综合质量检测（一）
（满分：100分）
一、选择题（本题共19小题，共43分。第1～14小题，每小题2分；第15～19小题，每小题3分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1.（2024·山西阳泉期末）张九龄有诗云：红泥乍擘绿蚁浮，玉碗才倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特点之一是甜腻入口，这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关，甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙述，错误的是（ ）
A.若酿制的米酒呈酸味，可能与长期封闭酿酒容器有关
B.酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似“J”形增长
C.客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖
D.根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例
2.Vero细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，具有无限增殖、贴壁生长等特点。制备病毒灭活疫苗的一般流程：培养Vero细胞→病毒培养→灭活→纯化→配比→包装。下列叙述正确的是（ ）
A.细胞培养环境中需要O2，不需要CO2
B.传代培养时可直接用离心法收集细胞制成细胞悬液
C.加入血清的合成培养基也可以用于培养病毒
D.病毒经灭活处理后无侵染能力，但保持抗原特性
3.我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15 ℃条件下振荡培养3 h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15 ℃条件下培养7 d；③挑取生长菌落，进行划线，15 ℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是（ ）
A.过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B.过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
C.过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种
D.涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
4.（2024·江苏淮安期末）HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿期，正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺癌。抗体—药物偶联物T-DMI由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成，对HER-2有很强的靶向性。下列相关分析错误的是（ ）
A.胎儿期HER-2高表达可能与胚胎发育有关，成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考
B.因为获取的B淋巴细胞可能有多种，所以曲妥珠单抗的制备过程需进行抗体检测
C.DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键
D.利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置
5.下列关于体外受精时采集卵子的方法的叙述，错误的是（ ）
A.可以采用促性腺激素处理的方法使小动物超数排卵
B.机械破碎法的缺点是在刺破卵巢和卵泡的过程中有可能刺伤卵母细胞
C.可以从早期胚胎中采集卵母细胞
D.抽吸法常用于采集较大型动物的卵母细胞
6.我国科学家成功克隆出世界首例体细胞克隆猴。体细胞克隆猴的成功将有效缩短我国基于克隆猴疾病模型的药物的研发周期，助力“健康中国2030”目标实现。进行体细胞核移植时不会涉及的操作是（ ）
A.采用钙离子处理法进行卵母细胞的去核
B.用物理或化学方法激活重组细胞
C.在胚胎移植前对代孕母体进行发情处理
D.选择合适时期的早期胚胎进行移植
7.某人利用图中所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组表达载体。有关叙述错误的是（ ）
A.这三种重组表达载体中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的是甲、丙
B.启动子是DNA片段，是RNA连接酶识别和结合的部位
C.抗生素抗性基因便于重组DNA分子的筛选
D.复制原点可以让重组表达载体拥有自主复制的能力，不会随细胞分裂被稀释而最终消失
8.（2024·扬州高二期中）小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且黏附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述正确的是（ ）
A.使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B.培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C.培养该上皮细胞比培养该淋巴细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象
D.相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
9.青蒿素是治疗疟疾的重要药物，研究人员已弄清青蒿细胞中青蒿素的合成途径（图中实线方框内所示），并发现酵母细胞也能产生合成青蒿素的中间产物FPP（图中虚线方框内所示）。下列说法不正确的是（ ）
A.利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对接种室灭菌
B.将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产青蒿素的转基因酵母菌
C.可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转录出ADS基因的mRNA
D.抑制FPP转化为固醇的途径，可以提高转基因酵母生产青蒿素的产量
10.抗体分为可变区（V区）和恒定区（C区）。V区中与抗原特异性结合的区域称为CDR区。杂交瘤技术制备的鼠源单抗可诱导人体产生抗单抗抗体（ADAs）导致治疗效果降低。单抗的制备经过了四代发展：鼠源性单抗→嵌合单抗（将小鼠V区移植到人类C区上）→人源化单抗（由人类免疫球蛋白G框架组成，只有小鼠来源的互补决定区CDR）→完全人源化单抗。下列相关叙述错误的是（ ）
A.杂交瘤细胞可由小鼠的骨髓瘤细胞和B细胞融合形成
B.上述四代单抗的制备过程均涉及动物细胞培养技术
C.嵌合单抗诱导人体产生ADAs的强度高于人源化单抗
D.人编码抗体的基因转移至小鼠中，其体内只有完全人源化单抗
11.下列有关植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B.生长素浓度低于细胞分裂素时，主要诱导芽原基的形成
C.人工种子的生产过程包括植物组织培养获得胚状体以及人工种皮对胚状体和人工胚乳的包埋等
D.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
12.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞需在含CO2和O2的条件下进行培养
13.PCR技术是在DNA聚合酶作用下，在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是（ ）
A.双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B.引物的延伸方向是从3'端→5'端
C.以2条DNA单链为模板，以4种脱氧核苷酸为原料，经耐高温酶在高温下合成2个新的DNA
D.设置PCR仪的温度进行反应可重复循环多次，DNA呈指数式扩增
