高中生物人教版（2019）选修3 2.2动物细胞工程章节综合练习题（含解析）
文档属性
| 名称 | 高中生物人教版（2019）选修3 2.2动物细胞工程章节综合练习题（含解析） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 900.9KB | ||
| 资源类型 | 试卷 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2023-11-13 00:21:02 | ||
图片预览
文档简介
中小学教育资源及组卷应用平台
2.2动物细胞工程
一、单选题
1．（2020高三上·莆田月考）以下有关动物细胞培养、植物组织培养的表述中正确的是（ ）
A．动物细胞培养中，含15%CO2的恒温培养箱的作用是调控pH和温度
B．植物组织培养过程中加入诱导因素也不会出现组织分化现象
C．目前使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型
D．动物细胞培养过程中，首先要用胃蛋白酶处理部分组织以使细胞分散获得单个细胞
2．（2023·辽宁模拟）下列关于动、植物细胞培养的比较的叙述，错误的是（ ）
A．两者培养基的成分有所不同，但都能得到优良个体
B．为了得到单细胞悬液，两者所用的材料和方法有所不同
C．在两者培养的过程中，往培养基中加入的酶不同
D．为获得杂交细胞，两者使用的诱导方法有所不同
3．（2022高二下·温州期末）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分，获得细胞悬液
B．细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间
C．培养基中添加胎牛血清有助于提高动物细胞克隆形成率
D．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养
4．（2022高二下·重庆市月考）某实验室做了如图过程所示的研究，下列与实验相关的叙述正确的是（ ）
A．过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变
B．过程②是脱分化，过程③是指细胞融合
C．干细胞与小鼠成纤维母细胞所含的遗传物质相同
D．乙细胞不能持续分裂，但能分泌抗体
5．（2021高二下·渭滨期末）关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是（ ）
A．二者所用培养基有差异
B．二者都需要无菌操作条件
C．二者依据的生物原理相同
D．二者培养的细胞都能进行有丝分裂
6．（2021高三上·苏州开学考）将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合（只考虑细胞两两融合）后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如表。下列相关叙述正确的是（ ）
细胞 融合细胞
人 鼠 细胞样编号 残留人染色体编号
ttHH TThh ① 17
② 10、10、17
③ 17、X
A．在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖
B．可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh
C．可以确定①②③的相关基因组成相同
D．可以将T（t）基因定位于人第17染色体
7．（2023高二下·龙口月考）相较于其他模型动物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系统可对更广泛的抗原产生应答且其较大的脾脏可产生更多抗体。除此之外，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、全新的表位识别、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式）等优势。下列相关叙述正确的是（ ）
A．利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体将会发生细胞免疫
B．给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分是单克隆抗体
C．利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力
D．体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的氧气和5%的CO
8．（2021高二下·安徽月考）下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B淋巴细胞
B．过程②中使用聚乙二醇有利于杂交瘤细胞的形成
C．一个效应B淋巴细胞只能产生一种抗体，故可在体外培养单个的①细胞，制备单克隆抗体
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
9．（2023高二下·龙口月考）肿瘤细胞表达的PDL1可结合到T细胞表面的PD1，使T细胞失去识别和打击肿瘤细胞的能力。为研究PD1基因敲除的T细胞治疗结直肠癌的有效性，研究人员采用CT26细胞（结直肠癌细胞株）、小鼠等实验材料进行相关实验。下列叙述错误的是（ ）
A．肿瘤细胞表面的PDL1与T细胞表面的PD1结合，促进T细胞的活化
B．可用基因敲除技术敲除小鼠T细胞中PD1基因，建立小鼠结肠癌模型
C．进行CT26细胞传代培养时，需在培养液中加入胰蛋白酶
D．PDL1高水平表达，一般有利于肿瘤细胞的免疫逃逸
10．2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A．捐献者卵母细胞应发育到特定时期再去核
B．捐献者没有基因能遗传给三亲婴儿
C．三亲婴儿的出生属于无性生殖
D．该技术可避免母亲的红绿色盲传递给后代
11．（2023高二下·高碑店月考）我国科研人员利用小鼠获得了单倍体胚胎干细胞，流程如下图所示。目前构建成功的单倍体胚胎干细胞，其细胞核内包含的性染色体全部都是X染色体，而无包含Y染色体的细胞。已知小鼠Y染色体比X染色体短小。下列叙述错误的是（ ）
A．精子头部入卵后，透明带迅速发生生理反应拒绝其它精子进入透明带
B．为得到只含精子染色体的胚胎干细胞需在核融合前剔除卵子的雌原核
C．由图可知，单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞
D．Y染色体比X染色体短小，可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因
12．（2021高三上·兰山开学考）下列关于体细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（ ）
A．利用体细胞核移植技术可以加速家畜遗传改良进程
B．利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可以作为生物反应器生产许多珍贵的医用蛋白
C．转基因克隆动物不能作为异种移植的供体进行器官移植，因为会发生免疫排斥反应
D．利用体细胞核移植技术培育后代可以避免细胞核供体的线粒体遗传病基因传递给后代
13．（2023高二下·保定月考）下列对高等哺乳动物细胞体外培养时，需要满足的细胞培养条件的表述，正确的是（ ）
A．所需的各种营养物质 B．消毒的环境
C．30℃左右的恒温环境 D．95%的O2和5%的CO2
14．（2023·重庆模拟）干细胞是一类具有自我更新能力的细胞，能产生特定组织甚至生物体的所有细胞类型。根据个体发育过程中干细胞出现的次序和发育潜能的不同，可分为胚胎干细胞和成体干细胞。下列相关说法错误的是（ ）
A．胚胎干细胞分化为完整个体体现了已分化动物细胞具有全能性
B．已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞
C．利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题
D．将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险
15．（2020高二下·渭滨期末）细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择错误的是（ ）
A．选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率
B．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞
C．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体
D．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
16．通过克隆猪来给生猪养殖户提供猪仔是一条值得探索的途径。早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功概率较低的主要原因，Bcl-2是细胞凋亡抑制基因，用实时荧光逆转录PCR技术(RT-qPCR)可以检测该基因表达水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因表达水平检测流程如图，下列说法错误的是（ ）
A．选择减数第二次分裂中期的卵母细胞进行核移植有助于细胞核全能性的表达
B．使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞以保证正常的二倍体核型
C．根据RT-qPCR最终的荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的翻译水平
D．应选择有健康体质和正常繁殖能力的经过同期发情处理的个体作为受体母猪
17．（2022高二下·龙岩期中）科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的贴壁型细胞，称为诱导多能于细胞，简称iPS细胞，下列叙述错误的是（ ）
A．可将iPS细胞进行悬浮培养且不会发生接触抑制的现象
B．培养iPS细胞需提供95%空气和5%CO2的混合气体环境
C．由iPS细胞产生的干细胞移植回病人体内，理论上不发生免疫排斥
D．由iPS细胞产生的特定细胞，可在新药的测试中发挥重要作用
18．（2021高三上·青岛开学考）人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通常采用双抗体夹心法对抗原进行定量检测，具体过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．可将Myo基因导入小鼠骨髓瘤细胞，来制备抗Myo的单克隆抗体
B．抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，用于诊断急性心肌梗塞
C．固相抗体和酶标抗体虽都能与抗原结合，但二者仍具有不同的结构
D．加入酶标抗体的目的是通过测定酶促反应的产物量来判断待测抗原量
19．（2021高二下·浦城月考）下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
B．细胞工程在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质
C．骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体
D．核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体
20．（2022·杭州模拟）为了研究治疗A型流感病毒感染引发肺部炎性损伤的方法，科研人员以免疫小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞为材料，制备了抗PA-X蛋白（PA-X蛋白是A型流感病毒复制需要的一种蛋白）的单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（ ）
A．制备过程需要用到细胞融合、克隆培养法等技术
B．细胞培养液中可加入胰岛素等物质促进细胞克隆
C．制备过程中几次筛选都只获得产生目标抗体的杂交瘤细胞
D．制备过程可用胰蛋白酶处理使杂交瘤细胞脱落，随后稀释
21．（2022高三下·金华模拟）利用现代生物技术可进行动，植物的胚胎培养。下列叙述错误的是（ ）
A．在愈伤组织的基础上可以培养得到植物的体细胞胚
B．绵羊“多莉"克隆过程中8细胞胚的基因表达顺序开始重排
C．植物体外受精过程中的精卵识别过程依赖于细胞壁
D．早期囊胚不能利用酶解法进行胚胎分割
22．（2022高二下·盐田月考）研究人员采用体细胞克隆技术培育克隆羊，其操作流程如图所示。下列叙述正确的是( )
A．X不能直接发育为个体的原因是细胞中的遗传物质不能表达
B．重组细胞要进行分裂和发育需经振荡或用灭活的病毒、PEG等激活
C．早期胚胎在丙体内能正常孕育是因为胚胎可与母体建立正常的生理和组织联系
D．经培育得到的丁羊，其细胞内的遗传物质与甲完全相同
23．（2022高二下·广东月考）下列有关核移植和克隆动物的叙述，错误的是（ ）
A．供体细胞应选择传代培养10代以内的细胞
B．体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的
C．用于核移植的卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞
D．通过体细胞核移植技术获得的克隆动物做不到对体细胞动物100％的复制
24．（2022·金华模拟）下图为杂交瘤细胞的制备及初步筛选示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。免疫B细胞（HGPRT+）能在HAT筛选培养液中正常生长。下列叙述正确的是（ ）
A．从HAT培养液中获得的抗体即为单克隆抗体
B．仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合
C．在HAT培养液中能长期存活的细胞具有特异性强、灵敏度高的特点
D．多个B细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能合成DNA
25．（2023高三上·贵州开学考）20世纪60年代，科学家采用体细胞杂交技术得到了“番茄—马铃薯”杂种植株，但该植株并没有地上结番茄、地下长马铃薯。下列有关叙述错误的是（ ）
A．体细胞杂交之前用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体
B．番茄和马铃薯的原生质体可采用高Ca2+—高pH融合法得到杂种细胞
C．愈伤组织脱分化后即可发育成完整的杂种植株
D．植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
二、实验探究题
26．（2022·浙江模拟）回答下列（1）、（2）小题：
（1）原产于亚洲西部的葡萄含有丰富的矿物质、多种维生素和人体所需的氨基酸，具有生津消食、缓解疲劳、补血益气的功效。利用葡萄生产的葡萄果汁、葡萄酒、葡萄醋等因具有独特的口感和丰富的营养而倍受人们喜爱。请回答下列问题。
