生物人教版（2019）选择性必修3 1.2.1微生物的基本培养技术（共20张ppt）
文档属性
| 名称 | 生物人教版（2019）选择性必修3 1.2.1微生物的基本培养技术（共20张ppt） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 2.9MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-01-07 10:12:07 | ||
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文档简介
(共20张PPT)
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适，主要原因是有杂菌混入。
那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
第1章第2节微生物的培养与应用
第1课时 微生物的基本培养技术
1.概述培养基的配制方法。
2.说出常用的消毒和灭菌方法。
3.进行酵母菌的纯培养。
固体培养基
半固体培养基
液体培养基
主要用于微生物的分离、计数等
主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等
主要用于工业生产
需加入凝固剂，如琼脂
一、培养基的配制
2.种类
1.概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。
资料分析：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
培养基组分 提供的主要营养
牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素
蛋白胨10g 氮源和维生素
NaCl 5g 无机盐
H2O定容在1000mL 氢元素、氧元素
3.成分
一、培养基的配制
培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：
如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基pH调节为酸性 ，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。
二、无菌技术
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键！
1.消毒：
2.消毒与灭菌的比较
项目 理化因素作用强度 消灭微生物数量 芽孢和孢子是否消灭
消毒
灭菌
温和
强烈
部分微生物
全部微生物
不能
能
使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或内部一部分微生物。
2.灭菌：
使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
②巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
③化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源
④紫外线30min消毒：照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果
(1)消毒的方法：
4.常用的消毒与灭菌的方法
(2)灭菌的方法：
①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口
二、无菌技术
②干热灭菌：玻璃器皿和金属用具
③高压蒸气灭菌：
100kPa、121 ℃下维持15-30min
问题1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
还能有效避免操作者自身被微生物感染。
问题2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管；
（3）实验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
二、无菌技术
4.常用的消毒与灭菌的方法
细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( )
A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅
【方法点拨】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。
C
三、微生物的纯培养
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
（一）概念：
（二）内容：
1）配制培养基
2）灭菌
3）接种
4）分离
5）培养
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体
1.菌落：
2.纯培养：
采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。
微生物群
分散或稀释
单个细胞
单个菌落
繁殖
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
3.原理：
4.方法步骤
1）配制培养基
称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。（有时需调pH）
2）灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h.
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
制备培养基
①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；
②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；
③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
3）倒平板
（三）酵母菌的纯培养
三、微生物的纯培养
待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
问题讨论：
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
（三）酵母菌的纯培养
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
(1)原理：
单个细胞
微生物群
单个菌落
连续划线
分散或稀释
生长繁殖
(2)“平板划线”实验操作
接种和分离酵母菌
（三）酵母菌的纯培养
三、微生物的纯培养
(2)“平板划线”实验操作
1.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。
2.在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌的棉塞。
3.将试管口通过火焰。
4.将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液 。
5.将试管口通过火焰，并塞上棉塞。
6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基！
7.灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
问题讨论：
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
第1区划线
接种环灭菌
第2区划线
接种环灭菌
第3区划线
接种环灭菌
接种环灭菌
1
2
3
4
5
①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次
②划线首尾不能相接
③每次划线前接种环进行灭菌
④划线后,培养皿倒置培养
平板划线法注意事项:
思考：若完成图示操作，共做了五次划线，接种环灼烧灭菌了几次？
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h。
结果分析与评价
1.未接种的培养基表面是否有菌落生长，如果有，说明了什么？
2.在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了菌落？这些菌落的颜色、形状、大小是否一致，如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析可能是哪些原因引起的吗？
培养酵母菌
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
微生物生长繁殖产生的菌落
【高考在线】
1．（2022·海南·统考高考真题）为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A．采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B．培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C．土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D．鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
2．（2021·天津·统考高考真题）下列操作能达到灭菌目的的是（ ）
A．用免洗酒精凝胶擦手 B．制作泡菜前用开水烫洗容器
C．在火焰上灼烧接种环 D．防疫期间用石炭酸喷洒教室
C
C
【高考在线】
3．（2021·北京·统考高考真题）野生草本植物多具有根系发达、生长较快、抗逆性强的特点，除用于生态治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收获后剩余的菌渣可作肥料或饲料。相关叙述错误的是（ ）
A．种植此类草本植物可以减少水土流失
B．菌渣作为农作物的肥料可实现能量的循环利用
