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第1章 发酵工程
第1节 传统发酵技术的应用
从社会中来
“葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶马上催。醉
卧沙场君莫笑,古来征战几人回。 ”(唐·王
翰)诗中提及的葡萄酒是人类利用微生物发酵
制作而来的。通过微生物的发酵作用还可以制
作葡萄醋。葡萄酒和葡萄醋都是以葡萄为原料
发酵而来的饮品,为什么一个是醇厚浓郁、耐
人寻味的酒,一个却是酸味柔和、 口感绵长的醋呢?它们的制作 方法有什么不同?你想不想自己动手制作葡萄酒和葡萄醋呢?
葡萄酒和葡萄醋都是由葡萄发酵而来,但是一个经酵母菌无氧 呼吸产生了酒精,另一个经醋酸菌有氧呼吸产生了醋酸,因此口 感不同。
20 世纪 40 年代
利用发酵工程大规模生产青霉 素,随着链霉素、金霉素和土 霉素等抗生素的发现及生产, 抗生素发酵工业兴起。
1897 年
科学家发现了酶在酵母菌发
酵中的作用,之后微生物的 分离和纯化技术得到了应用。
20 世纪 80 年代以后
科学家开始运用数学、 动力学、化学工程原理 以及计算机技术对发酵 过程进行综合研究。
1857 年
法国微生物学家巴斯德通过实 验证明酒精发酵是由活的酵母 菌引起的,从而将酵母菌与发
从传统发酵技术到发酵工程 究竟什么是发酵呢?
1957 年
用微生物生产谷氨酸获 得成功,酶制剂、多糖、 维生素发酵工业兴起。
20 世纪 70 年代以后
基因工程。细胞工程等
发展,人胰岛素和干扰 素大量生产。
我们祖先就会利用微生物将谷物、水果发酵为含酒精的饮料。
1850 1900 1940 1960 1970 1980
约9000年前
酵联系起来。
一、发酵与传统发酵技术
1、发酵
(1)概念: 指人们利用微生物,在适宜条件下,将原料通过微生物的 代谢转化为人类所需要的产物的过程。
(2)原理: 不同的微生物具有产生不同代谢产物的能力, 因此利用
它们既可以生产出人们所需要的多种产物。
需氧发酵( 醋酸发酵、谷氨酸发酵)
厌氧发酵( 酒精发酵、乳酸(泡菜、酸奶)发酵 )
(3)类型:
一、发酵与传统发酵技术
2、传统发酵技术
(1)概念: 直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵 保留下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵,制作
食品的技术。
固体发酵(泡菜、粮食白酒、腐乳等)
半固体发酵(豆豉、酱、酱油等)
(2)类型:×
一、发酵与传统发酵技术
2、传统发酵技术
(3)实例——腐乳
①原料:豆腐。
②参与发酵的微生物:酵母菌、曲霉 和毛霉等,其中起主要作用的是毛霉
。
一、发酵与传统发酵技术
2、传统发酵技术
(4)传统发酵技术的优点:
操作简单,适用于家庭式或作坊式生产,它是文化的传承等。
(5)传统发酵技术的缺点:
生产条件不易控制,产品容易受杂菌污染,生产效率较低等。
②作用: 在无氧情况下能将葡 乳酸链球菌(球状)
萄糖分解成乳酸
(1)应用的微生物:
乳酸菌 〈
表、人或动物肠道
④种类: 乳酸链球菌、乳酸杆菌
C6H12O6 酶 2C3H6O3 (乳酸) +能量
③分布广泛:空气、土壤、植物体
(一)发酵类型
1.乳酸发酵
⑤应用: 乳制品的发酵、泡菜的腌制
①代谢类型: 异养厌氧型
二、尝试制作传统发酵食品
(2)原理:
乳酸杆菌(杆状)
①代谢类型: 异养兼性厌氧型
②作用:在无氧情况下,
进行酒精发酵
③分布:含糖量较高的蔬菜、 酵母菌的出芽生殖
水果表面
④特点: 一类单细胞真菌
⑤应用: 酿酒、制作馒头和面包
C6H12O6 酶 2C2H5OH+二氧化碳+能量
(1)应用的微生物:
酵母菌
(一)发酵类型
2.酒精发酵
二、尝试制作传统发酵食品
(2)原理:
C6H12O6+2O2 酶→2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量
酶
C2H5OH+O2 →CH3COOH+H2O+能量
在氧气、糖都充足时, 能将糖分解成醋酸;
在缺糖时,能将乙醇 转化成乙醛,在将乙醛变 成醋酸
(一)发酵类型
3.醋酸发酵
(1)应用的微生物:
醋酸菌
二、尝试制作传统发酵食品
①代谢类型: 异养需氧型
③应用: 酿醋
②作用:
(2)原理:
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
