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动物细胞培养
活动:建构物理模型
1.哪种存在状态细胞更容易从环境中获得营养物质?为什么?
C单个细胞。
这样扩大了细胞与培养液的接触面积,营养易供应,代谢废物易排出。
A
B
C
活动:建构物理模型
A
B
C
剪碎
机械法
或酶解
2.怎样处理皮肤组织才能获得单个细胞?
取皮肤组织剪碎后,用机械方法或蛋白酶处理。
3.蛋白酶可以消化细胞间的蛋白质,也会消化掉细胞吗?
会,时间过长会对膜蛋白造成损伤。
感知概念:动物细胞培养
指从动物体中取出相关组织,
将它分散成单个细胞,
然后在适宜的培养条件下,
让这些细胞生长和增殖的技术。
★内环境的成分和理化性质是动物细胞培养条件的重要参考依据。
解构概念:动物细胞培养的条件
营养条件
环境条件
营养条件
液体培养基
还是固体培养基?
★包含了糖类、氨基酸、无机盐、微量元素、维生素二十种成分。
★动物血清补充细胞生长所需的激素和生长因子等物质。
营养条件
液体培养基应该有哪些成分?
★合成培养基
★无血清培养基
环境条件
与体内细胞不同的是,体外培养的细胞不能依赖机体代谢、调节和保护等机制,就对培养条件提出了更高的要求。
★无菌:对培养液和用具灭菌处理、无菌操作
★无毒:定期更换培养液
环境条件
适宜的温度、酸碱度能保证酶正常发挥作用,适宜的渗透压维持细胞正常形态,保证细胞生命活动的正常进行。
★为什么用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理动物组织而不是胃蛋白酶?
环境条件
95%的空气+5%的CO2
维持细胞的有氧呼吸
调节ph的相对稳定
★空气、CO2有什么作用呢?
解构概念:动物细胞培养的条件
营养条件 糖类、氨基酸、
无机盐、维生素
生长因子等
环境条件 适宜的渗透压、酸碱度、温度
适宜的气体环境
无菌无毒的环境
解构概念:动物细胞培养的过程
取材 处理 培养
解构概念:动物细胞培养的过程
取材 处理 培养
取新鲜动物组织
解构概念:动物细胞培养的过程
取材 处理 培养
剪碎,
加入适量的胰蛋白酶或胶原蛋白酶一段时间,
分散成单个细胞。
解构概念:动物细胞培养的过程
经离心后,
将沉淀中的动物细胞接种到培养液中制成细胞悬液。
置于适宜环境中培养。
取材 处理 培养
动物组织块
单个细胞
细胞悬液
机械法或酶
加培养液
适宜条件
解构概念:动物细胞培养的过程
取材 处理 培养
原代培养:
直接从体内获取组织进行初次培养。
悬浮生长类
★一类细胞能够______在培养液中生长增殖,如来源于血液、淋巴组织的细胞以及某些肿瘤细胞。
悬浮
★悬浮培养的细胞能在培养瓶中无限增殖吗?
细胞密度过大
有害代谢物积累
培养液中营养物质缺乏
贴壁生长类
★一类需要_______某些基质表面才能生长增殖,如皮肤细胞,这种现象称为____________。
★细胞分裂生长到表面相互______时就会停止分裂增殖,逐渐走向衰亡,这种现象称为___________。
贴附于
细胞贴壁
接触
接触抑制
贴壁的原因?
★贴壁是体内细胞在机体内生存和生长发育的基本方式,正是基于这种贴壁生长的特点,使得不同细胞之间结合形成组织,也使得细胞和周围环境保持联系。
解构概念:动物细胞培养过程
动物组织块
单个细胞
细胞悬液
分裂受阻
原代培养
机械法或酶
加培养液
适宜条件
悬浮生长
贴壁生长
密度过大、代谢物积累、营养缺乏、接触抑制
密度过大、代谢物积累、营养缺乏
解决问题?
传代培养:
将原代培养的细胞转移到
新的培养基上分瓶后的细胞培养。
传代培养前应如何处理?
贴壁生长
胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
传代培养
悬浮生长
离心法收集
离心取细胞沉淀
原代培养
活动:构建动物细胞培养过程的概念模型
动物组织块
单个细胞
细胞悬液
分裂受阻
原代培养
机械法或酶
加培养液
出现问题
适宜条件
悬浮生长
贴壁生长
密度过大、代谢物积累、营养缺乏、接触抑制
密度过大、代谢物积累、营养缺乏
解决问题
收集细胞
细胞悬液
加培养液
适宜条件
传代培养
分瓶
HeLa细胞系
★细胞因为遗传物质的改变,可无限传代,这种传代细胞称为永生细胞系或连续细胞系。如HeLa细胞系(来自HeLa女士的宫颈瘤细胞)。
应用概念:人造器官
人造皮肤
人造膀胱
组织工程人角膜内皮
生物制品、药用蛋白的生产、检测有毒物质
生成概念:动物细胞工程
细胞工程通过细胞水平的操作,获得有用的生物体或其产品。
常用技术:
动物细胞培养
动物细胞融合
动物细胞核移植
最基础
植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养基性质
培养基特有成分
培养过程
培养结果
培养目的
共同点 课后作业
动物细胞培养
条件
无菌无毒环境
营养
温度、pH和渗透压
气体环境
过程
分散成单细胞
原代培养
传代培养
悬浮生长、贴壁细胞
应用
人造器官
生物制品、药用蛋白
检测有毒物质
辅助核移植、细胞融合
干细胞培养
概念
原理
指从动物体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
有丝分裂
小结
我国科学家发现,人体烧伤皮肤原位存在着皮肤干细胞,在一定药物诱导下,能使烧伤处的皮肤原位再生。
疾病的细胞治疗——干细胞工程
表皮组织,干细胞位于基底层