《同步测控全优设计》2013-2014学年高中生物苏教版选修1单元检测：第一章 无菌操作技术实践（含答案）
文档属性
| 名称 | 《同步测控全优设计》2013-2014学年高中生物苏教版选修1单元检测：第一章 无菌操作技术实践（含答案） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 550.5KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 苏教版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2014-04-24 14:50:52 | ||
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文档简介
生物苏教版选修1第一章无菌操作技术实践单元检测
（时间：60分钟，满分：100分）
一、选择题（共25小题，每小题2分，共50分）
1．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍的稀释液，其原因是（ ）。
A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中含量比真菌高 D．随机的，没有原因
2．下列关于细菌的叙述，错误的是（ ）。
A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物
C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌
3．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是（ ）。
A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌
4．下面是鉴别纤维素分解菌的培养基，根据你的判断，鉴别纤维素分解菌的现象应是（ ）。
羧甲基纤维素钠
5～10 g
酵母膏
1 g
KH2PO4
0.25 g
琼脂
15 g
土豆汁
100 mL
用蒸馏水定容到1 000 mL
A.在液体培养基中有微生物存活
B．在固体培养基的表面有菌落的形成
C．加入刚果红溶液，在固体培养基上有透明圈形成
D．培养基的表面有微生物进行细胞分裂
5．用稀释涂布平板法来统计某土壤样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是（ ）。
A．菌落数量最多的平板 B．菌落数量最少的平板
C．菌落数量适中的平板 D．若干个平板菌落数量的平均值
6．下列操作不属于微生物的分离步骤的是（ ）。
A．稀释 B．划线或涂布 C．接斜面 D．培养
7．配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖？（ ）
A．酵母菌 B．自生固氮菌 C．各种细菌 D．纤维素分解菌
8．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（ ）。
A．防止杂菌污染 B．消灭杂菌
C．培养基和发酵设备都必须灭菌 D．灭菌必须在接种前
9．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是（ ）。
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
加蒸馏水定容至
含量
10 g
10 g
2 g
0.4 g
0.065 g
1 000 mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基
B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
C．该培养基缺少提供生长因子的物质
D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
10．通过选择培养基可从混杂的霉菌、放线菌、固氮细菌中分离出所需的固氮细菌。所用的培养基是（ ）。
A．选择培养基 B．固体培养基 C．液体培养基 D．鉴别培养基
11．若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，采用下列哪组培养基可将它们分离？（ ）
A．加食盐的培养基和蛋白胨培养基 B．伊红—美蓝培养基和无氮培养基
C．斜面培养基和液体培养基 D．加青霉素的培养基和液体培养基
12．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结果如下图所示，造成这种结果的原因是培养液中（ ）。
A．缺少无机盐 B．含氧量太高 C．缺少有机养分 D．不含二氧化碳
13．下列属于菌落特征的是（ ）。
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少
④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A．①②③④ B．①②④⑤ C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
14．分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是（ ）。
①稀释倒平板法 ②涂布平板法 ③单细胞挑取法 ④选择培养分离
A．①② B．②③④ C．②③ D．①③④
15．在一个“淀粉—琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37 ℃恒温箱中，保温处理24 h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：
淀粉圆点
实验处理方法
碘液处理后的颜色反应
①
新鲜唾液与盐酸混合
蓝黑色
②
经过煮沸的新鲜唾液
蓝黑色
③
接种面包霉
棕黄色
④
只有新鲜的唾液
？
⑤
只有一定浓度的蔗糖溶液
？
请指出④和⑤所发生的颜色反应，以及③接种的面包霉的分泌物分别是（ ）。