1.制作泡菜的原理
(1)利用植物体表面天然的乳酸菌;
(2)发酵期间,乳酸会不断的积累,当它的质量百分比为
0.4%~0.8%时,泡菜的口味、品质最佳。
(3)反应式:
C6 H12O6 2C3 H6O3 (乳酸) +能量
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
2.材料用具
(1)各种新鲜蔬菜(选新鲜蔬菜或其他原料,因为亚硝酸盐的含量低) 均可, 一般用白菜、黄瓜、豇豆、胡萝卜、白萝卜等。
(2)调味品:如花椒、八角、生姜、蒜瓣及其他香辛料、白酒、白砂糖 和盐。
(3)泡菜坛或其他密封性良好的罐子。
泡菜坛子使用之前要检查密封性的目的:
给泡菜坛内创造无氧环境,严格控制厌氧条件
用清水和食盐配制质量百分比 为5%-20%的盐水,并将盐水 煮沸 ,冷却待用;
调味;抑制其他微生物生长
②盐水浓度要适宜的目的:
过高:口味不佳,亚硝酸盐含量高; 乳酸发酵受抑制,泡菜风味差。
过低:杂菌易繁殖,导致泡菜变质。
③盐水煮沸的目的:
杀灭微生物;去除水中的溶解氧
将新鲜蔬菜洗净 ,切成块状或 条状, 混合均匀, 晾干后装入 泡菜坛内;装至半坛时, 加入 蒜瓣、生姜及其他香辛料,继 续装至八成满;
④盐水冷却后使用的目的:
为了不影响乳
酸菌的生命活
动
向坛盖边缘的水槽中注满水 , 并在发酵过程中注意经常向水 槽中补充水;根据室内温度控 制发酵时间;
将冷却好的盐水缓缓倒入坛中, 使盐水没过菜料,盖好坛盖
原料处理、 蔬菜装坛
配制盐水
封坛发酵
加盐水
①盐的作用:
3.制作流程
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
4.结果分析和评价
(1)用水密封泡菜坛的目的是什么?这说明泡菜制作需要什么条件 目的是给泡菜坛内创造无氧环境,这说明泡菜制作需要在无氧条 件下进行。
(2)为什么泡菜坛只能装八成满?
在泡菜发酵初期,由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为 活跃,它们可进行发酵,发酵产物中有较多的CO2,如果泡菜坛装 得太满,发酵液可能会溢出坛外;
另外,泡菜坛装得太满,会使盐水不太容易完全淹没菜料,从 而导致坛内菜料变质腐烂; 泡菜坛留有一定的空间,也更方便拿 取泡菜。 (防止由于产生CO2而导致发酵液溢出坛外;
防止因装太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料变质腐烂)
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
4.结果分析和评价
(3)如何判断你腌制的泡菜是否成功?色泽如何?口味如何?
泡菜质量可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定;
可以通过在显微镜下观察乳酸菌的形态;
根据亚硝酸盐的含量来评定;
根据不同时期泡菜坛中乳酸菌的数量来评定。
一般来说,腌制成功的泡菜汤清亮,无梅花浮膜,菜质脆嫩 度适口,酸甜咸味适宜,具有一定的香气,咀嚼后无渣等。
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
5.进一步探究
泡菜在腌制过程中会有亚硝酸盐产生;
膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,但如果人体摄入 过量,会发生中毒,甚至死亡;
查阅资料,设计实验跟踪检测泡菜在制作过程中亚硝酸盐含 量的变化,并探索腌制方法、时间长短和温度高低等条件对亚 硝酸盐含量的影响,寻求提高泡菜质量的措施。
某同学在制作泡菜前,查阅资料得
知,可以向泡菜坛中加人一些“陈泡
菜水 ”;在用质量百分比为5%的食盐
水制作泡菜时,他在不同时间测定了
泡菜中亚硝酸盐的含量,结果见曲线
图。请你帮他分析相关问题
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
5.进一步探究
(1).泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素
哪些? 腌制方法、腌制时间长短、温度高低
(2).据图分析,从亚硝酸盐的含量来看,你认
为该泡菜在什么时间食用比较合适 为什么
应该在10天后食用比较合适;
因为这时亚硝酸盐含量已经降到较低的水平;
(3).加入“陈泡菜水 ”的目的是什么?