14.将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素基因后，重新导入大肠杆菌细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是（ ）
A.转录人生长激素基因需要解旋酶和DNA连接酶
B.导入重组质粒的大肠杆菌一般先用Ca2＋处理
C.大肠杆菌质粒标记基因中A和U的含量相等
D.发酵液中所有的大肠杆菌均能产生人生长激素
15.某地土壤有机物X污染严重，为改善土壤环境，研究人员从土壤中分离出可高效降解有机物X的细菌菌株。以下是研究人员分离细菌菌株的示意图。下列说法错误的是（ ）
A.制备降解X的细菌初筛平板时，调节pH、湿热灭菌后分装到培养皿
B.实验结果显示E是降解X较理想的菌株，可将其进一步划线纯化
C.接种后未长出菌落的培养基不能直接丢弃
D.纯化培养时应用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液均匀涂布于平板上
16.（2024·吉林白山模拟）2023年1月，中国药监局批准单抗联合紫杉醇治疗晚期肺癌的方案。将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞。下图为制备过程，据图分析，下列相关叙述错误的是（ ）
A.①过程需要在小鼠的骨髓中获得细胞甲
B.③和④的选择方法和原理不同
C.过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行
D.抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性
17.2021年4月15日，Cell报道了人—猴嵌合体胚胎的成功。此前已有猴—猪嵌合体的尝试，图为猴—猪嵌合体胚胎培养的过程。下列说法正确的是（ ）
A.细胞融合与激活的目的是使极体与次级卵母细胞融合产生了二倍体胚胎
B.体外受精时先将精子置于获能液中培养，然后可直接在获能液中进行体外受精
C.嵌合体小猪同一个器官中的细胞遗传物质一定相同
D.人—猴嵌合体胚胎难以长期存活可能是由于免疫排斥反应的存在
18.大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。晚期桑葚胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说法错误的是（ ）
A.桑葚胚前的每个细胞都有发育成完整胚胎的潜能
B.囊胚期不同部位的细胞致密化程度不同
C.胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴
D.胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植
19.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（ ）
A.在溶化琼脂时，需要控制火力并不断用玻棒搅拌，以免发生焦煳
B.牛肉膏、蛋白胨容易吸潮，称取时动作要迅速，并及时盖上瓶盖
C.将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入干热灭菌箱内灭菌
D.培养基应先调pH再灭菌后分装到培养皿
二、非选择题（本题共4小题，共57分）
20.（14分）（2024·福建三明期末）尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验，实验中用到的尿素培养基成分如下表所示，具体操作流程如图所示。请分析回答。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。
（1）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是 ，需要消毒的是 （填序号）。
①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶 ③实验操作者的双手 ④操作空间 ⑤接种用具
（2）培养基中加入尿素的目的是 ，从作用分析这种培养基属于 培养基，本实验还同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，目的是 。
（3）除了本实验的接种培养方法外，通常还可以采用 法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 ；此实验不选这个方法的原因是 。
21.（14分）（2024·山东枣庄期中）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图。
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 。在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需的各种营养物质，并定期更换培养液。定期更换培养液的目的是
。
（2）为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的DNA进行PCR，选择SRY基因（该基因是位于Y染色体上的性别决定基因） （填“阳性”或“阴性”）的胚胎进行移植。
（3）代孕个体对移入子宫的重构胚 ，这为胚胎在受体内的 提供了可能。
（4）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意 。
22.（14分）（2024·重庆一中期末）人类乳头瘤病毒（HPV）有多种亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45 L1蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答下列问题：
（1）上述实验步骤①是 。
（2）上述过程中，细胞甲需从小鼠的 中获取。细胞甲、乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体的细胞有 。
（3）图中过程③需用选择培养基进行细胞培养，其结果是只有 细胞才能在培养基上生长。图中过程④依据的原理是 。
23.（15分）苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。AmpR为氨苄青霉素抗性基因，TetR为四环素抗性基因，LacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRⅠ（0.6 kb）、Pvu Ⅰ（0.8 kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题：
（1）基因工程操作的核心步骤是 。图甲中三种质粒适宜作为载体的是质粒 ，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是 。
（2）获取目的基因D时对应选择图乙中的 对其所在的DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序列，根据D基因已知核苷酸序列合成 ，利用PCR扩增目的基因。
（3）将目的基因D和图甲中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用 对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为 kb和 kb两条带。
综合质量检测（一）
1.A 酿制米酒时是利用微生物在无氧条件下的酒精发酵，如果呈酸味，说明酿酒过程中封闭性不好，导致氧气进入产生了乙酸，A错误；酵母菌在密闭酿酒容器内初期环境和食物空间充裕、种内竞争弱，所以种群数量呈近似“J”形增长，B正确；酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃，客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖，C正确；根霉、毛霉与酵母菌它们的代谢类型不同，都可以利用葡萄糖进行不同的发酵，因此构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例，D正确。
2.D 动物细胞培养所需的气体环境为95％空气（细胞代谢所必需的）和5％CO2（维持培养液的pH），A错误；进行传代培养时，对于接触抑制的细胞团须经胰蛋白酶等处理成单个细胞后制成细胞悬液，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，B错误；病毒不具有独立代谢能力，不能在加入血清的合成培养基上培养，必须在活细胞中培养，C错误。
