(共100张PPT)
第2课时 动物细胞融合技术与单克隆
抗体
任务一 动物细胞融合技术
任务二 单克隆抗体的制备
任务三 单克隆抗体的应用
一、动物细胞融合技术
1.概念:使____________动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理:________________________。
3.诱导动物细胞融合的常用方法: 融合法、电融合法、_________
_______等。
4.结果:形成__________，且具有原来____________细胞的遗传信息。
两个或多个
细胞膜具有一定的流动性
灭活病毒诱导法
杂交细胞
两个或多个
5.意义:突破了__________的局限,使远缘杂交成为可能。
有性杂交
6.应用
(1)成为研究__________、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重
要手段。
(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造_________
____开辟了新途径。
细胞遗传
单克隆抗体
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射__________,使动物产生抗体,然后从动
物______中分离所需抗体。
(2)缺点:产量低、________、________差。
某种抗原
血清
纯度低
特异性
2.单克隆抗体制备思路：把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨
髓瘤细胞融合，所得到的融合细胞就可能大量增殖，产生足够数量
的特定抗体。
3.单克隆抗体优点：能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生
特异性结合，并且可以__________。
大量制备
4.单克隆抗体的应用
(1)作为__________，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的
作用。
(2)用于__________和__________。
诊断试剂
运载药物
治疗疾病
任务一 动物细胞融合技术
1.【情境】 灭活的病毒可诱导动物细胞融合，其发挥作用的示意图
如下：
(1)动物细胞融合体现了细胞膜在结构上具有________的特点。
流动性
(2)与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合前不需要的步骤是_______
____________，两者都可以使用的诱导方式是___________________
___，灭活的病毒只适合诱导动物细胞融合。
酶解法去除细胞壁
电融合法、融合法
(3)病毒灭活是指用物理或化学手段使之失去感染能力，但并不破坏
它们的______结构。
抗原
(4)灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的________和一些
酶能够与细胞膜上的________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜
上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
糖蛋白
糖蛋白
(5)动物细胞融合的过程中，首先发生的是________(填“细胞膜”或
“细胞质”)融合。
细胞膜
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞膜的流动性和植物细 胞的全能性 细胞膜的流动性
步骤 去壁 诱导原生质体融合 杂种细胞 杂种植株 分散成单个细胞 诱导细
胞融合 杂交细胞
项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
诱导方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、灭
活病毒
结果 形成杂种植株 形成杂交细胞
相同点 融合原理相同；都可以用物理、化学方法诱导融合
（续表）
例1 [2024·重庆期末] 关于植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术
的对比，正确的是( )
A.都体现了细胞的全能性 B.都需要用液体培养基
C.都需要在无菌条件下进行 D.都需要使用 培养箱
√
[解析] 动物细胞融合技术获得的是动物细胞，并不是完整的动物个
体，没有体现细胞全能性，A错误;动物细胞的培养需要用液体培养
基，植物体细胞杂交技术用的是固体培养基，B错误;植物体细胞杂
交技术和动物细胞融合技术都需要在无菌条件下进行，C正确;植物
细胞的培养不需要使用 培养箱，D错误。
例2 下列关于动物细胞融合技术及其意义的叙述，错误的是( )
A.动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的
技术
B.可以打破生殖隔离，实现远缘杂交、获得新物种
C.杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的
D.灭活病毒可以诱导细胞融合与病毒表面的糖蛋白有关
√
[解析] 动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细
胞的技术，A正确；动物细胞融合技术不能获得新物种，B错误；杂
交瘤细胞就是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的，所以杂交瘤技术
是在细胞融合技术基础上发展起来的，C正确；灭活的病毒诱导细胞
融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶与细胞膜上糖蛋白发
生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新
排布，细胞膜打开，细胞发生融合，D正确。
任务二 单克隆抗体的制备
【资料】 阅读教材第48、49页图“米尔斯坦和科勒制备单克隆抗体
过程的示意图”。
(1)补充完善单克隆抗体的制备流程图：
. .
