1.2 第1课时 微生物的基本培养技术人教版（2019）生物选择性必修3同步练习题（含解析）
文档属性
| 名称 | 1.2 第1课时 微生物的基本培养技术人教版（2019）生物选择性必修3同步练习题（含解析） |  | |
| 格式 | docx | ||
| 文件大小 | 429.2KB | ||
| 资源类型 | 试卷 | ||
| 版本资源 | 人教版（2019） | ||
| 科目 | 生物学 | ||
| 更新时间 | 2025-05-19 11:26:49 | ||
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文档简介
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2025人教版生物选择性必修3
第2节 第1课时 微生物的基本培养技术
A组必备知识基础练
1.下表为某微生物培养基的配方,下列有关叙述正确的是( )
组分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g 适量 定容至 1 000 mL
A.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
B.该培养基调节到合适的pH后就可以接种使用
C.该培养基中提供氮源的物质是牛肉膏
D.从物理性质看,该培养基属于液体培养基
2.下列有关微生物培养基及其配制的叙述,正确的是( )
A.对培养基进行灭菌,常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B.若需要调节pH,则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行
C.家庭制作腐乳时,豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母菌等的培养基
D.固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
3.下列实验器材或食品所采用的灭菌或消毒方式,错误的是( )
A.接种环——酒精灯火焰灼烧
B.菌种悬液——紫外灯灭菌
C.啤酒——巴氏消毒法
D.培养基——湿热灭菌
4.下列有关无菌技术的叙述,正确的是( )
①配制培养基和接种时,均需在酒精灯火焰附近操作;②接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可用紫外线照射30 min进行消毒;③可以通过化学消毒法处理水源,还可通过生物消毒法净化污水;④培养基需经高压蒸汽灭菌后才可以调节pH;⑤高压蒸汽灭菌是在压力为101 kPa,温度为121 ℃的条件下维持15~30 min来灭菌的
A.①③ B.②⑤ C.②④ D.②③
5.微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述,错误的是( )
A.通过煮沸消毒法可以杀死所有的病原微生物及其芽孢
B.实验操作者接种前要用体积分数为70%的酒精棉球擦手进行消毒
C.吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌
D.接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌
6.下列关于酵母菌的纯培养实验的叙述,正确的是( )
A.将接种环灼烧后,立即从上次划线的末端开始划线
B.已灭菌的接种环,在操作过程中不需要再次灭菌
C.完成平板划线后不需要将平板倒置,放入恒温培养箱中培养即可
D.使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
7.下列关于酵母菌的纯培养实验的叙述,错误的是( )
A.马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分
B.对接种环进行灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧
C.平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线
D.完成平板划线后,应将平板立刻倒置培养,以免污染培养基
8.(2024广东深圳一模)在“酵母菌的纯培养”实验课上,学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是( )
A.开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧
B.棉塞拔出后和塞上前,装有培养液的试管口都要通过火焰
C.在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液
D.将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线
9.在分离、纯化细菌的实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如图所示,1、2、3、4、5是划线的五个区域。下列叙述错误的是( )
A.每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.图甲中的5区域为划线的起始区域
D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
10.采用平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上,下列有关平板划线操作的叙述,错误的是 ( )
A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种
C.在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液
D.划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者
11.在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料,对该品系大肠杆菌进行了培养。请分析回答下列问题。
(1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的 。
(2)配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须调节 ,接种前要进行 处理。
(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 法。
(4)在进行牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板 放置,这样做的目的是防止皿盖上的水珠落入 而造成污染。