3.B 过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量，利于微生物的繁殖，A正确；该实验是要分离细菌，因此过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至中性或弱碱性，B错误；过程②③使用的接种器具分别为涂布器和接种环，它们均需灼烧并冷却后接种，C正确。
4.C HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿期，可能与胚胎发育有关；正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺癌，所以成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考，A正确；机体生活的环境存在多种抗原，所以获取的B淋巴细胞可能有多种，故曲妥珠单抗的制备过程需进行专一抗体阳性检测，以保证能与HER-2特异性结合，B正确；DMI是药物，不能与HER-2特异性结合，能与HER-2特异性结合的是曲妥珠单抗，C错误；曲妥珠单抗能与HER-2特异性结合，故利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置，D正确。
5.C 采集卵母细胞的对象为性成熟的雌性个体，而不是早期胚胎，C错误。
6.A 采用显微操作法进行卵母细胞的去核，A错误；用物理或化学方法激活重组细胞，使之完成细胞分裂和发育的进程，B正确；在胚胎移植前对代孕母体进行发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，C正确；选择合适时期（桑葚胚或囊胚）的早期胚胎进行移植，D正确。
7.B 在基因表达载体中，启动子位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样的基因才能表达。图中甲和丙均不符合，所以不能在宿主细胞中表达目的基因产物，A正确；启动子是一段有特殊结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，B错误；载体上的标记基因便于重组DNA分子的筛选，常用的标记基因是抗生素抗性基因，C正确；复制原点是DNA聚合酶识别和结合的位点，可以让重组表达载体拥有自主复制的能力，不会随细胞分裂被稀释而最终消失，D正确。
8.C 使用合成培养基培养动物细胞通常添加天然成分——血清，A错误。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，但并不能形成无病毒的环境，B错误。该上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且黏附在培养瓶内壁上，如存在接触抑制，则细胞在瓶壁上只有一层；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中，因此培养该上皮细胞比培养该淋巴细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确。该上皮细胞在培养时黏附在培养瓶内壁上，该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中，则相同次数分瓶培养所获得的淋巴细胞数目多，D错误。
9.A 利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对接种室消毒，A错误；将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产青蒿素的转基因酵母菌，从而实现青蒿素的工业化生产，B正确；可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转
录出ADS基因的mRNA：若出现杂交带，则证明转录成功，C正确；据图可知，抑制FPP转化为固醇的途径，可以促进ADS酶转化为青蒿酸前体进而转变为青蒿素的途径，提高转基因酵母生产青蒿素的产量，D正确。
10.D 小鼠骨髓瘤细胞与某一种B淋巴细胞融合成为杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特异性抗体，A正确；制备单克隆抗体主要是要得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞是免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的，此过程中涉及动物细胞培养技术，B正确；单抗药物是利用单抗与细胞膜表面的受体特异性结合而达到靶向给药的作用，若人体存在抗单抗抗体（ADAs），与单抗结合，会降低单抗药物的疗效，该技术鼠表达出完全人源化单抗，故鼠源、人鼠嵌合、完全人源化单抗诱发产生ADAs的强度依次降低，因此嵌合单抗诱导人体产生ADAs的强度高于人源化单抗，C正确；人编码抗体的基因转移至小鼠中，其体内并非只有完全人源化单抗，D错误。
11.A 愈伤组织是一团没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞，A错误；植物组织培养的培养基中的生长素和细胞分裂素的含量和比例会影响愈伤组织的生长和分化，在脱分化形成愈伤组织的过程中要求生长素和细胞分裂素的比例相当，而在再分化过程中生长素浓度/细胞分裂素浓度的值高有利于根的分化，比值低有利于芽的分化，B正确；植物组织培养过程中要求无菌操作，以防止细菌感染，消毒时既要杀死材料表面的微生物，又要尽量减少消毒剂对细胞的伤害，D正确。
12.D 哺乳动物进行体外受精时很容易获得大量精子，不容易大量获取的是卵细胞，因而通常需要用促性腺激素处理雌鼠，使其一次性产生更多的卵细胞，来培养更多的胚胎，A错误；细胞分化是基因选择性表达的结果，不改变基因的种类和数量，细胞a和细胞b内含有的核基因相同，B错误；细胞培养过程中分散细胞时，用胰蛋白酶等处理组织块，分散得到单细胞悬液，不是破坏细胞的膜蛋白，而是仅仅分解掉细胞间的粘连蛋白，C错误。
13.D 双链DNA在高温下解旋即使得DNA双链打开，破坏的是碱基对之间的氢键，磷酸二酯键没有断裂，A错误；引物的延伸方向是从5'端→3'端，B错误；DNA复制为半保留复制，以2条DNA单链为模板，以4种dNTP为原料，在耐高温DNA聚合酶作用下合成2个新的DNA。子链延伸时的温度是中温，不是高温，C错误；PCR的反应步骤为目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在耐高温的DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环，因而每一次循环后目的基因的量可以增加一倍，即呈指数形式扩增（约为2n，其中n为扩增循环的次数），D正确。
14.B 生长激素基因在转录时需要RNA聚合酶，不需要解旋酶和DNA连接酶，A错误；将目的基因导入原核细胞时，通常用大肠杆菌作为受体细胞，并需要用Ca2＋处理大肠杆菌，B正确；大肠杆菌质粒标记基因中不含尿嘧啶（U），C错误；发酵液中只有导入重组质粒的大肠杆菌才能产生人生长激素，D错误。
15.D 培养基配制过程为：称量→溶解→调pH→融化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→倒平板，因此制备降解X的细菌初筛平板时，先调节pH，再湿热灭菌，最后进行倒平板分装到培养皿中，A正确；据图可知，实验结果显示A～E五种菌株中，E菌株的透明圈面积最大，说明其水解有机物X的能力最强，故E是降解X较理想的菌株，可将其进一步划线纯化，B正确；接种后未长出菌落的培养基，也可能有少量微生物，所以不能直接丢弃，C正确；用稀释涂布平板法进行纯化培养时，应该用微量移液器从盛有菌液的试管中取0.1 mL菌液，再用涂布器涂布，D错误。
16.A 细胞甲是B淋巴细胞，从小鼠的脾脏中获取，A错误；③是用选择培养基选择，④是用抗体进行检测，B正确。
17.B 细胞融合目的是使第二极体与次级卵母细胞融合产生了二倍体胚胎，激活的目的是使二倍体胚胎发育，A错误；嵌合体小猪同一个器官中可能含有不同来源的细胞，所以其细胞中的遗传物质可能不同，C错误；人—猴嵌合体胚胎难以长期存活可能是由于细胞竞争而非免疫排斥，早期胚胎无免疫系统分化，D错误。
