养
获得单菌落的方法
平板划线法
稀释涂布平板法
稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外,也常用来统计样品中活菌的数目。
02
微生物的选择培养
平板划线法和稀释涂布平板法的比较
03
微生物的数量测定
方法1
稀释涂布平板计数法计数
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
一般选择菌落数在30-300的平板进行记数。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为当两个或多个细胞连在一起,平板上观察到的只是一个菌落。
因此,统计结果一般用菌落数而不用活菌数来表示。
同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求平均值。
★原理:
★原则:
减小实验误差
★注意:
03
微生物的数量测定
方法2
显微镜直接计数法
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
快速、直观,能观察微生物的形态特征。
★原理:
★特点:
不能区分死菌和活菌,统计结果一般是活菌数和死菌数的总和
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
提出问题
①如何分离土壤中能分解尿素的细菌?
②如何计算每克土壤样品中有多少分解尿素的细菌?
基础知识
①绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
②利用尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
组分 含量
KH2PO4 1.4g
Na2HPO4 2.1g
MgSO4·7H2O 0.2g
葡萄糖 10.0g
尿素 1.0g
琼脂 15.0g
H2O 定容至1000mL
提供无机盐
提供碳源
提供氮源
提供水分
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
1.土壤取样
①要求:富含有机质、酸碱度接近中性的潮湿土壤
取样时一般要铲去表层土
城市:公园里、街道旁、花盆中
农村:农田里、菜园里
②取样土层:距地表3~8cm的土壤层
2.配置培养基
配置几种培养基?
牛肉膏蛋白胨培养基
以尿素为唯一氮源的培养基
▲对照试验说明选择培养基是否具有选择作用!
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
4.涂布平板
测定土壤中细菌的数量,一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释倍数进行平板培养。
3.样品的稀释
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
4.涂布平板
选用1×104、1×105、1×106 、1×107倍稀释倍数进行涂布平板
1×106
1×107
1×104
1×105
无菌水
选择培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
对照
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
5.培养观察
将平板倒置于30~37℃下培养1~2d,每隔24h观察统计一次
1×106
1×107
1×104
1×105
无菌水
选择培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
6.菌落计数
稀释度 1×104 1×105 1×106 1×107 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值
每个平板的菌落数
当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行技术,同一稀释度下至少计数3个平板,求出平均值,并根据对应的稀释度进行计算!
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
实验设计
6.菌落计数
某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)( )
A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4
B
计算公式:
每克样品中的菌株数 =(C÷V)×M
=(234÷0.1)× 106
= 2.34×109
03
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
探究·实践
讨论1.结合对照组,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落?
对照的培养皿没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。
接种后的牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落明显多于选择培养基的菌落数,说明培养基筛选出了一些尿素分解菌。
讨论2.你是否获得了某一稀释度下菌落数为30~300的平板?在这一稀释度下,是否至少有2个平板的菌落数接近?
如果得到了两个或多个菌落数为30~300的平板,说明稀释度合适,操作比较成功,能够进行菌落的计数。
讨论3.你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落是多少?与其他同学统计的结果接近吗?如果差异大,可能是什么原因引起的?
如果用同一土样进行操作,数据应该比较接近。如果差异很大,就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。
04
课后习题
1.研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。
(1)这种培养基是一种选择培养基。( )
(2)利用这种石油降解菌可以降解石油,修复土壤。( )
(3)相对于未被污染的土壤,从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌。( )
2.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数,原因是( )
A.菌落中的细菌数目是固定的
B.平板上的一个菌落就是一个细菌数目相同
C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际
D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌



D
04
课后习题
3.反刍动物,如牛和羊,具有特殊的器官—瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。请你设计一个实验,从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物。
反刍动物的瘤胃中有大量的微生物,其中就有分解尿素的微生物。瘤胃中的微生物多为厌氧微生物,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。
04
课后习题
4.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%~60%能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用,使人们能够利用秸秆等生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红与纤维素形成红色复合物;而当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈(如下图所示)。请回答下列问题。
几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈
04
课后习题
几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈
(1)现在要从土壤中分离纤维素分解菌,请你给出详细的实验方案。
(2)你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌 为什么
纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,采集土样时,可以选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土等。
(3)有同学说,可以把滤纸埋在土壤中,经过一段时间后,再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。请你评价这一做法。
这是人工设置适合纤维素分解菌生存的环境,腐烂的滤纸上很可能有纤维素分