(5)甲同学采用平板划线法接种,获得单个菌落后继续筛选,在每次划线之前都要灼烧 ,他这样做的目的是 。
在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗 ,为什么 。
(6)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是 。
B组能力素养提升练
12.(2024江西名校教研联盟)培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述,错误的是( )
A.制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂
B.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
C.培养霉菌时需要将培养基调至碱性
D.对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌
13.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒。金黄色葡萄球菌接种实验结束后,下列做法错误的是( )
A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉
C.做完实验后,在实验室内可以饮水
D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭
14.某生物兴趣小组同学开展了酵母菌的纯培养实验,部分操作步骤如下图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①中待培养基冷却至室温后缓慢倒入培养皿,凝固后倒置
B.步骤②中为防止杂菌污染,接种环灼烧后立即蘸取一环菌液
C.步骤③中不能划破培养基,以免影响菌落的分离与观察
D.步骤④完成后,接种环的灼烧次数与划线次数相同
15.某研究小组用平板划线法从有机废水中分离微生物,用于废水处理。下列叙述正确的是( )
A.倒平板后应立即将培养皿倒置
B.转换划线角度后不需灼烧接种环即可进行划线
C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的
D.划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上
16.胃炎、胃溃疡等疾病与幽门螺杆菌(Hp)感染有关。人体的胃液呈强酸性(pH约为0.9~1.8),但胃黏膜层中的黏液细胞可以分泌出一种黏液,从而保证胃不被腐蚀。幽门螺杆菌可以穿透黏液,附着并生活在靠近胃黏膜层pH呈中性的环境中,以下分离纯化Hp的步骤中不正确的是( )
A.配制固体培养基并将培养基的pH调至0.9~1.8
B.待灭菌的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板
C.可采用平板划线法接种Hp
D.将接种后的培养基密封放入37 ℃恒温培养箱中倒置培养
17.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示,下列说法不正确的是( )
A.倒平板后直接培养可判断有无杂菌污染
B.倒平板后需要进行灭菌处理
C.图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
18.某兴趣小组欲对葡萄皮上的野生酵母菌进行纯培养。请回答下列问题。
(1)酵母菌的纯培养可使用 (填“牛肉膏蛋白胨”或“马铃薯琼脂”)培养基,培养基中还应加入链霉素以抑制 的生长。该培养基应采用 灭菌法灭菌。
(2)采用平板划线法将葡萄皮上的野生酵母菌接种到平板上,之后经培养得到的单菌落一般是由 形成的纯培养物。上述方法能分离得到单菌落的原理是 。
(3)下图为不同初始氧气浓度下,利用等量酵母菌进行发酵产生酒精实验的相关曲线。其中,初始氧气浓度较高的是 ,判断依据是 。
19.扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一,其次级代谢物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布,研究人员进行了如图所示的实验,其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处,取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题。
(1)培养扩展青霉菌种使用的培养基的成分如下表所示,根据物理性质划分,该培养基属于 培养基,其中NaNO3的作用有 。接种至苹果之前用该培养基培养的目的是 。
蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4
30 g 2 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 1 g
(2)接种前,应对苹果进行 (填“消毒”或“灭菌”)处理。用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是 。
(3)研究人员测定了病斑直径为1、2、3 cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量,结果如下图所示。
由图中病斑直径大小 (填“能”或“不能”)得出病斑直径越大,测定的相同部位Pat含量越高的结论,理由是 。去除腐烂部位后的苹果是否可以食用 请作出判断并结合图中信息分析原因: 。
第1章 第2节 第1课时
微生物的基本培养技术
1.C 在此培养基上能生长的微生物有多种,不只有大肠杆菌,A项错误;该培养基调节到合适的pH后,要经过高压蒸汽灭菌才可以接种使用,B项错误;该培养基中提供氮源的物质是牛肉膏,C项正确;从物理性质看,该培养基含有琼脂(凝固剂),属于固体培养基,D项错误。
2.C 对培养基进行灭菌,常用的灭菌方法是湿热灭菌,A项错误;若需要调节pH,则应该在对培养基进行湿热灭菌前进行,B项错误;家庭制作腐乳时,毛霉、曲霉、酵母菌等所需营养物质均来自豆腐块,因此豆腐块就是它们的培养基,C项正确;固体培养基中添加的琼脂是凝固剂,不属于营养物质,D项错误。
3.B 接种环可用酒精灯火焰灼烧灭菌,A项正确;不能对菌种悬液进行灭菌处理,否则会杀死菌种,紫外灯常用来进行消毒,B项错误;巴氏消毒法可用于啤酒和牛奶等不耐高温的液体的消毒,C项正确;培养基常用湿热灭菌法进行灭菌,其中高压蒸汽灭菌的效果最好,D项正确。
4.D 配制培养基时,不需要在酒精灯火焰附近操作,①错误;接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可用紫外线照射30 min进行消毒,②正确;可以使用化学药剂即通过化学消毒法处理水源,还可用微生物分解水体中的有机物,即通过生物消毒法净化污水,③正确;培养基需先调节pH,再进行高压蒸汽灭菌,④错误;高压蒸汽灭菌是在压力为100 kPa,温度为121 ℃的条件下维持15~30 min来灭菌的,⑤错误。
