阶段性综合复习训练（考查范围：第3章、第4章）（含解析）2023——2024学年高生物人教版（2019）选择性必修必修3生物技术与工程
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| 名称 | 阶段性综合复习训练（考查范围：第3章、第4章）（含解析）2023——2024学年高生物人教版（2019）选择性必修必修3生物技术与工程 |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 1.2MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2024-05-18 19:09:27 | ||
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文档简介
阶段性综合复习训练（考查范围：第3章、第4章）
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．水蛭素（EH）具有较好的抗凝血活性，临床上被用作抗血栓药物。利用酵母菌工业化生产EH时，生产周期长、目标蛋白表达效率较低；利用大肠杆菌进行生产时，基因的转录和翻译都正常，但多肽链错误折叠，产生的无活性的EH会聚集形成水不溶性的包涵体。研究人员通过改造EH基因，以期获得能在大肠杆菌中表达的可溶性EH。下列有关叙述，错误的是（ ）
A．大肠杆菌在细胞增殖和代谢速率上较快，可用来改进酵母菌生产EH时的缺点
B．包涵体中错误折叠的EH与酵母菌生产的EH在氨基酸序列上有较大差异
C．要得到能表达可溶性EH的大肠杆菌，需要用Ca2+处理大肠杆菌
D．判断转基因大肠杆菌是否成功，需要对可溶性EH的抗凝血活性进行测定
2．抗原检测阴性但临床仍然高度怀疑甲型流感病毒感染的患者，医生会建议做核酸检测。但等待核酸检测出报告需较长时间，该检测实际采用的技术是逆转录PCR，病毒刺突蛋白编码序列如下图所示，科研人员为该PCR分别设计了引物A（5'-CCC…TGTATGGGGTTCTAA-3'）和引物B（5'-ACG…ACT①TTA②CTGGTGCAG-3'），已知引物A中ATG对应起始密码子，引物B中TTA对应终止密码子，标记基因可以插入刺突蛋白编码序列的首端或末端。DNA编码链为转录时所用模板链的互补链。下列叙述正确的是（ ）
A．获取甲流病毒的遗传物质后直接进行PCR扩增以节省出报告时间
B．扩增后的基因产物中引物A所在的子链是该基因的编码链
C．若标记基因需要插入引物B的①或②位置中则应选择①位置
D．PCR扩增产物经电泳后在琼脂糖凝胶中将出现宽度不同的5个条带
3．致育因子又称F因子，是游离在大肠杆菌细胞质中的一种环状DNA，能指导性菌毛的合成，性菌毛形成连接相邻大肠杆菌间的通道。含致育因子的大肠杆菌（F+）借助通道将自身的遗传物质传递给不含致育因子的大肠杆菌（F－），继而完成细胞的暂时沟通和遗传物质转移，（F－）转化为（F+），过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．F－转化为F+的过程中发生了基因重组
B．F+中的F因子仅有一条DNA链进入F－
C．完成转化过程的F－获取了F+中的大多数性状
D．F－转化为F+的转化过程需要内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶参与
4．绿萝是一种常见的观叶植物，几乎没有开花的记录。EaLFY是决定绿萝开花的关键基因。在研究绿萝不开花原因的实验中，科学家将长势相同的绿萝均匀地分为六组，三组不施加赤霉素（-GA3，不开花），另外三组施加赤霉素（+GA3，开花），然后分别取绿萝的mRNA进行RT-PCR处理，得到下图电泳结果。已知RT-PCR技术是将RNA的反转录（RT）和DNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。下列叙述错误的是（ ）
A．RT-PCR需要逆转录酶、RNA模板、DNA聚合酶、脱氧核苷酸、引物和能量等条件
B．绿萝EaLFY基因突变导致无法正常表达
C．据上述实验可知，绿萝无法开花的原因可能是自身赤霉素合成障碍
D．赤霉素的合成受基因控制，也会影响基因的表达过程
5．纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。科研人员从某菌株中获得了C1酶基因，将其与 HT质粒进行连接，构建基因表达载体生产高效C1酶。过程如图所示，已知C1酶基因以B链为转录模板链，下列说法错误的是（ ）
A．在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色复合物，滴加适量C1酶和CX酶后周围会出现透明圈
B．酶切位点1加上SmaI的识别序列，酶切位点2加上BamHⅠ的识别序列
C．启动子是一段有特殊序列的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点
D．基因工程的载体除了质粒外，还可以是噬菌体或动植物病毒
6．为研究变形链球菌中eriCF1和eriCF 基因的差异性表达与大肠杆菌氟抗性的关系，将eriCF1和eriCF2基因分别与质粒构建重组质粒后，导入大肠杆菌，在不同氟化钠浓度下绘制重组大肠杆菌的生长曲线，如下图，其中A（600）数值代表重组大肠杆菌数量的相对值，KZ代表对照组。下列说法错误的是（ ）
注：①～④氟化钠浓度分别为1.5、2.0、2.5、3.0（单位：克·L-1）
A．KZ组为空白对照组，是没有导入任何物质的大肠杆菌
B．将重组质粒导入大肠杆菌时可用Ca2+处理大肠杆菌
C．随着氟化钠浓度的增加，3组菌株的生长速度均逐渐减慢
D．氟化钠浓度越高，对重组大肠杆菌的生长抑制作用越强
7．某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
8．下图表示 PCR 过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R 表示方向。下列叙述正确的是（ ）
A．②链从 L 到 R 的方向为 3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板
B．PCR 过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制
C．以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环需消耗 8 个引物③
D．物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得该序列的双链产物
9．《全球通史》中说：“古巴导弹危机得到了和平解决……以致促使了几个限制核武器的协定形成：控制核武器实验协定、在现有核国家以外不扩散核武器协定、禁止使用生物武器协定和第一个限制战略武器条约等。”作者意在说明（ ）
A．限制核武协定推动了国际格局变化
B．古巴导弹危机产生的积极影响
C．两极格局下战争危机得到有效缓解
D．美苏争霸推动了世界科技进步
10．经国家的积极努力，脊髓性肌萎缩症（SMA）的特效药于2021年纳入医保目录。SMA是一种常染色体隐性遗传病，一般是SMNI基因发生部分碱基缺失引起的，主要表现为肌无力、肌肉萎缩等。下列相关分析，正确的是（ ）
A．产前诊断是优生优育的重要手段，孕期可通过产前B超检查胎儿是否患SMA
B．一对表型正常的夫妻，若第一个儿子为SMA患儿，则再次生下SMA儿子的概率为1/4
C．SMN1基因突变，将引起表达产物中氨基酸数量减少，蛋白质空间结构异常而致病
D．第三代试管婴儿技术，可在胚胎移植前进行遗传学诊断，可帮助双方均为携带者的夫妻生下健康宝宝
11．下列关于克隆人的说法中,不正确的是（ ）
A．克隆人是对人类文明的亵渎和犯罪,应严禁一切对人类的克隆实验,克隆人的社会地位无法确定
B．由于人的体细胞分裂次数是有限的,克隆人有可能会面临早衰和多病问题
C．克隆技术还不成熟,社会伦理有严重冲突,应研究治疗性克隆而禁止生殖性克隆
D．克隆人实验可能会存在流产率高、胎儿畸形率高等问题
12．我国科学家将体外培养的猕猴胎儿成纤维细胞注入到去核卵母细胞中，诱导细胞融合，然后将激活形成的重组胚胎移植到受体猴体内，发育产生了克隆猴“中中”和“华华”。科学家在克隆猴的过程中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d，并同时使用了此前科学家在其它哺乳动物中使用的组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，大大优化了克隆方法，最终获得灵长类动物克隆的首次成功。下列叙述错误的是（ ）
A．融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本
B．去除染色体―纺锤体复合物可获得去核卵母细胞
C．表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达
D．克隆猴技术可用于发展生殖性克隆人
13．在生殖性克隆和治疗性克隆问题上，中国政府的态度是（ ）
①禁止生殖性克隆人
②不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
③重视治疗性克隆
④不反对生殖性克隆和治疗性克隆
A．①② B．①②③ C．②③④ D．①③④
14．实验人员将一段外源DNA片段（包含约850个基因）与丝状支原体（一种原核生物）的DNA进行重组后，植入大肠杆菌，制造出一种“新的生命”。该生物能够正常生长、繁殖。下列有关该技术应用的叙述中，错误的是（ ）
A．该技术可以制造某些微生物，用于生产药品、制造染料、降解有毒物质等
B．由于存在生殖隔离，因此人造生命进入自然界并不会破坏生物多样性
C．人造生命扩散到自然界，有可能造成环境安全性问题
D．此项技术可能被用来制造生物武器，从而危及人类安全
15．为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性以及对生态环境的影响，研究人员在种植转基因菊花的第二年，随机选取转基因菊花株系及周边非转基因菊花和各种杂草，提取DNA。根据Vgb设计特异性引物进行PCR扩增，电泳结果如图。下列说法不正确的是（ ）
注:CK表示质粒阳性对照，1为空白对照，2～10 为转基因株系， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花
A．设置空白实验是为了排除实验操作、试剂污染等对结果的影响
B．结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散
C．转基因植物与周边其他植物之间不可能通过花粉发生基因交流
D．将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价
16．转基因作物是通过转基因技术对农作物进行精确地改造而产生的。转基因作物一方面在产量、抗逆性及品质等方面有显著改进，极大地降低了农业生产成本，另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在危害。英国前首相布莱尔为此发表了一篇文章，文中说：“毫无疑问，转基因作物对人类健康和环境有可能带来危害，保护公众和环境的安全，现在是，将来也是政府的首要任务；但与此同时，这种新的科技成果将给人类带来更多的利益，这也是毋庸置疑的。”据以上材料，你认为下列说法欠妥的是（ ）
A．转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物
B．若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该反思转基因技术
C．科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险并采取相应的防范措施
D．国家必须对转基因作物研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制
二、多选题
17．OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（ ）