Ⅰ.在自然界中可以从某些微生物如 等中获得果胶酶。在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使
Ⅱ.用如图装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀 进行关闭。比色法测定葡萄酒中的酒精含量：首先用 和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取等量经脱色处理的葡萄酒，加入 ，得到样品管，用比色计测得 ，最后计算得到酒精含量。
Ⅲ.在生产葡萄酒时由于操作不当，发现葡萄酒变酸。在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是
Ⅳ.为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行 处理。
（2）脓毒症的发病与肝素结合蛋白（HBP）的水平相关性显著，研制抗HBP单克隆抗体用于临床HBP定量测定，具有重要的临床应用价值。有关抗HBP单克隆抗体的研发流程如下。
Ⅰ.用 对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
Ⅱ.无菌取小鼠脾脏，提取脾细胞后可使用效率很高的 技术使其与骨髓瘤细胞融合。
Ⅲ.利用 筛选出杂交瘤细胞并进行培养。通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次 ，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤 。
Ⅳ.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是 。单克隆抗体的研发成功解决了普通抗血清的 问题。
27．（2023高二下·番禺期末）大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫，主要步骤如下。
步骤①：分离培养大熊猫的耳组织细胞，低温保存。
步骤②：从雌性大熊猫卵巢中获取卵母细胞并培养。
步骤③：细胞核移植获得重构胚。
步骤④：将不同性别的胚胎移植到代孕个体内。
（1）在体细胞核移植过程中，将卵母细胞培养到 后进行去核操作，去核事实上是去除卵母细胞的 。
（2）用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物体细胞的 。在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是 法。
（3）步骤③中的重构胚发育成囊胚所需营养物质主要来源于 。
三、综合题
28．（2022高三下·富宁开学考）克隆羊多利的问世，在全世界引发了一场大讨论，其中关于治疗性克隆的问题也成为人们关注的焦点。如图所示为人类治疗性克隆的大概过程，请据图回答下列问题：
（1）过程A表示 ，是目前实践体型细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由① 提供细胞质，进行人工重组。
（2）经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞，在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持 状态。
（3）治疗性克隆的结果说明高度分化的体细胞核具有 ，相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是 的结果。
（4）对于治疗性克隆仍然存在许多争论，有男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？ ，为什么？ 。
29．（2021高三下·贵阳月考）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将紫外线（UV）照射处理的黑芥叶肉原生质体和花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株。对双亲和部分杂合新植株的染色体计数，结果如下表所示。请回答下列问题：
植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株A 杂合新植株B 杂合新植株C
染色体数/条 18 16 34 30 58
（1）原生质体融合的理论依据是 。诱导原生质体融合常用的化学物质是 。
（2）将花椰菜和黑芥体细胞在--定条件下融合成杂种细胞，继而培养成新植物体的技术称为
，该技术的优势在于 。
（3）已知用一定剂量的UV处理黑芥原生质体可破坏其染色体。根据表中数据，尝试推测已获得的花椰菜黑芥杂合新植株B染色体数目少于34（双亲染色体数之和）、杂合新植株C染色体数目大于34，可能的原因是 。若要分析杂合新植株的染色体变异类型，应剪取杂合新植株与 植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
（4）简要写出从杂合新植株中筛选出具有高抗性的杂合新植株的思路： 。
30．（2020·曲靖模拟）细胞融合技术是细胞工程中的一门非常重要的技术，该技术能够按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品，作为科学研究的一种手段，在细胞工程中有着非常广泛的应用。据图回答下列问题：
（1）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，ab细胞融合之前，要用到的酶是 ，处理后得到 。接着可用化学诱导剂 诱导融合，融合成功的标志是 ，这些融合细胞经过脱分化形成 。
（2）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞。将其融合获得 （答出两个特点）的d杂交瘤细胞进行 培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。利用灭活的病毒可以诱导产生d细胞，其中的灭活是指 。
答案解析部分
1．【答案】C
【解析】【解答】A、动物细胞培养过程中，需要适宜的温度和一定的其他环境，所以含5%CO2的恒温培养箱用来调控pH值和温度，A错误；
B、植物组织培养过程中加入诱导因素会出现组织分化，B错误；
C、使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，C正确；
D、动物细胞培养的适宜pH是7.2-7.4，该pH下胃蛋白酶会失活，所以动物细胞培养过程中，应用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞，D错误。
故答案为：C。
【分析】动物细胞培养过程中，需要适宜的温度和一定的其他环境，所以含5%CO2的恒温培养箱用来调控pH值和温度；动物组织培养过程中会出现组织分化；原代培养的细胞因最接近于体内细胞的生长特性；动物细胞培养的适宜pH是7.2-7.4，该pH下胃蛋白酶会失活，所以动物细胞培养过程中，应用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞。
2．【答案】A
【解析】【解答】A、动物细胞培养和植物组织培养所用培养基营养成分不同，动物细胞培养基中含血清和血浆、植物组织培养基中含有生长素和细胞分裂素，培养目的都是为了得到大量细胞，A错误；
B、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理将细胞分散开，但植物组织培养过程中将细胞分散开不需要用酶处理，B正确；
C、在两者培养的过程中，为了对单个细胞进行培养，动物细胞培养过程中为了得到单细胞需要用胰蛋白酶处理，而植物细胞培养过程中不需要，C正确；
D、为获得杂交细胞，两者使用的诱导方法有所不同，动物细胞融合特有的方法是灭活病毒促融，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养，在传代培养的过程中可能会发生癌变。动物细胞培养的目的是获得细胞群或细胞产物。
2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
3．【答案】C
【解析】【解答】A、胰蛋白酶能消化细胞间的胶原纤维和其他成分，获得单细胞悬液，A错误；
B、传代培养的实质就是分离后再次培养，进行一次分离再培养称之为传一代，因此细胞进行一次传代培养所需时间应该大于一个细胞周期的时间，B错误；
C、动物血清有利于为细胞增殖提供有利的环境条件，有助于提高动物细胞克隆形成率，C正确；
D、动物细胞可以贴壁生长，也能进行悬浮培养，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、动物细胞培养过程：
2、传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。一般情况下，细胞传至10~50代后，增殖会明显减缓，甚至完全停止，部分细胞出现核型异常。
4．【答案】D
【解析】【解答】A、过程①导入的诱导基因属于基因重组，不属于基因突变，A错误；
B、过程②是细胞分化的过程，干细胞分裂分化成造血干细胞、脂肪细胞、骨细胞等，B错误；
C、小鼠成纤维母细胞导入诱导基因后形成的干细胞遗传物质发生改变，C错误；
D、乙细胞是浆细胞，不能持续分裂但能分泌抗体，D正确。
故答案为：D。
【分析】分析题图，①表示采用基因工程技术将诱导基因导入小鼠成纤维母细胞；②表示细胞分化过程；③是诱导细胞融合的过程；④
是克隆化培养获取单克隆抗体的过程。
5．【答案】C
【解析】【解答】A、植物组织培养的培养基成分含营养物质（蔗糖）、植物激素等，动物细胞培养的培养基成分含营养物质（葡萄糖）、动物血清等，A正确；
B、植物组织培养需要无菌操作条件，动物细胞培养是无菌无毒的液体环境，B正确；
C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，C错误；
D、植物组织培养和动物细胞培养的细胞分裂方式都是有丝分裂，D正确。
故答案为：C。
【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较：
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理 细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 固体培养基 液体培养基
培养基成分 营养物质（蔗糖）、植物激素等 营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果 植物体 细胞株、细胞系
培养目的 快速繁殖、培育无毒苗等 获得细胞或细胞产物
6．【答案】B
【解析】【解答】A、融合细胞有多种，由题意知，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖，A错误；
B、由表格信息可知，①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，由于有丝分裂中期一条染色体上含有2个染色单体，因此此时细胞中含有HH基因，鼠染色体上的基因型是TTTThhhh，所以融合细胞①的基因型是TTTTHHhhhh，B正确；
C、由于"增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失"，故②③基因型不能确定，C错误；
D、据表格信息可知，残留人染色体编号均含有17号染色体，而①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，故可将H（h）基因位于17号染色体上，D错误。
故答案为：B。
【分析】动物细胞融合：
（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程.融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。
（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。
7．【答案】C
【解析】【解答】A、利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体不会发生细胞免疫，会发生体液免疫，A错误；
B、给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分B淋巴细胞能产生相应的抗体，B错误；
C、利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特点，因而表现为能迅速大量增殖的能力，C正确；
D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的空气和5%的CO ，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、体液免疫：
2、动物细胞培养条件： （1）营养：培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质，通常需要加入血清等天然成分。 （2）无菌、无毒的环境。 （3）温度、pH和渗透压。 （4）气体环境：氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。动物细胞培养需要将培养瓶置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
8．【答案】C
【解析】【解答】A、①为浆细胞，常从小鼠的脾脏中获得，A正确；
B、过程②为细胞融合，常用试剂为聚乙二醇，B正确；
C、已免疫的B淋巴细胞（浆细胞）属于高度分化的细胞，有一定的寿命，不能长期培养，C错误；
D、④是经过筛选得到的杂交瘤细胞，能分泌特异性抗体同时还能无限增殖，D正确。
故答案为：C。
【分析】 单克隆抗体是由B细胞产生的仅针对某一抗原的抗体，通常由杂交瘤细胞获得。单克隆抗体制备流程参考如下：（1）给小鼠注射特定的抗原蛋白，刺激小鼠的免疫反应，生成免疫的B淋巴细胞；培养骨髓瘤细胞，利用癌细胞具有无限增殖的特点，大量繁殖骨髓瘤细胞；（2）诱导动物细胞融合，（聚乙二醇、灭活的病毒或者电刺激等）；（3）在具有筛选作用的培养基上培养，得到杂交瘤细胞；（4）克隆杂交细胞，筛选阳性杂交瘤细胞；（5）注射产生专一抗体的杂交瘤细胞，体外培养，制备单克隆抗体。
9．【答案】A
【解析】【解答】A、肿瘤细胞表达的PDL1可结合到T细胞表面的PD1，使T细胞失去识别和打击肿瘤细胞的能力，抑制T细胞的活化，A错误；
B、基因敲除技术敲除小鼠T细胞中PD1基因，抑制PD1的合成，阻止PDL1分子与PD1结合，从而使T细胞能行使正常的免疫功能，从而利于建立小鼠结肠癌模型，B正确；
C、 CT26细胞进行传代培养时，一般用胰蛋白酶处理，形成单个细胞，说明细胞间物质的主要成分是蛋白质，C正确；
D、肿瘤细胞可通过大量表达PDL1，与T细胞表面的PD1结合，抑制T细胞活化，有利于肿瘤细胞的免疫逃逸，D正确。
故答案为：A。
【分析】传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。一般情况下，细胞传至10~50代后，增殖会明显减缓，甚至完全停止，部分细胞出现核型异常。
10．【答案】A
【解析】【解答】A、捐献者卵母细胞应发育到特定时期再去核，通常是减数第二次分裂中期，A正确；
B、捐献者提供了卵母细胞的质基因，B错误；