18.D 胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段，可将其取出向受体移植，D错误。
19.C 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌，而不是干热灭菌，C错误。
20.（1） ①②⑤ ③④ （2）尿素作为唯一氮源用来分离分解尿素的细菌 选择 判断尿素（选择）培养基是否有筛选作用 （3）平板划线 纯培养物 平板划线法不能用于微生物的计数
解析：（1）消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。培养细菌用的培养基与培养皿、玻棒、试管、锥形瓶、接种用具需要经灭菌处理，实验操作者的双手和操作空间消毒处理即可，故在实验中，所给材料或用具需要灭菌的是①②⑤，需要消毒的是③④。（2）结合题干“某生物兴趣小组完成了‘土壤中分解尿素的细菌分离与计数’的实验”可知，培养基中加入尿素的目的是尿素作为唯一氮源用来分离分解尿素的细菌，从作用分析这种培养基属于选择培养基（允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基），本实验还同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，目的是作为对照，判断尿素（选择）培养基是否有筛选作用。（3）常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，故除了本实验的接种培养方法外，通常还可以采用平板划线法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物；此实验不选这个方法的原因是平板划线法不能用于微生物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数。
21.（1）原代培养 清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养 （2）阴性 （3）基本不发生免疫排斥反应 存活 （4）将内细胞团均等分割
解析：（1）从黑鼠体内获得体细胞后，获得单细胞悬液，之后对其进行的初次培养称为原代培养。动物细胞培养时要定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养。（2）由题意可知，SRY基因是位于Y染色体上的性别决定基因，由该基因表现为雄性，说明应选SRY基因为阴性的胚胎进行移植。（3）代孕个体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎进一步发育。
22.（1）向小鼠体内注射L1蛋白 （2）脾脏 甲乙丙丁 （3）杂交瘤 抗原—抗体特异性结合
解析：（1）在抗L1蛋白单克隆抗体的制备过程中，提取HPV45的L1蛋白（抗原），注射到小鼠体内，其目的是诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞。（2）B淋巴细胞起源于骨髓造血干细胞，在骨髓中发育成熟，能产生特定抗体的B淋巴细胞在脾中分布较多，故在小鼠的脾中可获得产生特定抗体的B淋巴细胞，故细胞甲需从小鼠的脾脏中来获取；其中细胞甲（B淋巴细胞）、乙（杂交瘤细胞）、丙（第一次筛选的杂交瘤细胞）、丁（第二次筛选的能产生特异性抗体的杂交瘤细胞），故细胞甲、乙、丙、丁都能产生抗L1蛋白抗体。（3）选择培养基可以淘汰未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞，只有杂交瘤细胞在该培养基上能生长；过程④是第二次筛选，目的是获得所需的能产生特定抗体的细胞群，即获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，检测方法是抗原—抗体杂交法。
23.（1）基因表达载体的构建 B 有标记基因，复制原点不会被限制酶切割 （2）Pvu Ⅰ 引物 （3）EcoR Ⅰ 1.2 5.5
解析：（1）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。图甲中三种质粒适宜作为载体的为质粒B，因为质粒B含有EcoR Ⅰ、Pvu Ⅰ 两种酶切位点、氨苄青霉素抗性基因和蓝色显色基因，而且相应的限制酶切割后，可以保留氨苄青霉素抗性基因的完整性。与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是有标记基因，复制原点不会被限制酶切割。（3）由于EcoR Ⅰ 在目的基因和质粒上都有酶切位点，为选出正向连接的重组质粒，使用EcoR Ⅰ 对重组质粒完全酶切后，进行电泳分析。质粒B中EcoR Ⅰ 酶切位点与Pvu Ⅰ 酶切位点距离为0.2 kb，若是正向连接载体，重组质粒中2个EcoR Ⅰ 酶切点之间的距离是0.2＋1＝1.2 （kb），重组质粒长度为2.7＋4＝6.7 （kb），故EcoR Ⅰ 酶切后，正向连接载体的情况下，电泳图谱中出现长度为1.2 kb和5.5 kb两条带。
6 / 6(共62张PPT)
综合质量检测（一）
（满分：100分）
一、单项选择题（本题共19小题，共43分。第1～14小题，每小题2分；第15～19小题，每小题3分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. （2024·山西阳泉期末）张九龄有诗云：红泥乍擘绿蚁浮，玉碗才
倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒
的特点之一是甜腻入口，这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关，甜酒
曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙
述，错误的是（ ）
A. 若酿制的米酒呈酸味，可能与长期封闭酿酒容器有关
B. 酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似“J”形增长
C. 客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖
D. 根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 酿制米酒时是利用微生物在无氧条件下的酒精发酵，如
果呈酸味，说明酿酒过程中封闭性不好，导致氧气进入产生了乙
酸，A错误；酵母菌在密闭酿酒容器内初期环境和食物空间充裕、
种内竞争弱，所以种群数量呈近似“J”形增长，B正确；酿酒酵母
的最适生长温度约为28 ℃，客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，
主要目的是为了促进酵母菌增殖，C正确；根霉、毛霉与酵母菌它
们的代谢类型不同，都可以利用葡萄糖进行不同的发酵，因此构成
竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
2. Vero细胞系来源于非洲绿猴肾上皮细胞，具有无限增殖、贴壁生长
等特点。制备病毒灭活疫苗的一般流程：培养Vero细胞→病毒培养
→灭活→纯化→配比→包装。下列叙述正确的是（ ）
A. 细胞培养环境中需要O2，不需要CO2
B. 传代培养时可直接用离心法收集细胞制成细胞悬液
C. 加入血清的合成培养基也可以用于培养病毒
D. 病毒经灭活处理后无侵染能力，但保持抗原特性
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 动物细胞培养所需的气体环境为95％空气（细胞代谢所
必需的）和5％CO2（维持培养液的pH），A错误；进行传代培养
时，对于接触抑制的细胞团须经胰蛋白酶等处理成单个细胞后制成
细胞悬液，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，
B错误；病毒不具有独立代谢能力，不能在加入血清的合成培养基
上培养，必须在活细胞中培养，C错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
3. 我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接
种在人造海水中，15 ℃条件下振荡培养3 h；②梯度稀释后将样品
涂布在TYS培养基中，15 ℃条件下培养7 d；③挑取生长菌落，进
