浙科版选修1第一部分实验1：大肠杆菌的培养和分离（共27张PPT）
文档属性
| 名称 | 浙科版选修1第一部分实验1：大肠杆菌的培养和分离（共27张PPT） |  | |
| 格式 | zip | ||
| 文件大小 | 1.1MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 浙科版 | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2014-12-08 09:52:23 | ||
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文档简介
课件27张PPT。实验1：大肠杆菌的培养和分离一、无菌技术1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。1）无菌操作：各种器皿必需是无菌的
各种培养基必需是无菌的
接种时不能带入其他杂菌 （１）消毒：
指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌：
以物理或化学方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体，芽孢等，而达到完全无菌的过程。1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min，如牛奶、啤酒、果酒、酱油等不宜进行高温灭菌的液体
3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等;氯气消毒水源
4、紫外线消毒：如接种室空气
……(3)消毒的方法：(4)常用灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸汽灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min.4、不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）：G6玻璃砂漏斗过滤（G6孔径最小，细菌不能滤过）1.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿
（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管
（3） 实验操作者的双手答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。思考题二、大肠杆菌按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。培养基类型液体培养基固体培养基凝固剂
琼脂扩大培养，工业生产分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏三选择培养基——在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，如
尿素固体培养基可以分离以尿素为氮源的微生物
不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌鉴别培养基——在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物，如
伊红—美蓝和大肠杆菌的代谢产物结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽，可以用来鉴别大肠杆菌配置步骤称量溶化调PH灭菌倒平板过程四、培养 五、分离第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。培养皿倒置：防止培养皿盖上的水滴落在培养基上，使培养基上的菌落随水扩散，达不到分离的目的。平板划线时不能划破培养基的原因
一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；
二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
课题2
分离以尿素为氮源的
微生物课题的内容：从土壤中分离出能利用尿素的细菌，观察菌落数，并了解它在生态平衡中的作用。
以LB全营养培养基为对照，观察全营养生长细菌的菌落数。实验原理：脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，脲酶可将尿素分解为能被植物吸收的氨，利用尿素作为其生长的氮源（反应式）中性碱性酚红颜色黄色红色实验目的：1、使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）2、使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应利用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离出能利用尿素的细菌，再通过稀释涂布分离法，将该菌分散开来，以形成单菌落。琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。1、 为分离土壤中含有脲酶的细菌，先将土样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的土样用玻璃刮刀接种到固体培养基的表面进行培养，观察菌落生长情况，这种分离细菌的方法叫 ⑤ ，下图所示的四种菌落生长情况图中，不可能由该方法得到的是 ⑥ 。用该方法统计土壤样本菌落数时 ⑦ （“需要”或“不需要”）对照组，因为 ⑧ 。
A B C D
2、若要分离的细菌为土壤中分解尿素为氮源的微生物则需要的培养基有 和 且本实验的所用的固体培养基的凝固剂是 。
3、以下对“分离以尿素为氮源的微生物”的实验结果分析，正确的是：
A、两种培养基上的单菌落数目应该相同
B、单菌落周围红色环带的大小代表脲酶活性的大小
C、该方法可以精确的测出该细菌在土壤中的含量
D、若两个培养基均有大量菌落说明该细菌在土壤中含量较大 （3）灭菌的定义： 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之过程。 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。芽孢 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.
各种培养基必需是无菌的
接种时不能带入其他杂菌 （１）消毒：
指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌：
以物理或化学方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体，芽孢等，而达到完全无菌的过程。1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min，如牛奶、啤酒、果酒、酱油等不宜进行高温灭菌的液体
3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等;氯气消毒水源
4、紫外线消毒：如接种室空气
……(3)消毒的方法：(4)常用灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸汽灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min.4、不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）：G6玻璃砂漏斗过滤（G6孔径最小，细菌不能滤过）1.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
（1） 培养细菌用的培养基与培养皿
（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管
（3） 实验操作者的双手答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。思考题二、大肠杆菌按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。培养基类型液体培养基固体培养基凝固剂
琼脂扩大培养，工业生产分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏三选择培养基——在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，如
尿素固体培养基可以分离以尿素为氮源的微生物
不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌鉴别培养基——在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物，如
伊红—美蓝和大肠杆菌的代谢产物结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽，可以用来鉴别大肠杆菌配置步骤称量溶化调PH灭菌倒平板过程四、培养 五、分离第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。培养皿倒置：防止培养皿盖上的水滴落在培养基上，使培养基上的菌落随水扩散，达不到分离的目的。平板划线时不能划破培养基的原因
一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；
二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
课题2
分离以尿素为氮源的
微生物课题的内容：从土壤中分离出能利用尿素的细菌，观察菌落数，并了解它在生态平衡中的作用。
以LB全营养培养基为对照，观察全营养生长细菌的菌落数。实验原理：脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，脲酶可将尿素分解为能被植物吸收的氨，利用尿素作为其生长的氮源（反应式）中性碱性酚红颜色黄色红色实验目的：1、使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）2、使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应利用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离出能利用尿素的细菌，再通过稀释涂布分离法，将该菌分散开来，以形成单菌落。琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。1、 为分离土壤中含有脲酶的细菌，先将土样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的土样用玻璃刮刀接种到固体培养基的表面进行培养，观察菌落生长情况，这种分离细菌的方法叫 ⑤ ，下图所示的四种菌落生长情况图中，不可能由该方法得到的是 ⑥ 。用该方法统计土壤样本菌落数时 ⑦ （“需要”或“不需要”）对照组，因为 ⑧ 。
A B C D
2、若要分离的细菌为土壤中分解尿素为氮源的微生物则需要的培养基有 和 且本实验的所用的固体培养基的凝固剂是 。
3、以下对“分离以尿素为氮源的微生物”的实验结果分析，正确的是：
A、两种培养基上的单菌落数目应该相同
B、单菌落周围红色环带的大小代表脲酶活性的大小
C、该方法可以精确的测出该细菌在土壤中的含量
D、若两个培养基均有大量菌落说明该细菌在土壤中含量较大 （3）灭菌的定义： 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌之过程。 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。芽孢 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.