A．棕黄色、棕黄色、淀粉酶 B．蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶
C．棕黄色、蓝黑色、淀粉酶 D．棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶
16．牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是（ ）。
A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B．在微生物生长温度范围内保持固体状态
C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长
D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
17．下列关于植物组织培养的内容，说法错误的是（ ）。
A．一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B．对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素也能成功
C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可
D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
18．关于愈伤组织形成过程的正确叙述是（ ）。
A．愈伤组织形成是离体的植物细胞分化的结果
B．愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果
C．愈伤组织形成是离体的动物细胞分化的结果
D．愈伤组织形成是离体的动物细胞脱分化和分裂的结果
19．MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别为（ ）。
A．MS培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素
B．MS培养基不需要氨基酸，微生物培养基含各种氨基酸
C．MS培养基不需碳源，微生物培养基含碳源
D．MS培养基含维生素B1和维生素B6，微生物培养基不含有
20．（改编题）下列选项中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）。
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 ②获取大量的脱毒苗 ③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株 ④单倍体育种 ⑤无子西瓜的快速大量繁殖
A．①②③ B．②③④⑤ C．①②④⑤ D．②③④
21．1958年，美国植物学家斯图尔德用胡萝卜韧皮部细胞培养出完整的胡萝卜植株。该过程不需要（ ）。
A．在无菌条件下切取具细胞核的细胞 B．用酶解法去掉细胞壁
C．适宜的光照和温度 D．在培养基中加入一定量的营养物质和激素
22．当先使用细胞分裂素，后使用生长素时，实验结果是（ ）。
A．有利于细胞分裂，但细胞不分化 B．细胞既分裂又分化
C．分化频率提高 D．有利于细胞分化，但不分裂
23．菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法不正确的是（ ）。
A．培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
B．幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间
C．用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃
D．将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染
24．（改编题）（多选）下列关于消毒效果的论述，不正确的是（ ）。
A．体积分数为70%的酒精对外殖体消毒效果好，但用时长，去除易
B．质量分数为0.1%的氯化汞溶液对外殖体消毒效果最好，用时较短，去除也易
C．体积分数为10%的过氧化氢对外殖体消毒效果最好，但易挥发、用时长，去除最易
D．抗菌素对外殖体消毒效果较好，消毒时间较长，去除难易程度适中
25．在菊花的组织培养操作完成了3～4天后，观察同一温室中的外殖体，发现有的瓶内外殖体正常生长，有的瓶内外殖体死亡，你认为外殖体死亡的原因不可能是（ ）。
A．培养条件，比如pH、温度等不适宜 B．接种时外殖体未消毒
C．接种工具灼烧后未待冷却就接种外殖体 D．将外殖体倒插入培养基中
二、非选择题（共4小题，共50分）
26．（18分）下表是微生物的培养基成分。请据图回答下列问题。
编号
成分
含量
①
粉状硫
10 g
②
（NH4）2SO4
0.4 g
③
K2HPO4
4.0 g
④
MgSO4
9.25 g
⑤
FeSO4
0.5 g
⑥
CaCl2
0.5 g
⑦
加蒸馏水定容至
1 000 mL
（1）该培养基可培养的微生物代谢类型是__________。
（2）若除去成分②，加入甲醛（CH2O），该培养基可用于培养________________________。
（3）表中营养成分共有________类。
（4）不论何种培养基，在配制完备后都要进行的是____________，常用方法是__________。
（5）若上表培养基用于菌种纯化，应该增加的成分是__________________。
27．（12分）自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
步骤：（1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
（2）用稀释涂布平板法接种样品。
（3）适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______。
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