产生特定抗体
特定
的选择培养基
杂交瘤细胞
克隆化培养
腹腔
细胞培养液
腹水
(2)该过程应用的动物细胞工程技术有___________________________
__；其原理是__________________________________。
动物细胞融合、动物细胞培养
细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖
(3)若只考虑细胞两两融合，诱导融合后会获得___种类型的细胞。经
特定的选择培养基筛选后，__________________和融合的_________
___的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
3
未融合的亲本细胞
具有同种核
(4)体外培养和注射到小鼠体内进行培养的细胞具有的特点是_______
________________________。
(5)图示过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是_______
__________________________________________________________。
既能大量增殖又能产生特定抗体
图示过程生产出的单克隆抗体对人体来说是抗原，存在着免疫排斥反应
单克隆抗体制备过程中的筛选过程
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选 原因 诱导融合后会得到多种杂 交细胞，另外还有未融合 的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原
的刺激，所以经选择培养获得的杂
交瘤细胞中有能产生其他抗体的细
胞
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选 方法 用特定的选择培养基筛 选：未融合的细胞和融合 的具有同种核的细胞都会 死亡，只有融合的杂交瘤 细胞才能生长 用96孔板培养，在每个孔中只有一
个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化
培养和抗体检测，经多次筛选得到
能产生特异性抗体的细胞群
筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
（续表）
例3 下列关于单克隆抗体制备的说法，正确的是 ( )
A.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
B.经特定抗原免疫过的B淋巴细胞可在体外培养时分泌单克隆抗体
C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，发生融合的细胞均为杂交瘤
细胞
D.筛选出杂交瘤细胞后，需利用特定抗原再次筛选分泌单克隆抗体
的细胞
√
[解析] 向小鼠体内注射特定的抗原，小鼠会产生免疫反应，可以从
小鼠血清中获得抗体，但此时的抗体不是单克隆抗体，A错误；经特
定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力，无法通过体外培养获
得单克隆抗体，B错误；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，产生
的融合细胞可能是B淋巴细胞 淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细
胞、B淋巴细胞—骨髓瘤细胞，C错误；单克隆抗体制备过程需要2
次筛选：第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能够产生特定抗
体的杂交瘤细胞，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞还
需进行抗体检测，筛选出呈阳性的杂交瘤细胞才能进行体内或体外
培养，D正确。
例4 [2024·天津滨海新区期
中] 甘草酸是中药甘草中的
主要活性成分。为了快速检
A.细胞甲都是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞
B.过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
C.过程④是利用选择培养基筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D.若小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40，则杂交瘤细胞的
染色体数也为40
测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，
其基本操作过程如图。下列相关叙述正确的是( )
√
[解析] 细胞甲是已免疫
的B淋巴细胞，但种类很
多，不一定能产生抗甘
草酸抗体，A错误；细胞
丁为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生特定抗体，过程⑤
无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，B正确;过程③用选择
培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，过程④用克隆化培养和抗体检测得
到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C错误；小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细
胞的染色体数均为40，融合后形成的杂交瘤细胞染色体数目为80，由于
杂交瘤细胞能发生分裂，故杂交瘤细胞的染色体数也可能为160
(有丝分裂后期)，D错误。
任务三 单克隆抗体的应用
【资料】 阅读教材第50页思考·讨论“单克隆抗体的应用”，进行分析。