C、三亲婴儿的出生经过了精卵结合的过程，属于有性生殖，C错误；
D、该技术中，母亲提供了卵母细胞的细胞核，色盲基因位于细胞核中，不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代，D错误。
故答案为：A。
【分析】体外受精
（1）哺乳动物的体外受精技术的主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理。
（2）胚胎可能来源以及生殖方式如下：
胚胎来源 生殖方式
核移植 无性生殖
体外受精 有性生殖
体内受精 有性生殖
11．【答案】A
【解析】【解答】A、 精子入卵后，卵黄膜会立即发生一种生理反应，拒绝其它精子进入透明带，A错误；
B、受精作用下卵细胞的细胞核与精子的细胞核会融合，因此为了得到只含精子染色体的胚胎干细胞需要在核融合之前剔除卵细胞的雌原核，B正确；
C、由图示可知，体外培养到囊胚阶段，囊胚出现内细胞团和滋养层，因此单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞 ，C正确；
D、Y染色体比X染色体短小，因此Y染色体上要比X染色体上的基因要少，也就可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因，D正确；
故答案为：A。
【分析】受精过程中“反应”的比较
（1）从发生时间看
①透明带的反应发生在精子触及卵细胞膜的瞬间。
②卵细胞膜的反应发生在精子入卵后。
（2）从生理作用看
①透明带的反应是阻止后来的精子进入透明带。
②卵细胞膜的反应是拒绝其他精子再进入卵内。
12．【答案】C
【解析】【解答】A、利用体细胞核移植技术已展示出广阔的应用前景，可以快速繁殖具有优良品质的家畜，可以加速家畜遗传改良进程，A正确；
B、利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用蛋白，如乳腺生物反应器、膀胱生物反应器等，B正确；
C、设法去除猪抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官，可作为异种移植的供体进行器官移植，C错误；
D、利用体细胞核移植技术培育后代由于细胞质来自卵细胞的供体，可以避免细胞核供体的线粒体遗传病基因传递给后代，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物体细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。如克隆羊“多利”。
2、体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。
13．【答案】A
【解析】【解答】A、动物细胞培养需要有充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等，A正确；
B、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，B错误；
C、动物细胞培养需要36.5℃左右的恒温环境，C错误；
D、动物细胞培养需要95%空气+5%CO2，D错误。
故答案为：A。
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）
14．【答案】A
【解析】【解答】A、在适当条件下，胚胎干细胞可被诱导分化为多种细胞、组织、器官，不能分化为完整个体，A错误；
B、已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞，比如诱导多能干细胞（iPS细胞），B正确；
C、成体干细胞来源于自体，利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题，C正确；
D、干细胞分裂分化能力强，会增加生物体内细胞的分裂能力，将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。
2、胚胎干细胞的特点：在形态上，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。
15．【答案】B
【解析】【解答】A、卵母细胞中含有促进全能性表达的物质，因此择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，A正确；
B、高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞，B错误；
C、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，C正确；
D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
16．【答案】C
【解析】【解答】A、减数第二次分裂中期的卵母细胞内含有动物生长发育的全部信息和营养，有助于动物细胞核全能性的表达，A正确；
B、由于10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型，因此使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞，B正确；
C、根据RT-qPCR最终的荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的转录水平，C错误；
D、应选择有健康体质和正常繁殖能力的经过同期发情处理的个体作为受体母猪，这样受体母猪的身体子宫所处时期适宜胚胎生长，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、 体细胞核移植技术 ：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
2、体细胞核移植过程：
3、体细胞核移植的应用：a、加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；b、转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；c、克隆动物的组织、器官做移植的供体；d、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
4、体细胞核移植技术存在的问题：（1）胚胎成活率低；（2）动物健康存在问题；（3）克隆动物食品的安全性问题。
17．【答案】A
【解析】【解答】A、iPS细胞具有发育的全能性，但iPS细胞在悬浮培养过程中会发生接触抑制的现象，A错误；
B、动物细胞培养时需要提供95%空气和5%CO2的混合气体环境，培养iPS细胞也不例外，其中5%CO2有调节pH的作用，B正确；
C、将iPS细胞增殖分化出的不同细胞与病人体内细胞含有的遗传物质基本相同，因此，移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；
D、iPS细胞能分化产生的特定细胞，是一类类似胚胎干细胞的细胞，具有发育的全能性，故可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、iPS细胞能分化产生特定的细胞，因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。
18．【答案】A
【解析】【解答】A、抗体是浆细胞产生的，仅有骨髓瘤细胞是不能产生抗体，且Myo基因表达出来的是抗原，A错误；
B、Myo是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一，而抗原和抗体的结合具有特异性，故利用抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，可用于诊断急性心肌梗塞，B正确；
C、固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合，二者仍具有不同的结构，C正确；
D、该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，而酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠产生了效应B细胞）；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合（注意融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选）；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞（特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体）；然后对它进行克隆化培养和抗体检测（筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞）；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。
2、单克隆抗体的应用：①因为纯度高、特异性强，灵敏度高，可作为诊断试剂
②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。
19．【答案】D
【解析】【解答】A、PEG是促细胞融合剂，不能直接诱导植物细胞融合，植物细胞需要先去除细胞壁形成原生质体后才能融合，A错误；
B、细胞工程在细胞水平上定向改变细胞核的遗传物质，B错误；
C、能产生抗体的是浆细胞，骨髓瘤细胞不能产生抗体，只有与经过免疫的B细胞融合后形成杂交瘤细胞才可以制备单克隆抗体，C错误；
D、核移植克隆的动物，需要供核一方和供质一方（一般用处于减数第二次分裂中期的卵细胞的细胞质），其线粒体DNA来自供卵母体，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。
2、制备单克隆抗体的流程 ：
（1）给小鼠注射特定的抗原蛋白，刺激小鼠的免疫反应，生成免疫的B淋巴细胞；培养骨髓瘤细胞，利用癌细胞具有无限增殖的特点，大量繁殖骨髓瘤细胞；
（2）诱导动物细胞融合，（聚乙二醇、灭活的病毒或者电刺激等）；
（3）在具有筛选作用的培养基上培养，得到杂交瘤细胞；
（4）克隆杂交细胞，筛选阳性杂交瘤细胞；
（5）注射产生专一抗体的杂交瘤细胞，体外培养，制备单克隆抗体。
3、细胞核移植受体细胞一般选择去核卵母细胞，细胞核移植生物的线粒体DNA主要来自母方。
20．【答案】C
【解析】【解答】A、单克隆抗体的制备需要将B细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，且对杂交瘤细胞进行筛选，最后对能产生单抗的细胞进行克隆培养，A正确；
B、胰岛素可以促进葡萄糖进入细胞，为细胞呼吸提供底物，为细胞分裂提供更多的能量，B正确；
C、第一次筛选是用HAT培养基获得杂交瘤细胞（B细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞），两次抗体筛选：第一次是筛选能针对PA-X蛋白的杂交瘤细胞，第二次筛选是筛选针对PA-X蛋白特定部位（通常为5-6个氨基酸残基，为抗原决定簇），因此第一次筛选（HAT培养基）得到的有含有目标抗体的杂交瘤细胞，是混合细胞，也有能产生非目标抗体的细胞，C错误；
D、胰蛋白酶可以水解细胞间的蛋白质，使杂交瘤细胞脱落，更换新的培养液，D正确。
故答案为：C。
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
21．【答案】C
【解析】【解答】A、在愈伤组织的基础上可以通过脱分化过程通过培养基中激素含量的调整培养得到植物的体细胞胚，A正确；
B、绵羊“多莉"克隆过程中8细胞胚中的每个细胞均具有发育的全能性，尽管都是尚未分化的细胞，但其中基因表达顺序开始重排，B正确；
C、精子和卵细胞均没有细胞壁，植物体外受精过程中的精卵识别过程依赖于细胞膜的直接接触，C错误；
D、囊胚期的内细胞团细胞之间的连接非常紧密，胰蛋白酶很难将它们分离开，若用酶解法获得单细胞，此时的单个细胞不能发育成完成胚胎，只能采用胚胎分割技术获得多个胚胎，即早期囊胚不能利用酶解法进行胚胎分割，D正确。
故答案为：C。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
4、注意事项：（1）动物细胞连续培养50代左右，会出现大量细胞死亡而只有少量细胞生存的现象，这少数细胞的遗传物质发生变化，往往具有癌变的特点。（2）动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官。（3）动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养， 。
22．【答案】C
【解析】【解答】A、X是细胞核，细胞核无法直接发育成个体的原因是没有完整的细胞结构做为基础，A错误；
B 、振荡或用灭活的病毒、PEG等是激活重组胚，B错误；
C、对供、受体进行同期发情处理，使受体的生殖器官的生理变化是相同的，为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，C正确；
D、 经培育得到的丁羊 ，重组细胞的细胞核来做甲，细胞质来自乙，D错误；
故答案为：C
【分析】（1）动物细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性。
克隆动物不是对供体动物的100%的复制，原因是克隆动物的亲本有三个，即细胞核供体、卵母细胞细胞质供体和代孕母体。
①克隆动物细胞核基因来自体细胞核供体，因此，克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。
②克隆动物细胞质基因来自卵母细胞，因此，克隆动物的性状与卵母细胞供体部分相同。
③代孕母体没有为克隆动物提供遗传物质，因此，克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。
（2）胚胎移植
①移植对象：通过体外受精以及其他方式得到的胚胎。
②移植条件：同种的、生理状态相同的雌性动物体内。
③供体：在胚胎移植中提供胚胎的个体。
④受体：在胚胎移植中接受胚胎的个体。
⑤地位：通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。
23．【答案】C
【解析】【解答】A、体细胞核移植过程中供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，可以保证细胞的二倍体核型，A正确；
B、体细胞的分化程度高于胚胎细胞，故体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的，B正确；
C、用于核移植的卵母细胞一般选择减数二次分裂中期的卵母细胞，C错误；
D、体细胞核移植技术获得的克隆动物细胞质遗传物质来自受体卵母细胞，故做不到对体细胞动物100％的复制，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、 体细胞核移植技术
（1）将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
（2）体细胞核移植过程：
