2.2.1 动物细胞培养 课件（共21张PPT）
文档属性
| 名称 | 2.2.1 动物细胞培养 课件（共21张PPT） |  | |
| 格式 | pptx | ||
| 文件大小 | 42.6MB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2024-06-12 19:55:44 | ||
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文档简介
(共21张PPT)
动物细胞培养
治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。如何解决？
通过动物细胞培养构建的人造皮肤
从社会中来
目录
01
动物细胞工程
02
动物细胞培养
03
动物细胞融合
04
动物核移植
05
（基础）
一、动物细胞培养
1.概念：
指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理：
细胞增殖
3.培养条件：
营养条件
环境条件
无菌、无毒的环境、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素···
任务1：请结合体内细胞生活的内环境，说说体外培养动物细胞需要满足哪些条件
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。
①状态：
一般用液体培养基，也称培养液
②成分：
合成培养基
＋
血清
人们对细胞所需的营养条件尚未研究清楚
原因
糖类、氨基酸、无机盐、维生素···
营养条件
①无菌、无毒的环境
a、对培养液和所有培养用具进行灭菌
b、在无菌环境下进行操作
c、定期更换培养液
环境条件
②适宜的温度、pH和渗透压
a、培养温度：
36.5+0.5 ℃
b、多数动物细胞生存的适宜pH：
7.2~7.4
c、细胞必须生存在等渗环境中：
培养液中的无机盐可维持渗透压，如Na+
③适宜的气体环境
a、气体组成：
O2 + CO2
细胞代谢必需
维持培养液pH
b、培养装置：
培养皿或松盖培养瓶
置于
CO2培养箱
95%空气和5%CO2
4.培养过程：
取动物组织
细胞悬液
原代培养
传代培养
分瓶
任务2：初步构建动物细胞培养流程图
任务3：请结合培养流程，阅读课本P44-45，思考回答以下问题
①取什么样的组织进行培养？为什么？
②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？用什么方法？
③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？
④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？
⑤体外培养动物细胞分为两类，分为哪两类？
⑥什么是细胞贴壁？⑦什么是接触抑制？
⑧为什么要进行分瓶培养？⑨进行传代培养时，如何处理？
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？
用什么方法？
①取什么样的组织进行培养？为什么？
这些细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养。
成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和繁殖。
①机械的方法；②胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理。
一般取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官培养
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？
多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。
蛋白质
④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？
细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，所以胰蛋白酶会把细胞消化掉。
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑤体外培养动物细胞分为两类
第1类：悬浮生长细胞
细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
⑥什么是细胞贴壁
悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。
第2类：贴壁生长细胞
细胞需贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型）
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑦什么是接触抑制？
这种现象称为接触抑制
形成一层细胞
可形成多层细胞
⑧为什么要进行分瓶培养？
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑨进行传代培养时，如何处理？
悬浮培养细胞
贴壁细胞
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
出现接触抑制
细胞分裂受阻
分瓶
培养
悬浮培养细胞
贴壁细胞
胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
分瓶培养
离心法收集
取动物组织
用机械法和用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
分散成单个细胞
加培养液
细胞悬液
在培养皿或培养瓶内
原代培养
贴壁细胞
细胞分
裂受阻
传代培养
分瓶
培养
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
出现接触抑制
悬浮培养细胞
悬浮培养细胞
贴壁细胞
胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
分瓶培养
离心法收集
学习任务3：完善动物细胞培养流程图
3、分布：
1、概念：
4、分类：
电镜下的胚胎干细胞
存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
包括胚胎干细胞和成体干细胞等
干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。
2、特点：
体积较小，细胞核大，核仁明显
二、干细胞的培养和应用
在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。
3、分布：
1、概念：
4、分类：
存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
胚胎干细胞 和 成体干细胞等
干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。
2、特点：
体积较小，细胞核大，核仁明显
二、干细胞的培养和应用
在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。
具有发育的全能性，
但涉及伦理问题
移植
取成纤维
细胞等
iPS细胞
转入相
关因子
细胞发生转化
分化
胰岛细胞
神经元
血细胞
肠上皮细胞
心肌细胞
病人
iPS细胞用于治疗人类疾病示意图