行划线，15 ℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴
定和保藏。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B. 过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
C. 过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种
D. 涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量，利于
微生物的繁殖，A正确；该实验是要分离细菌，因此过程②中的
TYS培养基灭菌前需将pH调至中性或弱碱性，B错误；过程②③使
用的接种器具分别为涂布器和接种环，它们均需灼烧并冷却后接
种，C正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
4. （2024·江苏淮安期末）HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只
出现于胎儿期，正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表
达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺
癌。抗体—药物偶联物T-DMI由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成，
对HER-2有很强的靶向性。下列相关分析错误的是（ ）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
A. 胎儿期HER-2高表达可能与胚胎发育有关，成人HER-2含量高可为
乳腺癌诊断提供参考
B. 因为获取的B淋巴细胞可能有多种，所以曲妥珠单抗的制备过程需
进行抗体检测
C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键
D. 利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊
断肿瘤的位置
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿
期，可能与胚胎发育有关；正常人体组织中其表达量极低，在乳腺
细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转
变为乳腺癌，所以成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考，A
正确；机体生活的环境存在多种抗原，所以获取的B淋巴细胞可能
有多种，故曲妥珠单抗的制备过程需进行专一抗体阳性检测，以保
证能与HER-2特异性结合，B正确；DMI是药物，不能与HER-2特
异性结合，能与HER-2特异性结合的是曲妥珠单抗，C错误；曲妥
珠单抗能与HER-2特异性结合，故利用同位素标记的曲妥珠单抗在
乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
5. 下列关于体外受精时采集卵子的方法的叙述，错误的是（ ）
A. 可以采用促性腺激素处理的方法使小动物超数排卵
B. 机械破碎法的缺点是在刺破卵巢和卵泡的过程中有可能刺伤卵母
细胞
C. 可以从早期胚胎中采集卵母细胞
D. 抽吸法常用于采集较大型动物的卵母细胞
解析： 采集卵母细胞的对象为性成熟的雌性个体，而不是早期
胚胎，C错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
6. 我国科学家成功克隆出世界首例体细胞克隆猴。体细胞克隆猴的成
功将有效缩短我国基于克隆猴疾病模型的药物的研发周期，助力
“健康中国2030”目标实现。进行体细胞核移植时不会涉及的操作
是（ ）
A. 采用钙离子处理法进行卵母细胞的去核
B. 用物理或化学方法激活重组细胞
C. 在胚胎移植前对代孕母体进行发情处理
D. 选择合适时期的早期胚胎进行移植
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 采用显微操作法进行卵母细胞的去核，A错误；用物理
或化学方法激活重组细胞，使之完成细胞分裂和发育的进程，B正
确；在胚胎移植前对代孕母体进行发情处理，保证胚胎移植入相同
的生理环境，C正确；选择合适时期（桑葚胚或囊胚）的早期胚胎
进行移植，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
7. 某人利用图中所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因
的重组表达载体。有关叙述错误的是（ ）
A. 这三种重组表达载体中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的
是甲、丙
B. 启动子是DNA片段，是RNA连接酶识别和结合的部位
C. 抗生素抗性基因便于重组DNA分子的筛选
D. 复制原点可以让重组表达载体拥有自主复制的能力，不会随细胞
分裂被稀释而最终消失
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 在基因表达载体中，启动子位于目的基因的首端，终止
子应位于目的基因的尾端，这样的基因才能表达。图中甲和丙均不
符合，所以不能在宿主细胞中表达目的基因产物，A正确；启动子
是一段有特殊结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的部
位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，B错误；载体上的标记基
因便于重组DNA分子的筛选，常用的标记基因是抗生素抗性基
因，C正确；复制原点是DNA聚合酶识别和结合的位点，可以让重
组表达载体拥有自主复制的能力，不会随细胞分裂被稀释而最终消
失，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
8. （2024·扬州高二期中）小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外
培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规
则多角形，且黏附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培
养液中。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B. 培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C. 培养该上皮细胞比培养该淋巴细胞更易观察判断细胞是否具有接
触抑制现象
D. 相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 使用合成培养基培养动物细胞通常添加天然成分——血
清，A错误。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中
加入适量的抗生素，但并不能形成无病毒的环境，B错误。该上皮
细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且黏附在培养瓶内壁上，
如存在接触抑制，则细胞在瓶壁上只有一层；而该淋巴细胞则常常
悬浮在培养液中，因此培养该上皮细胞比培养该淋巴细胞更易观察
判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确。该上皮细胞在培养时黏
附在培养瓶内壁上，该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中，则相同次
数分瓶培养所获得的淋巴细胞数目多，D错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
9. 青蒿素是治疗疟疾的重要药物，研究人员已弄清青蒿细胞中青蒿素
的合成途径（图中实线方框内所示），并发现酵母细胞也能产生合
成青蒿素的中间产物FPP（图中虚线方框内所示）。下列说法不正
确的是（ ）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