（3）体细胞核移植的应用：a、加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；b、转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；c、克隆动物的组织、器官做移植的供体；d、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
（4）体细胞核移植技术存在的问题：①胚胎成活率低；②动物健康存在问题；③克隆动物食品的安全性问题。
2、克隆动物和试管动物的异同
①试管动物和克隆动物的性状不同：前者由父本和母本共同决定，后者一般与核供体相同。
②试管动物和克隆动物的生殖方式不同：前者是有性生殖，后者是无性生殖。
③试管动物和克隆动物的产生过程不同：前者经过了体外受精过程，后者经过了核移植过程。
④试管动物和克隆动物细胞核遗传物质来源不同：前者细胞核遗传物质来自母本和父本两个个体，后者细胞核遗传物质仅来自供核亲本一个个体。
⑤试管动物和克隆动物的发育起点不同：前者的发育起点是受精卵，后者的发育起点是经过核移植后的重组细胞。
⑥获得试管动物和克隆动物相同之处：二者都经过早期胚胎培养和胚胎移植环节。
24．【答案】B
【解析】【解答】A、在HAT培养液中筛选出来的是杂交瘤细胞，可能有多种类型，因此后续还需要对这些杂交瘤细胞进行单一抗体检测，进而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，可见从HAT培养液中获得的抗体不是单克隆抗体，A错误；
B、仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合，据此可用灭活的仙台病毒作为促融剂，B正确；
C、在HAT培养液中能长期存活的细胞为杂交瘤细胞，这些细胞可能产生多种类型的抗体，因而不具有特异性强、灵敏度高的特点，C错误；
D、多个B细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能无限增殖，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖，诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产性杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。
2、单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内、体外培养。
3、制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体，但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。
25．【答案】C
【解析】【解答】A、植物细胞具有细胞壁，而细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以体细胞杂交之前用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，A不符合题意；
B、诱导原生质体融合的方法包括电融合法、离心法、PEG融合法以及高Ca2+—高pH融合法等，B不符合题意；
C、杂种细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，最终形成完整的杂种植株，C符合题意；
D、植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，能够扩大亲本范围，培育作物新品种，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】1、植物体细胞杂交
①概念：是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物细胞融合前需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，形成原生质体。诱导原生质体融合的方法包括电融合法、离心法、PEG融合法以及高Ca2+—高pH融合法等。
②原理：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
③意义：可克服远缘杂交不亲和的障碍，培育远缘杂交植株。
2、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，并给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。整个过程包括外植体消毒、脱分化形成愈伤组织、愈伤组织再被诱导生根发芽，最终培育成完整植株。利用的生物学原理是植物细胞的全能性。
26．【答案】（1）黑曲霉(或苹果青霉)；水果组织软化疏松及细胞受损；a；酒精标准溶液(或一系列浓度梯度的酒精溶液)；等量显色剂；光密度值；酒表面氧气浓度较大，醋化醋杆菌会大量繁殖形成菌膜；固定化
（2）肝素结合蛋白(或HBP)；电融合；选择培养基；克隆培养；细胞株；注射到小鼠腹腔内：体外培养；异质性
【解析】【解答】解：（1）I.果胶酶可以从一些微生物如黑曲霉（或苹果青霉）中获得；酶具有专一性，果胶酶水解果胶使水果组织软化疏松及细胞受损，故在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量。
II. 酒精发酵需要营造无氧条件，故在发酵过程中需要对气阀a进行关闭；用比色法测定酒精的含量，首先用酒精标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取一定量的不同发酵时间的葡萄酒，加入等量的显色剂，得到样品管，用比色计测得光密度值，最后计算得到酒精含量。
III.在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是醋化醋杆菌是好氧菌，在酒的表层氧气浓度较大，醋化醋杆菌会大量繁殖形成菌膜，从而在变酸的酒的表面会形成一层白色菌膜。
IV. 为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行固定化处理。
(2)I.分析题意可知，本过程目的是制备抗HBP单克隆抗体，故需要先用肝素结合蛋白（或HBP）对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
II.促使脾细胞与骨髓瘤细胞融合可用电融合技术。
III.利用选择培养基可筛选出杂交瘤细胞：在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都不能存活；通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次克隆培养，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
IV.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是注射到小鼠腹腔内进行体内培养或在培养液中进行体外培养；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点，其研发成功解决了普通抗血清的异质性问题。
【分析】1、果胶物质主要存在于植物初生壁和细胞中间，果胶物质是细胞壁的基质多糖。
2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
27．【答案】（1）减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）；纺锤体-染色体复合物
（2）细胞核具有全能性；显微操作
（3）去核的卵母细胞
【解析】【解答】（1）在核移植时的卵母细胞没有还没形成核膜，此时没有真正的细胞核，所以去除的其实是纺锤体-染色体复合物，在核移植前，需要将卵母细胞培养到减数分裂II中期，此时期第一极体与染色体位置很近，可以通过去除极体附近的部分细胞质的方法把染色体去掉，即此时的卵母细胞比较容易去核。
（2）动物细胞不具有全能性，而动物细胞核具有全能性，所以用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物体细胞的细胞核具有全能性；在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法。
（3）细胞核移植的受体细胞是去核的卵母细胞，卵母细胞中卵黄多，营养物质丰富，所以步骤③中的重构胚发育成囊胚所需营养物质主要来源于去核的卵母细胞。
【分析】动物细胞核移植技术
1、概念：动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。选取的卵母细胞应培养至减数分裂II中期，去的“核”其实是纺锤体-染色体复合物。
2、原理：动物细胞核具有全能性。
3、选取卵母细胞作为受体细胞的原因
①卵母细胞大，易于操作；
②卵黄多，营养物质丰富，能为胚胎发育提供充足的营养物质；
③其细胞质中有激发细胞核全能性的物质。
28．【答案】（1）细胞核移植；（次级）卵（母）
（2）未分化
（3）全能性可以表达（或全能性）；基因的选择性表达
（4）符合；因为脐带血不是来自于胚胎，其中的造血干细胞属于成体干细胞
【解析】【解答】（1）图中A表示细胞核移植；克隆技术中，患者的体细胞作为核供体，由①为卵（母）细胞提供细胞质进行人工重组。
（2）经过程B得到的结构为囊胚，其中④为内细胞团，内细胞团细胞是未分化的细胞。
（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核全能性可以表达，相同的胚胎干细胞，经过克隆过程可形成多种细胞，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是基因的选择性表达的结果。
（4）有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，这种做法符合伦理道德，因为脐带血不是来自于胚胎，其中的造血干细胞属于成体干细胞。（或脐带血是身外之物，属于废物利用，符合伦理道德）。
【分析】一、 图示所示为人类“治疗性克隆〞的大概过程。 图中①为卵〔母〕细胞；②为核移植所得的重组细胞；③为滋养层细胞；④为内细胞团，其中的细胞属于胚胎干细胞；A 表示核移植过程；B表示早期胚胎发育过程；C表示细胞分化过程。
二、治疗行克隆是通过构建出病患者自身的重组胚胎细胞，并定向诱导分化出相关细胞组织或者器官，移植给病患后达到治疗的目的。这样克隆出的组织器官因为和病患自身的抗原几乎一致，几乎不存在免疫排斥现象。是当前极为热门的生物医学研究方向。
三、 脐带血中含有的胚胎干细胞，可以诱导出该个体的组织或器官，且比治疗性克隆在操作过程方面节约了不少时间。
29．【答案】（1）细胞膜具有一定的流动性；聚乙二醇/PEG
（2）植物体细胞杂交；克服不同生物远杂交不亲和的障碍
（3）融合过程中染色体可能会丢失;融合是随机的，可能存在多个细胞的融合；双亲/花椰菜和黑芥
（4）将不同的杂合新植株分别进行黑腐病菌接种实验，观察比较它们的生长情况，生长最好的即为高抗性杂合新植株
【解析】【解答】（1）根据细胞膜具有一定的流动性的特点，经过一定的处理，实现原生质体的融合。诱导原生质体融合的手段有物理、化学的方法，常用的化学物质是聚乙二醇（PEG）。
（2）用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，利用植物体细胞杂交技术可将花椰菜和黑芥体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，继而利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成新植物体 ，该技术能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，这是该技术典型的优势。
（3）由于用一定剂量的UV处理黑芥原生质体可破坏其染色体，同时在融合过程中染色体可能会丢失，再加上融合是随机的，可能存在多个细胞的融合的情形，因此会出现杂合新植株C染色体数目大于34的情况。若要分析杂合新植株的染色体变异类型，应剪取杂合新植株与双亲（花椰菜和黑芥）植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的形态和数目，从而进行合理的分析。
（4）根据表中数据可知，杂合植株可能会有多种类型，为了从杂合新植株中筛选出具有高抗性的杂合新植株，需要进行个体生物学鉴定，即将不同的杂合新植株分别进行黑腐病菌接种实验，观察比较它们的生长情况，生长最好的即为高抗性杂合新植株。
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成为杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。其原理是细胞膜的流动性，（细胞的全能性）， 去除细胞壁后诱导原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，其典型优势是克服远缘杂交不亲和的障碍。
30．【答案】（1）纤维素酶和果胶酶；原生质体；PEG（聚乙二醇）；杂种细胞再生出细胞壁；愈伤组织
（2）既能产生特异性抗体，又能无限增殖；克隆化；利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构
【解析】【解答】（1）若a、b是番茄和马铃薯两种植物的体细胞植物，植物体细胞杂交前，先采用酶解法去除细胞壁，即采用纤维素酶、果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体；诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）；原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。融合细胞经脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。（2）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应将经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，仅考虑两两融合，则融合的细胞C有3种，融合后需经多次筛选，以得到既能产特异性抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞d。该过程中第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以便获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞进行体内或体外扩大培养。诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
【分析】1、植物体细胞杂交过程：（1）表示制备原生质体。去除细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；（2）诱导植物原生质体融合。方法为：物理法：离心、振动、电激，化学法：聚乙二醇（PEG）；（3）杂种细胞的筛选。细胞融合形成杂种细胞，完成的标志：再生出新的细胞壁；（4）杂种植株的培养和鉴定，过程包括脱分化和再分化过程。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
