(共29张PPT)
第二章 第1节 植物细胞工程
第1课时:植物细胞工程的基本技术
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
根、芽等
试管苗
驯化移栽
完整植株
其芽葺葺,其叶青青,犹绿衣郎,挺节独立,可敬可慕。
迨夫花开,凝晴瀼露,万态千妍,薰风自来,四坐芬郁,岂非入兰室乎!岂非有国香乎!
高洁、典雅的兰花颇受人喜欢。
但其繁殖率低,价格不菲,如何让它大量、快速地繁殖呢?
从社会中来
过渡
是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
2. 分类
动物细胞工程
植物细胞工程
植物组织培养技术
植物体细胞杂交技术
细胞工程
1. 概念:
什么是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术?
过渡
1
植物组织培养技术
2
植物体细胞杂交技术
目 录
一、植物细胞工程的基本技术
植物组织培养技术
一
植物组织培养的基本原理是什么
什么是细胞的全能性
体细胞具有全能性的根本原因是什么
在生物的生长发育过程中,为什么不是所有的细胞都表现出全能性
一、植物组织培养技术
【自主学习】阅读教材P34,结合所学内容思考以下问题:
《任务一》
韧皮部细胞
细胞团
根或芽
幼苗
胡萝卜植株
脱分化
再分化
是指细胞经分裂和分化后,仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
(2)全能性定义:
(3)具有全能性的原因:
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传信息。
(1)基本原理:
植物细胞具有全能性
1.植物组织培养的基本原理
(4)不体现全能性的实例:
芽原基只能发育为芽,叶原基只能发育为叶
(5)不体现全能性的原因:
基因在特定时间、空间条件下选择性表达
叶原基
芽原基
1.植物组织培养的基本原理
参考教材“图2-1植物组织培养流程图” 写出植物组织培养的基本流程。
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
根、芽等
试管苗
驯化移栽
完整植株
基于植物组织培养的流程,归纳概括出植物组织培养的概念
指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
2. 植物组织培养的流程
在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞失去其特有的结构和功能,转变为未分化的细胞进而形成愈伤组织的过程。
无定形,高度液泡化的薄壁细胞
愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
(根、芽)
试管苗
完整植株
细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、影响脱分化和再分化的关键激素,激素浓度和比例会影响植物细胞发育的方向
认真阅读教材p36菊花组织培养的流程,然后完成以下填空:
过渡
菊花的组织培养——相关概念
探究 实践
外植体消毒
外植体分割
接种外植体
培养外植体
转移培养
移栽试管苗
在 旁,将外植体的1/3 ~ 1/2插人诱导 的培养基中。用封口膜或瓶盖封盖瓶口,并在培养瓶上作好标记。
将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于 中培养。在培养过程中,定期观察和记录 .的生长情况。
探究 实践
菊花的组织培养——方法步骤
酒精灯火焰
愈伤组织
18~22℃的培养箱
愈伤组织
外植体消毒
外植体分割
接种外植体
培养外植体
转移培养
移栽试管苗
培养15~20d后,将生长良好的愈伤组织转接到 的培养基上。长出芽后,再将其转接到 的培养基上,进一步诱导形成试管苗。
移栽前先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后,将幼苗移植到消过毒的 或
等环境中,待其长壮后再移栽入土。每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
探究 实践
菊花的组织培养——方法步骤
诱导生芽
诱导生根
蛭石
珍珠岩
探究 实践
1.实验中使用的培养基和所有的器械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行,并且每次使用后的器械都要灭菌。
2.接种时注意外植体的方向,不要倒插。
3.诱导愈伤组织期间一般不需要光照,在后续的培养过程中,每日需要给予适当时间和强度的光照。
根据植物组织培养的流程,你能说出哪些实验注意事项?
菊花的组织培养——方法步骤
培养基、接种工具灭菌不彻底;
外植体消毒不彻底;
操作过程不符合无菌操作要求等。
2周左右
探究 实践
菊花的组织培养——结果分析与评价
1.接种3~4d后,检查外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,试分
析它们被污染的可能原因。
2.从刚接种的外植体到长出愈伤组织需经历多少天?
生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基,又不能伤及根系。一般使用无土栽培方法。培养基质要提前消毒,可以向培养基质喷洒质量分数为5%的高锰酸钾,并用塑料薄膜覆盖12h,掀开塑料薄膜24h后才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过渡几天,待其长壮后再移植到大田或盆中。
探究 实践
菊花的组织培养——结果分析与评价
3.培育的试管苗能直接移栽到露地吗?应如何操作?
探究生长素与细胞分裂素比例对植物组织培养的影响,如何设计对照实验?