A. 利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对接种室灭菌
B. 将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产青蒿素的转基因酵母菌
C. 可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转录出ADS基因的
mRNA
D. 抑制FPP转化为固醇的途径，可以提高转基因酵母生产青蒿素的产
量
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 利用植物组织培养技术生产青蒿素时，常用紫外线对
接种室消毒，A错误；将ADS基因导入酵母细胞，可以培育生产
青蒿素的转基因酵母菌，从而实现青蒿素的工业化生产，B正
确；可利用PCR和电泳等技术检测转基因酵母是否转录出ADS
基因的mRNA：若出现杂交带，则证明转录成功，C正确；据图
可知，抑制FPP转化为固醇的途径，可以促进ADS酶转化为青
蒿酸前体进而转变为青蒿素的途径，提高转基因酵母生产青蒿
素的产量，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
10. 抗体分为可变区（V区）和恒定区（C区）。V区中与抗原特异性
结合的区域称为CDR区。杂交瘤技术制备的鼠源单抗可诱导人体
产生抗单抗抗体（ADAs）导致治疗效果降低。单抗的制备经过了
四代发展：鼠源性单抗→嵌合单抗（将小鼠V区移植到人类C区上）→人源化单抗（由人类免疫球蛋白G框架组成，只有小鼠来源的互补决定区CDR）→完全人源化单抗。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 杂交瘤细胞可由小鼠的骨髓瘤细胞和B细胞融合形成
B. 上述四代单抗的制备过程均涉及动物细胞培养技术
C. 嵌合单抗诱导人体产生ADAs的强度高于人源化单抗
D. 人编码抗体的基因转移至小鼠中，其体内只有完全人源化单抗
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 小鼠骨髓瘤细胞与某一种B淋巴细胞融合成为杂交瘤细
胞，这种杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特异性抗体，A正
确；制备单克隆抗体主要是要得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞是免
疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的，此过程中涉及动物细
胞培养技术，B正确；单抗药物是利用单抗与细胞膜表面的受体
特异性结合而达到靶向给药的作用，若人体存在抗单抗抗体
（ADAs），与单抗结合，会降低单抗药物的疗效，该技术鼠表达
出完全人源化单抗，故鼠源、人鼠嵌合、完全人源化单抗诱发产
生ADAs的强度依次降低，因此嵌合单抗诱导人体产生ADAs的强
度高于人源化单抗，C正确；人编码抗体的基因转移至小鼠中，其体内并非只有完全人源化单抗，D错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
11. 下列有关植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B. 生长素浓度低于细胞分裂素时，主要诱导芽原基的形成
C. 人工种子的生产过程包括植物组织培养获得胚状体以及人工种皮
对胚状体和人工胚乳的包埋等
D. 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的
伤害
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 愈伤组织是一团没有特定形态、结构和功能的薄壁细
胞，A错误；植物组织培养的培养基中的生长素和细胞分裂素的
含量和比例会影响愈伤组织的生长和分化，在脱分化形成愈伤组
织的过程中要求生长素和细胞分裂素的比例相当，而在再分化过
程中生长素浓度/细胞分裂素浓度的值高有利于根的分化，比值低
有利于芽的分化，B正确；植物组织培养过程中要求无菌操作，
以防止细菌感染，消毒时既要杀死材料表面的微生物，又要尽量
减少消毒剂对细胞的伤害，D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
12. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图
所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B. 细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同
C. 用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞需在含CO2和O2的条件下进行培养
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 哺乳动物进行体外受精时很容易获得大量精子，不容
易大量获取的是卵细胞，因而通常需要用促性腺激素处理雌鼠，
使其一次性产生更多的卵细胞，来培养更多的胚胎，A错误；细
胞分化是基因选择性表达的结果，不改变基因的种类和数量，细
胞a和细胞b内含有的核基因相同，B错误；细胞培养过程中分散细
胞时，用胰蛋白酶等处理组织块，分散得到单细胞悬液，不是破
坏细胞的膜蛋白，而是仅仅分解掉细胞间的粘连蛋白，C错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
13. PCR技术是在DNA聚合酶作用下，在体外进行DNA大量扩增的一
种分子生物技术。下列叙述正确的是（ ）
A. 双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B. 引物的延伸方向是从3'端→5'端
C. 以2条DNA单链为模板，以4种脱氧核苷酸为原料，经耐高温酶在
高温下合成2个新的DNA
D. 设置PCR仪的温度进行反应可重复循环多次，DNA呈指数式扩增
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 双链DNA在高温下解旋即使得DNA双链打开，破坏的
是碱基对之间的氢键，磷酸二酯键没有断裂，A错误；引物的延
伸方向是从5'端→3'端，B错误；DNA复制为半保留复制，以2条
DNA单链为模板，以4种dNTP为原料，在耐高温DNA聚合酶作用
下合成2个新的DNA。子链延伸时的温度是中温，不是高温，C错
误；PCR的反应步骤为目的基因DNA受热变性后解链为单链，引
物与单链相应互补序列结合，然后在耐高温的DNA聚合酶作用下
进行延伸，如此重复循环，因而每一次循环后目的基因的量可以
增加一倍，即呈指数形式扩增（约为2n，其中n为扩增循环的次
数），D正确。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
14. 将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素基因后，重新导入大肠杆菌
细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素。下列叙述正
确的是（ ）
A. 转录人生长激素基因需要解旋酶和DNA连接酶
B. 导入重组质粒的大肠杆菌一般先用Ca2＋处理
C. 大肠杆菌质粒标记基因中A和U的含量相等
D. 发酵液中所有的大肠杆菌均能产生人生长激素
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 生长激素基因在转录时需要RNA聚合酶，不需要解旋
酶和DNA连接酶，A错误；将目的基因导入原核细胞时，通常用
大肠杆菌作为受体细胞，并需要用Ca2＋处理大肠杆菌，B正确；
大肠杆菌质粒标记基因中不含尿嘧啶（U），C错误；发酵液中只
有导入重组质粒的大肠杆菌才能产生人生长激素，D错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
15. 某地土壤有机物X污染严重，为改善土壤环境，研究人员从土壤
中分离出可高效降解有机物X的细菌菌株。以下是研究人员分离
细菌菌株的示意图。下列说法错误的是（ ）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