21世纪教育网 www.21cnjy.com 精品试卷·第 2 页 （共 2 页）
21世纪教育网(www.21cnjy.com)
2.2动物细胞工程
一、单选题
1．（2020高三上·莆田月考）以下有关动物细胞培养、植物组织培养的表述中正确的是（ ）
A．动物细胞培养中，含15%CO2的恒温培养箱的作用是调控pH和温度
B．植物组织培养过程中加入诱导因素也不会出现组织分化现象
C．目前使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型
D．动物细胞培养过程中，首先要用胃蛋白酶处理部分组织以使细胞分散获得单个细胞
2．（2023·辽宁模拟）下列关于动、植物细胞培养的比较的叙述，错误的是（ ）
A．两者培养基的成分有所不同，但都能得到优良个体
B．为了得到单细胞悬液，两者所用的材料和方法有所不同
C．在两者培养的过程中，往培养基中加入的酶不同
D．为获得杂交细胞，两者使用的诱导方法有所不同
3．（2022高二下·温州期末）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分，获得细胞悬液
B．细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间
C．培养基中添加胎牛血清有助于提高动物细胞克隆形成率
D．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养
4．（2022高二下·重庆市月考）某实验室做了如图过程所示的研究，下列与实验相关的叙述正确的是（ ）
A．过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变
B．过程②是脱分化，过程③是指细胞融合
C．干细胞与小鼠成纤维母细胞所含的遗传物质相同
D．乙细胞不能持续分裂，但能分泌抗体
5．（2021高二下·渭滨期末）关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是（ ）
A．二者所用培养基有差异
B．二者都需要无菌操作条件
C．二者依据的生物原理相同
D．二者培养的细胞都能进行有丝分裂
6．（2021高三上·苏州开学考）将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合（只考虑细胞两两融合）后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如表。下列相关叙述正确的是（ ）
细胞 融合细胞
人 鼠 细胞样编号 残留人染色体编号
ttHH TThh ① 17
② 10、10、17
③ 17、X
A．在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖
B．可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh
C．可以确定①②③的相关基因组成相同
D．可以将T（t）基因定位于人第17染色体
7．（2023高二下·龙口月考）相较于其他模型动物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系统可对更广泛的抗原产生应答且其较大的脾脏可产生更多抗体。除此之外，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、全新的表位识别、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式）等优势。下列相关叙述正确的是（ ）
A．利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体将会发生细胞免疫
B．给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分是单克隆抗体
C．利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力
D．体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的氧气和5%的CO
8．（2021高二下·安徽月考）下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B淋巴细胞
B．过程②中使用聚乙二醇有利于杂交瘤细胞的形成
C．一个效应B淋巴细胞只能产生一种抗体，故可在体外培养单个的①细胞，制备单克隆抗体
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
9．（2023高二下·龙口月考）肿瘤细胞表达的PDL1可结合到T细胞表面的PD1，使T细胞失去识别和打击肿瘤细胞的能力。为研究PD1基因敲除的T细胞治疗结直肠癌的有效性，研究人员采用CT26细胞（结直肠癌细胞株）、小鼠等实验材料进行相关实验。下列叙述错误的是（ ）
A．肿瘤细胞表面的PDL1与T细胞表面的PD1结合，促进T细胞的活化
B．可用基因敲除技术敲除小鼠T细胞中PD1基因，建立小鼠结肠癌模型
C．进行CT26细胞传代培养时，需在培养液中加入胰蛋白酶
D．PDL1高水平表达，一般有利于肿瘤细胞的免疫逃逸
10．2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述正确的是（ ）
A．捐献者卵母细胞应发育到特定时期再去核
B．捐献者没有基因能遗传给三亲婴儿
C．三亲婴儿的出生属于无性生殖
D．该技术可避免母亲的红绿色盲传递给后代
11．（2023高二下·高碑店月考）我国科研人员利用小鼠获得了单倍体胚胎干细胞，流程如下图所示。目前构建成功的单倍体胚胎干细胞，其细胞核内包含的性染色体全部都是X染色体，而无包含Y染色体的细胞。已知小鼠Y染色体比X染色体短小。下列叙述错误的是（ ）
A．精子头部入卵后，透明带迅速发生生理反应拒绝其它精子进入透明带
B．为得到只含精子染色体的胚胎干细胞需在核融合前剔除卵子的雌原核
C．由图可知，单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞
D．Y染色体比X染色体短小，可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因
12．（2021高三上·兰山开学考）下列关于体细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（ ）
A．利用体细胞核移植技术可以加速家畜遗传改良进程
B．利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可以作为生物反应器生产许多珍贵的医用蛋白
C．转基因克隆动物不能作为异种移植的供体进行器官移植，因为会发生免疫排斥反应
D．利用体细胞核移植技术培育后代可以避免细胞核供体的线粒体遗传病基因传递给后代
13．（2023高二下·保定月考）下列对高等哺乳动物细胞体外培养时，需要满足的细胞培养条件的表述，正确的是（ ）
A．所需的各种营养物质 B．消毒的环境
C．30℃左右的恒温环境 D．95%的O2和5%的CO2
14．（2023·重庆模拟）干细胞是一类具有自我更新能力的细胞，能产生特定组织甚至生物体的所有细胞类型。根据个体发育过程中干细胞出现的次序和发育潜能的不同，可分为胚胎干细胞和成体干细胞。下列相关说法错误的是（ ）
A．胚胎干细胞分化为完整个体体现了已分化动物细胞具有全能性
B．已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞
C．利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题
D．将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险
15．（2020高二下·渭滨期末）细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择错误的是（ ）
A．选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率
B．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞
C．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体
D．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
16．通过克隆猪来给生猪养殖户提供猪仔是一条值得探索的途径。早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功概率较低的主要原因，Bcl-2是细胞凋亡抑制基因，用实时荧光逆转录PCR技术(RT-qPCR)可以检测该基因表达水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因表达水平检测流程如图，下列说法错误的是（ ）
A．选择减数第二次分裂中期的卵母细胞进行核移植有助于细胞核全能性的表达
B．使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞以保证正常的二倍体核型
C．根据RT-qPCR最终的荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的翻译水平
D．应选择有健康体质和正常繁殖能力的经过同期发情处理的个体作为受体母猪
17．（2022高二下·龙岩期中）科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的贴壁型细胞，称为诱导多能于细胞，简称iPS细胞，下列叙述错误的是（ ）
A．可将iPS细胞进行悬浮培养且不会发生接触抑制的现象
B．培养iPS细胞需提供95%空气和5%CO2的混合气体环境
C．由iPS细胞产生的干细胞移植回病人体内，理论上不发生免疫排斥
D．由iPS细胞产生的特定细胞，可在新药的测试中发挥重要作用
18．（2021高三上·青岛开学考）人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通常采用双抗体夹心法对抗原进行定量检测，具体过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．可将Myo基因导入小鼠骨髓瘤细胞，来制备抗Myo的单克隆抗体
B．抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，用于诊断急性心肌梗塞
C．固相抗体和酶标抗体虽都能与抗原结合，但二者仍具有不同的结构
D．加入酶标抗体的目的是通过测定酶促反应的产物量来判断待测抗原量
19．（2021高二下·浦城月考）下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
B．细胞工程在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质
C．骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体
D．核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体
20．（2022·杭州模拟）为了研究治疗A型流感病毒感染引发肺部炎性损伤的方法，科研人员以免疫小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞为材料，制备了抗PA-X蛋白（PA-X蛋白是A型流感病毒复制需要的一种蛋白）的单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（ ）
A．制备过程需要用到细胞融合、克隆培养法等技术
B．细胞培养液中可加入胰岛素等物质促进细胞克隆
C．制备过程中几次筛选都只获得产生目标抗体的杂交瘤细胞
D．制备过程可用胰蛋白酶处理使杂交瘤细胞脱落，随后稀释
21．（2022高三下·金华模拟）利用现代生物技术可进行动，植物的胚胎培养。下列叙述错误的是（ ）
A．在愈伤组织的基础上可以培养得到植物的体细胞胚
B．绵羊“多莉"克隆过程中8细胞胚的基因表达顺序开始重排
C．植物体外受精过程中的精卵识别过程依赖于细胞壁
D．早期囊胚不能利用酶解法进行胚胎分割
22．（2022高二下·盐田月考）研究人员采用体细胞克隆技术培育克隆羊，其操作流程如图所示。下列叙述正确的是( )
A．X不能直接发育为个体的原因是细胞中的遗传物质不能表达
B．重组细胞要进行分裂和发育需经振荡或用灭活的病毒、PEG等激活
C．早期胚胎在丙体内能正常孕育是因为胚胎可与母体建立正常的生理和组织联系
D．经培育得到的丁羊，其细胞内的遗传物质与甲完全相同
23．（2022高二下·广东月考）下列有关核移植和克隆动物的叙述，错误的是（ ）
A．供体细胞应选择传代培养10代以内的细胞
B．体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的
C．用于核移植的卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞
D．通过体细胞核移植技术获得的克隆动物做不到对体细胞动物100％的复制
24．（2022·金华模拟）下图为杂交瘤细胞的制备及初步筛选示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。免疫B细胞（HGPRT+）能在HAT筛选培养液中正常生长。下列叙述正确的是（ ）
A．从HAT培养液中获得的抗体即为单克隆抗体
B．仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合
C．在HAT培养液中能长期存活的细胞具有特异性强、灵敏度高的特点
D．多个B细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能合成DNA
25．（2023高三上·贵州开学考）20世纪60年代，科学家采用体细胞杂交技术得到了“番茄—马铃薯”杂种植株，但该植株并没有地上结番茄、地下长马铃薯。下列有关叙述错误的是（ ）
A．体细胞杂交之前用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体
B．番茄和马铃薯的原生质体可采用高Ca2+—高pH融合法得到杂种细胞
C．愈伤组织脱分化后即可发育成完整的杂种植株
D．植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
二、实验探究题
26．（2022·浙江模拟）回答下列（1）、（2）小题：
（1）原产于亚洲西部的葡萄含有丰富的矿物质、多种维生素和人体所需的氨基酸，具有生津消食、缓解疲劳、补血益气的功效。利用葡萄生产的葡萄果汁、葡萄酒、葡萄醋等因具有独特的口感和丰富的营养而倍受人们喜爱。请回答下列问题。
Ⅰ.在自然界中可以从某些微生物如 等中获得果胶酶。在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使
Ⅱ.用如图装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀 进行关闭。比色法测定葡萄酒中的酒精含量：首先用 和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取等量经脱色处理的葡萄酒，加入 ，得到样品管，用比色计测得 ，最后计算得到酒精含量。