① 空白对照:不加任何激素;
② 实验组1:生长素用量与细胞分裂素用量的比值为1;
③ 实验组2:生长素用量与细胞分裂素用量的比值大于1;
④ 实验组3:生长素用量与细胞分裂素用量的比值小于1。
使用比例 实验结果
生长素
细胞分裂素
>
生长素
细胞分裂素
<
有利于根的分化
有利于芽的分化,抑制根的分化
促进愈伤组织生长
菊花的组织培养——进一步探究
探究 实践
细胞分裂素与
生长素比例适宜
植物体细胞的杂交技术
二
哪科学家是怎样得到杂种植株的呢
过渡
利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?
不能。因为两种生物之间存在着天然的生殖隔离
番茄—马铃薯杂种植株
番茄
马铃薯
二、植物体细胞的杂交技术
【合作探究】阅读教材“植物体细胞杂交技术”,结合图2-4,小组讨论解决下列问题:
《任务二》
为什么要去除细胞壁 用什么方法可以去除细胞壁
上述酶溶液中一般加入一定浓度的无机盐离子和甘露醇,试分析原因?
诱导原生质体融合的原理是什么?方法有哪些 融合完成的标志是什么?
获得的所有细胞一定是需要的杂交细胞吗?有哪些类型?
植物体细胞杂交技术应用了哪两种技术?对应的原理是什么?
①去壁原因: 。
②方法: 。③相关酶溶液: 。
细胞壁阻碍着细胞间的杂交(阻碍了原生质体间的融合)
酶解法
纤维素酶和果胶酶溶液
(1)去除细胞壁
为什么要去除细胞壁 用什么方法可以去除细胞壁
上述酶溶液中一般加入一定浓度的无机盐离子和甘露醇,试分析原因?
使溶液有一定的渗透压,防止原生质体吸水过多而涨破
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
②方法:
①理论基础:
(2)原生质体间的融合
诱导原生质体融合的原理是什么?方法有哪些 融合完成的标志是什么?
细胞膜具有流动性
物理方法:
化学方法:
电融合法、离心法
聚乙二醇(PEG)融合法、
高Ca2+-高pH融合法
使用方便,融合频率高
缺点:有一定的毒性对某些细胞不适用(如卵细胞)
对细胞无毒害作用,操作简便,可重复性好
优点
优点
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
植物细胞融合完成的标志
融合的原生质体重新产生细胞壁,形成杂种细胞
(3)细胞融合完成的标志
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
若只考虑两两融合
(2)原生质体间的融合
获得的所有细胞一定是需要的杂交细胞吗?
不一定,有三类:
①未融合的细胞
②两两融合的细胞
③多细胞融合体
AA
AB
BB
筛选
AB
(2)原生质体间的融合
原生质体融合技术的原理是: ;
植物组织培养技术的原理是: 。
基于植物体细胞杂交技术流程,归纳概括植物体细胞杂交技术概念。
过渡
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
植物细胞融合技术
植物组织培养技术
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
植物体细胞杂交技术应用了哪两种技术?对应的原理是什么?
细胞膜的流动性
植物细胞的全能性
(1)概念:
(2)意义:
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种。
将不同来源的植物细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
白菜-甘蓝
1. 植物体细胞的杂交技术的概念及意义
本节小结
植物体细胞的杂交技术
植物细胞工程的基本技术
去除细胞壁
再生细胞壁
纤维素酶果胶酶
植物细A、B
原生质体A、B
融合的原生质体
杂种细胞
原理:植物细胞的全能性
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
(根、芽)
完整植株
物理法:
化学法:
电融合法、离心法等
聚乙二醇(PEG)融合法等
菊花的组织培养技术
愈伤组织
脱分化
杂种植株
再分化
植物组织培养技术
流程
1.下图是利用甲、乙两种植物的各自优势,通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是( )
A.进行a处理时能用胰蛋白酶
B.b是诱导融合后得到的杂种细胞
C.c是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽
D.进行d选择时要将植株种在高盐环境中
√
教材课后习题·概念检测
2.科学家在制备原生质体时,有时使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。据此分析,蜗牛消化道提取液中可能含有什么成分
纤维素酶和果胶酶
教材课后习题·概念检测
教材课后习题·拓展应用
"番茄—马铃薯"没有像人们预想的那样地上结番茄、地下长马铃薯,主要原因是∶生物体内基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以"番茄—马铃薯"杂种植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,它们不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,杂种植株自然就不能地上结番茄、地下长马铃薯了。
"番茄—马铃薯"杂种植株没有如科学家所想象的那样,地上结番茄,地下长马铃薯,这是为什么
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