（2）一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL）________。
（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量____________，因为________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？
28．（10分）根据各种微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、酵母菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件填空。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌，再将上述微生物混合的稀释液分别接种到各种培养基上进行培养。
（1）用无氮培养基可筛选出________________________________________________。
（2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出______________________________________
________________________________________________________________________。
（3）酵母菌的筛选需要在基本培养基中加入__________，抑制原核微生物的生长。
（4）利用伊红—美蓝培养基培养混合菌，菌落呈______。挑取该菌单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红—美蓝培养基鉴定为________________。
29．（2012·课标全国理综）为了探究6BA和IAA对某菊花品种茎尖外殖体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外殖体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外殖体的比率（m），以及再生丛芽外殖体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
培养基编号
浓度/mg·L－1
m/%
n/个
6BA
IAA
1
0.5
0
76.7
3.1
2
0.1
77.4
6.1
3
0.2
66.7
5.3
4
0.5
60.0
5.0
回答下列问题：
（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为______和______两类。上述培养基中，6BA属于______类生长调节剂。
（2）在该实验中，自变量是______，因变量是______，自变量的取值范围是________________。
（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是____号培养基。
（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入______（填“6BA”或“IAA”）。
参考答案
1．答案：C 解析：土壤中的微生物70%～90%是细菌，真菌的含量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
2．答案：D 解析：某些细菌如蓝细菌（蓝藻）、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是从外界获得补充的。常用的伊红—美蓝培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，则菌落呈绿色金属光泽。
3．答案：C 解析：分解纤维素的细菌能将纤维素分解， 刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
4．答案：C 解析：该培养基是含有丰富天然有机营养成分的固体培养基。不仅有分解纤维素的微生物的生长，还有其他微生物的生长，它们都能形成相应的菌落，但只有能分解纤维素的微生物，用刚果红溶液染色，能在其菌落周围出现透明圈，而其他微生物的菌落周围因为没有纤维素的分解，不能形成透明圈。微生物个体微小，并不能用肉眼观察微生物的细胞分裂。
5．答案：C
6．答案：C 解析：土壤中微生物分离的步骤是：土壤取样→样本稀释→微生物培养和观察等，其中微生物分离过程主要在于接种阶段，通过平板划线法或者稀释涂布平板法，使得微生物充分稀释和分离，从而使得平板上生长的一个菌落来源于单个的细菌，这样就达到了从土壤中分离微生物的目的。接斜面是在试管中扩大细菌数量或者短时间保存菌种的方法，不属于分离微生物的过程。
7．答案：D 解析：该培养基的有机营养成分里面含碳的营养物质是纤维素，不能分解利用纤维素的微生物不能在该培养基上生长，所以属于选择培养基。
8．答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A项说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B项是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物；C项是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；D项是正确的，发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
9．答案：B
10．答案：A
11．答案：B 解析：大肠杆菌的代谢产物（有机酸）可与伊红—美蓝结合，使菌落呈绿色，并带有金属光泽；圆褐固氮菌能自行固氮，可用无氮培养基进行选择。
12．答案：C 解析：绿藻为自养型生物，能够快速繁殖，说明该培养液不缺少无机盐。酵母菌为异养型生物，在该培养液中不能生长，说明缺少的是有机养分。而培养液中O2和CO2含量对二者的影响不是很大。