“陈泡菜水 ”中含有纯度较高的乳酸菌,加入“陈泡菜水 ” 相当于接种乳酸菌。
(4).他第一次制作出的泡菜“咸而不酸 ”,造成这个结果最可能的
盐浓度高,杀死了乳酸菌等微生物
原因是什么?
发酵时期 乳酸菌 乳酸
亚硝酸盐
发酵前期 少(O2抑制乳酸 菌活动) 少
增加(硝酸盐还原菌 的作用)
发酵中期 最多(无氧条件 乳酸积累,抑制 其他菌活动) 增多
达到最多后开始下降
(硝酸盐还原菌受抑制, 部分亚硝酸盐被分解)
发酵后期 减少(乳酸积累, pH下降,抑制乳 酸菌活动) 继续增多,最 后保持稳定
下降至保持相对稳定
(硝酸盐还原菌被完 全抑制)
变化曲线
二、尝试制作传统发酵食品——制作泡菜
6. 腌制中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
1.制作原理
①许多新鲜水果的果皮表面附着有大量的不同种类的 野生酵母菌;
②在这些酵母菌的作用下,水果可以发酵成果酒(通过有氧呼吸 大量繁殖,通过无氧呼吸产酒精)
③在有氧的条件下,果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。
+ 2+ ( 1
C2H5OH+O2 酶 CH3COOH(醋酸) +H2O+能量 果醋 酶
5
④相关
能量
量
O2
+
C
0
酒精
6CO2
OH
酶
H
O
2
2
C
H
2
6
酶
6O
6
6
O
O
2
2
1
1
H
H
6
6
酒
应
果
反
C6H12O6+2O2 > 2CH3COOH(醋酸) +2H2O+2CO2+能量
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
制作果酒 制作果醋
醋酸杆菌
细菌
酵母菌
真菌
菌种名称 生物学分类 代谢类型 适宜温度 繁殖方式
对氧的需求
酵母菌 真核生物 异养 兼性厌氧型 约为28 ℃ 出芽生殖
前期需氧,
后期不需氧
醋酸菌 原核生物 异养 需氧型 30—35℃ 二分裂
一直需氧
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
菌种繁殖方式和代谢类型
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
2.材料用具
①新鲜的水果(如葡萄、苹果、山楂和
龙眼等)
②洗洁精、体积分数70%的酒精、发酵瓶、
纱布和榨汁机等
①70%的酒精的作用: 消毒
②冲洗的目的: 去除表面灰尘、污物 ③冲洗1-2次即可,能否反复冲洗,
为什么? 不能,
防止野生菌种数量减少,影响发酵
④为什么去梗前冲洗:
以防葡萄汁流失和破损导致杂菌污染
⑤葡萄汁装入发酵瓶时,为何要留有 1/3的空间?
a.先让酵母菌进行有氧呼吸,快速繁殖 ,耗尽O2后,再进行酒精发酵;
b.防止发酵过程中产生的CO2造成发酵 液溢出
⑥每隔12h左右将瓶盖拧松一点的目
将温度控制在18-30℃进行发 酵,在发酵过程中,每隔12h 左右将瓶盖拧松一点(注意: 不是打开瓶盖),此后再拧紧 瓶盖。发酵时间为10-12d.
取新鲜葡萄,用清水冲洗1-2
次 ,再去除枝梗和腐烂的籽粒,
用榨汁机榨取葡萄汁,将葡萄 汁装入发酵瓶(注意: 要留有 大约1/3的空间),盖好瓶盖
将发酵瓶、榨汁机等器具用洗 洁精清洗干净,并用体积分数 为70%的酒精消毒,晾干备用
⑦拧松但不打开的目的:
防止O2进入和杂菌污染
榨汁装瓶
酒精发酵
冲洗葡萄
器具消毒
3.制作流程
排出气体
沥干
的:
⑧如何检测果酒的发酵情况
(检测是否产生酒精)?
a.闻 b.品尝
c.用酸性条件下的重铬酸钾溶液检 测橙色→灰绿色
⑨醋酸菌从何而来?