5.A 煮沸消毒法不能杀死所有的病原微生物及其芽孢,A项错误;实验操作者接种前要用体积分数为70%的酒精棉球擦手进行消毒,B项正确;吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌,C项正确;接种环、试管口等常通过灼烧灭菌法进行灭菌,D项正确。
6.D 将接种环灼烧后,待接种环冷却后再从上次划线的末端开始划线,A项错误;已灭菌的接种环,在操作过程中每次划线前均需要再次灭菌,B项错误;完成平板划线后需要将平板倒置,再放入恒温培养箱中培养,C项错误;使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境,D项正确。
7.D 马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分,A项正确;对接种环进行灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧,防止杂菌的污染,B项正确;平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线,用力划线会使培养基表面破损,影响对实验结果的观察,C项正确;完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,再将平板倒置培养,D项错误。
8.D 接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌,并需要在酒精灯火焰旁冷却后才能接种,划线完毕后要将接种环进行灼烧,避免微生物污染环境和感染操作者,A项正确;拔出棉塞后,需将试管口通过火焰,蘸取菌液后,需将试管口通过火焰并塞上棉塞,通过灼烧防止杂菌污染,B项正确;酒精灯火焰旁存在无菌区域,在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液,C项正确;划线操作时,为了防止杂菌污染,培养皿的皿盖不能完全打开,操作时需要在酒精灯火焰旁进行,D项错误。
9.C 图中的5区域出现了单个菌落,1区域菌落最多,因此5区域应该为划线的最终区域,1区域为划线的起始区域,C项错误。
10.C 从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,C项错误。
11.答案 (1)浓度和比例
(2)pH 灭菌
(3)高压蒸汽灭菌
(4)倒过来 培养基
(5)接种环 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自上次划线的末端 需要 杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者
(6)防止污染环境
解析 (1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的浓度和比例。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH的调节,接种前要对培养基进行灭菌处理。(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是高压蒸汽灭菌法。(4)在进行牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(5)每次划线之前都要灼烧接种环,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自上次划线的末端。划线操作结束时,仍需对接种工具进行灭菌处理,其目的是杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。(6)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是防止污染环境。
12.C 向液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基,A项正确;培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,B项正确;培养霉菌时一般需要将培养基调至酸性,C项错误;对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌,D项正确。
13.C 实验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死,以免使人致病,接种环应进行灼烧灭菌处理,A项正确;带菌的培养基要经高压蒸汽灭菌后才能倒掉,以免污染环境,B项正确;在微生物培养实验室中,不能吃东西、饮水等,C项错误;接种后双手必须用肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭,D项正确。
14.C 步骤①中待培养基冷却至50 ℃(而非室温)左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,A项错误;步骤②中接种环灼烧后,应待接种环冷却后再接种,避免杀死菌种,B项错误;划线时应避免划破培养基表面,以免影响菌落的分离与观察,C项正确;采用平板划线法纯化酵母菌菌种,每次划线前后均要对接种环进行灼烧灭菌,因此接种环的灼烧次数比划线次数多一次,D项错误。
15.C 倒平板后应待平板冷却凝固后,再将培养皿倒置,A项错误;转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌,冷却后再进行划线,B项错误;划线时在火焰附近将培养皿打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,盖上皿盖,不可完全打开皿盖,D项错误。
16.A 分析题意可知,幽门螺杆菌生活在靠近胃黏膜层pH呈中性的环境中,故培养基中的pH应调至中性,A项错误;待灭菌的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,B项正确;微生物的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法,C项正确;将接种后的培养基密封放入37 ℃恒温培养箱中倒置培养,D项正确。
17.B 平板上不含任何生长因子,若倒平板后直接培养,出现菌落说明已被杂菌污染,因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长,A项正确;制备培养基时,先将培养基灭菌,待冷却至50 ℃左右时再倒平板,B项错误;图中菌落生长在乙、丙区域之间,说明该菌同时需要生长因子乙和丙,C项正确;不同菌种所需生长因子不同,可利用生长图形法筛选菌种,D项正确。
