(共55张PPT)
第3章 基因工程
第4节 蛋白质工程的原理和应用
目标
01
02
03
尝试通过蛋白质工程技术,根据人类需要的蛋白质结构,设计改造某一蛋白质的设计流程。(科学思维)
说明基因的碱基排列顺序—蛋白质的结构—蛋白质功能的关系。(生命观念)
尝试运用逆向思维分析和解决问题。
(社会责任)
学习目标
基因工程在农牧业方面的应用
基因工程的应用
1.转基因抗虫植物
2.转基因抗病植物
3.转基因抗除草剂植物
4.改良植物的品质
5.提高动物的生长速率
6.改善畜产品的品质
基因工程在医药卫生领域的应用
基因工程在食品工业方面的应用
1.对微生物或动植物的细胞进行基因改造,使它们能够生产药物。
2.利用基因工程技术,可以让哺乳动物批量生产药物,如乳腺生物反应器。
3.用转基因动物作器官移植的供体等。
温故知新
构建基因工程菌生产食品工业用酶、氨基酸、维生素
情境视频一:
人类蛋白质组计划(视频)
情境视频二:从社会中来
右图是用发出不同颜色荧光的细菌“画"的美妙图案。这些细菌能够发出荧光,是因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白,科学家通过改造它,获得了黄色荧光蛋白等。这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。
用细菌“画画”(视频)
问题1: 科学家利用了什么技术让细菌能发出绿色荧光?
基因工程技术使细菌表达了荧光蛋白。
问题2: 科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造让细菌能发出黄色荧光?
情景视频一:从社会中来
右图是用发出不同颜色荧光的细菌“画"的美妙图案。这些细菌能够发出荧光,是因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白,科学家通过改造它,获得了黄色荧光蛋白等。这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。
用细菌“画画”(视频)
科学家解析了多管水母绿色荧光蛋白的晶体结构,并利用计算机进行辅助设计,在此基础上再采用定点突变的技术将绿色荧光蛋白发光基团正下方的第203位的苏氨酸替换为酪氨酸,从而获得了一种新的绿色荧光蛋白的衍生物——黄色荧光蛋白。
问题2: 科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造让细菌能发出黄色荧光?
问题3: 这种对现有蛋白质进行改造的技术与基因工程技术一样吗?
目录
CONTENTS
蛋白质工程的基本原理
2/
蛋白质工程崛起的缘由
1/
蛋白质工程的应用
3/
01
蛋白质工程崛起的缘由
一、蛋白质工程崛起的缘由
(一)基因工程的实质和不足:
将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新性状。
问题4: 什么是蛋白质工程呢?
一、蛋白质工程崛起的缘由
(二)蛋白质工程概念:
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
基础
操作方法及对象
结果
目的
蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程,是涉及多学科的综合科技工程。
一、蛋白质工程崛起的缘由
(三)实例:提高玉米赖氨酸含量:
赖氨酸合成
调控
达到一定浓度
两种酶的活性
352位的苏氨酸变成异亮氨酸
二氢吡啶二羧酸合成酶
天冬氨酸激酶
+
104位的天冬酰胺变成异亮氨酸
赖氨酸含量
抑制
提高
提高
限制
提高
提高5倍
提高2倍
问题4: 蛋白质工程是怎样进行的呢?基本原理是什么?
02
蛋白质工程的基本原理
温故天然蛋白质合成的过程,构建出蛋白质工程的基本思路。
为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质?
蛋白质工程的目标、实质、结果。
2
3
4
1
合作探究一:请同学们自主阅读教材P94,小组合作思考讨论完成问题。
二、蛋白质工程的基本原理
如何辨别一个操作是基因工程还是蛋白质工程?
二、蛋白质工程的基本原理
目标
实质
结果
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造。
通过改造或合成基因,来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质。
生产出自然界没有的蛋白质。
问题5:为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质?
