(2)微生物的基本培养技术
——高二生物学人教版(2019)选择性必修三课堂速测
基础检测
培养基的配制
1.培养基
人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。
2.培养基的分类:按照物理性质不同分为两类。
(1)液体培养基:呈 的培养基,不加入凝固剂(如琼脂)。
(2)固体培养基:呈 的培养基,加入凝固剂(如琼脂)。
3.培养基的营养组成
各种培养基一般都含有 、 、 和无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的需求。
无菌技术
1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止 。
2.消毒和灭菌
消毒 灭菌
概念 使用较为 的物理、化学或生物等方法杀死物体 或内部一部分微生物 使用 的理化方法杀死物体内外 的微生物,包括
常用方法 消毒法、巴氏消毒法、 消毒法、紫外线消毒法 灭菌、干热灭菌、 灭菌
适用对象 操作空间、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
3.具体操作
(1)对实验操作的 、操作者的衣着和手进行清洁和 。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。
微生物的纯培养
1.纯培养:在微生物学中,将接种于 内,在合适条件下形成的含 的群体称为培养物。由 所获得的微生物群体称为纯培养物,获得 的过程就是纯培养。
2.微生物纯培养的步骤:微生物的纯培养包括配制培养基、 、 、分离和培养等步骤。
3.酵母菌的纯培养
(1)菌落:分散的微生物在适宜的 表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的 。
(2)获得单菌落的方法: 法和 法。
(3)过程
①制备培养基: →灭菌→
②接种和分离酵母菌:用 法在马铃薯培养基表面接种酵母菌。下列接种过程正确的顺序是
③培养酵母菌:待菌液被 吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28 ℃左右恒温箱中培养 h。
小试牛刀
1.下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供( )
成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl H2O
含量 0.5g 1g 0.5g 100mL
A.碳源 B.氮源
C.维生素 D.包括A、B、C三项
2.配制培养异养微生物的培养基时,哪种不是必须添加的成分( )
A.琼脂 B.水 C.无机盐 D.碳源
3.在微生物培养实验中,分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的灭菌处理,这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌( )
A.接种环、手、培养基 B.培养容器、手、微生物菌种
C.接种针、手、高压锅 D.培养基、手、接种针
4.外科医生对病人进行手术时,对自己的手和使用的手术器械分别进行( )
A.消毒、消毒 B.灭菌、灭菌 C.消毒、灭菌 D.灭菌、消毒
5.培养基的配制顺序为( )
①称量
②熔化
③灭菌
④调pH
⑤倒平板
⑥定容
A.①②③④⑥⑤ B.①②④⑥③⑤ C.①②④⑥⑤③ D.①②④③⑥⑤
6.培养微生物时必须进行无菌操作,下列消毒灭菌方法中,常用于各种器皿灭菌的是( )
A.70%酒精浸泡 B.紫外线照射 C.高压蒸汽法 D.5%次氯酸钠溶液浸泡
7.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )
A.消毒是指用较为温和的物理或化学方法杀死所有微生物
B.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
8.关于微生物的营养,下列说法正确的是( )
A.同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
答案以及解析
1.答案:D
解析:据分析可知牛肉膏蛋白陈培养基中牛肉膏和蛋白可以提供碳源、氮源、和维生素,D正确。故选D。
2.答案:A
解析:水、无机盐、碳源(能为异养生物提供碳源和能源)、氮源(能为生物生长提供氮元素)等是培养基的基本成分,琼脂是凝固剂,固体培养基才需要加入琼脂,液体培养基不需要加入琼脂。故选A。
3.答案:D
解析:高压蒸汽气灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌;用酒精擦拭双手是消毒的一种方法;火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种环等金属用具,即D正确。
4.答案:C
解析:灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子),常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子),常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法,适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数。
5.答案:B
解析:微生物的培养过程中,培养基的制备是关键的一步,制备培养基的步骤是计算、称量、熔化、调pH、定容、灭菌、倒平板,对应的顺序是①②④⑥③⑤,故选B。
6.答案:C
解析:玻璃刮刀采用70%酒精浸泡清毒,杀灭空气中的微生物常采用紫外线照射,各种器皿通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌,5%次氯酸钠溶液浸泡常用于植物切段消毒。
7.答案:A
解析:消毒是指用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子,故A项错误,B项正确;接种环用灼烧法灭菌,常用的灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法等,C、D两项正确。
8.答案:D
解析:A、对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源,A错误;
B、CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量,B错误;
C、CO2和N2是无机物,也是微生物的碳源和氮源,C错误;
D、硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨,同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能量,D正确。
故选D。