A．可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量
B．四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
C．应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
18．下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（ ）
A．利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶
B．引物是子链合成延伸的基础，子链沿着模板链的5'→3'方向延伸
C．从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16
D．在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/2
19．人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现与日俱增。下列有关叙述错误的是（ ）
A．为了国家安全，进行生物武器和化学武器的研究是必要的
B．转基因食品被食用后，基因会进入人体基因组发生转化过程
C．生殖性克隆人可以丰富人类基因的多样性，值得推广
D．采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染
20．下列关于“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术及安全伦理的叙述，正确的是（ ）
A．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理都是有性生殖
B．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术对人类的作用是相同的
C．“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后植入母体孕育
D．不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争
三、非选择题
21．Ⅲ型胶原蛋白，是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白。 Ⅲ型胶原蛋白不仅是许多器官必不可少的结构成分，还可通过与血小板结合而促进血小板聚集，因此在凝血中起重要作用。家蚕丝腺生物反应器是利用家蚕丝腺表达重组蛋白的转基因动物表达系统。家蚕已丧失飞翔逃逸能力，家蚕幼虫丝腺具有强大的蛋白质合成与分泌能力。科学家已成功利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白，回答以下问题：
(1)科学家将Ⅲ型胶原蛋白基因与 等调控元件重组在一起，通过 的方法导入家蚕的受精卵。
(2)从转基因产品的安全性角度分析，家蚕作为外源基因的受体，安全性较高，是因为 。
(3)科学家曾用大肠杆菌作为工程菌生产Ⅲ型胶原蛋白，流程如图所示：
①选取的皮肤细胞为生命力旺盛的新生细胞，原因是 。
②要将成功转入Ⅲ型胶原蛋白基因的工程菌筛选出来，所用的方法是在培养基中添加 。
(4)对比工程菌大肠杆菌，利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白的优势在于 ，因而使Ⅲ型胶原蛋白具有生物活性。
22．油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高51.71%。回答下列问题：
(1)从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用 的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是 。
(2)对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是 。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a~d 表示 FAD2－1基因的4个位点。
将FAD2－1基因的 （填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是 。
(3)重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过 的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测 ，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。
23．棉子糖系列寡糖（RFOs）是植物体内一种重要的渗透性调节物质，肌醇半乳糖苷合成酶（GoLS）是 RFOs合成过程中的关键酶。科研人员从大豆中克隆了 GmGolSL 基因，其编码的蛋白质具有 GoLS的特征，该基因在大豆幼苗处于高温胁迫条件下表达量明显升高。科研人员通过构建 GmGolSL 基因表达载体并转化烟草，获得了四个转基因烟草株系OEl~OE4。 回答下列问题:
(1)从大豆染色体上扩增所需的 GmGolSL 基因片段，需要设计与两条模板链结合的 2 种引物，引物的作用是 。在扩增 次后，可得到两条链等长的 GmGolSL 基因片段。大量扩增该基因的过程中所需要的酶具有 的特点。
(2) 是培育转基因烟草的核心步骤，为防止 GmGolSL 基因在质粒上的反向连接，可采用的方法是 。将重组质粒导人根瘤农杆菌之前需要对其使用 处理，目的是 。
(3)GmGolSL 对高温胁迫的应答明显，4 种转基因烟草中该基因的相对表达量如图所示。由图可知，与野生型烟草 WT 相比， （答两点），由此表明转基因烟草中 。
24．如图是治疗性克隆的过程图解，请据图回答相关问题。
(1)图示过程中的重组新细胞如果培养后移植到子宫内能够成功孕育出一个新个体，则称作 (填“生殖性”或“治疗性”)克隆，我国政府对其持有的态度是 。相比较而言，试管婴儿的产生过程中，在“试管”内完成的步骤为体外受精和 。
(2)通过“治疗性克隆”的技术对白血病患者进行造血干细胞移植，能够在一定程度上解决供体细胞来源不足等问题，且可避免移植过程中存在的 问题。
(3)若某患者患有某种遗传性糖尿病，则可利用基因工程技术将正常胰岛素基因导入上图 中，再定向诱导使其分化为胰岛样细胞，从中筛选出具有正常胰岛β细胞功能的胰岛样细胞，输入患者体内达到治疗目的。
25．学习下列材料，回答（1）～（4）题。
人造细胞
多细胞生物是一个复杂而有序的细胞“社会”，需要通过细胞间的信息交流高效地完成复杂的生命活动。细胞膜上的受体蛋白在这一过程中发挥了重要作用，胞外信号分子与膜受体的结合可诱导膜受体发生空间构象改变，进而引发细胞内产生下游信号分子，实现信号从胞外到胞内的传递，以进一步影响细胞的生命活动。
我国科研人员利用DNA纳米结构，构建了两种模拟膜蛋白功能的结构一DNA三棱柱和DNA纳米孔。他们先从活细胞中获得巨型膜囊泡，通过胆固醇分子将DNA三棱柱锚定在膜囊泡表面，DNA纳米孔穿插于膜囊泡磷脂双分子层中，构建出“人造细胞”—GMVA。再用同样的方法构建出仅在膜囊泡表面锚定DNA三棱柱的“人造细胞”—GMVB。两种人造细胞之间可通过下图所示机制进行信息传递。
实验开始前，GMVA的DNA三棱柱所带的绿色荧光基团被淬灭，DNA纳米孔发出红色荧光。体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，同时自身的绿色荧光恢复。密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，同时DNA纳米孔的红色荧光被淬灭；Ca2＋通过DNA纳米孔流入GMVA中，可被指示剂分子检测到，GMVA内部从无色变为黄绿色。
上述研究为模拟和探索真实细胞的复杂功能提供了可能。此外，人造细胞也可应用于环境治理、新能源开发、疾病治疗等诸多方面。当然，对于“人造细胞”的应用领域和发展前景，学界还存在大量争议。有学者认为，人类对于像“人造细胞”这样的新兴技术的使用必须保持审慎的态度。
(1)Ca2＋跨膜运输的方式类似于 ，依据是 。
(2)细胞间信息交流的方式包括激素通过体液运输作用于靶细胞、相邻两植物细胞间形成胞间连丝等。与文中GMVA和GMVB的信息交流方式相似的生物学实例是 。
(3)荧光标记技术和指示剂可以帮助科研人员精准地操控和判断GMVA上的信息传递过程。下列关于GMVA膜表面荧光情况，正确的是 （填字母）。
a．未接收信号刺激，同时发出绿色荧光和红色荧光
b．未接收信号刺激，仅发出红色荧光，绿色荧光猝灭
c．接收信号刺激，同时发出绿色荧光和红色荧光
d．接收信号刺激，仅发出绿色荧光，红色荧光猝灭
e．接收信号刺激，无荧光，囊泡内部呈现黄绿色
(4)人造细胞是简化模型，在应用“人造细胞”技术时需要注意的一项风险是 。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．B
【分析】1、基因工程的四个步骤是：目的基因的获取 、基因表达载体的构建 、将目的基因导入受体细胞 、目的基因的检测与鉴定。目的基因获取途径：从基因文库中获取、PCR扩增、化学合成；构建基因表达载体时，需要用相同的限制酶将载体和目的基因切开，再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来，构建基因表达载体，常见的载体有质粒；将目的基因导入受体细胞时，如果受体细胞是植物细胞，可以用花粉管通道法或农杆菌转化法；受体细胞是动物细胞时，用显微注射法；受体细胞是微生物细胞时，可以用Ca+处理法。目的基因导入受体细胞后，首先要在分子水平检测，通过PCR等技术检测目的基因是否导入、是否转录，通过抗原—-抗体杂交检测是否翻译；其次还需要进行个体生物学水平的鉴定。
2、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，因为是对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，所以必须通过基因修饰或基因合成实现。
【详解】A、大肠杆菌是原核生物中的细菌类，繁殖速度和代谢速率都较快，可以用来改进酵母菌生产EH时生产周期长、目标蛋白表达效率较低的缺点，A正确；
B、利用大肠杆菌进行生产时，基因的转录和翻译都正常，说明在核糖体上合成的多肽正常，与酵母菌生产的EH在氨基酸序列上应该相同，B错误；
C、在基因工程操作中，受体细胞是原核生物如大肠杆菌时，为提高转化效率，可Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种更容易吸收周围DNA分子的生理状态，促进重组质粒的转入， C正确；
D、转基因大肠杆菌是否成功，还需要在个体水平进行检测，即对可溶性EH的抗凝血活性进行测定；D正确。
故选B。
2．B
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】A、获取甲流病毒的遗传物质后先逆转录为DNA后在进行扩增，A错误；
B、已知引物A中ATG对应起始密码子，引物A的序列是5'-CCC…TGTATGGGGTTCTAA-3'，因此扩增后的基因产物中引物A所在的子链是该基因的编码链，B正确；
C、引物B中TTA对应终止密码子，所以标记基因需要插入引物B的②位置，C错误；
D、PCR扩增产物经电泳后在琼脂糖凝胶中将出现宽度不同的3个条带，D错误。
故选B。
3．C
【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】A、由图可知，F 转化为F 的过程中发生了基因重组，A正确；
B、由图可知，F 中的F因子仅有一条DNA链进入F ，然后在F 中完成复制过程，B正确；
C、完成转化过程的F 只获取了F 中的至育因子，C错误；
D、F 转化为F 的转化是DNA重组技术，其过程需要内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶参与 ，D正确。
故选C。
4．B