18.答案 (1)马铃薯琼脂 细菌 湿热
(2)单一个体繁殖 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,经数次划线培养,可以分离得到单菌落
(3)a 初始氧气浓度高,酵母菌进行有氧呼吸的时间长,酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高,酵母菌有氧呼吸大量繁殖,在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快)
解析 (1)马铃薯琼脂培养基常用于真菌的培养,因此酵母菌的纯培养可使用马铃薯琼脂培养基;培养基中加入链霉素可以抑制细菌的生长,培养基应采用湿热灭菌法灭菌。(2)单菌落一般是由单一个体繁殖形成的纯培养物。平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,经数次划线培养,可以分离得到单菌落。(3)初始氧气浓度高时,酵母菌进行有氧呼吸的时间长,酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高,酵母菌有氧呼吸大量繁殖,在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快),因此初始氧气浓度较高的是a。
19.答案 (1)液体 提供氮源和无机盐 增加扩展青霉菌种的浓度
(2)消毒 第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷却就开始在第二区域划线或划线未从第一区域末端开始
(3)不能 2 cm病斑的①号和④号部位的Pat含量均略高于3 cm病斑的①号和④号部位的Pat含量 不建议食用,未腐烂部位仍含有一定量的Pat,食用后可能存在健康风险
解析 (1)题表中显示,培养扩展青霉菌种使用的培养基的成分中没有凝固剂,故根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基;NaNO3的主要作用是为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐。接种至苹果之前用该培养基培养扩展青霉,让扩展青霉在液体培养基中大量繁殖,可增大扩展青霉菌种的浓度。(2)消毒是指使用较温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物的方法,这种方法对被消毒的物体基本无害;灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物的方法,对活体生物及组织器官不能采用灭菌的方法,只能进行消毒。故接种扩展青霉前,为了避免苹果上其他杂菌的污染,应对苹果进行消毒处理。划线时需要从上一次划线的末端开始划线,第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落,导致操作失误的原因可能是:第一区域划线结束,接种环灼烧后未经冷却即开始下一次划线,导致菌种被杀死;划线未从第一区域末端开始,使以后划线上均无菌种,从而导致其他区域的划线上均无菌落。(3)在曲线图中,2 cm病斑的①号部位和④号部位的Pat含量均略高于3 cm病斑的①号部位和④号部位的Pat含量,所以不能得出病斑直径越大,测定的相同部位Pat含量越高的结论。由题中曲线图可知,远离病斑没有腐烂的苹果部位⑤仍然含有少量的Pat,Pat是一种具有致突变作用的毒素,所以,苹果去除腐烂部位后不建议食用,食用后可能存在健康风险。
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2025人教版生物选择性必修3
第2节 第1课时 微生物的基本培养技术
A组必备知识基础练
1.下表为某微生物培养基的配方,下列有关叙述正确的是( )
组分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g 适量 定容至 1 000 mL
A.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
B.该培养基调节到合适的pH后就可以接种使用
C.该培养基中提供氮源的物质是牛肉膏
D.从物理性质看,该培养基属于液体培养基
2.下列有关微生物培养基及其配制的叙述,正确的是( )
A.对培养基进行灭菌,常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B.若需要调节pH,则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行
C.家庭制作腐乳时,豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母菌等的培养基
D.固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
3.下列实验器材或食品所采用的灭菌或消毒方式,错误的是( )
A.接种环——酒精灯火焰灼烧
B.菌种悬液——紫外灯灭菌
C.啤酒——巴氏消毒法
D.培养基——湿热灭菌
4.下列有关无菌技术的叙述,正确的是( )
①配制培养基和接种时,均需在酒精灯火焰附近操作;②接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可用紫外线照射30 min进行消毒;③可以通过化学消毒法处理水源,还可通过生物消毒法净化污水;④培养基需经高压蒸汽灭菌后才可以调节pH;⑤高压蒸汽灭菌是在压力为101 kPa,温度为121 ℃的条件下维持15~30 min来灭菌的
A.①③ B.②⑤ C.②④ D.②③
5.微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述,错误的是( )
A.通过煮沸消毒法可以杀死所有的病原微生物及其芽孢
B.实验操作者接种前要用体积分数为70%的酒精棉球擦手进行消毒
C.吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌
D.接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌
6.下列关于酵母菌的纯培养实验的叙述,正确的是( )
A.将接种环灼烧后,立即从上次划线的末端开始划线
B.已灭菌的接种环,在操作过程中不需要再次灭菌
C.完成平板划线后不需要将平板倒置,放入恒温培养箱中培养即可
D.使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
7.下列关于酵母菌的纯培养实验的叙述,错误的是( )