①蛋白质的高级结构十分复杂,直接改造难度大;
②蛋白质是由基因编码的,改造了基因可以间接改造蛋白质;
③基因可以遗传,蛋白质无法遗传;
(一)实质、目标和结果:
二、蛋白质工程的基本原理
(二)天然蛋白质合成过程:
按照中心法则进行
基因
表达
形成具有特定氨基酸序列的多肽链
形成具有高级结构的蛋白质
行使生物功能
转录
翻译
二、蛋白质工程的基本原理
(三)蛋白质工程的基本设计思路:
①预期的蛋白质功能
②设计预期的蛋白质结构
③推测应有的氨基酸序列
④找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因
⑤获得所需蛋白质
预期功能
生物功能
设计
推测
改造或合成
行使
折叠
目的基因
转录
mRNA
翻译
多肽链
蛋白质
(三维结构)
思
路
逆中心法则,与天然蛋白质合成的过程相反
蛋白质工程基本思路的应用
思考.讨论
二、蛋白质工程的基本原理
某多肽链的一段氨基酸序列是:
丙氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
谷氨酸
赖氨酸
问题6: 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。
查密码子表得知:
推知mRNA序列为:
丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)。
GCU(或C或A或G)UGG AAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)
共 种可能序列
32
蛋白质工程基本思路的应用
思考.讨论
二、蛋白质工程的基本原理
丙氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
谷氨酸
赖氨酸
查密码子表得知:
推知mRNA序列为:
丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)。
GCU(或C或A或G)UGG AAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)
共 种可能序列
32
脱氧核苷酸序列
GCT(或C或A或G)TGG AAA(或G)GAA(或G) TTT(或C)
CGA(或G或T或C) ACC TTT(或C)CTT(或C) AAA(或G)
共 种可能序列
32
蛋白质工程基本思路的应用
思考.讨论
二、蛋白质工程的基本原理
问题7: 确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?
确定目的基因的碱基序列后,可以人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因。对基因的改造经常会用到基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等。
提示:
天然蛋白质
改造蛋白质
蛋白质工程与基因工程的比较
项目 蛋白质工程 基因工程
操作对象
操作起点
操作水平
操作流程
结果
实质
联系 基因
基因
DNA分子水平
DNA分子水平
预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到并改变对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新基因→获得所需要的蛋白质
目的基因的筛选与获取→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
可生产自然界没有的蛋白质
生产自然界已有的蛋白质
通过改造或合成基因来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质
将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状
①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程;
②蛋白质工程离不开基因工程,其包含基因工程的基本操作。
预期蛋白质功能
目的基因
是否合成新的基因
蛋白质工程
是否对原有基因进行改造
是
否
是
否
蛋白质工程
基因工程
看蛋白质
看基因
是否为天然蛋白质
是
否
蛋白质工程
基因工程
蛋白质工程与基因工程的比较
问题8: 如何确定一个操作过程是基因工程技术还是蛋白质工程技术?
实战训练
1.蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时,主要包括哪几种( )①进行少数氨基酸的替换②对不同来源的蛋白质的拼接③从预期蛋白质的功能出发去推测氨基酸排列顺序④直接改变蛋白质的空间结构
A.①③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④
实战训练
问题9: 蛋白质工程有哪些运用呢?请举例。
2.近年来,人工智能(AI)算法在蛋白质工程领域的应用已经被开发,下列关于AI算法在蛋白质工程领域应用的设想中,实现难度最大的是( )
A.根据人类对蛋白质的功能需求设计蛋白质的高级结构B.根据蛋白质的空间结构推测其氨基酸序列C.按照设定的氨基酸序列推测mRNA的碱基序列D.按照设定的mRNA的碱基序列设计新基因
03
蛋白质工程的应用