【分析】PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性、低温复性、中温延伸。
【详解】A、PCR过程主要需要DNA聚合酶，DNA模板，能量，游离的脱氧核苷酸，引物，结合逆转录过程，RT-PCR需添加逆转录酶，DNA聚合酶、脱氧核苷酸、引物和能量等条件，但模板应为RNA，A正确；
B、在弄清楚RT-PCR的基础上再分析电泳图，可知添加GA3后，三组绿萝都产生了EaLFY的mRNA，可以排除基因突变，B错误；
C、施加赤霉素可以诱导绿萝开花，可推测原绿萝无法开花的原因可能是植株体内无法产生赤霉素，C正确；
D、植物激素的合成受基因的控制，同时据实验可知，赤霉素调控基因表达过程，D正确。
故选B。
5．B
【分析】1、一个基因表达载体的组成，除目的基因、标记基因外，还必须有启动子(promoter)、终止子(terminator)等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。
2、基因工程中的载体通常是利用质粒作为载体，将基因送入细胞。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体 DNA 上，随受体 DNA 同步复制。
【详解】A、C1酶、CX酶能使纤维素分解成纤维二糖，所以在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色复合物，滴加适量C1酶和CX酶后，纤维素被分解，不能与刚果红形成红色复合物，周围会出现透明圈 ，A正确；
B、转录时mRNA的合成方向为5'→3'，mRNA与DNA模板链互补，DNA模板链从启动子开始的转录方向应为3'→5'，所以应在酶切位点1加上BamHI的识别序列，酶切位点2加上SmaI的识别序列，B错误；
C、启动子是一段有特殊序列的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点，即转录的起始位点，C正确；
D、基因工程常用的载体为质粒，即存在于真核细胞细胞核之外或原核细胞拟核之外的小型环状DNA，还可以是噬菌体或动植物病毒，D正确。
故选B。
6．A
【分析】从图中看出随着氟化钠浓度的升高，三组A600的值降低，说明大肠杆菌数量减小。
【详解】A、对照组是导入的正常质粒，A错误；
B、将重组质粒导入大肠杆菌时可用Ca2+处理大肠杆菌 ，使大肠杆菌称为感受态，B正确；
C、比较①②③④，随着氟化钠浓度的增加，三组的A600在不断减小，说明随着氟化钠浓度的增加，3组菌株的生长速度均逐渐减慢，C正确；
D、氟化钠浓度越高，eriCPI和eriCF 组A600的值不断减小，所以氟化钠浓度越高，对重组大肠杆菌的生长抑制作用越强，D正确。
故选A。
7．B
【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
【详解】A、分析图中可知，启动子在左侧，GFP基因整合Gata3基因的右侧，启动子启动转录后，可以使GEP基因转录，Gata3基因的启动子能控制GFP基因的表达，A错误；
B、因启动子在左侧，转录的方向向右，合成的mRNA从左向右为5′→3′，刚好是翻译的方向，所以翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确；
C、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，C错误；
D、用引物1和引物3进行PCR扩增，无法区分杂合子和纯合子，因为二者扩增后只得到小片段，D错误。
故选B。
8．D
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）：过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开）：低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、根据DNA分子中两条链的反向平行关系可判断，②链从 L 到 R 的方向为 5′→3′，图中①②链均可作为子链合成的模板，A错误；
B、PCR 过程需要通过高温处理使双链中氢键断裂成为单链，而后通过降温使子链和引物之间形成双链结构，而后调节温度是子链沿着引物的3’端延伸，B错误；
C、以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗 引物③的数目为（8×2-2）÷2=7，C错误；
D、物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得以该序列为模板合成的双链DNA产物，D正确。
故选D。
9．B
【分析】由题干分析可知，古巴导弹危机加速了核武器的扩散和非扩散问题的讨论，并促使国际社会加强对核武器的控制和监管。
【详解】A、材料信息无法体现国际格局的变化，A错误；
B、根据题干“古巴导弹危机得到了和平解决……以致促使了几个限制核武器的协定形成”可知，古巴导弹危机促使几个限制核武器的协定形成，一定程度上有利于世界和平，B正确；
C、题干中信息列举了几个限制核武器的协定，但是没有指出战争危机是否得到有效缓解，C错误；
D、材料反映古巴导弹危机和平解决的积极意义，无法体现美苏争霸推动了世界科技进步，D错误。
故选B。
10．D
【分析】遗传病的监测和预防：（1）产前诊断：胎儿出生前，医生用专门的检测手段确定胎儿是否患某种遗传病或先天性疾病，产前诊断可以大大降低病儿的出生率。（2）遗传咨询：在一定的程度上能够有效的预防遗传病的产生和发展。（3）禁止近亲结婚。
【详解】A、分析题意可知，SMA是一种常染色体隐性遗传病，该类遗传病无法通过产前B超检查确定胎儿是否患病，A错误；
B、SMA是一种常染色体隐性遗传病，设为A/a，一对表型正常的夫妻，若第一个儿子为SMA患儿aa，则该夫妇基因型都是Aa，再次剩下SMA儿子的概率=1/4×1/2=1/8，B错误；
C、SMNI基因突变是由于基因发生部分碱基缺失引起的，碱基对缺失可能引起mRN上的密码子减少，但不一定会引起氨基酸数量减少：可能因为碱基对缺失而引起终止密码延迟出现，导致氨基酸数量增多，C错误；
D、“第三代试管婴儿”也称胚胎植入前遗传学诊断技术，指在胚胎移植前，取胚胎遗传物质进行分析，诊断胚胎是否异常，是减少出生缺陷儿的有效方法，第三代试管婴儿技术，可在胚胎移植前进行遗传学诊断，可帮助双方均为携带者的夫妻生下健康宝宝，D正确。
故选D。
11．A
【分析】1、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤、神经或肌肉等)用于治疗性移植。
2、生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。
3、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人。
【详解】A、我国反对生殖性克隆，但并不反对治疗性克隆，A错误；
B、人的正常体细胞分裂到一定次数后不再分裂，分裂次数是有限的，克隆人有可能会面临早衰和多病，B正确；
C、由于克隆技术还不成熟，现在就做克隆人很有可能孕育出有严重生理缺陷的孩子，C正确；
D、克隆动物的过程中存在着胚胎着床率低、流产率高、胎儿畸形率高等问题，D正确。
故选A。
12．D
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
【详解】A、融合细胞是由成纤维细胞与去核卵母细胞诱导形成，则融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本，A正确；
B、将卵母细胞培养到中期Ⅱ后进行去核操作，“去核”就是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物，B正确；
C、科学家在重组胚胎中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d和组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，抑制了表观遗传，从而获得了克隆猴，由此可见，表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达，C正确；
D、在克隆人的问题上，中国政府的态度是禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），D错误。
故选D。
13．B
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
2、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。
3、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】中国政府对待克隆人的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），重视治疗性克隆涉及的伦理问题，主张对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，B正确。
故选B。
14．B
【分析】根据题中“将一段外源DNA片段(包含约850个基因)与丝状支原体(一种原核生物)的DNA进行重组后，植入大肠杆菌”，属于基因工程，原理是基因重组。
【详解】A、通过导入不同的目的基因，可用于生产药品、制造染料、降解有毒物质，A正确；
B、“新的生命”是一个新的物种，由于其没有天敌，进入自然界后，会破坏生物的多样性，B错误；
C、人造生命扩散到自然界，竞争能力强，因此能成为“入侵的外来物种”，有可能造成环境安全性问题，C正确；
D、利用基因工程技术，在一些不致病的微生物体内插入制备基因，或在一些致病的细菌或者病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因，就会培育出新的致病微生物或新的抗药性增强的致病微生物，这些微生物可制成生物武器，D正确。
故选B。
15．C
【分析】据题意可知，1为空白对照，2～10 为转基因株系， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花，图中2～10 含有Vgb基因，其他植物都不含Vgb基因，说明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散。
【详解】A、设置空白实验目的是排除无关变量对实验结果的干扰，本实验无关变量为实验操作、试剂污染等，A正确；
B、据题意可知， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花，图中它们都没有外源基因Vgb，因此推测2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散，B正确；
C、外源基因若转入细胞核就有可能通过花粉进行传播，发生基因交流，C错误；
D、不同基因具有不同表达模式和功能，对植物自身和环境造成的影响以及带来的安全性问题，因此将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价，D正确。
故选C。
16．B
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
【详解】A、转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物，此外还有转基因动物、转基因药物等，A正确；
B、转基因生物的成功培育是转基因技术取得的丰硕成果。该技术具有双刃剑效应，既可以造福人类，也可能给人类带来灾难，面对转基因技术可能产生的负面影响，应理性看待，从多个方面，多个角度进行防范，严格管理，有效控制，趋利避害，不能因噎废食，B错误；
C、科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施，C正确；
D、国家必须对转基因作物研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制，D正确。
故选B。
17．AC
【分析】1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
