（3）微生物的选择培养和计数——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测（含解析）
文档属性
| 名称 | （3）微生物的选择培养和计数——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测（含解析） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 23.0KB | ||
| 资源类型 | 教案 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2024-09-18 19:05:12 | ||
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文档简介
（3）微生物的选择培养和计数
——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测
基础检测
选择培养基
1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时 或 其他微生物的生长。
2.选择培养基概念：在微生物学中，允许 的微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培养基。
3.选择培养基配方的设计：
（1）原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解产生 。
（2）培养基配方设计：以尿素为唯一氮源的选择培养基。
微生物的选择培养
1．分解尿素的细菌的分离
分解尿素的细菌能合成脲酶，该酶能催化尿素分解产生NH3，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是 。
2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌
土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行 ，然后再将菌液涂布到制备好的 ，操作过程如下：
采集土样→将10 g土样加入盛有90 mL 的锥形瓶中，充分 。取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次 →取0.1 mL菌液，滴加到 表面→将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中→将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布→用涂布器将菌液均匀地涂布在 表面。涂布时可转动 ，使涂布均匀→涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入 ℃的恒温箱中培养1～2 d。
微生物的数量测定
1．稀释涂布平板法
（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的 。通过 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为 的平板进行计数。
（2）注意问题：统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
2．显微镜直接计数法
（1）方法：利用特定的 或 ，在显微镜下观察、计数。
（2）注意问题：统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。
小试牛刀
1.将土壤稀释液涂布于选择培养基上，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，还需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白脉培养基
C.相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.相同条件下接种了的选择培养基
2.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )
①加尿素
②不加尿素
③加琼脂
④不加琼脂
⑤加葡萄糖
⑥不加葡萄糖
⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A. ①③⑤⑦ B. ②④⑥⑧ C. ①③⑤⑧ D. ①④⑥⑦
3.下列不能测定样品微生物数的方法是( )
A.稀释涂布平板法 B.显微镜直接计数法
C.滤膜法 D.平板划线法
4.某生物兴趣小组从有机质丰富的土壤中提取样本，利用液体培养基选择培养纤维素分解菌。使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的原因主要是( )
A.纤维素分解菌是厌氧菌 B.使用液体培养基更容易灭菌
C.富集目的菌同时便于稀释涂布 D.分解菌在固体培养基上不能生长
5.在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中,为判断是否起到了分离效果,提高实验结果的可信度,需要精心设置对照.对照组的设置方式为( )
A.牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液
B.牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水
C.筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种
D.筛选分解尿素细菌的选择培养
6.下列关于“测定土壤中细菌的总量”实验的叙述，正确的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后进行高压蒸汽灭菌
B.一般选用104、105、106倍的土壤稀释液进行平板培养和计数
C.确定对照组无菌后，选择菌落数为30~300之间的平板进行计数
D.实验组各组统计的菌落数目往往比活菌的实际数目多
7.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )
A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数
B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落
C.为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数
D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果
8.某同学利用稀释涂布平板法进行菌落数目的统计，在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760个/mL、295个/mL和46个/mL，则菌落总数(个/mL)为( )
A.3.76×104 B.3.95×104 C.3.6×104 D.3.775×104
答案以及解析
1.答案：C
解析：对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白陈培养基为对照组，将菌液稀释相同的倍数，在相同培养条件下，在牛肉膏蛋白陈培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。因此，应设置相同条件下接种了的牛肉膏蛋白陈培养基作为对照，C正确，故选C。
2.答案：C
解析：①②要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、②错误；
③④分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，③正确，④错误；
⑤⑥土壤中分解尿素的细菌为异氧型，故培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；
⑦⑧培养基中不需要加除尿素以外的其它氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确；
故符合题意的有①③⑤⑧，即C正确，ABD错误。
故选C。
3.答案：D
解析：A、稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；
B、显微镜直接计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；
C、滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；
D、平板划线法可用于分离微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。
故选D。
4.答案：C
解析：A、纤维素分解菌的代谢类型是异养需氧型，A错误；BC、使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板维素分解菌，并不是因为使用液体培养基更容易灭菌，B错误，C正确；D、鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基，所以纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长，D错误。故选：C。
5.答案：A
解析：A、本实验中，目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果，故应用牛肉膏蛋白陈培养基作为对照，接种相同土壤样液观察菌落的多少，通过两种培养基上菌落的多少，可判断选择培养基是否起到了分离效果，A正确；B、牛肉膏蛋白陈培养基上接种无菌水可用于检测培养基是否合格，与题意不符，B错误；C、筛选分解尿素细菌的选择培养基是实验中，应该接种，否则无法达到筛选的目的，C错误：D、筛选分解尿素细菌的选择培养是为了增加细菌的数量，保证筛选的成功，不是对照组，D错误。故选A。
6.答案：C
解析：A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白陈培养基，倒平板前进行高压蒸汽灭菌，A错误；B、取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml(作为对照组)，分别涂布于各组平板上，B错误；C、确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300以内的实验组平板进行计数，C正确；D、实验组各组统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，D故选C。
7.答案：C
解析：稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，值得注意的是，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，A、B正确。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数，设计实验时，一定要至少用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性，分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时，取平均值作为统计结果，C错误，D正确。