打开瓶盖后,空气中的醋酸菌会 进入果酒发酵液中大量繁殖,其 他的菌因不适应环境条件(不能
a.闻; b.品尝;
c.使用pH试纸检测检测和比较发酵前后的pH值;
d.观察醋酸菌膜是否形成;
打开瓶盖, 盖上纱布
当葡萄酒制作完成后, 打开瓶 盖,盖上一层纱布,进行葡萄 醋的发酵。发酵温度为30-35 ℃,时间为7-8d。
可通过从发酵瓶口取样来对发 酵的情况进行检测
果酒检测
⑩如何检测果醋的发酵情况? 利用乙醇)而不能繁殖
果醋检测
3.制作流程
结构 作用 酒精发酵时状态
醋酸发酵时状态
充气口 通入空气 关闭
打开,并接入气泵
排气口 排出CO2 打开
打开
出料口 便于取样监测 关闭
关闭
排气口要通过一个长而弯曲的胶管
与瓶身连接,为什么?
其目的是防止空气中微
生物的污染。
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
4.果酒发酵与果醋发酵的装置
2023/4/18
果酒发酵
果醋发酵
发酵菌种 酵母菌
醋酸菌
菌种来源 附着在新鲜水果果皮表 面的野生酵母菌
空气中的醋酸菌或人 工接种的醋酸菌
菌种代谢类型 异养兼性厌氧型
异养需氧型
菌种生物类型 真核生物
原核生物
发酵原理
发酵条件 温度 18~30℃
30~35℃
时间 10~12d
7~8d
氧气 前期需氧,后期不需氧
始终需氧
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
5.果酒发酵与果醋发酵的比较
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
6.结果分析与评价
①在制作果酒和果醋的过程中,发酵液分别有哪些变化?其 中最明显的变化发生在发酵后多少天?引起变化的原因是什么?
在葡萄酒的制作过程中,发酵液会产生气泡,这是因为 酵母菌发酵产生CO2;开始发酵后, CO2产生越来越多,会使发 酵液出现“沸腾 ”现象
在发酵的10天后,这种现象最明显。
如果是用紫色葡萄制作葡萄酒,随着发酵时间的延长,由果 皮进入发酵液的花青素会越来越多,因而发酵液的颜色会逐渐加 深变成深红色。
果醋发酵过程中一般不会出现气泡,发酵完成时,在发酵 液的液面上会出现一层菌膜,这是醋酸菌膜。
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
6.结果分析与评价
②在制作果酒的过程中,除了酵母菌,是否还有其他微生物生长 它们会对果酒发酵产生影响吗?如果有,如何避免这种影响?
果酒中除了酵母菌,还有乳酸菌、醋酸菌等微生物。
乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等,从而使果酒变质。
可以通过调节发酵的温度、果酒的pH等来控制乳酸菌的含量。
在有氧的情况下,醋酸菌能把糖分解成醋酸;在缺少糖源的情况 下,乙醇便是醋酸菌的碳源和能源,它将乙醇转化为乙醛,再将乙醛 变为醋酸。由于醋酸菌在有氧的条件下才能进行旺盛的代谢活动,因 此在制作果酒的过程中尽量减少O2含量,可以抑制醋酸菌的生长繁殖。 此外,通过调节发酵的温度、果酒的pH等同样可以控制醋酸菌的含量。
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
6.结果分析与评价
③在制作果醋的过程中,酵母菌是否还会继续发酵?醋酸菌从 何而来?采用什么措施可以加快果醋的制作?
随着醋酸发酵的进行,发酵液的pH、发酵温度等均不利于酵母 菌的生长繁殖,因此酵母菌活性很低。
在我们的实验条件下,当打开瓶盖后, 空气中的醋酸菌会进入 发酵液中大量繁殖,其他的菌因不适应环境条件而不能繁殖。
在工业上,后期醋的发酵需要人工接种醋酸菌。
我们制作果醋时,可以先买一瓶醋, 将其打开暴露于空气中, 一段时间后在醋的表面会有一层薄膜(实际上是醋酸菌),用这层 薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间。
二、尝试制作传统发酵食品——制作果酒和果醋
6.结果分析与评价
④你制作的果酒和果醋的口味如何?如果你对结果不满意,应该 如何改进?