【详解】A、可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，A正确；
B、由题图可知，在同一个T-DNA中OsGLO1启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，故四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，B错误；
C、据图可知，卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C正确；
D、由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入到水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，D错误。
故选AC。
18．BCD
【分析】聚酶链式反应扩增DNA片段的原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
.PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】A、利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶，该过程中氢键的断裂是通过高温完成的，而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶，A正确；
B、引物是子链合成延伸基础，即DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，也可以说子链沿着模板链的3’→5’方向延伸，B错误；
C、从理论上推测，第四轮循环产物共有24=16个DNA分子，其中有2个DNA含有模板链，只含有引物A的DNA片段即为与其中的一个模板链形成的DNA分子，因此，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，C错误；
D、DNA复制为半保留复制，DNA复制n次，共形成2n个DNA，其中两个DNA含有母链和子链（引物A或引物B），（2n-2）个DNA都含有子链（含有引物A和引物B）。第三轮循环即DNA复制3次，共形成8个DNA，其中2个DNA含有引物A或引物B，6个DNA含有引物A和引物B，其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，含量为1/4，D错误。
故选BCD。
19．ABC
【分析】1、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术制造完整的克隆人，目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是治疗性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞，不产生可独立生存的个体。
2、中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人。
3、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，A错误；
B、转基因食品被食用后，基因会在人体肠道中分解为小分子物质被吸收，并不会发生转化过程，B错误；
C、生殖性克隆人属于无性生殖，不能丰富人类基因的多样性，C错误；
D、采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染，D正确。
故选ABC。
20．ACD
【分析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
2、设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。
【详解】A、试管婴儿的培育主要采用的是体外受精、胚胎移植等技术，属于有性生殖。试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，属于有性生殖，A正确；
B、设计试管婴儿可用于疾病治疗，试管婴儿用于解决不孕不育问题，B错误；
C、“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后选择符合要求的胚胎植入母体孕育，C正确；
D、不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争，D正确。
故选ACD。
21．(1) 家蚕丝腺细胞中特异性表达的基因的启动子 显微注射
(2)家蚕家蚕已丧失飞翔逃逸能力，作为家养的动物，对人类无害
(3) 新生的皮肤细胞Ⅲ型胶原蛋白合成旺盛 四环素
(4)家蚕丝腺细胞中有内质网和高尔基体，能对Ⅲ型胶原蛋白进行加工
【分析】基因工程的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：
【详解】（1）结合题意可知，科学家将Ⅲ型胶原蛋白基因与家蚕丝腺细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，通过显微注射的方法导入家蚕的受精卵，进而获得转基因家蚕。
（2）从转基因产品的安全性角度分析，家蚕作为外源基因的受体，安全性较高，是因为家蚕作为家养的动物，对人类无害，且具有生活周期短、易饲养的特点。
（3）①本实验中选取的皮肤细胞为生命力旺盛的新生细胞，一方面是因为Ⅲ型胶原蛋白是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白，即Ⅲ型胶原蛋白在人体皮肤细胞中表达，另一方面皮肤细胞更新快。
②要将成功转入Ⅲ型胶原蛋白基因的工程菌筛选出来，需要借助标记基因进行筛选，根据图示可知，重组质粒中带有四环素抗性基因，因此，可在培养基中添加四环素进行筛选。
（4）对比工程菌大肠杆菌，利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白的优势在于家蚕丝腺生物反应器中含有内质网和高尔基体，能对Ⅲ型胶原蛋白进行加工，因而使Ⅲ型胶原蛋白具有生物活性。
22．(1) 人工合成 DNA的半保留复制
(2) 磷酸二酯键 b 重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的 mRNA进行翻译
(3) 喷施草铵磷 大豆的油酸含量
【分析】基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。
【详解】（1）从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列，可用人工合成的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理DNA的半保留复制。
（2）XbaⅠ、SacⅠ两种限制酶作用的化学键是磷酸二酯键。据题可知，需要将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体，故应将FAD2－1基因模板链的互补链接入重组表达载体的模板链中，再结合图示，观察转录方向，根据同向连接原则，可将FAD2－1基因的b位点连接到重组表达载体模板链的启动子端，重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的mRNA进行翻译，抑制细胞内FAD2－1基因的表达。
（3）重组质粒中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，该基因为标记基因，则转化后可通过喷施草铵磷的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测大豆的油酸含量，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。
23．(1) 使 DNA 聚含酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 3 耐高温
(2) 基因表达载体的构建 使用产生不同末端的两种限制酶进行切割 Ca2+ 使其成为能吸收周围环境中的DNA分子的生理状态
(3) 转基因烟草的耐高温性均高于对照组，且OE2的效率较明显 GmGolSL 基因控制合成的产物发挥了 GoLS的催化活性
【分析】基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因表达载体的构建是基因工程的核心工作。基因表达载体是载体的一种，除目的基因、标记基因外，它还必须有启动子、终止子等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。
【详解】（1）从大豆染色体上扩增所需的 GmGolSL 基因片段，需要设置与两条核链结合的2种引物，两条引物的碱基序列不能碱基互补配对，引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。扩增3次后可得到两条链等长的GmGolSL基因片段，因为是从染色体上直接扩增所需的 DNA片段，扩增3次才能得到符合要求的 DNA片段。大量扩增该基因使用的是 PCR 技术，需要的是 Taq酶，具有耐高温的特点。
（2）基因表达载体的构建是培育转基因烟草的核心步骤。将目的基因和载体用同样的限制酶切割，让其产生相同的末端，再利用DNA连接酶连接，可以构建重组质粒。为防止 GmGolSI.基因在质粒上的反向连接，可采用的方法是使用产生不同末端的两种限制酶进行切割，这样连接的产物为正向连接，导入受体细胞后才能表达。将重组质粒导入根瘤农杆菌之前需要对其使用Ca2+处理使其成为能吸收周围环境中 DNA分子的生理状态，便于目的基因的导入。
（3）根据图示信息，在干旱胁迫下，转基因烟草的GmGolSL的表达量均高于对照组，OE2株系的表达量最高。说明转基因烟草的耐高温性均高于对照组，且 OE2 的效果最明显，由此表明转基因烟草中GmGolSL基因控制合成的产物发挥了GoLS的催化活性。
24．(1) 生殖性 不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 早期胚胎培养
(2)免疫排斥
(3)胚胎干细胞
【分析】治疗性克隆指把患者植体细胞移到去核卵母细胞中形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚，然后从囊胚内分离出ES细胞，获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细胞)，用于替代疗法，这种方法的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体。
【详解】（1）以培育后代为目的的核移植技术，称为生殖性克隆。我国政府的态度是禁止生殖性克隆（或不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验）。在“试管”内完成的步骤是体外受精和早期胚胎培养过程。
（2）由于“治疗性克隆”所产生的细胞与体内正常细胞遗传物质相同，MHC分子相同，在一定程度上解决了免疫排斥反应，还在一定程度上解决了供体器官来源不足的问题。
（3）能定向诱导使其分化为胰岛样细胞的是胚胎干细胞。
25．(1) 协助扩散 DNA纳米孔打开时，Ca2+顺浓度梯度进入细胞，不消耗能量
(2)精子与卵细胞之间的识别和结合
(3)bd
(4)人造细胞可能成为新的致病源，可能对活细胞带来未知的、不可控的影响
【分析】体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，从而使得Ca2＋流入。这种荧光的情况可以显示GMVA上的信息传递过程
【详解】（1）Ca2＋跨膜运输的方式类似于协助扩散，依据是DNA纳米孔打开时，Ca2+顺浓度梯度进入细胞，不消耗能量。
（2）由题文中体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，从而使得Ca2＋流入这与精子冲破包裹在卵子外面的放射冠和透明带相似。所以与文中GMVA和GMVB的信息交流方式相似的生物学实例是精子与卵细胞之间的识别和结合
