生物人教版(2019)选择性必修3 2.2 动物细胞工程(共30张ppt)

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名称 生物人教版(2019)选择性必修3 2.2 动物细胞工程(共30张ppt)
格式 zip
文件大小 10.9MB
资源类型 教案
版本资源 人教版(2019)
科目 生物学
更新时间 2022-08-29 15:02:35

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文档简介

(共30张PPT)
第2章 细胞工程
生物学选择性必修三《生物技术与工程》
2.2 动物细胞工程
4.2 动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术
4.2.1 阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础
4.2.2 阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的过程
4.2.3 阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
4.2.4 概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术
4.2.5 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值
内容要求——植物细胞工程
动物细胞工程
动物细胞培养(基础)
动物细胞融合技术和单克隆抗体
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞培养的条件
2.动物细胞培养的过程
3.干细胞培养及应用
1.动物细胞融合
2.单克隆抗体及其应用
1.动物体细胞核移植
2.体细胞核移植技术的应用前景及问题
动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
00
动物细胞工程
动物细胞培养
4
01
动物细胞培养
动物细胞培养流程
幼龄动物组织块
单个分散细胞
幼龄
剪碎
胰蛋白酶
胃蛋白酶(1.5~2.0)
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
幼龄动物组织块
幼龄动物组织块
单个分散细胞
单个分散细胞
分裂能力强,容易培养
适宜pH为7.2—7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,注意处理时间
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
培养基
接种
营养条件
水、糖类、氨基酸、无机盐、维生素……
依据是什么?
液体培养基
动物血清
为什么要用该物质?
可以提供营养物质、抗体、激素;但目的是激素。
抗生素
外部条件?
培养基
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
外部条件?
无菌无毒
无菌:无菌操作;加抗生素
无毒:定期更换培养液
以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
防止培养过程中的微生物污染
温度、pH和渗透压
维持细胞正常的形态和功能
温度:36.5±0.5℃
pH:7.2~7.4
适宜的渗透压
气体环境
O2:细胞代谢所必需
CO2:维持培养液的pH值
95%CO2+5%O2的CO2培养箱
培养基
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
通常将分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。
原代培养
原代培养
①悬浮生长类:能够悬浮在培养液中生长增殖,会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。
②贴壁生长类:大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁);除受密度、有害代谢物、营养物质影响外,还会发生接触抑制。
接触抑制有何生理意义?
使得器官表面光滑。
癌细胞由于无接触抑制而能够继续移动和增殖,导致细胞向三维空间扩展,发生堆积。
是否接触抑制可作为区别正常细胞与癌细胞的标志之一。
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
原代培养
先收集细胞,制成细胞悬液,再分瓶培养
a.悬浮生长类:直接用离心法收集。
b.贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
传代培养
大量死亡
01
动物细胞培养
动物细胞培养
幼龄动物组织块
单个分散细胞
细胞株
原代培养
传代培养
培养基
细胞系
细胞群
细胞株
细胞系
细胞群
大量死亡
分裂
遗传物质发生改变(原癌基因和抑癌基因没有变),无限增殖,但不是癌细胞
比较动物细胞培养和植物组织培养
01
动物细胞培养
动物细胞培养
01
动物细胞培养
干细胞培养及其应用
种类 胚胎干细胞 成体干细胞 诱导多能干细胞
来源 _________ 骨髓、脐带血等 体细胞(如成纤维细胞等)
特点 能分化成任何一种细胞、组织或器官,甚至成为_______ 分化成___________ _______ 能诱导分化成类似
     的细胞
应用 分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等 造血干细胞用于治疗白血病,神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等 治疗镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等
早期胚胎
个体
特定的细胞
或组织
胚胎干细胞
01
动物细胞培养
干细胞培养及其应用
iPS细胞用于治疗人类疾病示意图
科学案已尝试采用多种方法来制备ips细胞,包括借助载体将特定基因导入细胞中,直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成ips细胞。ips细胞最初是由成纤维细胞转化而来的,后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为ips细胞。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物细胞融合
动物细胞融合技术指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
诱导原生质体融合
物理方法:电融合法、离心法
化学方法:聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法
原理:细胞膜具有流动性
诱导动物细胞融合
物理方法:电融合法
化学方法:聚乙二醇(PEG)融合法
生物方法:灭活的病毒诱导法
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物细胞融合