合作探究二:请同学们自主阅读教材P95,小组合作思考讨论总结蛋白质工程可以应用于哪些领域,有哪些案例。
三、蛋白质工程的运用
应用 实例
医药工业方面
其他工业方面
农业方面
三、蛋白质工程的运用
①产生速效胰岛素
②产生易保存的干扰素
③生产人鼠嵌合抗体
(一)医药工业方面
定点突变
三、蛋白质工程的运用
(一)医药工业方面
(1)研发速效胰岛素类似物
天然蛋白质易形成二聚体或六聚体
预期结构
改造
B28位脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置
新胰岛素基因
转录
mRNA
折叠
预期功能
行使功能
降低胰岛素的聚合作用
设计结构
改变B链第20~29位氨基酸组成
推测序列
翻译
多肽链
有效抑制胰岛素的聚合
定点突变
三、蛋白质工程的运用
(一)医药工业方面
定点突变
(2)延长干扰素体外保存时间
天然干扰素
(体外保存困难)
改造后的干扰素
(-70℃可保存半年)
半胱氨酸
丝氨酸
干扰素在体外保存相当困难
将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸
在-70℃下干扰素可保存半年
三、蛋白质工程的运用
鼠抗体
人抗体
恒定区
恒定区
可变区
可变区
嵌合抗体
对人体的不良反应减少
(一)医药工业方面:
基因融合
3.降低人对小鼠单抗隆抗体的免疫反应
三、蛋白质工程的运用
(二)他工业方面的运用:
三、蛋白质工程的运用
改进酶的性能或开发新的工业用酶
如利用蛋白质工程获得枯草杆菌蛋白酶的突变体,筛选出符合工业化生产需求的突变体,提高该酶的使用价值。
枯草杆菌蛋白酶
枯草杆菌
三、蛋白质工程的运用
(二)农业方面的运用:
第二
设计优良微生物农药,通过改造微生物蛋白质的结构,使它防治病虫害的效果增强。
第一
改造某些参与调控光合作用的酶,以提高植物光合作用的速率,增加粮食的产量;
(1)面临的问题:蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构,而这种高级结构往往十分复杂。
四、蛋白质工程的运用
(2)前景展望:要设计出更加符合人类需要的蛋白质,还需要不断地攻坚克难。随着科技的深入发展,蛋白质工程将会给人类带来更多的福祉。
实战训练
3.判断常考语句,澄清易混易错
(1)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质 ( )
(2)对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的 ( )
(3)由于蛋白质中氨基酸的排列顺序千变万化,空间结构千差万别,蛋白质工程操作难度很大 ( )
(4)蛋白质工程不能改变蛋白质的活性 ( )
拓展延伸
课堂小结
蛋白质工程
理论基础
技术手段
目标
基本思路
实践应用
蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系
通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造
从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
药物研发
改进酶的性能或开发新的工业用酶
增加粮食产量、研发新型农药
练习与应用
一、概念检测
1.蛋白质工程可以说是基因工程的延伸。判断下列相关表述是否正确。
(1)基因工程需要在分子水平对基因进行操作,蛋白质工程不需要对基因进行操作。 ( )
(2)蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列。 ( )
(3)蛋白质工程可以改造酶,提高酶的热稳定性。 ( )
×
×
√
练习与应用
一、概念检测
2.蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的,它最终要达到的目的是 ( )
A .分析蛋白质的三维结构
B .研究蛋白质的氨基酸组成
C .获取编码蛋白质的基因序列信息
D .改造现有蛋白质或制造新的蛋白质,满足人类的需求
练习与应用
3.水蛭素是一种蛋白质,可用于预防和治疗血栓。研究人员发现,用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。在这项替换研究中,目前可行的直接操作对象是( )
A.基因 B.氨基酸
C.多肽链 D.蛋白质
一、概念检测
练习与应用
二、拓展应用
T4溶菌酶是一种重要的工业用酶,但是它在温度较高时容易失去活性。为了提高T4溶菌酶的耐热性,科学家首先对影响T4溶菌酶耐热性的一些重要结构进行了研究。然后以此为依据对相关基因进行改造,使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸。于是,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,T4溶菌酶的耐热性得到了提高。这项工作属于什么工程的范畴 在该实例中引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是什么 如果要将该研究成果应用到生产实践,还需要做哪些方面的工作
这项工作属于蛋白质工程的范畴。引起T4溶菌酶空间结构发生改变的根本原因是基因的碱基序列发生了变化。如果要将改造后的T4溶菌酶应用于生产实践,还有很多工作需要做。例如由于改造后酶的空间结构发生了变化,因此它的一些基本特性需要重新明确,包括它能耐受的温度范围、催化反应的最适温度、酶活力的大小等;需要建立规模化生产该酶的技术体系,评估生产成本等。