（3）未接收信号刺激，DNA纳米孔的密钥不会打开，所以DNA纳米孔发出红色荧光，绿色荧光基团被淬灭。故选b。
接收信号刺激，DNA纳米孔的密钥打开，使DNA纳米孔转变为打开状态，同时DNA纳米孔的红色荧光被淬灭；同时GMVA自身的绿色荧光恢复，故选d。
综上，选bd。
（4）“人造细胞”技术尚不完善，可能成为新的致病源，可能对活细胞带来未知的、不可控的影响，所以要注意这一项风险。
答案第1页，共2页
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学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．水蛭素（EH）具有较好的抗凝血活性，临床上被用作抗血栓药物。利用酵母菌工业化生产EH时，生产周期长、目标蛋白表达效率较低；利用大肠杆菌进行生产时，基因的转录和翻译都正常，但多肽链错误折叠，产生的无活性的EH会聚集形成水不溶性的包涵体。研究人员通过改造EH基因，以期获得能在大肠杆菌中表达的可溶性EH。下列有关叙述，错误的是（ ）
A．大肠杆菌在细胞增殖和代谢速率上较快，可用来改进酵母菌生产EH时的缺点
B．包涵体中错误折叠的EH与酵母菌生产的EH在氨基酸序列上有较大差异
C．要得到能表达可溶性EH的大肠杆菌，需要用Ca2+处理大肠杆菌
D．判断转基因大肠杆菌是否成功，需要对可溶性EH的抗凝血活性进行测定
2．抗原检测阴性但临床仍然高度怀疑甲型流感病毒感染的患者，医生会建议做核酸检测。但等待核酸检测出报告需较长时间，该检测实际采用的技术是逆转录PCR，病毒刺突蛋白编码序列如下图所示，科研人员为该PCR分别设计了引物A（5'-CCC…TGTATGGGGTTCTAA-3'）和引物B（5'-ACG…ACT①TTA②CTGGTGCAG-3'），已知引物A中ATG对应起始密码子，引物B中TTA对应终止密码子，标记基因可以插入刺突蛋白编码序列的首端或末端。DNA编码链为转录时所用模板链的互补链。下列叙述正确的是（ ）
A．获取甲流病毒的遗传物质后直接进行PCR扩增以节省出报告时间
B．扩增后的基因产物中引物A所在的子链是该基因的编码链
C．若标记基因需要插入引物B的①或②位置中则应选择①位置
D．PCR扩增产物经电泳后在琼脂糖凝胶中将出现宽度不同的5个条带
3．致育因子又称F因子，是游离在大肠杆菌细胞质中的一种环状DNA，能指导性菌毛的合成，性菌毛形成连接相邻大肠杆菌间的通道。含致育因子的大肠杆菌（F+）借助通道将自身的遗传物质传递给不含致育因子的大肠杆菌（F－），继而完成细胞的暂时沟通和遗传物质转移，（F－）转化为（F+），过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．F－转化为F+的过程中发生了基因重组
B．F+中的F因子仅有一条DNA链进入F－
C．完成转化过程的F－获取了F+中的大多数性状
D．F－转化为F+的转化过程需要内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶参与
4．绿萝是一种常见的观叶植物，几乎没有开花的记录。EaLFY是决定绿萝开花的关键基因。在研究绿萝不开花原因的实验中，科学家将长势相同的绿萝均匀地分为六组，三组不施加赤霉素（-GA3，不开花），另外三组施加赤霉素（+GA3，开花），然后分别取绿萝的mRNA进行RT-PCR处理，得到下图电泳结果。已知RT-PCR技术是将RNA的反转录（RT）和DNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。下列叙述错误的是（ ）
A．RT-PCR需要逆转录酶、RNA模板、DNA聚合酶、脱氧核苷酸、引物和能量等条件
B．绿萝EaLFY基因突变导致无法正常表达
C．据上述实验可知，绿萝无法开花的原因可能是自身赤霉素合成障碍
D．赤霉素的合成受基因控制，也会影响基因的表达过程
5．纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。科研人员从某菌株中获得了C1酶基因，将其与 HT质粒进行连接，构建基因表达载体生产高效C1酶。过程如图所示，已知C1酶基因以B链为转录模板链，下列说法错误的是（ ）
A．在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色复合物，滴加适量C1酶和CX酶后周围会出现透明圈
B．酶切位点1加上SmaI的识别序列，酶切位点2加上BamHⅠ的识别序列
C．启动子是一段有特殊序列的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点
D．基因工程的载体除了质粒外，还可以是噬菌体或动植物病毒
6．为研究变形链球菌中eriCF1和eriCF 基因的差异性表达与大肠杆菌氟抗性的关系，将eriCF1和eriCF2基因分别与质粒构建重组质粒后，导入大肠杆菌，在不同氟化钠浓度下绘制重组大肠杆菌的生长曲线，如下图，其中A（600）数值代表重组大肠杆菌数量的相对值，KZ代表对照组。下列说法错误的是（ ）
注：①～④氟化钠浓度分别为1.5、2.0、2.5、3.0（单位：克·L-1）
A．KZ组为空白对照组，是没有导入任何物质的大肠杆菌
B．将重组质粒导入大肠杆菌时可用Ca2+处理大肠杆菌
C．随着氟化钠浓度的增加，3组菌株的生长速度均逐渐减慢
D．氟化钠浓度越高，对重组大肠杆菌的生长抑制作用越强
7．某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
8．下图表示 PCR 过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R 表示方向。下列叙述正确的是（ ）
A．②链从 L 到 R 的方向为 3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板
B．PCR 过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制
C．以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环需消耗 8 个引物③
D．物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得该序列的双链产物
9．《全球通史》中说：“古巴导弹危机得到了和平解决……以致促使了几个限制核武器的协定形成：控制核武器实验协定、在现有核国家以外不扩散核武器协定、禁止使用生物武器协定和第一个限制战略武器条约等。”作者意在说明（ ）
A．限制核武协定推动了国际格局变化
B．古巴导弹危机产生的积极影响
C．两极格局下战争危机得到有效缓解
D．美苏争霸推动了世界科技进步
10．经国家的积极努力，脊髓性肌萎缩症（SMA）的特效药于2021年纳入医保目录。SMA是一种常染色体隐性遗传病，一般是SMNI基因发生部分碱基缺失引起的，主要表现为肌无力、肌肉萎缩等。下列相关分析，正确的是（ ）
A．产前诊断是优生优育的重要手段，孕期可通过产前B超检查胎儿是否患SMA
B．一对表型正常的夫妻，若第一个儿子为SMA患儿，则再次生下SMA儿子的概率为1/4
C．SMN1基因突变，将引起表达产物中氨基酸数量减少，蛋白质空间结构异常而致病
D．第三代试管婴儿技术，可在胚胎移植前进行遗传学诊断，可帮助双方均为携带者的夫妻生下健康宝宝
11．下列关于克隆人的说法中,不正确的是（ ）
A．克隆人是对人类文明的亵渎和犯罪,应严禁一切对人类的克隆实验,克隆人的社会地位无法确定
B．由于人的体细胞分裂次数是有限的,克隆人有可能会面临早衰和多病问题
C．克隆技术还不成熟,社会伦理有严重冲突,应研究治疗性克隆而禁止生殖性克隆
D．克隆人实验可能会存在流产率高、胎儿畸形率高等问题
12．我国科学家将体外培养的猕猴胎儿成纤维细胞注入到去核卵母细胞中，诱导细胞融合，然后将激活形成的重组胚胎移植到受体猴体内，发育产生了克隆猴“中中”和“华华”。科学家在克隆猴的过程中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d，并同时使用了此前科学家在其它哺乳动物中使用的组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，大大优化了克隆方法，最终获得灵长类动物克隆的首次成功。下列叙述错误的是（ ）
A．融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本
B．去除染色体―纺锤体复合物可获得去核卵母细胞
C．表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达
D．克隆猴技术可用于发展生殖性克隆人
13．在生殖性克隆和治疗性克隆问题上，中国政府的态度是（ ）
①禁止生殖性克隆人
②不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
③重视治疗性克隆
④不反对生殖性克隆和治疗性克隆
A．①② B．①②③ C．②③④ D．①③④
14．实验人员将一段外源DNA片段（包含约850个基因）与丝状支原体（一种原核生物）的DNA进行重组后，植入大肠杆菌，制造出一种“新的生命”。该生物能够正常生长、繁殖。下列有关该技术应用的叙述中，错误的是（ ）
A．该技术可以制造某些微生物，用于生产药品、制造染料、降解有毒物质等
B．由于存在生殖隔离，因此人造生命进入自然界并不会破坏生物多样性
C．人造生命扩散到自然界，有可能造成环境安全性问题
D．此项技术可能被用来制造生物武器，从而危及人类安全
15．为评估外源基因Vgb在菊花中的稳定性以及对生态环境的影响，研究人员在种植转基因菊花的第二年，随机选取转基因菊花株系及周边非转基因菊花和各种杂草，提取DNA。根据Vgb设计特异性引物进行PCR扩增，电泳结果如图。下列说法不正确的是（ ）
注:CK表示质粒阳性对照，1为空白对照，2～10 为转基因株系， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花
A．设置空白实验是为了排除实验操作、试剂污染等对结果的影响
B．结果表明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散
C．转基因植物与周边其他植物之间不可能通过花粉发生基因交流
D．将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价
16．转基因作物是通过转基因技术对农作物进行精确地改造而产生的。转基因作物一方面在产量、抗逆性及品质等方面有显著改进，极大地降低了农业生产成本，另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在危害。英国前首相布莱尔为此发表了一篇文章，文中说：“毫无疑问，转基因作物对人类健康和环境有可能带来危害，保护公众和环境的安全，现在是，将来也是政府的首要任务；但与此同时，这种新的科技成果将给人类带来更多的利益，这也是毋庸置疑的。”据以上材料，你认为下列说法欠妥的是（ ）
A．转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物
B．若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该反思转基因技术
C．科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险并采取相应的防范措施
D．国家必须对转基因作物研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制
二、多选题
17．OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（ ）
A．可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量
B．四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