8.答案：D
解析：在进行稀释涂布平板法进行计数时,需要选择菌落数在30~300的进行计数,否则会导致误差过大,因此菌落总数应该为46×103=4.6×104个/mL,295×102=2.95×104个/mL,二者的平均数为(4.6+2.95)÷2×104=3.775×104个/mL,即D正确。故选D。
——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测
基础检测
选择培养基
1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时 或 其他微生物的生长。
2.选择培养基概念：在微生物学中，允许 的微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培养基。
3.选择培养基配方的设计：
（1）原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解产生 。
（2）培养基配方设计：以尿素为唯一氮源的选择培养基。
微生物的选择培养
1．分解尿素的细菌的分离
分解尿素的细菌能合成脲酶，该酶能催化尿素分解产生NH3，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是 。
2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌
土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行 ，然后再将菌液涂布到制备好的 ，操作过程如下：
采集土样→将10 g土样加入盛有90 mL 的锥形瓶中，充分 。取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次 →取0.1 mL菌液，滴加到 表面→将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中→将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布→用涂布器将菌液均匀地涂布在 表面。涂布时可转动 ，使涂布均匀→涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入 ℃的恒温箱中培养1～2 d。
微生物的数量测定
1．稀释涂布平板法
（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的 。通过 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为 的平板进行计数。
（2）注意问题：统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
2．显微镜直接计数法
（1）方法：利用特定的 或 ，在显微镜下观察、计数。
（2）注意问题：统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。
小试牛刀
1.将土壤稀释液涂布于选择培养基上，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，还需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白脉培养基
C.相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.相同条件下接种了的选择培养基
2.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )
①加尿素
②不加尿素
③加琼脂
④不加琼脂
⑤加葡萄糖
⑥不加葡萄糖
⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A. ①③⑤⑦ B. ②④⑥⑧ C. ①③⑤⑧ D. ①④⑥⑦
3.下列不能测定样品微生物数的方法是( )
A.稀释涂布平板法 B.显微镜直接计数法
C.滤膜法 D.平板划线法
4.某生物兴趣小组从有机质丰富的土壤中提取样本，利用液体培养基选择培养纤维素分解菌。使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的原因主要是( )
A.纤维素分解菌是厌氧菌 B.使用液体培养基更容易灭菌
C.富集目的菌同时便于稀释涂布 D.分解菌在固体培养基上不能生长
5.在“分离土壤中分解尿素的细菌”实验中,为判断是否起到了分离效果,提高实验结果的可信度,需要精心设置对照.对照组的设置方式为( )
A.牛肉膏蛋白胨培养基上接种相同土壤样液
B.牛肉膏蛋白胨培养基上接种无菌水
C.筛选分解尿素细菌的选择培养基不接种
D.筛选分解尿素细菌的选择培养
6.下列关于“测定土壤中细菌的总量”实验的叙述，正确的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板后进行高压蒸汽灭菌
B.一般选用104、105、106倍的土壤稀释液进行平板培养和计数
C.确定对照组无菌后，选择菌落数为30~300之间的平板进行计数
D.实验组各组统计的菌落数目往往比活菌的实际数目多
7.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )
A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数
B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落
C.为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数
D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果
8.某同学利用稀释涂布平板法进行菌落数目的统计，在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760个/mL、295个/mL和46个/mL，则菌落总数(个/mL)为( )
A.3.76×104 B.3.95×104 C.3.6×104 D.3.775×104
答案以及解析
1.答案：C
解析：对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白陈培养基为对照组，将菌液稀释相同的倍数，在相同培养条件下，在牛肉膏蛋白陈培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。因此，应设置相同条件下接种了的牛肉膏蛋白陈培养基作为对照，C正确，故选C。
2.答案：C
解析：①②要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、②错误；
③④分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，③正确，④错误；
⑤⑥土壤中分解尿素的细菌为异氧型，故培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错误；
⑦⑧培养基中不需要加除尿素以外的其它氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确；
故符合题意的有①③⑤⑧，即C正确，ABD错误。
故选C。
3.答案：D
解析：A、稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；
B、显微镜直接计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；
C、滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；
D、平板划线法可用于分离微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。
故选D。
4.答案：C
解析：A、纤维素分解菌的代谢类型是异养需氧型，A错误；BC、使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板维素分解菌，并不是因为使用液体培养基更容易灭菌，B错误，C正确；D、鉴别纤维素分解菌使用的是固体培养基，所以纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长，D错误。故选：C。
5.答案：A
解析：A、本实验中，目的是为了判断选择培养基是否起到了分离效果，故应用牛肉膏蛋白陈培养基作为对照，接种相同土壤样液观察菌落的多少，通过两种培养基上菌落的多少，可判断选择培养基是否起到了分离效果，A正确；B、牛肉膏蛋白陈培养基上接种无菌水可用于检测培养基是否合格，与题意不符，B错误；C、筛选分解尿素细菌的选择培养基是实验中，应该接种，否则无法达到筛选的目的，C错误：D、筛选分解尿素细菌的选择培养是为了增加细菌的数量，保证筛选的成功，不是对照组，D错误。故选A。
6.答案：C
解析：A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白陈培养基，倒平板前进行高压蒸汽灭菌，A错误；B、取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml(作为对照组)，分别涂布于各组平板上，B错误；C、确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300以内的实验组平板进行计数，C正确；D、实验组各组统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，D故选C。
7.答案：C
解析：稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，值得注意的是，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，A、B正确。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数，设计实验时，一定要至少用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性，分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时，取平均值作为统计结果，C错误，D正确。
8.答案：D
解析：在进行稀释涂布平板法进行计数时,需要选择菌落数在30~300的进行计数,否则会导致误差过大,因此菌落总数应该为46×103=4.6×104个/mL,295×102=2.95×104个/mL,二者的平均数为(4.6+2.95)÷2×104=3.775×104个/mL,即D正确。故选D。