实战训练
4.科学家利用基因定点突变技术,对枯草杆菌碱性蛋白酶BAPB92第188、239和262位氨基酸残基进行改造,构建了突变体BAPB92(A188P)、BAPB92(Q239R)和BAPB92(A188P/V262I)。相对于野生型,BAPB92(A188P)酶活力提高了2.6倍,BAPB92(Q239R)酶活力提高了2.5倍,BAPB92(A188P/V262I)酶活力提高了3.3倍,并且突变体蛋白酶的热稳定性和耐碱情况均得到较大提高。下列相关叙述正确的是( )
A.碱性蛋白酶BAPB92的改造无需设计蛋白酶突变体的结构B.水解替换酶BAPB92第188位的氨基酸可获得突变体BAPB92(A188P)C.枯草杆菌碱性蛋白酶的改造工程遵循的原理是基因重组D.三种突变体中BAPB92(A188P/V262I)降低反应活化能的效果最显著
实战训练
5.蛋白质工程是新崛起的一项生物工程,又称第二代基因工程。下图为蛋白质工程的流程。下列有关叙述错误的是( )
A.蛋白质工程就是根据人们需要,直接对蛋白质进行加工改造B.蛋白质工程是通过基因改造或基因合成等方法,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质C.①②过程为转录和翻译D.蛋白质工程是从④开始的
实战训练
6.干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白,在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸(密码子:UGU、UGC)变成丝氨酸(密码子:UCU、UCC、UCA、UCG),就可以延长干扰素的体外保存时间。下列相关叙述,错误的是( )
A.对干扰素的设计和改造,以基因的结构和功能的关系为基础B.对干扰素基因进行定点突变(C→G)来实现碱基的替换C.改造后的干扰素基因仍需导入受体细胞完成表达过程D.改造后的干扰素的功能与天然干扰素不是完全不同
实战训练
7.已知生物体内有一种转运蛋白Y,由300个氨基酸组成。如果将Y中157位的L异亮氨酸变成亮氨酸,261位的酪氨酸变成丝氨酸,改变后的蛋白质Y1不但保留了原有Y的功能,且具备了催化活性。下列说法正确的是( )
A.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异B.可以通过对Y蛋白基因进行修饰或人工合成获得Y1蛋白基因C.蛋白质工程操作过程中,不需要酶和载体作为工具D.细胞内合成Y1蛋白与Y蛋白的过程中,遗传信息的流向是相反的
实战训练
8.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较,不合理的是( )
A.蛋白质工程的操作起点是从预期的蛋白质功能出发,设计出相应的基因,并借助基因工程实现B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的,蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成C.当得到可以保存半年的干扰素后,在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下,干扰素可以大量自我合成D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
实战训练
9.T4溶菌酶(AO)在温度较高时易失去活性。研究人员通过蛋白质工程对T4溶菌酶第3位上的异亮氨酸改成半胱氨酸,该处半胱氨酸可与第97位半胱氨酸之间形成一个二硫键,获得了热稳定性高的T4溶菌酶(A1)。下列说法正确的是( )
A.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异B.蛋白质工程与中心法则的流程方向一致,即DNA→mRNA→蛋白质C.检测A1活性时可先将A1与底物混合,再置于高温环境中D.AO和A1空间结构的差异是二者热稳定性不同的直接原因
实战训练
10.研究发现,胰岛素进入血液循环后容易被降解,糖尿病患者需要反复注射胰岛素才能达到治疗效果。科研人员借助蛋白质工程改变了胰岛素中的某些氨基酸,提高了胰岛素在患者体内的稳定性,延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是( )
A.蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造B.氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一C.改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发D.蛋白质工程难度很大与蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构有关
实战训练
11.萤火虫的荧光素酶能催化ATP激活的荧光素氧化发光,这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素DTZ发光的问题,研究人员采用蛋白质工程(又称为第二代基因工程)对它进行了改造。下列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述,正确的是( )