13．答案：B
14．答案：B
15．答案：C 解析：唾液中含唾液淀粉酶，在适宜条件下可将淀粉分解。唾液淀粉酶的最适pH为中性，最适温度为37 ℃，故新鲜唾液与盐酸混合或煮沸后，唾液淀粉酶将失去活性，不能分解淀粉，淀粉遇碘呈蓝黑色。实验装置中，④中含唾液淀粉酶且有活性，可将淀粉分解，加碘液，呈棕黄色，③中加碘液后呈棕黄色，故面包霉能分泌淀粉酶。⑤中加一定浓度的蔗糖溶液，不影响淀粉与碘液反应，呈蓝黑色。
16．答案：C 解析：本题考查琼脂在培养基中的作用。在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种理想的凝固剂，是由其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。琼脂在水中加热至95 ℃时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40 ℃左右才开始凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。
17．答案：C 解析：在植物组织培养过程中，接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜温度和光照进行培养，培养期间应定期消毒，防止细菌等微生物污染。
18．答案：B
19．答案：A 解析：MS培养基含大量元素、微量元素、有机物，有机物包括甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、蔗糖等，特别包括植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含植物激素。
20．答案：B 解析：植物组织培养指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术，主要用于获取脱毒苗、培养转基因的植株、单倍体育种、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株属于多倍体育种，不需要植物组织培养技术。
21．答案：B 解析：胡萝卜韧皮部细胞在培养基中经过培养，首先脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，诱导生成芽、根，然后长成新的植株，因为长出芽、根后要进行光合作用，所以要给以合适的光照，而在诱导分化时要加入适当比例的生长素和细胞分裂素。因为不是植物体细胞的杂交，所以不需要去掉细胞壁。
22．答案：B 解析：细胞分裂素和生长素的使用顺序不同，培养的结果不同。先使用生长素，再使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化；两者同时使用，细胞分化频率提高。
23．答案：D 解析：植物的组织培养需要严格的无菌操作，将菊花茎段插入时，不应倒插是因为倒插的茎段不易形成愈伤组织，而不是为了防止杂菌污染。
24．答案：ABC 解析：体积分数为70%的酒精对外殖体消毒效果好，外殖体放入其中摇动2～3次，持续6～7 s，易去除；质量分数为0.1%的氯化汞溶液有剧毒，消毒效果最好，时间较短，但消毒后难以去除残余的汞；体积分数为10%的过氧化氢溶液消毒效果好，且易分解成无毒化合物，用时5～15 min；抗菌素对外殖体消毒效果较好，用时30～60 min，去除难易程度适中。
25．答案：A 解析：一般来讲，进行植物组织培养时，培养条件应是相同的，但接种过程是否严格在无菌条件下进行，外殖体是否倒插等因素都会影响外殖体的生长。
26．答案：解析：对于一种培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，如果是一种天然培养基就不能从培养基的成分上区分它能培养何种微生物。分析化学成分要从营养物质的类型出发。上表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。对特殊营养物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可培养的微生物是自养型微生物。自生固氮微生物利用空气中的氮气为氮源，但它们是异养型微生物。配制培养基的目的是培养微生物，也可能是分离纯化、菌种鉴定等，为防止杂菌的污染，常用高压蒸汽灭菌法灭菌。对于菌种的分离纯化，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要加入常见的凝固剂——琼脂。
答案：（1）自养型微生物 （2）自生固氮微生物 （3）3 （4）灭菌 高压蒸汽灭菌法 （5）琼脂（或凝固剂）
27．答案：解析：（1）计数微生物时可选取多个菌落数相差不大的平板计数求其平均值。（2）每毫升样品中的菌落数为：23.4÷10－6÷0.2＝1.17×108（个）。（3）因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。
答案：（1）D （2）1.17×108 （3）多 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 （4）不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。
28．答案：解析：圆褐固氮菌能利用空气中的氮气，经还原获得氮源，用无氮培养基选择出圆褐固氮菌；硝化细菌是自养型微生物，能利用空气中的二氧化碳为碳源，因此利用不含有机碳源的培养基选择出硝化细菌；酵母菌对青霉素不敏感，通常用青霉素将其从混合菌中筛选出来；大肠杆菌的代谢产物有机酸能和伊红—美蓝培养基结合，使菌落呈绿色，有金属光泽，鉴别后，挑取菌落培养得到大肠杆菌。
答案：（1）圆褐固氮菌 （2）硝化细菌 （3）青霉素
（4）绿色，有金属光泽 大肠杆菌
29．答案：解析：（1）根据植物的需求量，培养基中的元素分为大量元素和微量元素，6BA属于细胞分裂素类的植物生长调节剂。（2）实验中的自变量是IAA的浓度，因变量是再生丛芽外殖体的比率和再生丛芽外殖体上的丛芽平均数。自变量的取值范围在0～0.5 mg/L之间。（3）诱导丛芽的总数量为m与n的乘积，所以1号培养基最少。（4）6BA属于细胞分裂素，有利于芽的分化，抑制根的形成。