Ⅲ.在生产葡萄酒时由于操作不当，发现葡萄酒变酸。在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是
Ⅳ.为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行 处理。
（2）脓毒症的发病与肝素结合蛋白（HBP）的水平相关性显著，研制抗HBP单克隆抗体用于临床HBP定量测定，具有重要的临床应用价值。有关抗HBP单克隆抗体的研发流程如下。
Ⅰ.用 对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
Ⅱ.无菌取小鼠脾脏，提取脾细胞后可使用效率很高的 技术使其与骨髓瘤细胞融合。
Ⅲ.利用 筛选出杂交瘤细胞并进行培养。通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次 ，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤 。
Ⅳ.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是 。单克隆抗体的研发成功解决了普通抗血清的 问题。
27．（2023高二下·番禺期末）大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫，主要步骤如下。
步骤①：分离培养大熊猫的耳组织细胞，低温保存。
步骤②：从雌性大熊猫卵巢中获取卵母细胞并培养。
步骤③：细胞核移植获得重构胚。
步骤④：将不同性别的胚胎移植到代孕个体内。
（1）在体细胞核移植过程中，将卵母细胞培养到 后进行去核操作，去核事实上是去除卵母细胞的 。
（2）用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物体细胞的 。在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是 法。
（3）步骤③中的重构胚发育成囊胚所需营养物质主要来源于 。
三、综合题
28．（2022高三下·富宁开学考）克隆羊多利的问世，在全世界引发了一场大讨论，其中关于治疗性克隆的问题也成为人们关注的焦点。如图所示为人类治疗性克隆的大概过程，请据图回答下列问题：
（1）过程A表示 ，是目前实践体型细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由① 提供细胞质，进行人工重组。
（2）经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞，在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持 状态。
（3）治疗性克隆的结果说明高度分化的体细胞核具有 ，相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是 的结果。
（4）对于治疗性克隆仍然存在许多争论，有男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？ ，为什么？ 。
29．（2021高三下·贵阳月考）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将紫外线（UV）照射处理的黑芥叶肉原生质体和花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株。对双亲和部分杂合新植株的染色体计数，结果如下表所示。请回答下列问题：
植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株A 杂合新植株B 杂合新植株C
染色体数/条 18 16 34 30 58
（1）原生质体融合的理论依据是 。诱导原生质体融合常用的化学物质是 。
（2）将花椰菜和黑芥体细胞在--定条件下融合成杂种细胞，继而培养成新植物体的技术称为
，该技术的优势在于 。
（3）已知用一定剂量的UV处理黑芥原生质体可破坏其染色体。根据表中数据，尝试推测已获得的花椰菜黑芥杂合新植株B染色体数目少于34（双亲染色体数之和）、杂合新植株C染色体数目大于34，可能的原因是 。若要分析杂合新植株的染色体变异类型，应剪取杂合新植株与 植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
（4）简要写出从杂合新植株中筛选出具有高抗性的杂合新植株的思路： 。
30．（2020·曲靖模拟）细胞融合技术是细胞工程中的一门非常重要的技术，该技术能够按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品，作为科学研究的一种手段，在细胞工程中有着非常广泛的应用。据图回答下列问题：
（1）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，ab细胞融合之前，要用到的酶是 ，处理后得到 。接着可用化学诱导剂 诱导融合，融合成功的标志是 ，这些融合细胞经过脱分化形成 。
（2）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞。将其融合获得 （答出两个特点）的d杂交瘤细胞进行 培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。利用灭活的病毒可以诱导产生d细胞，其中的灭活是指 。
答案解析部分
1．【答案】C
【解析】【解答】A、动物细胞培养过程中，需要适宜的温度和一定的其他环境，所以含5%CO2的恒温培养箱用来调控pH值和温度，A错误；
B、植物组织培养过程中加入诱导因素会出现组织分化，B错误；
C、使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，C正确；
D、动物细胞培养的适宜pH是7.2-7.4，该pH下胃蛋白酶会失活，所以动物细胞培养过程中，应用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞，D错误。
故答案为：C。
【分析】动物细胞培养过程中，需要适宜的温度和一定的其他环境，所以含5%CO2的恒温培养箱用来调控pH值和温度；动物组织培养过程中会出现组织分化；原代培养的细胞因最接近于体内细胞的生长特性；动物细胞培养的适宜pH是7.2-7.4，该pH下胃蛋白酶会失活，所以动物细胞培养过程中，应用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞。
2．【答案】A
【解析】【解答】A、动物细胞培养和植物组织培养所用培养基营养成分不同，动物细胞培养基中含血清和血浆、植物组织培养基中含有生长素和细胞分裂素，培养目的都是为了得到大量细胞，A错误；
B、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理将细胞分散开，但植物组织培养过程中将细胞分散开不需要用酶处理，B正确；
C、在两者培养的过程中，为了对单个细胞进行培养，动物细胞培养过程中为了得到单细胞需要用胰蛋白酶处理，而植物细胞培养过程中不需要，C正确；
D、为获得杂交细胞，两者使用的诱导方法有所不同，动物细胞融合特有的方法是灭活病毒促融，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养，在传代培养的过程中可能会发生癌变。动物细胞培养的目的是获得细胞群或细胞产物。
2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
3．【答案】C
【解析】【解答】A、胰蛋白酶能消化细胞间的胶原纤维和其他成分，获得单细胞悬液，A错误；
B、传代培养的实质就是分离后再次培养，进行一次分离再培养称之为传一代，因此细胞进行一次传代培养所需时间应该大于一个细胞周期的时间，B错误；
C、动物血清有利于为细胞增殖提供有利的环境条件，有助于提高动物细胞克隆形成率，C正确；
D、动物细胞可以贴壁生长，也能进行悬浮培养，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、动物细胞培养过程：
2、传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。一般情况下，细胞传至10~50代后，增殖会明显减缓，甚至完全停止，部分细胞出现核型异常。
4．【答案】D
【解析】【解答】A、过程①导入的诱导基因属于基因重组，不属于基因突变，A错误；
B、过程②是细胞分化的过程，干细胞分裂分化成造血干细胞、脂肪细胞、骨细胞等，B错误；
C、小鼠成纤维母细胞导入诱导基因后形成的干细胞遗传物质发生改变，C错误；
D、乙细胞是浆细胞，不能持续分裂但能分泌抗体，D正确。
故答案为：D。
【分析】分析题图，①表示采用基因工程技术将诱导基因导入小鼠成纤维母细胞；②表示细胞分化过程；③是诱导细胞融合的过程；④
是克隆化培养获取单克隆抗体的过程。
5．【答案】C
【解析】【解答】A、植物组织培养的培养基成分含营养物质（蔗糖）、植物激素等，动物细胞培养的培养基成分含营养物质（葡萄糖）、动物血清等，A正确；
B、植物组织培养需要无菌操作条件，动物细胞培养是无菌无毒的液体环境，B正确；
C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，C错误；
D、植物组织培养和动物细胞培养的细胞分裂方式都是有丝分裂，D正确。
故答案为：C。
【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较：
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理 细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 固体培养基 液体培养基
培养基成分 营养物质（蔗糖）、植物激素等 营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果 植物体 细胞株、细胞系
培养目的 快速繁殖、培育无毒苗等 获得细胞或细胞产物
6．【答案】B
【解析】【解答】A、融合细胞有多种，由题意知，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖，A错误；
B、由表格信息可知，①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，由于有丝分裂中期一条染色体上含有2个染色单体，因此此时细胞中含有HH基因，鼠染色体上的基因型是TTTThhhh，所以融合细胞①的基因型是TTTTHHhhhh，B正确；
C、由于"增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失"，故②③基因型不能确定，C错误；
D、据表格信息可知，残留人染色体编号均含有17号染色体，而①细胞含有一条人体染色体，由细胞同时具有T、H基因才能存活，因此该染色体上含有H基因，故可将H（h）基因位于17号染色体上，D错误。
故答案为：B。
【分析】动物细胞融合：
（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程.融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。
（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。
7．【答案】C
【解析】【解答】A、利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体不会发生细胞免疫，会发生体液免疫，A错误；
B、给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分B淋巴细胞能产生相应的抗体，B错误；
C、利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特点，因而表现为能迅速大量增殖的能力，C正确；
D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95%的空气和5%的CO ，D错误。
故答案为：C。
【分析】1、体液免疫：
2、动物细胞培养条件： （1）营养：培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质，通常需要加入血清等天然成分。 （2）无菌、无毒的环境。 （3）温度、pH和渗透压。 （4）气体环境：氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。动物细胞培养需要将培养瓶置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
8．【答案】C
【解析】【解答】A、①为浆细胞，常从小鼠的脾脏中获得，A正确；
B、过程②为细胞融合，常用试剂为聚乙二醇，B正确；
C、已免疫的B淋巴细胞（浆细胞）属于高度分化的细胞，有一定的寿命，不能长期培养，C错误；
D、④是经过筛选得到的杂交瘤细胞，能分泌特异性抗体同时还能无限增殖，D正确。
故答案为：C。
【分析】 单克隆抗体是由B细胞产生的仅针对某一抗原的抗体，通常由杂交瘤细胞获得。单克隆抗体制备流程参考如下：（1）给小鼠注射特定的抗原蛋白，刺激小鼠的免疫反应，生成免疫的B淋巴细胞；培养骨髓瘤细胞，利用癌细胞具有无限增殖的特点，大量繁殖骨髓瘤细胞；（2）诱导动物细胞融合，（聚乙二醇、灭活的病毒或者电刺激等）；（3）在具有筛选作用的培养基上培养，得到杂交瘤细胞；（4）克隆杂交细胞，筛选阳性杂交瘤细胞；（5）注射产生专一抗体的杂交瘤细胞，体外培养，制备单克隆抗体。
9．【答案】A
【解析】【解答】A、肿瘤细胞表达的PDL1可结合到T细胞表面的PD1，使T细胞失去识别和打击肿瘤细胞的能力，抑制T细胞的活化，A错误；
B、基因敲除技术敲除小鼠T细胞中PD1基因，抑制PD1的合成，阻止PDL1分子与PD1结合，从而使T细胞能行使正常的免疫功能，从而利于建立小鼠结肠癌模型，B正确；
C、 CT26细胞进行传代培养时，一般用胰蛋白酶处理，形成单个细胞，说明细胞间物质的主要成分是蛋白质，C正确；
D、肿瘤细胞可通过大量表达PDL1，与T细胞表面的PD1结合，抑制T细胞活化，有利于肿瘤细胞的免疫逃逸，D正确。
故答案为：A。
【分析】传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。一般情况下，细胞传至10~50代后，增殖会明显减缓，甚至完全停止，部分细胞出现核型异常。
10．【答案】A
【解析】【解答】A、捐献者卵母细胞应发育到特定时期再去核，通常是减数第二次分裂中期，A正确；
B、捐献者提供了卵母细胞的质基因，B错误；
C、三亲婴儿的出生经过了精卵结合的过程，属于有性生殖，C错误；
D、该技术中，母亲提供了卵母细胞的细胞核，色盲基因位于细胞核中，不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代，D错误。
故答案为：A。
【分析】体外受精
（1）哺乳动物的体外受精技术的主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理。