肝细胞
5、诱导多能干细胞（iPS细胞）
无需破坏胚胎
可避免免疫排斥
反应
无菌、无毒
营养
温度、pH和渗透压
气体环境
制备细胞悬液
原代培养
传代培养
动物细胞培养
培养的条件
培养的过程
干细胞的
培养和应用
干细胞的种类、特点及应用
iPS细胞的培养和应用
小结
动物细胞培养
治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。如何解决？
通过动物细胞培养构建的人造皮肤
从社会中来
目录
01
动物细胞工程
02
动物细胞培养
03
动物细胞融合
04
动物核移植
05
（基础）
一、动物细胞培养
1.概念：
指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理：
细胞增殖
3.培养条件：
营养条件
环境条件
无菌、无毒的环境、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素···
任务1：请结合体内细胞生活的内环境，说说体外培养动物细胞需要满足哪些条件
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。
①状态：
一般用液体培养基，也称培养液
②成分：
合成培养基
＋
血清
人们对细胞所需的营养条件尚未研究清楚
原因
糖类、氨基酸、无机盐、维生素···
营养条件
①无菌、无毒的环境
a、对培养液和所有培养用具进行灭菌
b、在无菌环境下进行操作
c、定期更换培养液
环境条件
②适宜的温度、pH和渗透压
a、培养温度：
36.5+0.5 ℃
b、多数动物细胞生存的适宜pH：
7.2~7.4
c、细胞必须生存在等渗环境中：
培养液中的无机盐可维持渗透压，如Na+
③适宜的气体环境
a、气体组成：
O2 + CO2
细胞代谢必需
维持培养液pH
b、培养装置：
培养皿或松盖培养瓶
置于
CO2培养箱
95%空气和5%CO2
4.培养过程：
取动物组织
细胞悬液
原代培养
传代培养
分瓶
任务2：初步构建动物细胞培养流程图
任务3：请结合培养流程，阅读课本P44-45，思考回答以下问题
①取什么样的组织进行培养？为什么？
②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？用什么方法？
③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？
④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？
⑤体外培养动物细胞分为两类，分为哪两类？
⑥什么是细胞贴壁？⑦什么是接触抑制？
⑧为什么要进行分瓶培养？⑨进行传代培养时，如何处理？
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？
用什么方法？
①取什么样的组织进行培养？为什么？
这些细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养。
成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和繁殖。
①机械的方法；②胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理。
一般取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官培养
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？
多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。
蛋白质
④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？
细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，所以胰蛋白酶会把细胞消化掉。
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑤体外培养动物细胞分为两类
第1类：悬浮生长细胞
细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
⑥什么是细胞贴壁
悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。
第2类：贴壁生长细胞
细胞需贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型）
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑦什么是接触抑制？
这种现象称为接触抑制
形成一层细胞
可形成多层细胞
⑧为什么要进行分瓶培养？
取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养
⑨进行传代培养时，如何处理？
悬浮培养细胞
贴壁细胞
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
出现接触抑制
细胞分裂受阻
分瓶
培养
悬浮培养细胞
贴壁细胞
胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
分瓶培养
离心法收集
取动物组织
用机械法和用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
分散成单个细胞
加培养液
细胞悬液
在培养皿或培养瓶内
原代培养
贴壁细胞
细胞分
裂受阻
传代培养
分瓶
培养
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
出现接触抑制
悬浮培养细胞
悬浮培养细胞
贴壁细胞
胰蛋白酶处理
制成细胞悬液
分瓶培养
离心法收集
学习任务3：完善动物细胞培养流程图
3、分布：
1、概念：
4、分类：
电镜下的胚胎干细胞
存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
包括胚胎干细胞和成体干细胞等
干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。
2、特点：
体积较小，细胞核大，核仁明显
二、干细胞的培养和应用
在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。
3、分布：
1、概念：
4、分类：
存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
胚胎干细胞 和 成体干细胞等
干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。
2、特点：
体积较小，细胞核大，核仁明显
二、干细胞的培养和应用
在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。
具有发育的全能性，
但涉及伦理问题
移植
取成纤维
细胞等
iPS细胞
转入相
关因子
细胞发生转化
分化
胰岛细胞
神经元
血细胞
肠上皮细胞
心肌细胞
病人
iPS细胞用于治疗人类疾病示意图
肝细胞
5、诱导多能干细胞（iPS细胞）
无需破坏胚胎
可避免免疫排斥
反应
无菌、无毒
营养
温度、pH和渗透压
气体环境
制备细胞悬液
原代培养
传代培养
动物细胞培养
培养的条件
培养的过程
干细胞的
培养和应用
干细胞的种类、特点及应用
iPS细胞的培养和应用
小结