A.马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分
B.对接种环进行灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧
C.平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线
D.完成平板划线后,应将平板立刻倒置培养,以免污染培养基
8.(2024广东深圳一模)在“酵母菌的纯培养”实验课上,学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是( )
A.开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧
B.棉塞拔出后和塞上前,装有培养液的试管口都要通过火焰
C.在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液
D.将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线
9.在分离、纯化细菌的实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如图所示,1、2、3、4、5是划线的五个区域。下列叙述错误的是( )
A.每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌
B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C.图甲中的5区域为划线的起始区域
D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
10.采用平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上,下列有关平板划线操作的叙述,错误的是 ( )
A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种
C.在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液
D.划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者
11.在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料,对该品系大肠杆菌进行了培养。请分析回答下列问题。
(1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的 。
(2)配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须调节 ,接种前要进行 处理。
(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 法。
(4)在进行牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板 放置,这样做的目的是防止皿盖上的水珠落入 而造成污染。
(5)甲同学采用平板划线法接种,获得单个菌落后继续筛选,在每次划线之前都要灼烧 ,他这样做的目的是 。
在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗 ,为什么 。
(6)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是 。
B组能力素养提升练
12.(2024江西名校教研联盟)培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述,错误的是( )
A.制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂
B.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
C.培养霉菌时需要将培养基调至碱性
D.对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌
13.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒。金黄色葡萄球菌接种实验结束后,下列做法错误的是( )
A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉
C.做完实验后,在实验室内可以饮水
D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭
14.某生物兴趣小组同学开展了酵母菌的纯培养实验,部分操作步骤如下图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①中待培养基冷却至室温后缓慢倒入培养皿,凝固后倒置
B.步骤②中为防止杂菌污染,接种环灼烧后立即蘸取一环菌液
C.步骤③中不能划破培养基,以免影响菌落的分离与观察
D.步骤④完成后,接种环的灼烧次数与划线次数相同
15.某研究小组用平板划线法从有机废水中分离微生物,用于废水处理。下列叙述正确的是( )
A.倒平板后应立即将培养皿倒置
B.转换划线角度后不需灼烧接种环即可进行划线
C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的
D.划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上
16.胃炎、胃溃疡等疾病与幽门螺杆菌(Hp)感染有关。人体的胃液呈强酸性(pH约为0.9~1.8),但胃黏膜层中的黏液细胞可以分泌出一种黏液,从而保证胃不被腐蚀。幽门螺杆菌可以穿透黏液,附着并生活在靠近胃黏膜层pH呈中性的环境中,以下分离纯化Hp的步骤中不正确的是( )
A.配制固体培养基并将培养基的pH调至0.9~1.8
B.待灭菌的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板
C.可采用平板划线法接种Hp
D.将接种后的培养基密封放入37 ℃恒温培养箱中倒置培养
17.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示,下列说法不正确的是( )
A.倒平板后直接培养可判断有无杂菌污染
B.倒平板后需要进行灭菌处理
C.图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
18.某兴趣小组欲对葡萄皮上的野生酵母菌进行纯培养。请回答下列问题。
(1)酵母菌的纯培养可使用 (填“牛肉膏蛋白胨”或“马铃薯琼脂”)培养基,培养基中还应加入链霉素以抑制 的生长。该培养基应采用 灭菌法灭菌。