A.通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列B.改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子C.可用PCR方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质D.改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能
实战训练
12.神经科学家设计了一种合成蛋白质LIMK1(结合ATP并磷酸化其靶标的蛋白质),能改善老年认知退化人群的记忆功能。下列叙述不正确的是
( )
A.设计蛋白质LIMK1时,先设计其基因的碱基序列再推测其功能B.通过基因定点突变技术可对LIMK1蛋白基因进行碱基的替换C.设计蛋白质LIMK1利用的技术是蛋白质工程,其可制造新的蛋白质D.蛋白质的高级结构十分复杂,故蛋白质工程是一项难度很大的工程
实战训练
13.下列关于蛋白质工程的叙述,正确的是( )
A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.蛋白质工程可以创造出自然界不存在的新类型蛋白质C.蛋白质工程的操作,摆脱了自然界关于遗传信息在生物大分子上传递的规律D.蛋白质工程产生的蛋白质类药物比基因工程药物更安全,可直接用于治疗患者
实战训练
14.干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白,可用于对抗病毒的感染和癌症,但体外保存相当困难。下图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图,错误的是( )
A.图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能B.图中新的干扰素基因必须插入质粒上的起始密码子和终止密码子之间才能表达C.图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构D.图中各项技术环节中,有些需要通过基因工程实现
实战训练
15.噬菌体展示技术(如下图)可将某些蛋白质呈递至噬菌体表面,便于对目标蛋白进行筛选、鉴定。以下对该技术的分析错误的是( )
A.建立噬菌体展示库需限制性内切核酸酶和耐高温DNA聚合酶B.可利用抗原-抗体杂交技术筛选目标蛋白C.可用细菌细胞作宿主培养噬菌体D.该技术可用于获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因
实战训练
16.下图为蛋白质工程操作的基本思路,请据图回答下列问题:
(1)代表蛋白质工程操作思路的过程是_____;代表中心法则内容的是________。(填写数字)
(2)写出图中各数字代表的生物学过程的名称或内容: ①______;②______;③______;④______;⑤__________。
(3)蛋白质工程的目的是_______________________________________ _____________________,通过___________________实现。
(4)从图中可以看出蛋白质工程的基本途径与中心法则是______的。
④⑤
①②③
转录
翻译
折叠
推测
改造合成
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白
质的结构进行分子设计
基因改造或基因合成
相反
实战训练
17.IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷(SCID)患儿IKK基因编码区第1183位碱基T突变为C,导致IKK上第395位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制,研究人员利用纯合野生鼠应用大引物PCR定点诱变技术培育出SCID模型小鼠(纯合),主要过程如图甲、乙。分析回答:
(1)在PCR反应体系中,需加入引物、IKK基因、缓冲液、Mg2+等外,还需加入 等。
(2)在图甲获取突变基因过程中,需要以下3种引物:
则PCR1中使用的引物有 ,PCR2中使用的引物有 和图中大引物的 (填“①”或“②”)链。
(3)PCR的反应程序:94 ℃ 3 min;94 ℃ 30 s,58 ℃ 30 s,72 ℃ 50 s,30个循环。在循环之前的94 ℃ 3 min处理为预变性;循环中72 ℃处理的目的是 。
(4)研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠F0,并确认突变基因已经稳定同源替代IKK基因,请你设计完成获得SCID模型鼠的实验步骤:
①杂交亲本: ,杂交得F1;
②F1雌、雄鼠随机交配得F2;
③提取F2每只小鼠的基因组DNA,采用分子生物学方法,利用IKK基因探针和突变基因探针进行筛选,
则 的为模型鼠。
耐高温DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸(dNTP)
引物A和引物B
引物C
②
耐高温的DNA聚合酶从引物起始进行互补链合成
F0×野生鼠
IKK基因探针检测未出现杂交带,突变基因探针检测出现杂交带