制作成功的葡萄酒爽口,柔和,有浓郁的果香味;
制作成功的果醋有特有的果香,酸味柔和,稍有甜味,不涩。
如果对制作结果不满意,应从制作过程全面考虑改进措施,如 严格控制发酵条件,发酵所用装置要进行清洗、晾干、消毒等。
到社会中去
少量制作转向大规模生产时,会遇到许多新问题。例如,少量制 作果醋时,不需要专门的搅拌装置。而大规模生产果醋时,由于发酵 罐容积很大,就需要安装搅拌器,以保障醋酸菌对O2的需求。可见在 大规模生产发酵产品时,需要进行更为全面周详的考虑,如考虑原料 的来源与选样、菌种的选育与培养、发酵设备的选择、发酵条件的自 动化控制、发酵产品的质量控制、成本价格等。 自己制作的果酒和果 醋并非商品意义上的产品。在实际生产中还需要经过沉淀、过滤、灭 菌、装瓶等过程才能获得成品酒或醋。果酒还需要在一定条件下进行 后续发酵,以获得特定的风味和色泽。通过深入思考,可以感悟到, 工程、技术与科学的不同——科学以“发现 ”为核心,技术以“发明 ”为核心,工程以“建造 ”和“产品 ”为核心。技术要通过工程设计 等环节,将一系列相关技术体系化地组合起来,才能转化应用在工程 中,大规模生产人们需要的产品。
2023/4/18
概念
来源
类型
结果
实质
应用
优点
缺点
直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次
发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行 发酵、制作食品的技术。
原材料中天然存在或面团、卤汁等发酵物中的微生物
固体发酵及半固体发酵
有氧或无氧条件下的物质氧化分解
生产人们需要的各种发酵产品
果酒、果醋、泡菜、酱油等的制作
操作简单,便于家庭式或作坊式生产,是文化的传承等
生产条件不易控制,容易受杂菌污染,生产效率较低等。
传统发酵技术
洗净,切块 或条状,混 合均匀,晾 干装坛
装至半坛时, 加入香辛料, 然后装至八 成满
称取食盐 配制盐水 煮沸冷却
测定亚硝 酸盐含量
制作泡菜
发
酵
选择材料
成 品
18~30℃ 30~35℃
果酒 果醋
果酒和果醋的制作
无氧 有氧
榨 汁
监测与 鉴定
发酵器 具消毒
乙酸 发酵
酒精 发酵
挑选 葡萄
10-12d 7-8d
冲 洗
一、概念检测
1. 油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。制作时需要将豆腐浸入含有
乳酸菌、芽抱杆菌等微生物的卤汁中发酵。判断下列相关表述是否正确。
(1)卤汁中的乳酸菌和芽抱杆菌不存在竞争关系。 (× )
(2)乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2。 ×()
(3)微生物发酵产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道。 (√ )
一、概念检测
2. 传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物。下列相
关叙述错误的是( D)
A. 腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵
B. 制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶
C. 制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精
D. 制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸
二、拓展应用
1.请举例说说你身边的传统发酵食品有哪些,它们的制作原理是
什么。有机会的话,你也可以尝试做一做。
提示:腐乳、泡菜、酱、豆豉等都是生活中常
见的传统发酵食品。
C同学的装置更适合制作果醋。出料口可以用来取样;充气口可
以在发酵时连接充气泵进行充气,从而有利于醋酸菌更好地进行有 氧呼吸,提高发酵效率;排气口可以用来排出在发酵过程中产生的 气体,它通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气 中微生物的污染。进一步改进:可以在充气口填充棉花或者安装其 他过滤装置,以防止充入的气体携带外来杂菌污染发酵液等。
3.有3位同学分别采用了3种不同的发酵装置来制作果醋。 A同学用的是 带盖的塑料瓶; B同学用了没有盖的塑料瓶,在发酵过程中无盖的瓶口 一直由捆绑在瓶口的8层纱布覆盖; C同学则设计了如右图所示的发酵 装置。结合果醋的制作原理,你认为哪一种发酵装置更适合制作果醋 你还能继续改进这种装置吗?
二、拓展应用