（2）胚胎可能来源以及生殖方式如下：
胚胎来源 生殖方式
核移植 无性生殖
体外受精 有性生殖
体内受精 有性生殖
11．【答案】A
【解析】【解答】A、 精子入卵后，卵黄膜会立即发生一种生理反应，拒绝其它精子进入透明带，A错误；
B、受精作用下卵细胞的细胞核与精子的细胞核会融合，因此为了得到只含精子染色体的胚胎干细胞需要在核融合之前剔除卵细胞的雌原核，B正确；
C、由图示可知，体外培养到囊胚阶段，囊胚出现内细胞团和滋养层，因此单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞 ，C正确；
D、Y染色体比X染色体短小，因此Y染色体上要比X染色体上的基因要少，也就可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因，D正确；
故答案为：A。
【分析】受精过程中“反应”的比较
（1）从发生时间看
①透明带的反应发生在精子触及卵细胞膜的瞬间。
②卵细胞膜的反应发生在精子入卵后。
（2）从生理作用看
①透明带的反应是阻止后来的精子进入透明带。
②卵细胞膜的反应是拒绝其他精子再进入卵内。
12．【答案】C
【解析】【解答】A、利用体细胞核移植技术已展示出广阔的应用前景，可以快速繁殖具有优良品质的家畜，可以加速家畜遗传改良进程，A正确；
B、利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用蛋白，如乳腺生物反应器、膀胱生物反应器等，B正确；
C、设法去除猪抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官，可作为异种移植的供体进行器官移植，C错误；
D、利用体细胞核移植技术培育后代由于细胞质来自卵细胞的供体，可以避免细胞核供体的线粒体遗传病基因传递给后代，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、动物体细胞核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。如克隆羊“多利”。
2、体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。
13．【答案】A
【解析】【解答】A、动物细胞培养需要有充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等，A正确；
B、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，B错误；
C、动物细胞培养需要36.5℃左右的恒温环境，C错误；
D、动物细胞培养需要95%空气+5%CO2，D错误。
故答案为：A。
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）
14．【答案】A
【解析】【解答】A、在适当条件下，胚胎干细胞可被诱导分化为多种细胞、组织、器官，不能分化为完整个体，A错误；
B、已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞，比如诱导多能干细胞（iPS细胞），B正确；
C、成体干细胞来源于自体，利用成体干细胞进行疾病治疗理论上无需考虑免疫排斥的问题，C正确；
D、干细胞分裂分化能力强，会增加生物体内细胞的分裂能力，将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。
2、胚胎干细胞的特点：在形态上，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。
15．【答案】B
【解析】【解答】A、卵母细胞中含有促进全能性表达的物质，因此择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，A正确；
B、高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞，B错误；
C、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，C正确；
D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
16．【答案】C
【解析】【解答】A、减数第二次分裂中期的卵母细胞内含有动物生长发育的全部信息和营养，有助于动物细胞核全能性的表达，A正确；
B、由于10代以内的细胞可保证正常的二倍体核型，因此使用的良种猪体细胞一般都选择10代以内的细胞，B正确；
C、根据RT-qPCR最终的荧光强度可计算出基因Bcl-2在相应细胞中的转录水平，C错误；
D、应选择有健康体质和正常繁殖能力的经过同期发情处理的个体作为受体母猪，这样受体母猪的身体子宫所处时期适宜胚胎生长，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、 体细胞核移植技术 ：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
2、体细胞核移植过程：
3、体细胞核移植的应用：a、加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；b、转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；c、克隆动物的组织、器官做移植的供体；d、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
4、体细胞核移植技术存在的问题：（1）胚胎成活率低；（2）动物健康存在问题；（3）克隆动物食品的安全性问题。
17．【答案】A
【解析】【解答】A、iPS细胞具有发育的全能性，但iPS细胞在悬浮培养过程中会发生接触抑制的现象，A错误；
B、动物细胞培养时需要提供95%空气和5%CO2的混合气体环境，培养iPS细胞也不例外，其中5%CO2有调节pH的作用，B正确；
C、将iPS细胞增殖分化出的不同细胞与病人体内细胞含有的遗传物质基本相同，因此，移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；
D、iPS细胞能分化产生的特定细胞，是一类类似胚胎干细胞的细胞，具有发育的全能性，故可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
2、iPS细胞能分化产生特定的细胞，因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。
18．【答案】A
【解析】【解答】A、抗体是浆细胞产生的，仅有骨髓瘤细胞是不能产生抗体，且Myo基因表达出来的是抗原，A错误；
B、Myo是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一，而抗原和抗体的结合具有特异性，故利用抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，可用于诊断急性心肌梗塞，B正确；
C、固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合，二者仍具有不同的结构，C正确；
D、该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，而酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量，D正确。
故答案为：A。
【分析】1、单克隆抗体的制备过程：对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠产生了效应B细胞）；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合（注意融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选）；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞（特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体）；然后对它进行克隆化培养和抗体检测（筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞）；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。
2、单克隆抗体的应用：①因为纯度高、特异性强，灵敏度高，可作为诊断试剂
②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。
19．【答案】D
【解析】【解答】A、PEG是促细胞融合剂，不能直接诱导植物细胞融合，植物细胞需要先去除细胞壁形成原生质体后才能融合，A错误；
B、细胞工程在细胞水平上定向改变细胞核的遗传物质，B错误；
C、能产生抗体的是浆细胞，骨髓瘤细胞不能产生抗体，只有与经过免疫的B细胞融合后形成杂交瘤细胞才可以制备单克隆抗体，C错误；
D、核移植克隆的动物，需要供核一方和供质一方（一般用处于减数第二次分裂中期的卵细胞的细胞质），其线粒体DNA来自供卵母体，D正确。
故答案为：D。
【分析】1、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。
2、制备单克隆抗体的流程 ：
（1）给小鼠注射特定的抗原蛋白，刺激小鼠的免疫反应，生成免疫的B淋巴细胞；培养骨髓瘤细胞，利用癌细胞具有无限增殖的特点，大量繁殖骨髓瘤细胞；
（2）诱导动物细胞融合，（聚乙二醇、灭活的病毒或者电刺激等）；
（3）在具有筛选作用的培养基上培养，得到杂交瘤细胞；
（4）克隆杂交细胞，筛选阳性杂交瘤细胞；
（5）注射产生专一抗体的杂交瘤细胞，体外培养，制备单克隆抗体。
3、细胞核移植受体细胞一般选择去核卵母细胞，细胞核移植生物的线粒体DNA主要来自母方。
20．【答案】C
【解析】【解答】A、单克隆抗体的制备需要将B细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，且对杂交瘤细胞进行筛选，最后对能产生单抗的细胞进行克隆培养，A正确；
B、胰岛素可以促进葡萄糖进入细胞，为细胞呼吸提供底物，为细胞分裂提供更多的能量，B正确；
C、第一次筛选是用HAT培养基获得杂交瘤细胞（B细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞），两次抗体筛选：第一次是筛选能针对PA-X蛋白的杂交瘤细胞，第二次筛选是筛选针对PA-X蛋白特定部位（通常为5-6个氨基酸残基，为抗原决定簇），因此第一次筛选（HAT培养基）得到的有含有目标抗体的杂交瘤细胞，是混合细胞，也有能产生非目标抗体的细胞，C错误；
D、胰蛋白酶可以水解细胞间的蛋白质，使杂交瘤细胞脱落，更换新的培养液，D正确。
故答案为：C。
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
21．【答案】C
【解析】【解答】A、在愈伤组织的基础上可以通过脱分化过程通过培养基中激素含量的调整培养得到植物的体细胞胚，A正确；
B、绵羊“多莉"克隆过程中8细胞胚中的每个细胞均具有发育的全能性，尽管都是尚未分化的细胞，但其中基因表达顺序开始重排，B正确；
C、精子和卵细胞均没有细胞壁，植物体外受精过程中的精卵识别过程依赖于细胞膜的直接接触，C错误；
D、囊胚期的内细胞团细胞之间的连接非常紧密，胰蛋白酶很难将它们分离开，若用酶解法获得单细胞，此时的单个细胞不能发育成完成胚胎，只能采用胚胎分割技术获得多个胚胎，即早期囊胚不能利用酶解法进行胚胎分割，D正确。
故答案为：C。
【分析】动物细胞培养：
1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2、动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
4、注意事项：（1）动物细胞连续培养50代左右，会出现大量细胞死亡而只有少量细胞生存的现象，这少数细胞的遗传物质发生变化，往往具有癌变的特点。（2）动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官。（3）动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养， 。
22．【答案】C
【解析】【解答】A、X是细胞核，细胞核无法直接发育成个体的原因是没有完整的细胞结构做为基础，A错误；
B 、振荡或用灭活的病毒、PEG等是激活重组胚，B错误；
C、对供、受体进行同期发情处理，使受体的生殖器官的生理变化是相同的，为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境，C正确；
D、 经培育得到的丁羊 ，重组细胞的细胞核来做甲，细胞质来自乙，D错误；
故答案为：C
【分析】（1）动物细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性。
克隆动物不是对供体动物的100%的复制，原因是克隆动物的亲本有三个，即细胞核供体、卵母细胞细胞质供体和代孕母体。
①克隆动物细胞核基因来自体细胞核供体，因此，克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。
②克隆动物细胞质基因来自卵母细胞，因此，克隆动物的性状与卵母细胞供体部分相同。
③代孕母体没有为克隆动物提供遗传物质，因此，克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。
（2）胚胎移植
①移植对象：通过体外受精以及其他方式得到的胚胎。
②移植条件：同种的、生理状态相同的雌性动物体内。
③供体：在胚胎移植中提供胚胎的个体。
④受体：在胚胎移植中接受胚胎的个体。
⑤地位：通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。
23．【答案】C
【解析】【解答】A、体细胞核移植过程中供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，可以保证细胞的二倍体核型，A正确；
B、体细胞的分化程度高于胚胎细胞，故体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的，B正确；
C、用于核移植的卵母细胞一般选择减数二次分裂中期的卵母细胞，C错误；
D、体细胞核移植技术获得的克隆动物细胞质遗传物质来自受体卵母细胞，故做不到对体细胞动物100％的复制，D正确。
故答案为：C。
【分析】1、 体细胞核移植技术
（1）将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。
（2）体细胞核移植过程：
（3）体细胞核移植的应用：a、加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；b、转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；c、克隆动物的组织、器官做移植的供体；d、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
（4）体细胞核移植技术存在的问题：①胚胎成活率低；②动物健康存在问题；③克隆动物食品的安全性问题。