A. 制备降解X的细菌初筛平板时，调节pH、湿热灭菌后分装到培养
皿
B. 实验结果显示E是降解X较理想的菌株，可将其进一步划线纯化
C. 接种后未长出菌落的培养基不能直接丢弃
D. 纯化培养时应用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液均匀涂布于
平板上
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 培养基配制过程为：称量→溶解→调pH→融化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→倒平板，因此制备降解X的细菌初筛平板时，先调节pH，再湿热灭菌，最后进行倒平板分装到培养皿中，A正确；据图可知，实验结果显示A～E五种菌株中，E菌株的透明圈面积最大，说明其水解有机物X的能力最强，故E是降解X较理想的菌株，可将其进一步划线纯化，B正确；接种后未长出菌落的培养基，也可能有少量微生物，所以不能直接丢弃，C正确；用稀释涂布平板法进行纯化培养时，应该用微量移液器从盛有菌液的试管中取0.1 mL菌液，再用涂布器涂布，D错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
16. （2024·吉林白山模拟）2023年1月，中国药监局批准单抗联合紫
杉醇治疗晚期肺癌的方案。将特定的药物与单克隆抗体结合在一
起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞。下图为制备过程，据图
分析，下列相关叙述错误的是（ ）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 细胞甲是B淋巴细胞，从小鼠的脾脏中获取，A错误；③是用选择培养基选择，④是用抗体进行检测，B正确。
A. ①过程需要在小鼠的骨髓中获得细胞甲
B. ③和④的选择方法和原理不同
C. 过程⑤既可以在小鼠腹腔内进行，也可以在体外培养液中进行
D. 抗体的靶向作用使⑥过程具有高度的特异性
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
17. 2021年4月15日，Cell报道了人—猴嵌合体胚胎的成功。此前已有
猴—猪嵌合体的尝试，图为猴—猪嵌合体胚胎培养的过程。下列
说法正确的是（ ）
A. 细胞融合与激活的目的是使极
体与次级卵母细胞融合产生了
二倍体胚胎
B. 体外受精时先将精子置于获能液中培养，然后可直接在获能液中
进行体外受精
C. 嵌合体小猪同一个器官中的细胞遗传物质一定相同
D. 人—猴嵌合体胚胎难以长期存活可能是由于免疫排斥反应的存在
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析：细胞融合目的是使第二极体与次级卵母细胞融合产生了二倍体胚胎，激活的目的是使二倍体胚胎发育，A错误；嵌合体小猪同一个器官中可能含有不同来源的细胞，所以其细胞中的遗传物质可能不同，C错误；人—猴嵌合体胚胎难以长期存活可能是由于细胞竞争而非免疫排斥，早期胚胎无免疫系统分化，D错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
18. 大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎
的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随发育进程逐
渐减弱甚至消失。晚期桑葚胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发
育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说
法错误的是（ ）
A. 桑葚胚前的每个细胞都有发育成完整胚胎的潜能
B. 囊胚期不同部位的细胞致密化程度不同
C. 胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴
D. 胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段，可将其取出向受体
移植，D错误。
19. 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（ ）
A. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断用玻棒搅拌，以免发生焦煳
B. 牛肉膏、蛋白胨容易吸潮，称取时动作要迅速，并及时盖上瓶盖
C. 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用
皮筋勒紧，放入干热灭菌箱内灭菌
D. 培养基应先调pH再灭菌后分装到培养皿
解析： 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上
牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压蒸汽灭菌锅内灭菌，而不是干
热灭菌，C错误。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
二、非选择题（本题共4小题，共57分）
20. （14分）（2024·福建三明期末）尿素是一种重要的农业肥料，但
若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的
微生物种类和数量繁多，某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿
素的细菌分离与计数”的实验，实验中用到的尿素培养基成分如
下表所示，具体操作流程如图所示。请分析回答。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。
（1）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是 ，需要消
毒的是 （填序号）。
①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶
③实验操作者的双手 ④操作空间 ⑤接种用具
①②⑤
③④
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。培养细菌用的培养基与培养皿、玻棒、试管、锥形瓶、接种用具需要经灭菌处理，实验操作者的双手和操作空间消毒处理即可，故在实验中，所给材料或用具需要灭菌的是①②⑤，需要消毒的是③④。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（2）培养基中加入尿素的目的是
，从作用分析这种培养基属于 培养基，
本实验还同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，目
的是 。
尿素作为唯一氮源用来分离分
解尿素的细菌
选择
判断尿素（选择）培养基是否有筛选作用
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 结合题干“某生物兴趣小组完成了‘土壤中分
解尿素的细菌分离与计数’的实验”可知，培养基中加入尿
素的目的是尿素作为唯一氮源用来分离分解尿素的细菌，从
作用分析这种培养基属于选择培养基（允许特定微生物种类
生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基），本
实验还同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，目的
是作为对照，判断尿素（选择）培养基是否有筛选作用。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（3）除了本实验的接种培养方法外，通常还可以采用
法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的
单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 ；此实验
不选这个方法的原因是 。
平板划线
纯培养物
平板划线法不能用于微生物的计数
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和
平板划线法，故除了本实验的接种培养方法外，通常还可以