(2)采用平板划线法将葡萄皮上的野生酵母菌接种到平板上,之后经培养得到的单菌落一般是由 形成的纯培养物。上述方法能分离得到单菌落的原理是 。
(3)下图为不同初始氧气浓度下,利用等量酵母菌进行发酵产生酒精实验的相关曲线。其中,初始氧气浓度较高的是 ,判断依据是 。
19.扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一,其次级代谢物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布,研究人员进行了如图所示的实验,其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处,取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题。
(1)培养扩展青霉菌种使用的培养基的成分如下表所示,根据物理性质划分,该培养基属于 培养基,其中NaNO3的作用有 。接种至苹果之前用该培养基培养的目的是 。
蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4
30 g 2 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 1 g
(2)接种前,应对苹果进行 (填“消毒”或“灭菌”)处理。用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是 。
(3)研究人员测定了病斑直径为1、2、3 cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量,结果如下图所示。
由图中病斑直径大小 (填“能”或“不能”)得出病斑直径越大,测定的相同部位Pat含量越高的结论,理由是 。去除腐烂部位后的苹果是否可以食用 请作出判断并结合图中信息分析原因: 。
第1章 第2节 第1课时
微生物的基本培养技术
1.C 在此培养基上能生长的微生物有多种,不只有大肠杆菌,A项错误;该培养基调节到合适的pH后,要经过高压蒸汽灭菌才可以接种使用,B项错误;该培养基中提供氮源的物质是牛肉膏,C项正确;从物理性质看,该培养基含有琼脂(凝固剂),属于固体培养基,D项错误。
2.C 对培养基进行灭菌,常用的灭菌方法是湿热灭菌,A项错误;若需要调节pH,则应该在对培养基进行湿热灭菌前进行,B项错误;家庭制作腐乳时,毛霉、曲霉、酵母菌等所需营养物质均来自豆腐块,因此豆腐块就是它们的培养基,C项正确;固体培养基中添加的琼脂是凝固剂,不属于营养物质,D项错误。
3.B 接种环可用酒精灯火焰灼烧灭菌,A项正确;不能对菌种悬液进行灭菌处理,否则会杀死菌种,紫外灯常用来进行消毒,B项错误;巴氏消毒法可用于啤酒和牛奶等不耐高温的液体的消毒,C项正确;培养基常用湿热灭菌法进行灭菌,其中高压蒸汽灭菌的效果最好,D项正确。
4.D 配制培养基时,不需要在酒精灯火焰附近操作,①错误;接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可用紫外线照射30 min进行消毒,②正确;可以使用化学药剂即通过化学消毒法处理水源,还可用微生物分解水体中的有机物,即通过生物消毒法净化污水,③正确;培养基需先调节pH,再进行高压蒸汽灭菌,④错误;高压蒸汽灭菌是在压力为100 kPa,温度为121 ℃的条件下维持15~30 min来灭菌的,⑤错误。
5.A 煮沸消毒法不能杀死所有的病原微生物及其芽孢,A项错误;实验操作者接种前要用体积分数为70%的酒精棉球擦手进行消毒,B项正确;吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌,C项正确;接种环、试管口等常通过灼烧灭菌法进行灭菌,D项正确。
6.D 将接种环灼烧后,待接种环冷却后再从上次划线的末端开始划线,A项错误;已灭菌的接种环,在操作过程中每次划线前均需要再次灭菌,B项错误;完成平板划线后需要将平板倒置,再放入恒温培养箱中培养,C项错误;使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境,D项正确。
7.D 马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分,A项正确;对接种环进行灭菌时,顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧,防止杂菌的污染,B项正确;平板划线时,接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线,用力划线会使培养基表面破损,影响对实验结果的观察,C项正确;完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,再将平板倒置培养,D项错误。
8.D 接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌,并需要在酒精灯火焰旁冷却后才能接种,划线完毕后要将接种环进行灼烧,避免微生物污染环境和感染操作者,A项正确;拔出棉塞后,需将试管口通过火焰,蘸取菌液后,需将试管口通过火焰并塞上棉塞,通过灼烧防止杂菌污染,B项正确;酒精灯火焰旁存在无菌区域,在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液,C项正确;划线操作时,为了防止杂菌污染,培养皿的皿盖不能完全打开,操作时需要在酒精灯火焰旁进行,D项错误。
9.C 图中的5区域出现了单个菌落,1区域菌落最多,因此5区域应该为划线的最终区域,1区域为划线的起始区域,C项错误。
10.C 从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,C项错误。
11.答案 (1)浓度和比例
(2)pH 灭菌
(3)高压蒸汽灭菌
(4)倒过来 培养基
(5)接种环 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自上次划线的末端 需要 杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者
(6)防止污染环境
解析 (1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的浓度和比例。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH的调节,接种前要对培养基进行灭菌处理。(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是高压蒸汽灭菌法。(4)在进行牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(5)每次划线之前都要灼烧接种环,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自上次划线的末端。划线操作结束时,仍需对接种工具进行灭菌处理,其目的是杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。(6)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是防止污染环境。