C．用作培养基的草本植物给食用菌提供碳源和氮源
D．菌渣作饲料实现了物质在植物、真菌和动物间的转移
4．（2019·江苏·统考高考真题）下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是（ ）
A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
B
A
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适，主要原因是有杂菌混入。
那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
第1章第2节微生物的培养与应用
第1课时 微生物的基本培养技术
1.概述培养基的配制方法。
2.说出常用的消毒和灭菌方法。
3.进行酵母菌的纯培养。
固体培养基
半固体培养基
液体培养基
主要用于微生物的分离、计数等
主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等
主要用于工业生产
需加入凝固剂，如琼脂
一、培养基的配制
2.种类
1.概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。
资料分析：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
培养基组分 提供的主要营养
牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素
蛋白胨10g 氮源和维生素
NaCl 5g 无机盐
H2O定容在1000mL 氢元素、氧元素
3.成分
一、培养基的配制
培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：
如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基pH调节为酸性 ，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。
二、无菌技术
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键！
1.消毒：
2.消毒与灭菌的比较
项目 理化因素作用强度 消灭微生物数量 芽孢和孢子是否消灭
消毒
灭菌
温和
强烈
部分微生物
全部微生物
不能
能
使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或内部一部分微生物。
2.灭菌：
使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
②巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
③化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源
④紫外线30min消毒：照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果
(1)消毒的方法：
4.常用的消毒与灭菌的方法
(2)灭菌的方法：
①灼烧灭菌：接种环、接种针、试管口、瓶口
二、无菌技术
②干热灭菌：玻璃器皿和金属用具
③高压蒸气灭菌：
100kPa、121 ℃下维持15-30min
问题1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
还能有效避免操作者自身被微生物感染。
问题2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管；
（3）实验操作者的双手
（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
二、无菌技术
4.常用的消毒与灭菌的方法
细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( )
A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅
【方法点拨】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。
C
三、微生物的纯培养
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
（一）概念：
（二）内容：
1）配制培养基
2）灭菌
3）接种
4）分离
5）培养
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体
1.菌落：
2.纯培养：
采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。
微生物群
分散或稀释
单个细胞
单个菌落
繁殖
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
3.原理：
4.方法步骤
1）配制培养基
称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。（有时需调pH）
2）灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h.
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
制备培养基
①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；
②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；
③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
3）倒平板
（三）酵母菌的纯培养
三、微生物的纯培养
待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
问题讨论：
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
（三）酵母菌的纯培养
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
(1)原理：
单个细胞
微生物群
单个菌落
连续划线
分散或稀释
生长繁殖
(2)“平板划线”实验操作
接种和分离酵母菌
（三）酵母菌的纯培养
三、微生物的纯培养
(2)“平板划线”实验操作
1.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。
2.在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌的棉塞。
3.将试管口通过火焰。
4.将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液 。
5.将试管口通过火焰，并塞上棉塞。
6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基！
7.灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
问题讨论：
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
第1区划线
接种环灭菌
第2区划线
接种环灭菌
第3区划线
接种环灭菌
接种环灭菌
1
2
3
4
5
①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次
②划线首尾不能相接
③每次划线前接种环进行灭菌
④划线后,培养皿倒置培养
平板划线法注意事项:
思考：若完成图示操作，共做了五次划线，接种环灼烧灭菌了几次？
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h。
结果分析与评价
1.未接种的培养基表面是否有菌落生长，如果有，说明了什么？
2.在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了菌落？这些菌落的颜色、形状、大小是否一致，如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析可能是哪些原因引起的吗？
培养酵母菌
三、微生物的纯培养
（三）酵母菌的纯培养
微生物生长繁殖产生的菌落
【高考在线】
1．（2022·海南·统考高考真题）为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A．采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B．培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C．土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D．鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
2．（2021·天津·统考高考真题）下列操作能达到灭菌目的的是（ ）
A．用免洗酒精凝胶擦手 B．制作泡菜前用开水烫洗容器
C．在火焰上灼烧接种环 D．防疫期间用石炭酸喷洒教室
C
C
【高考在线】
3．（2021·北京·统考高考真题）野生草本植物多具有根系发达、生长较快、抗逆性强的特点，除用于生态治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收获后剩余的菌渣可作肥料或饲料。相关叙述错误的是（ ）
A．种植此类草本植物可以减少水土流失
B．菌渣作为农作物的肥料可实现能量的循环利用
C．用作培养基的草本植物给食用菌提供碳源和氮源
D．菌渣作饲料实现了物质在植物、真菌和动物间的转移
4．（2019·江苏·统考高考真题）下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是（ ）
A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
B
A