答案：（1）大量元素 微量元素 细胞分裂素
（2）IAA浓度 再生丛芽外殖体的比率（m）和再生丛芽外殖体上的丛芽平均数（n） 0～0.5 mg·L－1
（3）1
（4）6BA
（时间：60分钟，满分：100分）
一、选择题（共25小题，每小题2分，共50分）
1．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍的稀释液，其原因是（ ）。
A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中含量比真菌高 D．随机的，没有原因
2．下列关于细菌的叙述，错误的是（ ）。
A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质
B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物
C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质
D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌
3．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是（ ）。
A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌
4．下面是鉴别纤维素分解菌的培养基，根据你的判断，鉴别纤维素分解菌的现象应是（ ）。
羧甲基纤维素钠
5～10 g
酵母膏
1 g
KH2PO4
0.25 g
琼脂
15 g
土豆汁
100 mL
用蒸馏水定容到1 000 mL
A.在液体培养基中有微生物存活
B．在固体培养基的表面有菌落的形成
C．加入刚果红溶液，在固体培养基上有透明圈形成
D．培养基的表面有微生物进行细胞分裂
5．用稀释涂布平板法来统计某土壤样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是（ ）。
A．菌落数量最多的平板 B．菌落数量最少的平板
C．菌落数量适中的平板 D．若干个平板菌落数量的平均值
6．下列操作不属于微生物的分离步骤的是（ ）。
A．稀释 B．划线或涂布 C．接斜面 D．培养
7．配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖？（ ）
A．酵母菌 B．自生固氮菌 C．各种细菌 D．纤维素分解菌
8．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（ ）。
A．防止杂菌污染 B．消灭杂菌
C．培养基和发酵设备都必须灭菌 D．灭菌必须在接种前
9．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是（ ）。
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
加蒸馏水定容至
含量
10 g
10 g
2 g
0.4 g
0.065 g
1 000 mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基
B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
C．该培养基缺少提供生长因子的物质
D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
10．通过选择培养基可从混杂的霉菌、放线菌、固氮细菌中分离出所需的固氮细菌。所用的培养基是（ ）。
A．选择培养基 B．固体培养基 C．液体培养基 D．鉴别培养基
11．若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，采用下列哪组培养基可将它们分离？（ ）
A．加食盐的培养基和蛋白胨培养基 B．伊红—美蓝培养基和无氮培养基
C．斜面培养基和液体培养基 D．加青霉素的培养基和液体培养基
12．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻和酵母菌，其结果如下图所示，造成这种结果的原因是培养液中（ ）。
A．缺少无机盐 B．含氧量太高 C．缺少有机养分 D．不含二氧化碳
13．下列属于菌落特征的是（ ）。
①菌落的形状 ②菌落的大小 ③菌落的多少
④隆起程度 ⑤颜色 ⑥有无荚膜
A．①②③④ B．①②④⑤ C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥
14．分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是（ ）。
①稀释倒平板法 ②涂布平板法 ③单细胞挑取法 ④选择培养分离
A．①② B．②③④ C．②③ D．①③④
15．在一个“淀粉—琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37 ℃恒温箱中，保温处理24 h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：
淀粉圆点
实验处理方法
碘液处理后的颜色反应
①
新鲜唾液与盐酸混合
蓝黑色
②
经过煮沸的新鲜唾液
蓝黑色
③
接种面包霉
棕黄色
④
只有新鲜的唾液
？
⑤
只有一定浓度的蔗糖溶液
？
请指出④和⑤所发生的颜色反应，以及③接种的面包霉的分泌物分别是（ ）。
A．棕黄色、棕黄色、淀粉酶 B．蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶
C．棕黄色、蓝黑色、淀粉酶 D．棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶
16．牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是（ ）。