C．应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
18．下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（ ）
A．利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶
B．引物是子链合成延伸的基础，子链沿着模板链的5'→3'方向延伸
C．从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16
D．在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/2
19．人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现与日俱增。下列有关叙述错误的是（ ）
A．为了国家安全，进行生物武器和化学武器的研究是必要的
B．转基因食品被食用后，基因会进入人体基因组发生转化过程
C．生殖性克隆人可以丰富人类基因的多样性，值得推广
D．采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染
20．下列关于“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术及安全伦理的叙述，正确的是（ ）
A．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理都是有性生殖
B．“试管婴儿”、“设计试管婴儿”技术对人类的作用是相同的
C．“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后植入母体孕育
D．不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争
三、非选择题
21．Ⅲ型胶原蛋白，是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白。 Ⅲ型胶原蛋白不仅是许多器官必不可少的结构成分，还可通过与血小板结合而促进血小板聚集，因此在凝血中起重要作用。家蚕丝腺生物反应器是利用家蚕丝腺表达重组蛋白的转基因动物表达系统。家蚕已丧失飞翔逃逸能力，家蚕幼虫丝腺具有强大的蛋白质合成与分泌能力。科学家已成功利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白，回答以下问题：
(1)科学家将Ⅲ型胶原蛋白基因与 等调控元件重组在一起，通过 的方法导入家蚕的受精卵。
(2)从转基因产品的安全性角度分析，家蚕作为外源基因的受体，安全性较高，是因为 。
(3)科学家曾用大肠杆菌作为工程菌生产Ⅲ型胶原蛋白，流程如图所示：
①选取的皮肤细胞为生命力旺盛的新生细胞，原因是 。
②要将成功转入Ⅲ型胶原蛋白基因的工程菌筛选出来，所用的方法是在培养基中添加 。
(4)对比工程菌大肠杆菌，利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白的优势在于 ，因而使Ⅲ型胶原蛋白具有生物活性。
22．油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高51.71%。回答下列问题：
(1)从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用 的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是 。
(2)对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是 。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a~d 表示 FAD2－1基因的4个位点。
将FAD2－1基因的 （填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是 。
(3)重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过 的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测 ，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。
23．棉子糖系列寡糖（RFOs）是植物体内一种重要的渗透性调节物质，肌醇半乳糖苷合成酶（GoLS）是 RFOs合成过程中的关键酶。科研人员从大豆中克隆了 GmGolSL 基因，其编码的蛋白质具有 GoLS的特征，该基因在大豆幼苗处于高温胁迫条件下表达量明显升高。科研人员通过构建 GmGolSL 基因表达载体并转化烟草，获得了四个转基因烟草株系OEl~OE4。 回答下列问题:
(1)从大豆染色体上扩增所需的 GmGolSL 基因片段，需要设计与两条模板链结合的 2 种引物，引物的作用是 。在扩增 次后，可得到两条链等长的 GmGolSL 基因片段。大量扩增该基因的过程中所需要的酶具有 的特点。
(2) 是培育转基因烟草的核心步骤，为防止 GmGolSL 基因在质粒上的反向连接，可采用的方法是 。将重组质粒导人根瘤农杆菌之前需要对其使用 处理，目的是 。
(3)GmGolSL 对高温胁迫的应答明显，4 种转基因烟草中该基因的相对表达量如图所示。由图可知，与野生型烟草 WT 相比， （答两点），由此表明转基因烟草中 。
24．如图是治疗性克隆的过程图解，请据图回答相关问题。
(1)图示过程中的重组新细胞如果培养后移植到子宫内能够成功孕育出一个新个体，则称作 (填“生殖性”或“治疗性”)克隆，我国政府对其持有的态度是 。相比较而言，试管婴儿的产生过程中，在“试管”内完成的步骤为体外受精和 。
(2)通过“治疗性克隆”的技术对白血病患者进行造血干细胞移植，能够在一定程度上解决供体细胞来源不足等问题，且可避免移植过程中存在的 问题。
(3)若某患者患有某种遗传性糖尿病，则可利用基因工程技术将正常胰岛素基因导入上图 中，再定向诱导使其分化为胰岛样细胞，从中筛选出具有正常胰岛β细胞功能的胰岛样细胞，输入患者体内达到治疗目的。
25．学习下列材料，回答（1）～（4）题。
人造细胞
多细胞生物是一个复杂而有序的细胞“社会”，需要通过细胞间的信息交流高效地完成复杂的生命活动。细胞膜上的受体蛋白在这一过程中发挥了重要作用，胞外信号分子与膜受体的结合可诱导膜受体发生空间构象改变，进而引发细胞内产生下游信号分子，实现信号从胞外到胞内的传递，以进一步影响细胞的生命活动。
我国科研人员利用DNA纳米结构，构建了两种模拟膜蛋白功能的结构一DNA三棱柱和DNA纳米孔。他们先从活细胞中获得巨型膜囊泡，通过胆固醇分子将DNA三棱柱锚定在膜囊泡表面，DNA纳米孔穿插于膜囊泡磷脂双分子层中，构建出“人造细胞”—GMVA。再用同样的方法构建出仅在膜囊泡表面锚定DNA三棱柱的“人造细胞”—GMVB。两种人造细胞之间可通过下图所示机制进行信息传递。
实验开始前，GMVA的DNA三棱柱所带的绿色荧光基团被淬灭，DNA纳米孔发出红色荧光。体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，同时自身的绿色荧光恢复。密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，同时DNA纳米孔的红色荧光被淬灭；Ca2＋通过DNA纳米孔流入GMVA中，可被指示剂分子检测到，GMVA内部从无色变为黄绿色。
上述研究为模拟和探索真实细胞的复杂功能提供了可能。此外，人造细胞也可应用于环境治理、新能源开发、疾病治疗等诸多方面。当然，对于“人造细胞”的应用领域和发展前景，学界还存在大量争议。有学者认为，人类对于像“人造细胞”这样的新兴技术的使用必须保持审慎的态度。
(1)Ca2＋跨膜运输的方式类似于 ，依据是 。
(2)细胞间信息交流的方式包括激素通过体液运输作用于靶细胞、相邻两植物细胞间形成胞间连丝等。与文中GMVA和GMVB的信息交流方式相似的生物学实例是 。
(3)荧光标记技术和指示剂可以帮助科研人员精准地操控和判断GMVA上的信息传递过程。下列关于GMVA膜表面荧光情况，正确的是 （填字母）。
a．未接收信号刺激，同时发出绿色荧光和红色荧光
b．未接收信号刺激，仅发出红色荧光，绿色荧光猝灭
c．接收信号刺激，同时发出绿色荧光和红色荧光
d．接收信号刺激，仅发出绿色荧光，红色荧光猝灭
e．接收信号刺激，无荧光，囊泡内部呈现黄绿色
(4)人造细胞是简化模型，在应用“人造细胞”技术时需要注意的一项风险是 。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．B
【分析】1、基因工程的四个步骤是：目的基因的获取 、基因表达载体的构建 、将目的基因导入受体细胞 、目的基因的检测与鉴定。目的基因获取途径：从基因文库中获取、PCR扩增、化学合成；构建基因表达载体时，需要用相同的限制酶将载体和目的基因切开，再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来，构建基因表达载体，常见的载体有质粒；将目的基因导入受体细胞时，如果受体细胞是植物细胞，可以用花粉管通道法或农杆菌转化法；受体细胞是动物细胞时，用显微注射法；受体细胞是微生物细胞时，可以用Ca+处理法。目的基因导入受体细胞后，首先要在分子水平检测，通过PCR等技术检测目的基因是否导入、是否转录，通过抗原—-抗体杂交检测是否翻译；其次还需要进行个体生物学水平的鉴定。
2、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，因为是对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，所以必须通过基因修饰或基因合成实现。
【详解】A、大肠杆菌是原核生物中的细菌类，繁殖速度和代谢速率都较快，可以用来改进酵母菌生产EH时生产周期长、目标蛋白表达效率较低的缺点，A正确；
B、利用大肠杆菌进行生产时，基因的转录和翻译都正常，说明在核糖体上合成的多肽正常，与酵母菌生产的EH在氨基酸序列上应该相同，B错误；
C、在基因工程操作中，受体细胞是原核生物如大肠杆菌时，为提高转化效率，可Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种更容易吸收周围DNA分子的生理状态，促进重组质粒的转入， C正确；
D、转基因大肠杆菌是否成功，还需要在个体水平进行检测，即对可溶性EH的抗凝血活性进行测定；D正确。
故选B。
2．B
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】A、获取甲流病毒的遗传物质后先逆转录为DNA后在进行扩增，A错误；
B、已知引物A中ATG对应起始密码子，引物A的序列是5'-CCC…TGTATGGGGTTCTAA-3'，因此扩增后的基因产物中引物A所在的子链是该基因的编码链，B正确；
C、引物B中TTA对应终止密码子，所以标记基因需要插入引物B的②位置，C错误；
D、PCR扩增产物经电泳后在琼脂糖凝胶中将出现宽度不同的3个条带，D错误。
故选B。
3．C
【分析】DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
【详解】A、由图可知，F 转化为F 的过程中发生了基因重组，A正确；
B、由图可知，F 中的F因子仅有一条DNA链进入F ，然后在F 中完成复制过程，B正确；
C、完成转化过程的F 只获取了F 中的至育因子，C错误；
D、F 转化为F 的转化是DNA重组技术，其过程需要内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶参与 ，D正确。
故选C。
4．B
【分析】PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性、低温复性、中温延伸。
【详解】A、PCR过程主要需要DNA聚合酶，DNA模板，能量，游离的脱氧核苷酸，引物，结合逆转录过程，RT-PCR需添加逆转录酶，DNA聚合酶、脱氧核苷酸、引物和能量等条件，但模板应为RNA，A正确；