2、克隆动物和试管动物的异同
①试管动物和克隆动物的性状不同：前者由父本和母本共同决定，后者一般与核供体相同。
②试管动物和克隆动物的生殖方式不同：前者是有性生殖，后者是无性生殖。
③试管动物和克隆动物的产生过程不同：前者经过了体外受精过程，后者经过了核移植过程。
④试管动物和克隆动物细胞核遗传物质来源不同：前者细胞核遗传物质来自母本和父本两个个体，后者细胞核遗传物质仅来自供核亲本一个个体。
⑤试管动物和克隆动物的发育起点不同：前者的发育起点是受精卵，后者的发育起点是经过核移植后的重组细胞。
⑥获得试管动物和克隆动物相同之处：二者都经过早期胚胎培养和胚胎移植环节。
24．【答案】B
【解析】【解答】A、在HAT培养液中筛选出来的是杂交瘤细胞，可能有多种类型，因此后续还需要对这些杂交瘤细胞进行单一抗体检测，进而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，可见从HAT培养液中获得的抗体不是单克隆抗体，A错误；
B、仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合，据此可用灭活的仙台病毒作为促融剂，B正确；
C、在HAT培养液中能长期存活的细胞为杂交瘤细胞，这些细胞可能产生多种类型的抗体，因而不具有特异性强、灵敏度高的特点，C错误；
D、多个B细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能无限增殖，D错误。
故答案为：B。
【分析】1、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性、细胞的增殖，诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产性杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。
2、单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内、体外培养。
3、制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体，但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。
25．【答案】C
【解析】【解答】A、植物细胞具有细胞壁，而细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以体细胞杂交之前用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，A不符合题意；
B、诱导原生质体融合的方法包括电融合法、离心法、PEG融合法以及高Ca2+—高pH融合法等，B不符合题意；
C、杂种细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，最终形成完整的杂种植株，C符合题意；
D、植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，能够扩大亲本范围，培育作物新品种，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】1、植物体细胞杂交
①概念：是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物细胞融合前需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，形成原生质体。诱导原生质体融合的方法包括电融合法、离心法、PEG融合法以及高Ca2+—高pH融合法等。
②原理：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
③意义：可克服远缘杂交不亲和的障碍，培育远缘杂交植株。
2、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，并给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。整个过程包括外植体消毒、脱分化形成愈伤组织、愈伤组织再被诱导生根发芽，最终培育成完整植株。利用的生物学原理是植物细胞的全能性。
26．【答案】（1）黑曲霉(或苹果青霉)；水果组织软化疏松及细胞受损；a；酒精标准溶液(或一系列浓度梯度的酒精溶液)；等量显色剂；光密度值；酒表面氧气浓度较大，醋化醋杆菌会大量繁殖形成菌膜；固定化
（2）肝素结合蛋白(或HBP)；电融合；选择培养基；克隆培养；细胞株；注射到小鼠腹腔内：体外培养；异质性
【解析】【解答】解：（1）I.果胶酶可以从一些微生物如黑曲霉（或苹果青霉）中获得；酶具有专一性，果胶酶水解果胶使水果组织软化疏松及细胞受损，故在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量。
II. 酒精发酵需要营造无氧条件，故在发酵过程中需要对气阀a进行关闭；用比色法测定酒精的含量，首先用酒精标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取一定量的不同发酵时间的葡萄酒，加入等量的显色剂，得到样品管，用比色计测得光密度值，最后计算得到酒精含量。
III.在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是醋化醋杆菌是好氧菌，在酒的表层氧气浓度较大，醋化醋杆菌会大量繁殖形成菌膜，从而在变酸的酒的表面会形成一层白色菌膜。
IV. 为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行固定化处理。
(2)I.分析题意可知，本过程目的是制备抗HBP单克隆抗体，故需要先用肝素结合蛋白（或HBP）对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
II.促使脾细胞与骨髓瘤细胞融合可用电融合技术。
III.利用选择培养基可筛选出杂交瘤细胞：在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都不能存活；通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次克隆培养，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
IV.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是注射到小鼠腹腔内进行体内培养或在培养液中进行体外培养；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点，其研发成功解决了普通抗血清的异质性问题。
【分析】1、果胶物质主要存在于植物初生壁和细胞中间，果胶物质是细胞壁的基质多糖。
2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的浆细胞，然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
27．【答案】（1）减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）；纺锤体-染色体复合物
（2）细胞核具有全能性；显微操作
（3）去核的卵母细胞
【解析】【解答】（1）在核移植时的卵母细胞没有还没形成核膜，此时没有真正的细胞核，所以去除的其实是纺锤体-染色体复合物，在核移植前，需要将卵母细胞培养到减数分裂II中期，此时期第一极体与染色体位置很近，可以通过去除极体附近的部分细胞质的方法把染色体去掉，即此时的卵母细胞比较容易去核。
（2）动物细胞不具有全能性，而动物细胞核具有全能性，所以用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物体细胞的细胞核具有全能性；在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法。
（3）细胞核移植的受体细胞是去核的卵母细胞，卵母细胞中卵黄多，营养物质丰富，所以步骤③中的重构胚发育成囊胚所需营养物质主要来源于去核的卵母细胞。
【分析】动物细胞核移植技术
1、概念：动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。选取的卵母细胞应培养至减数分裂II中期，去的“核”其实是纺锤体-染色体复合物。
2、原理：动物细胞核具有全能性。
3、选取卵母细胞作为受体细胞的原因
①卵母细胞大，易于操作；
②卵黄多，营养物质丰富，能为胚胎发育提供充足的营养物质；
③其细胞质中有激发细胞核全能性的物质。
28．【答案】（1）细胞核移植；（次级）卵（母）
（2）未分化
（3）全能性可以表达（或全能性）；基因的选择性表达
（4）符合；因为脐带血不是来自于胚胎，其中的造血干细胞属于成体干细胞
【解析】【解答】（1）图中A表示细胞核移植；克隆技术中，患者的体细胞作为核供体，由①为卵（母）细胞提供细胞质进行人工重组。
（2）经过程B得到的结构为囊胚，其中④为内细胞团，内细胞团细胞是未分化的细胞。
（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核全能性可以表达，相同的胚胎干细胞，经过克隆过程可形成多种细胞，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是基因的选择性表达的结果。
（4）有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，这种做法符合伦理道德，因为脐带血不是来自于胚胎，其中的造血干细胞属于成体干细胞。（或脐带血是身外之物，属于废物利用，符合伦理道德）。
【分析】一、 图示所示为人类“治疗性克隆〞的大概过程。 图中①为卵〔母〕细胞；②为核移植所得的重组细胞；③为滋养层细胞；④为内细胞团，其中的细胞属于胚胎干细胞；A 表示核移植过程；B表示早期胚胎发育过程；C表示细胞分化过程。
二、治疗行克隆是通过构建出病患者自身的重组胚胎细胞，并定向诱导分化出相关细胞组织或者器官，移植给病患后达到治疗的目的。这样克隆出的组织器官因为和病患自身的抗原几乎一致，几乎不存在免疫排斥现象。是当前极为热门的生物医学研究方向。
三、 脐带血中含有的胚胎干细胞，可以诱导出该个体的组织或器官，且比治疗性克隆在操作过程方面节约了不少时间。
29．【答案】（1）细胞膜具有一定的流动性；聚乙二醇/PEG
（2）植物体细胞杂交；克服不同生物远杂交不亲和的障碍
（3）融合过程中染色体可能会丢失;融合是随机的，可能存在多个细胞的融合；双亲/花椰菜和黑芥
（4）将不同的杂合新植株分别进行黑腐病菌接种实验，观察比较它们的生长情况，生长最好的即为高抗性杂合新植株
【解析】【解答】（1）根据细胞膜具有一定的流动性的特点，经过一定的处理，实现原生质体的融合。诱导原生质体融合的手段有物理、化学的方法，常用的化学物质是聚乙二醇（PEG）。
（2）用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，利用植物体细胞杂交技术可将花椰菜和黑芥体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，继而利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成新植物体 ，该技术能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，这是该技术典型的优势。
（3）由于用一定剂量的UV处理黑芥原生质体可破坏其染色体，同时在融合过程中染色体可能会丢失，再加上融合是随机的，可能存在多个细胞的融合的情形，因此会出现杂合新植株C染色体数目大于34的情况。若要分析杂合新植株的染色体变异类型，应剪取杂合新植株与双亲（花椰菜和黑芥）植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的形态和数目，从而进行合理的分析。
（4）根据表中数据可知，杂合植株可能会有多种类型，为了从杂合新植株中筛选出具有高抗性的杂合新植株，需要进行个体生物学鉴定，即将不同的杂合新植株分别进行黑腐病菌接种实验，观察比较它们的生长情况，生长最好的即为高抗性杂合新植株。
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成为杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。其原理是细胞膜的流动性，（细胞的全能性）， 去除细胞壁后诱导原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，其典型优势是克服远缘杂交不亲和的障碍。
30．【答案】（1）纤维素酶和果胶酶；原生质体；PEG（聚乙二醇）；杂种细胞再生出细胞壁；愈伤组织
（2）既能产生特异性抗体，又能无限增殖；克隆化；利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构
【解析】【解答】（1）若a、b是番茄和马铃薯两种植物的体细胞植物，植物体细胞杂交前，先采用酶解法去除细胞壁，即采用纤维素酶、果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体；诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）；原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。融合细胞经脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。（2）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应将经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，仅考虑两两融合，则融合的细胞C有3种，融合后需经多次筛选，以得到既能产特异性抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞d。该过程中第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以便获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞进行体内或体外扩大培养。诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
【分析】1、植物体细胞杂交过程：（1）表示制备原生质体。去除细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；（2）诱导植物原生质体融合。方法为：物理法：离心、振动、电激，化学法：聚乙二醇（PEG）；（3）杂种细胞的筛选。细胞融合形成杂种细胞，完成的标志：再生出新的细胞壁；（4）杂种植株的培养和鉴定，过程包括脱分化和再分化过程。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
21世纪教育网 www.21cnjy.com 精品试卷·第 2 页 （共 2 页）
21世纪教育网(www.21cnjy.com)