采用平板划线法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经
培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养
物；此实验不选这个方法的原因是平板划线法不能用于微生
物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
21. （14分）（2024·山东枣庄期中）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分
化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑
鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如图。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为
。在培养iPS细胞的过程中，培养基中应含有细胞所需
的各种营养物质，并定期更换培养液。定期更换培养液的目
的是
。
原代
培养
清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危
害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析： 从黑鼠体内获得体细胞后，获得单细胞悬液，之后对其进行的初次培养称为原代培养。动物细胞培养时要定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（2）为提高后代雌性概率，可对可用胚胎的滋养层细胞的
DNA进行PCR，选择SRY基因（该基因是位于Y染色体上
的性别决定基因） （填“阳性”或“阴性”）的胚
胎进行移植。
解析：由题意可知，SRY基因是位于Y染色体上的性别决定基因，由该基因表现为雄性，说明应选SRY基因为阴性的胚胎进行移植。
阴性
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（3）代孕个体对移入子宫的重构胚 ，
这为胚胎在受体内的 提供了可能。
解析：代孕个体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
（4）胚胎分割可以增加胚胎数量，在对囊胚阶段的胚胎进行分割
时要注意 。
解析：在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎进一步发育。
基本不发生免疫排斥反应
存活
将内细胞团均等分割
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
22. （14分）（2024·重庆一中期末）人类乳头瘤病毒（HPV）有多种
亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是
组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45 L1
蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答
下列问题：
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（1）上述实验步骤①是 。
解析：在抗L1蛋白单克隆抗体的制备过程中，提取
HPV45的L1蛋白（抗原），注射到小鼠体内，其目的是诱导
小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞。
向小鼠体内注射L1蛋白
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（2）上述过程中，细胞甲需从小鼠的 中获取。细胞甲、
乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体的细胞有 。
解析：B淋巴细胞起源于骨髓造血干细胞，在骨髓中
发育成熟，能产生特定抗体的B淋巴细胞在脾中分布较多，
故在小鼠的脾中可获得产生特定抗体的B淋巴细胞，故细胞
甲需从小鼠的脾脏中来获取；其中细胞甲（B淋巴细胞）、
乙（杂交瘤细胞）、丙（第一次筛选的杂交瘤细胞）、丁
（第二次筛选的能产生特异性抗体的杂交瘤细胞），故细胞
甲、乙、丙、丁都能产生抗L1蛋白抗体。
脾脏
甲乙丙丁
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（3）图中过程③需用选择培养基进行细胞培养，其结果是只
有 细胞才能在培养基上生长。图中过程④依据的原
理是 。
解析：选择培养基可以淘汰未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞，只有杂交瘤细胞在该培养基上能生长；过程④是第二次筛选，目的是获得所需的能产生特定抗体的细胞群，即获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，检测方法是抗原—抗体杂交法。
杂交瘤
抗原—抗体特异性结合
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
23. （15分）苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入
该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙
为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。AmpR
为氨苄青霉素抗性基因，TetR为四环素抗性基因，LacZ为蓝色显
色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使
菌落呈蓝色，EcoRⅠ（0.6 kb）、Pvu Ⅰ（0.8 kb）为限制酶及其切
割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题：
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（1）基因工程操作的核心步骤是 。图甲中
三种质粒适宜作为载体的是质粒 ，与另外两种质粒相
比，其作为载体的优点是
。
基因表达载体的构建
B
有标记基因，复制原点不会被限
制酶切割
解析：基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构
建。图甲中三种质粒适宜作为载体的为质粒B，因为质粒B
含有EcoR Ⅰ、Pvu Ⅰ 两种酶切位点、氨苄青霉素抗性基因和
蓝色显色基因，而且相应的限制酶切割后，可以保留氨苄青
霉素抗性基因的完整性。与另外两种质粒相比，其作为载体
的优点是有标记基因，复制原点不会被限制酶切割。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（2）获取目的基因D时对应选择图乙中的 对其所在的
DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序
列，根据D基因已知核苷酸序列合成 ，利用PCR扩
增目的基因。
Pvu Ⅰ
引物
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
（3）将目的基因D和图甲中相应质粒连接后，得到图丙中三种方
式。为选出正向连接的重组质粒，使用 对质粒完全
酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出
现长度为 kb和 kb两条带。
EcoR Ⅰ
1.2
5.5
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
解析：由于EcoR Ⅰ 在目的基因和质粒上都有酶切位点，为选出正向连接的重组质粒，使用EcoR Ⅰ 对重组质粒完全酶切后，进行电泳分析。质粒B中EcoR Ⅰ 酶切位点与Pvu Ⅰ 酶切位点距离为0.2 kb，若是正向连接载体，重组质粒中2个EcoR Ⅰ 酶切点之间的距离是0.2＋1＝1.2 （kb），重组质粒长度为2.7＋4＝6.7 （kb），故EcoR Ⅰ 酶切后，正向连接载体的情况下，电泳图谱中出现长度为1.2 kb和5.5 kb两条带。
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
感 谢 观 看!