B、在弄清楚RT-PCR的基础上再分析电泳图，可知添加GA3后，三组绿萝都产生了EaLFY的mRNA，可以排除基因突变，B错误；
C、施加赤霉素可以诱导绿萝开花，可推测原绿萝无法开花的原因可能是植株体内无法产生赤霉素，C正确；
D、植物激素的合成受基因的控制，同时据实验可知，赤霉素调控基因表达过程，D正确。
故选B。
5．B
【分析】1、一个基因表达载体的组成，除目的基因、标记基因外，还必须有启动子(promoter)、终止子(terminator)等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。
2、基因工程中的载体通常是利用质粒作为载体，将基因送入细胞。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体 DNA 上，随受体 DNA 同步复制。
【详解】A、C1酶、CX酶能使纤维素分解成纤维二糖，所以在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色复合物，滴加适量C1酶和CX酶后，纤维素被分解，不能与刚果红形成红色复合物，周围会出现透明圈 ，A正确；
B、转录时mRNA的合成方向为5'→3'，mRNA与DNA模板链互补，DNA模板链从启动子开始的转录方向应为3'→5'，所以应在酶切位点1加上BamHI的识别序列，酶切位点2加上SmaI的识别序列，B错误；
C、启动子是一段有特殊序列的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的位点，即转录的起始位点，C正确；
D、基因工程常用的载体为质粒，即存在于真核细胞细胞核之外或原核细胞拟核之外的小型环状DNA，还可以是噬菌体或动植物病毒，D正确。
故选B。
6．A
【分析】从图中看出随着氟化钠浓度的升高，三组A600的值降低，说明大肠杆菌数量减小。
【详解】A、对照组是导入的正常质粒，A错误；
B、将重组质粒导入大肠杆菌时可用Ca2+处理大肠杆菌 ，使大肠杆菌称为感受态，B正确；
C、比较①②③④，随着氟化钠浓度的增加，三组的A600在不断减小，说明随着氟化钠浓度的增加，3组菌株的生长速度均逐渐减慢，C正确；
D、氟化钠浓度越高，eriCPI和eriCF 组A600的值不断减小，所以氟化钠浓度越高，对重组大肠杆菌的生长抑制作用越强，D正确。
故选A。
7．B
【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
【详解】A、分析图中可知，启动子在左侧，GFP基因整合Gata3基因的右侧，启动子启动转录后，可以使GEP基因转录，Gata3基因的启动子能控制GFP基因的表达，A错误；
B、因启动子在左侧，转录的方向向右，合成的mRNA从左向右为5′→3′，刚好是翻译的方向，所以翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正确；
C、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，C错误；
D、用引物1和引物3进行PCR扩增，无法区分杂合子和纯合子，因为二者扩增后只得到小片段，D错误。
故选B。
8．D
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）：过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开）：低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、根据DNA分子中两条链的反向平行关系可判断，②链从 L 到 R 的方向为 5′→3′，图中①②链均可作为子链合成的模板，A错误；
B、PCR 过程需要通过高温处理使双链中氢键断裂成为单链，而后通过降温使子链和引物之间形成双链结构，而后调节温度是子链沿着引物的3’端延伸，B错误；
C、以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗 引物③的数目为（8×2-2）÷2=7，C错误；
D、物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得以该序列为模板合成的双链DNA产物，D正确。
故选D。
9．B
【分析】由题干分析可知，古巴导弹危机加速了核武器的扩散和非扩散问题的讨论，并促使国际社会加强对核武器的控制和监管。
【详解】A、材料信息无法体现国际格局的变化，A错误；
B、根据题干“古巴导弹危机得到了和平解决……以致促使了几个限制核武器的协定形成”可知，古巴导弹危机促使几个限制核武器的协定形成，一定程度上有利于世界和平，B正确；
C、题干中信息列举了几个限制核武器的协定，但是没有指出战争危机是否得到有效缓解，C错误；
D、材料反映古巴导弹危机和平解决的积极意义，无法体现美苏争霸推动了世界科技进步，D错误。
故选B。
10．D
【分析】遗传病的监测和预防：（1）产前诊断：胎儿出生前，医生用专门的检测手段确定胎儿是否患某种遗传病或先天性疾病，产前诊断可以大大降低病儿的出生率。（2）遗传咨询：在一定的程度上能够有效的预防遗传病的产生和发展。（3）禁止近亲结婚。
【详解】A、分析题意可知，SMA是一种常染色体隐性遗传病，该类遗传病无法通过产前B超检查确定胎儿是否患病，A错误；
B、SMA是一种常染色体隐性遗传病，设为A/a，一对表型正常的夫妻，若第一个儿子为SMA患儿aa，则该夫妇基因型都是Aa，再次剩下SMA儿子的概率=1/4×1/2=1/8，B错误；
C、SMNI基因突变是由于基因发生部分碱基缺失引起的，碱基对缺失可能引起mRN上的密码子减少，但不一定会引起氨基酸数量减少：可能因为碱基对缺失而引起终止密码延迟出现，导致氨基酸数量增多，C错误；
D、“第三代试管婴儿”也称胚胎植入前遗传学诊断技术，指在胚胎移植前，取胚胎遗传物质进行分析，诊断胚胎是否异常，是减少出生缺陷儿的有效方法，第三代试管婴儿技术，可在胚胎移植前进行遗传学诊断，可帮助双方均为携带者的夫妻生下健康宝宝，D正确。
故选D。
11．A
【分析】1、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤、神经或肌肉等)用于治疗性移植。
2、生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。
3、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人。
【详解】A、我国反对生殖性克隆，但并不反对治疗性克隆，A错误；
B、人的正常体细胞分裂到一定次数后不再分裂，分裂次数是有限的，克隆人有可能会面临早衰和多病，B正确；
C、由于克隆技术还不成熟，现在就做克隆人很有可能孕育出有严重生理缺陷的孩子，C正确；
D、克隆动物的过程中存在着胚胎着床率低、流产率高、胎儿畸形率高等问题，D正确。
故选A。
12．D
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
【详解】A、融合细胞是由成纤维细胞与去核卵母细胞诱导形成，则融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本，A正确；
B、将卵母细胞培养到中期Ⅱ后进行去核操作，“去核”就是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物，B正确；
C、科学家在重组胚胎中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d和组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，抑制了表观遗传，从而获得了克隆猴，由此可见，表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达，C正确；
D、在克隆人的问题上，中国政府的态度是禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），D错误。
故选D。
13．B
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
2、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。
3、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】中国政府对待克隆人的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），重视治疗性克隆涉及的伦理问题，主张对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，B正确。
故选B。
14．B
【分析】根据题中“将一段外源DNA片段(包含约850个基因)与丝状支原体(一种原核生物)的DNA进行重组后，植入大肠杆菌”，属于基因工程，原理是基因重组。
【详解】A、通过导入不同的目的基因，可用于生产药品、制造染料、降解有毒物质，A正确；
B、“新的生命”是一个新的物种，由于其没有天敌，进入自然界后，会破坏生物的多样性，B错误；
C、人造生命扩散到自然界，竞争能力强，因此能成为“入侵的外来物种”，有可能造成环境安全性问题，C正确；
D、利用基因工程技术，在一些不致病的微生物体内插入制备基因，或在一些致病的细菌或者病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因，就会培育出新的致病微生物或新的抗药性增强的致病微生物，这些微生物可制成生物武器，D正确。
故选B。
15．C
【分析】据题意可知，1为空白对照，2～10 为转基因株系， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花，图中2～10 含有Vgb基因，其他植物都不含Vgb基因，说明2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散。
【详解】A、设置空白实验目的是排除无关变量对实验结果的干扰，本实验无关变量为实验操作、试剂污染等，A正确；
B、据题意可知， 11～15为不同种类杂草，16～20 为非转基因菊花，图中它们都没有外源基因Vgb，因此推测2年内Vgb基因在菊花细胞中稳定，且未发生向周边植物的扩散，B正确；
C、外源基因若转入细胞核就有可能通过花粉进行传播，发生基因交流，C错误；
D、不同基因具有不同表达模式和功能，对植物自身和环境造成的影响以及带来的安全性问题，因此将Vgb基因转入其他植物时同样要经过安全性评价，D正确。
故选C。
16．B
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
【详解】A、转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物，此外还有转基因动物、转基因药物等，A正确；
B、转基因生物的成功培育是转基因技术取得的丰硕成果。该技术具有双刃剑效应，既可以造福人类，也可能给人类带来灾难，面对转基因技术可能产生的负面影响，应理性看待，从多个方面，多个角度进行防范，严格管理，有效控制，趋利避害，不能因噎废食，B错误；
C、科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施，C正确；
D、国家必须对转基因作物研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制，D正确。
故选B。
17．AC
【分析】1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
【详解】A、可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，A正确；
B、由题图可知，在同一个T-DNA中OsGLO1启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，故四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，B错误；