A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B．在微生物生长温度范围内保持固体状态
C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长
D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
17．下列关于植物组织培养的内容，说法错误的是（ ）。
A．一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B．对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素也能成功
C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可
D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
18．关于愈伤组织形成过程的正确叙述是（ ）。
A．愈伤组织形成是离体的植物细胞分化的结果
B．愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果
C．愈伤组织形成是离体的动物细胞分化的结果
D．愈伤组织形成是离体的动物细胞脱分化和分裂的结果
19．MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别为（ ）。
A．MS培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素
B．MS培养基不需要氨基酸，微生物培养基含各种氨基酸
C．MS培养基不需碳源，微生物培养基含碳源
D．MS培养基含维生素B1和维生素B6，微生物培养基不含有
20．（改编题）下列选项中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）。
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 ②获取大量的脱毒苗 ③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株 ④单倍体育种 ⑤无子西瓜的快速大量繁殖
A．①②③ B．②③④⑤ C．①②④⑤ D．②③④
21．1958年，美国植物学家斯图尔德用胡萝卜韧皮部细胞培养出完整的胡萝卜植株。该过程不需要（ ）。
A．在无菌条件下切取具细胞核的细胞 B．用酶解法去掉细胞壁
C．适宜的光照和温度 D．在培养基中加入一定量的营养物质和激素
22．当先使用细胞分裂素，后使用生长素时，实验结果是（ ）。
A．有利于细胞分裂，但细胞不分化 B．细胞既分裂又分化
C．分化频率提高 D．有利于细胞分化，但不分裂
23．菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法不正确的是（ ）。
A．培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌
B．幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间
C．用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃
D．将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染
24．（改编题）（多选）下列关于消毒效果的论述，不正确的是（ ）。
A．体积分数为70%的酒精对外殖体消毒效果好，但用时长，去除易
B．质量分数为0.1%的氯化汞溶液对外殖体消毒效果最好，用时较短，去除也易
C．体积分数为10%的过氧化氢对外殖体消毒效果最好，但易挥发、用时长，去除最易
D．抗菌素对外殖体消毒效果较好，消毒时间较长，去除难易程度适中
25．在菊花的组织培养操作完成了3～4天后，观察同一温室中的外殖体，发现有的瓶内外殖体正常生长，有的瓶内外殖体死亡，你认为外殖体死亡的原因不可能是（ ）。
A．培养条件，比如pH、温度等不适宜 B．接种时外殖体未消毒
C．接种工具灼烧后未待冷却就接种外殖体 D．将外殖体倒插入培养基中
二、非选择题（共4小题，共50分）
26．（18分）下表是微生物的培养基成分。请据图回答下列问题。
编号
成分
含量
①
粉状硫
10 g
②
（NH4）2SO4
0.4 g
③
K2HPO4
4.0 g
④
MgSO4
9.25 g
⑤
FeSO4
0.5 g
⑥
CaCl2
0.5 g
⑦
加蒸馏水定容至
1 000 mL
（1）该培养基可培养的微生物代谢类型是__________。
（2）若除去成分②，加入甲醛（CH2O），该培养基可用于培养________________________。
（3）表中营养成分共有________类。
（4）不论何种培养基，在配制完备后都要进行的是____________，常用方法是__________。
（5）若上表培养基用于菌种纯化，应该增加的成分是__________________。
27．（12分）自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
步骤：（1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
（2）用稀释涂布平板法接种样品。
（3）适宜温度下培养。
结果分析：
（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______。
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
（2）一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL）________。
（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量____________，因为________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