(1)资料1说明，单克隆抗体诊断试剂盒在应用上具有______________
__________的优势。
诊断时间提前、准确率高
(2)分析资料2：
①抗体—药物偶联物(ADC)通常由______、______和______
(如细胞毒素)三部分组成。
②杀伤肿瘤细胞的过程中，识别肿瘤细胞的是抗体—药物偶联物的
______部分，发挥杀伤作用的是______。
③抗体—药物偶联物以______的方式进入肿瘤细胞，最终引起细胞
凋亡。
抗体
接头
药物
抗体
药物
胞吞
④使用单克隆抗体制备抗体—药物偶联物杀伤肿瘤细胞的优势是
______________________________________。
选择性杀伤肿瘤细胞，避免伤害正常细胞
(3)单克隆抗体诊断试剂盒与单克隆抗体—药物偶联物都利用了抗体
的______性。
特异
例5 [2024·广东六校联考]
治疗最凶险乳腺癌“ ”的抗体—药物
偶联物 被纳入2023年医保目
录名单。 由曲妥珠单抗、细胞毒性药物偶联形成。
作用机制如下图，下列有关叙述错误的是( )
A.曲妥珠单抗的作用是将 准确带至乳腺癌细胞
B. 被乳腺癌细胞吞噬后释放 抑制微管聚合进而导致细胞凋亡
C.曲妥珠单抗制备中可选择 作为抗原刺激小鼠产生免疫反应
D.利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗可定位诊断
√
[解析] 由曲妥珠单抗、
细胞毒性药物 偶联形成，
其中曲妥珠单抗可以与细胞膜
表面的 特异性结合，将
准确带至乳腺癌细胞，A正确；据图分析， 被乳腺癌细胞
吞噬后释放 抑制微管聚合，进而导致细胞凋亡，B正确； 是细
胞毒性药物，不能与 特异性结合，所以不选择它作为制备单
抗的抗原，C错误；曲妥珠单抗可以与 特异性结合，因此可以利
用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗定位诊断 ，D正确。
1.正误辨析
(1)灭活会破坏病毒或细菌的抗原结构，使其失去感染能力。( )
×
[解析] “灭活”是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力，
但不破坏其抗原结构。
(2)制备单克隆抗体时，先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠
脾脏中分离出B淋巴细胞。( )
×
[解析] 若用抗原蛋白饲喂小鼠，抗原蛋白会被小鼠消化道中的蛋白
酶水解而失去活性，因此应向小鼠注射特定的抗原蛋白，再从小鼠
脾脏中分离出相应的B淋巴细胞。
(3)单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选
择透过性。 ( )
×
[解析] 单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细
胞培养和动物细胞融合，原理依次是细胞增殖、细胞膜具有一定的
流动性。
(4)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合，培养液中融合后的细
胞即为杂交瘤细胞。( )
×
[解析] 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合，培养液中融合后
的细胞有多种，只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞才为杂
交瘤细胞。
(5)为提高单克隆抗体制备成功率，往往需要多次给实验动物注射多
种抗原。( )
×
[解析] 为提高单克隆抗体制备成功率，往往需要多次给实验动物注
射同一种抗原。
(6)需对抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行体内或体外培养。( )
√
(7)抗体—药物偶联物中，单克隆抗体作为抗癌药物能够定向杀死癌
细胞。( )
×
[解析] 抗体—药物偶联物中，单克隆抗体需携带抗癌药物才能定向
杀死癌细胞。
2.将人细胞与小鼠细胞融合,培养出的杂交细胞可能会随机丢失来自
人细胞的染色体。在丢失人的1号染色体的融合细胞中，不能合成人
的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中不合理的是( )
A.与人和小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变
B.研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术
C.融合细胞经过培养，能实现细胞的全能性
D.尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上
√
[解析] 融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，即发生了遗传物
质的改变，A正确;适当的培养基用来选择融合细胞，动物细胞融合
时常用 、灭活病毒和电激来诱导融合，B正确;该过程没有将杂交
细胞培养成个体，不能体现细胞的全能性，C错误;在丢失人的1号染
色体的融合细胞中，不能合成人的尿苷单磷酸激酶，说明尿苷单磷
酸激酶的基因很可能在1号染色体上,D正确。
3.[2022·山东卷]如图所示，将由2种不同
的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体
外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，
简称双抗。下列说法错误的是( )
A.双抗可同时与2种抗原结合
B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
√
[解析] 根据抗原和抗体发生特异性结合
的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，
利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，