12.C 向液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基,A项正确;培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,B项正确;培养霉菌时一般需要将培养基调至酸性,C项错误;对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌,D项正确。
13.C 实验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死,以免使人致病,接种环应进行灼烧灭菌处理,A项正确;带菌的培养基要经高压蒸汽灭菌后才能倒掉,以免污染环境,B项正确;在微生物培养实验室中,不能吃东西、饮水等,C项错误;接种后双手必须用肥皂洗净,再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭,D项正确。
14.C 步骤①中待培养基冷却至50 ℃(而非室温)左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,A项错误;步骤②中接种环灼烧后,应待接种环冷却后再接种,避免杀死菌种,B项错误;划线时应避免划破培养基表面,以免影响菌落的分离与观察,C项正确;采用平板划线法纯化酵母菌菌种,每次划线前后均要对接种环进行灼烧灭菌,因此接种环的灼烧次数比划线次数多一次,D项错误。
15.C 倒平板后应待平板冷却凝固后,再将培养皿倒置,A项错误;转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌,冷却后再进行划线,B项错误;划线时在火焰附近将培养皿打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,盖上皿盖,不可完全打开皿盖,D项错误。
16.A 分析题意可知,幽门螺杆菌生活在靠近胃黏膜层pH呈中性的环境中,故培养基中的pH应调至中性,A项错误;待灭菌的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,B项正确;微生物的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法,C项正确;将接种后的培养基密封放入37 ℃恒温培养箱中倒置培养,D项正确。
17.B 平板上不含任何生长因子,若倒平板后直接培养,出现菌落说明已被杂菌污染,因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长,A项正确;制备培养基时,先将培养基灭菌,待冷却至50 ℃左右时再倒平板,B项错误;图中菌落生长在乙、丙区域之间,说明该菌同时需要生长因子乙和丙,C项正确;不同菌种所需生长因子不同,可利用生长图形法筛选菌种,D项正确。
18.答案 (1)马铃薯琼脂 细菌 湿热
(2)单一个体繁殖 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,经数次划线培养,可以分离得到单菌落
(3)a 初始氧气浓度高,酵母菌进行有氧呼吸的时间长,酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高,酵母菌有氧呼吸大量繁殖,在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快)
解析 (1)马铃薯琼脂培养基常用于真菌的培养,因此酵母菌的纯培养可使用马铃薯琼脂培养基;培养基中加入链霉素可以抑制细菌的生长,培养基应采用湿热灭菌法灭菌。(2)单菌落一般是由单一个体繁殖形成的纯培养物。平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,经数次划线培养,可以分离得到单菌落。(3)初始氧气浓度高时,酵母菌进行有氧呼吸的时间长,酒精发酵的起始时间较晚(或初始氧气浓度高,酵母菌有氧呼吸大量繁殖,在酒精发酵的初期产生酒精的速率较快),因此初始氧气浓度较高的是a。
19.答案 (1)液体 提供氮源和无机盐 增加扩展青霉菌种的浓度
(2)消毒 第一区域划线结束,接种环灼烧后未冷却就开始在第二区域划线或划线未从第一区域末端开始
(3)不能 2 cm病斑的①号和④号部位的Pat含量均略高于3 cm病斑的①号和④号部位的Pat含量 不建议食用,未腐烂部位仍含有一定量的Pat,食用后可能存在健康风险
解析 (1)题表中显示,培养扩展青霉菌种使用的培养基的成分中没有凝固剂,故根据物理性质划分,该培养基属于液体培养基;NaNO3的主要作用是为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐。接种至苹果之前用该培养基培养扩展青霉,让扩展青霉在液体培养基中大量繁殖,可增大扩展青霉菌种的浓度。(2)消毒是指使用较温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物的方法,这种方法对被消毒的物体基本无害;灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物的方法,对活体生物及组织器官不能采用灭菌的方法,只能进行消毒。故接种扩展青霉前,为了避免苹果上其他杂菌的污染,应对苹果进行消毒处理。划线时需要从上一次划线的末端开始划线,第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。用平板划线法分离扩展青霉时,划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,其他区域的划线上却均无菌落,导致操作失误的原因可能是:第一区域划线结束,接种环灼烧后未经冷却即开始下一次划线,导致菌种被杀死;划线未从第一区域末端开始,使以后划线上均无菌种,从而导致其他区域的划线上均无菌落。(3)在曲线图中,2 cm病斑的①号部位和④号部位的Pat含量均略高于3 cm病斑的①号部位和④号部位的Pat含量,所以不能得出病斑直径越大,测定的相同部位Pat含量越高的结论。由题中曲线图可知,远离病斑没有腐烂的苹果部位⑤仍然含有少量的Pat,Pat是一种具有致突变作用的毒素,所以,苹果去除腐烂部位后不建议食用,食用后可能存在健康风险。
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