C、据图可知，卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，C正确；
D、由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入到水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，D错误。
故选AC。
18．BCD
【分析】聚酶链式反应扩增DNA片段的原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
.PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】A、利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶，该过程中氢键的断裂是通过高温完成的，而子链延伸过程需要耐高温的DNA聚合酶，A正确；
B、引物是子链合成延伸基础，即DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，也可以说子链沿着模板链的3’→5’方向延伸，B错误；
C、从理论上推测，第四轮循环产物共有24=16个DNA分子，其中有2个DNA含有模板链，只含有引物A的DNA片段即为与其中的一个模板链形成的DNA分子，因此，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/16，C错误；
D、DNA复制为半保留复制，DNA复制n次，共形成2n个DNA，其中两个DNA含有母链和子链（引物A或引物B），（2n-2）个DNA都含有子链（含有引物A和引物B）。第三轮循环即DNA复制3次，共形成8个DNA，其中2个DNA含有引物A或引物B，6个DNA含有引物A和引物B，其中只有2个两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，含量为1/4，D错误。
故选BCD。
19．ABC
【分析】1、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术制造完整的克隆人，目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是治疗性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞，不产生可独立生存的个体。
2、中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人。
3、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，A错误；
B、转基因食品被食用后，基因会在人体肠道中分解为小分子物质被吸收，并不会发生转化过程，B错误；
C、生殖性克隆人属于无性生殖，不能丰富人类基因的多样性，C错误；
D、采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染，D正确。
故选ABC。
20．ACD
【分析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
2、设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。
【详解】A、试管婴儿的培育主要采用的是体外受精、胚胎移植等技术，属于有性生殖。试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，属于有性生殖，A正确；
B、设计试管婴儿可用于疾病治疗，试管婴儿用于解决不孕不育问题，B错误；
C、“设计试管婴儿”形成的胚胎需遗传学诊断后选择符合要求的胚胎植入母体孕育，C正确；
D、不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争，D正确。
故选ACD。
21．(1) 家蚕丝腺细胞中特异性表达的基因的启动子 显微注射
(2)家蚕家蚕已丧失飞翔逃逸能力，作为家养的动物，对人类无害
(3) 新生的皮肤细胞Ⅲ型胶原蛋白合成旺盛 四环素
(4)家蚕丝腺细胞中有内质网和高尔基体，能对Ⅲ型胶原蛋白进行加工
【分析】基因工程的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：
【详解】（1）结合题意可知，科学家将Ⅲ型胶原蛋白基因与家蚕丝腺细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，通过显微注射的方法导入家蚕的受精卵，进而获得转基因家蚕。
（2）从转基因产品的安全性角度分析，家蚕作为外源基因的受体，安全性较高，是因为家蚕作为家养的动物，对人类无害，且具有生活周期短、易饲养的特点。
（3）①本实验中选取的皮肤细胞为生命力旺盛的新生细胞，一方面是因为Ⅲ型胶原蛋白是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白，即Ⅲ型胶原蛋白在人体皮肤细胞中表达，另一方面皮肤细胞更新快。
②要将成功转入Ⅲ型胶原蛋白基因的工程菌筛选出来，需要借助标记基因进行筛选，根据图示可知，重组质粒中带有四环素抗性基因，因此，可在培养基中添加四环素进行筛选。
（4）对比工程菌大肠杆菌，利用家蚕丝腺生物反应器生产Ⅲ型胶原蛋白的优势在于家蚕丝腺生物反应器中含有内质网和高尔基体，能对Ⅲ型胶原蛋白进行加工，因而使Ⅲ型胶原蛋白具有生物活性。
22．(1) 人工合成 DNA的半保留复制
(2) 磷酸二酯键 b 重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的 mRNA进行翻译
(3) 喷施草铵磷 大豆的油酸含量
【分析】基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。
【详解】（1）从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列，可用人工合成的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理DNA的半保留复制。
（2）XbaⅠ、SacⅠ两种限制酶作用的化学键是磷酸二酯键。据题可知，需要将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体，故应将FAD2－1基因模板链的互补链接入重组表达载体的模板链中，再结合图示，观察转录方向，根据同向连接原则，可将FAD2－1基因的b位点连接到重组表达载体模板链的启动子端，重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的mRNA进行翻译，抑制细胞内FAD2－1基因的表达。
（3）重组质粒中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，该基因为标记基因，则转化后可通过喷施草铵磷的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测大豆的油酸含量，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。
23．(1) 使 DNA 聚含酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 3 耐高温
(2) 基因表达载体的构建 使用产生不同末端的两种限制酶进行切割 Ca2+ 使其成为能吸收周围环境中的DNA分子的生理状态
(3) 转基因烟草的耐高温性均高于对照组，且OE2的效率较明显 GmGolSL 基因控制合成的产物发挥了 GoLS的催化活性
【分析】基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因表达载体的构建是基因工程的核心工作。基因表达载体是载体的一种，除目的基因、标记基因外，它还必须有启动子、终止子等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。
【详解】（1）从大豆染色体上扩增所需的 GmGolSL 基因片段，需要设置与两条核链结合的2种引物，两条引物的碱基序列不能碱基互补配对，引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。扩增3次后可得到两条链等长的GmGolSL基因片段，因为是从染色体上直接扩增所需的 DNA片段，扩增3次才能得到符合要求的 DNA片段。大量扩增该基因使用的是 PCR 技术，需要的是 Taq酶，具有耐高温的特点。
（2）基因表达载体的构建是培育转基因烟草的核心步骤。将目的基因和载体用同样的限制酶切割，让其产生相同的末端，再利用DNA连接酶连接，可以构建重组质粒。为防止 GmGolSI.基因在质粒上的反向连接，可采用的方法是使用产生不同末端的两种限制酶进行切割，这样连接的产物为正向连接，导入受体细胞后才能表达。将重组质粒导入根瘤农杆菌之前需要对其使用Ca2+处理使其成为能吸收周围环境中 DNA分子的生理状态，便于目的基因的导入。
（3）根据图示信息，在干旱胁迫下，转基因烟草的GmGolSL的表达量均高于对照组，OE2株系的表达量最高。说明转基因烟草的耐高温性均高于对照组，且 OE2 的效果最明显，由此表明转基因烟草中GmGolSL基因控制合成的产物发挥了GoLS的催化活性。
24．(1) 生殖性 不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 早期胚胎培养
(2)免疫排斥
(3)胚胎干细胞
【分析】治疗性克隆指把患者植体细胞移到去核卵母细胞中形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚，然后从囊胚内分离出ES细胞，获得的ES细胞使之定向分化为所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细胞)，用于替代疗法，这种方法的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体。
【详解】（1）以培育后代为目的的核移植技术，称为生殖性克隆。我国政府的态度是禁止生殖性克隆（或不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验）。在“试管”内完成的步骤是体外受精和早期胚胎培养过程。
（2）由于“治疗性克隆”所产生的细胞与体内正常细胞遗传物质相同，MHC分子相同，在一定程度上解决了免疫排斥反应，还在一定程度上解决了供体器官来源不足的问题。
（3）能定向诱导使其分化为胰岛样细胞的是胚胎干细胞。
25．(1) 协助扩散 DNA纳米孔打开时，Ca2+顺浓度梯度进入细胞，不消耗能量
(2)精子与卵细胞之间的识别和结合
(3)bd
(4)人造细胞可能成为新的致病源，可能对活细胞带来未知的、不可控的影响
【分析】体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，从而使得Ca2＋流入。这种荧光的情况可以显示GMVA上的信息传递过程
【详解】（1）Ca2＋跨膜运输的方式类似于协助扩散，依据是DNA纳米孔打开时，Ca2+顺浓度梯度进入细胞，不消耗能量。
（2）由题文中体系中混合无荧光的GMVB后，其上的DNA三棱柱发出信号，诱发GMVA释放出可以打开DNA纳米孔的密钥，密钥作用于GMVA上的DNA纳米孔，使DNA纳米孔转变为打开状态，从而使得Ca2＋流入这与精子冲破包裹在卵子外面的放射冠和透明带相似。所以与文中GMVA和GMVB的信息交流方式相似的生物学实例是精子与卵细胞之间的识别和结合
（3）未接收信号刺激，DNA纳米孔的密钥不会打开，所以DNA纳米孔发出红色荧光，绿色荧光基团被淬灭。故选b。
接收信号刺激，DNA纳米孔的密钥打开，使DNA纳米孔转变为打开状态，同时DNA纳米孔的红色荧光被淬灭；同时GMVA自身的绿色荧光恢复，故选d。
综上，选bd。
（4）“人造细胞”技术尚不完善，可能成为新的致病源，可能对活细胞带来未知的、不可控的影响，所以要注意这一项风险。
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