（4）某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？
28．（10分）根据各种微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、酵母菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件填空。
首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌，再将上述微生物混合的稀释液分别接种到各种培养基上进行培养。
（1）用无氮培养基可筛选出________________________________________________。
（2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出______________________________________
________________________________________________________________________。
（3）酵母菌的筛选需要在基本培养基中加入__________，抑制原核微生物的生长。
（4）利用伊红—美蓝培养基培养混合菌，菌落呈______。挑取该菌单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红—美蓝培养基鉴定为________________。
29．（2012·课标全国理综）为了探究6BA和IAA对某菊花品种茎尖外殖体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外殖体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外殖体的比率（m），以及再生丛芽外殖体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
培养基编号
浓度/mg·L－1
m/%
n/个
6BA
IAA
1
0.5
0
76.7
3.1
2
0.1
77.4
6.1
3
0.2
66.7
5.3
4
0.5
60.0
5.0
回答下列问题：
（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为______和______两类。上述培养基中，6BA属于______类生长调节剂。
（2）在该实验中，自变量是______，因变量是______，自变量的取值范围是________________。
（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是____号培养基。
（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入______（填“6BA”或“IAA”）。
参考答案
1．答案：C 解析：土壤中的微生物70%～90%是细菌，真菌的含量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
2．答案：D 解析：某些细菌如蓝细菌（蓝藻）、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是从外界获得补充的。常用的伊红—美蓝培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，则菌落呈绿色金属光泽。
3．答案：C 解析：分解纤维素的细菌能将纤维素分解， 刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
4．答案：C 解析：该培养基是含有丰富天然有机营养成分的固体培养基。不仅有分解纤维素的微生物的生长，还有其他微生物的生长，它们都能形成相应的菌落，但只有能分解纤维素的微生物，用刚果红溶液染色，能在其菌落周围出现透明圈，而其他微生物的菌落周围因为没有纤维素的分解，不能形成透明圈。微生物个体微小，并不能用肉眼观察微生物的细胞分裂。
5．答案：C
6．答案：C 解析：土壤中微生物分离的步骤是：土壤取样→样本稀释→微生物培养和观察等，其中微生物分离过程主要在于接种阶段，通过平板划线法或者稀释涂布平板法，使得微生物充分稀释和分离，从而使得平板上生长的一个菌落来源于单个的细菌，这样就达到了从土壤中分离微生物的目的。接斜面是在试管中扩大细菌数量或者短时间保存菌种的方法，不属于分离微生物的过程。
7．答案：D 解析：该培养基的有机营养成分里面含碳的营养物质是纤维素，不能分解利用纤维素的微生物不能在该培养基上生长，所以属于选择培养基。
8．答案：B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A项说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B项是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物；C项是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；D项是正确的，发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
9．答案：B
10．答案：A
11．答案：B 解析：大肠杆菌的代谢产物（有机酸）可与伊红—美蓝结合，使菌落呈绿色，并带有金属光泽；圆褐固氮菌能自行固氮，可用无氮培养基进行选择。
12．答案：C 解析：绿藻为自养型生物，能够快速繁殖，说明该培养液不缺少无机盐。酵母菌为异养型生物，在该培养液中不能生长，说明缺少的是有机养分。而培养液中O2和CO2含量对二者的影响不是很大。
13．答案：B
14．答案：B
15．答案：C 解析：唾液中含唾液淀粉酶，在适宜条件下可将淀粉分解。唾液淀粉酶的最适pH为中性，最适温度为37 ℃，故新鲜唾液与盐酸混合或煮沸后，唾液淀粉酶将失去活性，不能分解淀粉，淀粉遇碘呈蓝黑色。实验装置中，④中含唾液淀粉酶且有活性，可将淀粉分解，加碘液，呈棕黄色，③中加碘液后呈棕黄色，故面包霉能分泌淀粉酶。⑤中加一定浓度的蔗糖溶液，不影响淀粉与碘液反应，呈蓝黑色。