①突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
什么是单克隆抗体?
单:单一、一种
克隆:大量、多
单一种类的大量抗体。
B1
B2
B3
1
2
细菌
3
传统抗体是多克隆抗体
产量低、纯度低,特异性差。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
为什么是从小鼠的脾中得到B淋巴细胞?
最大的淋巴器官,容易获取。
为什么是从小鼠的骨髓瘤细胞?可以是其他细胞吗?这种细胞如何产生?有什么特点?
骨髓里的癌细胞(无限增殖),可以用其他细胞,但是需要满足后面的筛选要求。
代谢缺陷型骨髓瘤细胞
(即DNA的应急复制途径缺失)
普通骨髓瘤细胞
诱导突变
接种到
6-硫代鸟嘌呤的鸟嘌呤类似物培养基
筛选
含有“次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-)”可以将氮鸟嘌呤或6-硫代鸟嘌呤转变成相应的核苷酸形式参与 DNA 合成而发生毒性作用,使细胞致死。
缺陷型(HGPRT-)细胞由于HGPRT活性丧失,不能使用氮鸟嘌呤或6-硫代鸟嘌呤,能生活在高浓度的含氮鸟嘌呤或6-硫代鸟嘌呤的鸟嘌呤类似物培养基上。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
资料:细胞合成DNA有D(全合成途径)和S(应急合成途径)两条途径,其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径。
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞(A)
合成DNA
D途径
S途径
D途径
氨基喋呤
A、B、AA、BB、AB1、AB2、AB3
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
克隆化培养、抗体检测、多次筛选 如何理解?
阳性孔
用96孔板培养,每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞,用标记的抗原等检测每个小孔上清液里是否含有我们需要的特异性的抗体。筛选杂交瘤细胞,一次无法保证,稀释后重复操作。
02
动物细胞融合技术与单克隆抗体
单克隆抗体及其应用
(1)作为     :在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
(2)运载药物:抗体—药物偶联物(ADC)通过将     与能特异性识别肿瘤抗原的      结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由
              三部分组成。
①ADC的抗体和药物各具有什么作用?
诊断试剂
细胞毒素
单克隆抗体
抗体、接头和药物(如细胞毒素)
ADC的抗体和药物具有的作用分别是导向和治疗。
③ADC在临床应用上的作用机理是什么?
通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原,然后利用细胞本身具备的内吞作用使化学药物进入肿瘤细胞体内发生药力,从而达到杀死肿瘤细胞的目的。
(3)治疗疾病。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞核移植技术
如:多莉羊
将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体。
胚胎细胞核移植
体细胞核移植
原理:动物细胞核的全能性
分类:
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞核移植技术
减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)卵母细胞中的“核”其实是纺锤体——染色体复合物。文中所说的“去核”是去除该复合物。
目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞核移植技术
(1)动物核移植技术的理论基础(原理)是什么?克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖?
动物细胞核的全能性。克隆动物属于无性繁殖。
(2)为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难?
由于动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对容易;而动物体细胞分化程度高,表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。
(3)受体细胞为什么选用卵母细胞?
体积大,易操作;去核时易于同时吸走第一极体;含有激发细胞核全能性的物质。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞核移植技术
(4)为什么不是取供体细胞核进行核移植操作,而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中?
保证供核不被破坏,使克隆动物更像供体动物,操作也方便。
(5)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?
为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的核遗传物质去掉或将其破坏。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
动物细胞核移植技术
(6)从多莉的产生过程可以看出多莉有三个亲本,探究多莉的性状表现与三个亲本的关系并分析原因。
①大多数性状与母羊A(体细胞核供体)相同,因基因型与母羊A完全一样。
②少数性状与母羊B(卵母细胞细胞质供体)相同,因细胞质中的基因来自母羊B,受质基因控制的性状与母羊B相同。
③性状与母羊C(代孕母体)无关,因母羊C没有为新个体提供遗传物质。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
体细胞核移植技术的应用前景
(1)畜牧业:加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。
(2)医药卫生领域:
①建立转基因体细胞系,再利用此技术培育的转基因克隆动物可作为生物反应器生产珍贵的医用蛋白。
②治疗人类疾病时,转基因克隆动物的细胞、组织或器官,可作为异种移植的供体。
乳腺生物反应器
③患者的核移植胚胎干细胞经过诱导分化,能形成相应的细胞、组织或器官可用于移植以避免免疫排斥反应。
④研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程;
⑤克隆一批遗传背景相同的动物,可通过对比来分析致病基因;
⑥克隆特定疾病模型的动物,能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
03
动物体细胞核移植技术和克隆动物
体细胞核移植技术的应用前景
(3)保护濒危物种:有望增加濒危物种的存活数量。