2.2.1 动物细胞培养课件（共18张PPT）

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动物细胞培养
【知识回顾】
模拟动物体内细胞生存的环境
内环境的化学成分和理化性质处于相对稳定的状态。
一、动物细胞培养的条件
活动一：探究动物细胞培养的营养条件
1.体外培养哺乳动物细胞应该选择何种培养基（液体/固体）？
2.根据内环境的化学成分，讨论体外培养哺乳动物细胞应该提供哪些营养物质？
液体培养基
糖类（葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素等
血清
一、动物细胞培养的条件
活动二：探究动物细胞培养的环境条件
根据内环境的理化性质，探讨体外培养哺乳动物细胞应该提供的环境条件。
温度
A
pH
B
渗透压
C
（36.5±0.5）℃
7.2-7.4
气体
D
95%空气
5%CO2
维持培养液的pH
维持培养液的pH
一、动物细胞培养的条件
活动二：探究动物细胞培养的环境条件
为什么培养的细胞很容易受到细菌等微生物的污染，造成细胞死亡。
无菌、无毒
循环系统
免疫系统
泌尿系统
一、动物细胞培养的条件
【思考与讨论】
体外培养哺乳动物细胞时，应该如何避免杂菌污染细胞？
如何降低或减少培养液中细胞代谢废物对细胞的毒害作用？
定期更换培养基
灭菌处理、无菌操作
向培养液中加入一定量抗生素
一、动物细胞培养的条件
营养
无菌、无毒的环境
温度、pH和渗透压
气体环境
糖类（葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素等+血清
灭菌处理+无菌操作适量使用抗生素、定时更换培养基
（36.5±0.5）℃、7.2-7.4、适宜渗透压
95%的空气+5% CO2
可否使用95%的氧气？为什么？
二、动物细胞培养的过程
为什么从动物体中取出的组织在体外不增殖呢？
分析资料一到资料三，解决该问题
资料一：研究发现动物组织细胞间隙含有弹性纤维蛋白、胶原纤维蛋白等物质，能将细胞网络在一起形成具有一定弹性和韧性的组织或器官。成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖。
二、动物细胞培养的过程
活动三：探究动物细胞培养的过程
形成单个细胞
蛋白酶
注意酶浓度和处理时间
二、动物细胞培养的过程
活动三：探究动物细胞培养的过程
资料二：有关研究表明大多数细胞必须与其他细胞或细胞外基质发生联系才能生存，否则会启动细胞凋亡程序。因此细胞在培养时要贴附于培养器皿壁上（细胞贴壁），细胞一经贴壁就迅速铺展，然后开始有丝分裂。
培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。
贴壁生长
二、动物细胞培养的过程
资料三：细胞膜上有糖类和蛋白质共同构成糖蛋白，它在细胞间起识别作用。当贴壁的细胞增殖到一定程度，也就是互相挨在一起的时候，糖蛋白识别到这种信息，就会使细胞停止继续增殖，这种现象叫做接触抑制。
如果想要得到大量细胞，应该如何处理？
更换培养基后，数量不增长
传代培养
二、动物细胞培养的过程
取动物组织
制成细胞悬液
原代培养
传代培养
①机械方法
②胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
转入培养液
分瓶
贴壁生长
接触抑制
1-10代
10-50代
三、动物细胞培养的概念及原理
活动四：尝试构建动物细胞培养概念
动物细胞培养就是从动物机体中取出_________________，将它__________________，然后，放在___________________中，让这些细胞________________。
相关的组织
分散成单个细胞
适宜的培养基
生长和增殖
动物细胞培养原理：
细胞增殖（有丝分裂）
四、干细胞培养及其应用
阅读课本P46“干细胞培养及其应用”的内容，思考以下问题：
四、干细胞培养及其应用
1.什么是干细胞？它有哪些类型？
2.科学家是怎样获得iPS细胞的？这种细胞与胚胎干细胞相比，有哪些应用优势？
3.干细胞应用于临床治疗可能存在什么问题？
四、干细胞培养及其应用
1.什么是干细胞？它有哪些类型？
2.科学家是怎样获得iPS细胞的？这种细胞与胚胎干细胞相比，有哪些应用优势？
干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体，包括胚胎干细胞和成体干细胞
通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得iPS细胞。优势：诱导过程无需破坏胚胎；理论上可以避免免疫排斥反应。
四、干细胞培养及其应用
3.干细胞应用于临床治疗可能存在什么问题？
①维持干细胞未分化状态的机制和干细胞定向诱导分化的调控机制还没有全部研究清楚；
②胚胎干细胞具有自我更新能力，在使用时有形成肿瘤的可能性；
③同时还存在一定的伦理问题
课堂小结
1.动物细胞培养的条件。
2.动物细胞培养的过程。
3.动物细胞培养的概念及原理。
4.干细胞的培养及其应用。