16．答案：C 解析：本题考查琼脂在培养基中的作用。在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种理想的凝固剂，是由其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。琼脂在水中加热至95 ℃时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40 ℃左右才开始凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。
17．答案：C 解析：在植物组织培养过程中，接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜温度和光照进行培养，培养期间应定期消毒，防止细菌等微生物污染。
18．答案：B
19．答案：A 解析：MS培养基含大量元素、微量元素、有机物，有机物包括甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、蔗糖等，特别包括植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含植物激素。
20．答案：B 解析：植物组织培养指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术，主要用于获取脱毒苗、培养转基因的植株、单倍体育种、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株属于多倍体育种，不需要植物组织培养技术。
21．答案：B 解析：胡萝卜韧皮部细胞在培养基中经过培养，首先脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，诱导生成芽、根，然后长成新的植株，因为长出芽、根后要进行光合作用，所以要给以合适的光照，而在诱导分化时要加入适当比例的生长素和细胞分裂素。因为不是植物体细胞的杂交，所以不需要去掉细胞壁。
22．答案：B 解析：细胞分裂素和生长素的使用顺序不同，培养的结果不同。先使用生长素，再使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化；两者同时使用，细胞分化频率提高。
23．答案：D 解析：植物的组织培养需要严格的无菌操作，将菊花茎段插入时，不应倒插是因为倒插的茎段不易形成愈伤组织，而不是为了防止杂菌污染。
24．答案：ABC 解析：体积分数为70%的酒精对外殖体消毒效果好，外殖体放入其中摇动2～3次，持续6～7 s，易去除；质量分数为0.1%的氯化汞溶液有剧毒，消毒效果最好，时间较短，但消毒后难以去除残余的汞；体积分数为10%的过氧化氢溶液消毒效果好，且易分解成无毒化合物，用时5～15 min；抗菌素对外殖体消毒效果较好，用时30～60 min，去除难易程度适中。
25．答案：A 解析：一般来讲，进行植物组织培养时，培养条件应是相同的，但接种过程是否严格在无菌条件下进行，外殖体是否倒插等因素都会影响外殖体的生长。
26．答案：解析：对于一种培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，如果是一种天然培养基就不能从培养基的成分上区分它能培养何种微生物。分析化学成分要从营养物质的类型出发。上表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。对特殊营养物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可培养的微生物是自养型微生物。自生固氮微生物利用空气中的氮气为氮源，但它们是异养型微生物。配制培养基的目的是培养微生物，也可能是分离纯化、菌种鉴定等，为防止杂菌的污染，常用高压蒸汽灭菌法灭菌。对于菌种的分离纯化，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要加入常见的凝固剂——琼脂。
答案：（1）自养型微生物 （2）自生固氮微生物 （3）3 （4）灭菌 高压蒸汽灭菌法 （5）琼脂（或凝固剂）
27．答案：解析：（1）计数微生物时可选取多个菌落数相差不大的平板计数求其平均值。（2）每毫升样品中的菌落数为：23.4÷10－6÷0.2＝1.17×108（个）。（3）因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。
答案：（1）D （2）1.17×108 （3）多 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 （4）不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。
28．答案：解析：圆褐固氮菌能利用空气中的氮气，经还原获得氮源，用无氮培养基选择出圆褐固氮菌；硝化细菌是自养型微生物，能利用空气中的二氧化碳为碳源，因此利用不含有机碳源的培养基选择出硝化细菌；酵母菌对青霉素不敏感，通常用青霉素将其从混合菌中筛选出来；大肠杆菌的代谢产物有机酸能和伊红—美蓝培养基结合，使菌落呈绿色，有金属光泽，鉴别后，挑取菌落培养得到大肠杆菌。
答案：（1）圆褐固氮菌 （2）硝化细菌 （3）青霉素
（4）绿色，有金属光泽 大肠杆菌
29．答案：解析：（1）根据植物的需求量，培养基中的元素分为大量元素和微量元素，6BA属于细胞分裂素类的植物生长调节剂。（2）实验中的自变量是IAA的浓度，因变量是再生丛芽外殖体的比率和再生丛芽外殖体上的丛芽平均数。自变量的取值范围在0～0.5 mg/L之间。（3）诱导丛芽的总数量为m与n的乘积，所以1号培养基最少。（4）6BA属于细胞分裂素，有利于芽的分化，抑制根的形成。
答案：（1）大量元素 微量元素 细胞分裂素
（2）IAA浓度 再生丛芽外殖体的比率（m）和再生丛芽外殖体上的丛芽平均数（n） 0～0.5 mg·L－1
（3）1
（4）6BA