从而使药物发挥相应的作用，A、B正确；筛选双抗时需使用制备单克
隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原—抗体检测，从而实现对双抗的
筛选，C正确；同时注射2种抗原可刺激不同的B细胞分化形成不同的浆
细胞，每种浆细胞只能产生一种抗体，D错误。
4.[2024·山东师大附中月考]将
特定药物与单克隆抗体相结
合制成的“生物导弹”，能够用
于杀死人类某些癌细胞，其
A.经过程①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体
B.过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同
C.过程②需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D.抗体的靶向作用使过程③具有高度特异性
过程如图所示。下列有关叙述错误的是( )
√
[解析] 经过程①形成的杂
交瘤细胞不一定都能产生特
定抗体，需要经过抗体检测
筛选出呈阳性的杂交瘤细胞，
A错误；过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同，都是
细胞膜具有一定的流动性，B正确；过程②需要采用抗体检测筛选出呈
阳性的杂交瘤细胞即能产生特定抗体的杂交瘤细胞，然后进行培养
(包括体内培养和体外培养)，C正确；抗体的靶向作用(特异性地和抗原
结合)使过程③具有高度特异性，D正确。
1.下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是( )
A.动物细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞
B.动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性
C.融合后得到的杂交细胞可能表现出两个亲本细胞的特点
D.融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核
√
[解析] 动物细胞融合前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单
个细胞，A正确；动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，B正确；融
合后得到的杂交细胞获得了两个亲本细胞的遗传物质，可能表现出两
个亲本细胞的特点，C正确；融合后得到的杂交细胞是单核细胞，D
错误。
2.有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法。将细胞悬液进行连
续倍数稀释，最终调整密度为5个/mL；将稀释好的细胞悬液接种于96
孔板，每孔加0.1mL；24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔，补加
培养液后继续培养获得细胞克隆。相关说法错误的是( )
A．培养液中需含有蔗糖、血清等物质
B．96 孔板需置于CO2培养箱中培养
C．贴附型细胞获得悬液需用胰蛋白酶处理
D．该方法可用于筛选产特定抗体的杂交瘤细胞
√
[解析] 动物细胞培养添加的有机碳源是葡萄糖，A错误；动物细胞培
养需要置于CO2培养箱中培养，以维持培养液pH的稳定，B正确；贴
附型细胞获得悬液需用胰蛋白酶处理以获得单个细胞，C正确；有限
稀释和克隆化培养可筛选出单克隆抗体，D正确。
3.草莓皱缩病毒（SCV）感染草莓时，会使其叶片扭曲皱缩，植株矮
化，导致减产。为了能快速有效检测出该病毒，研究人员利用SCV的
病毒粒子免疫健康小鼠，制备相应的单克隆抗体。下列有关叙述错误
的是( )
A．从免疫小鼠体内分离获得的B淋巴细胞可无限增殖
B．在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中，需要进行两次筛选
C．用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原抗体特异性结合
的原理
D．单克隆抗体可与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
√
[解析] 从免疫小鼠体内获得的B淋巴细胞不能无限增殖，A错误；在
获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中，需要进行两次筛选，第
一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细
胞，B正确；用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗
体杂交的原理，C正确；单克隆抗体可与特定抗原发生特异性结合，
并且可以大量制备，D正确。
4.在进行课题研究时，甲、乙、丙、丁四位同学所采用的方法中错误
的是( )
A.甲用酶解法去除植物细胞的细胞壁
B.乙用青蛙的血清来配制小鼠细胞的培养液
C.丙用化学法诱导原生质体的融合
D.丁用体外培养法制备单克隆抗体
√
[解析] 可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确；由于青蛙和小鼠
的代谢具有较大差异，所以应用小鼠的血清来配制小鼠细胞的培养液，
B错误；诱导原生质体的融合可以用化学法，C正确；制备单克隆抗
体既可在生物体内，也可在生物体外，D正确。
5.单克隆抗体是指通过克隆形成细胞群，产生出化学性质单一、特异
性强的抗体。下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述，
正确的是( )
A.每个脾B淋巴细胞可
产生多种抗体
B.灭活的病毒促融合的
效率一般不能达到100%
C.细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上没有差异
D.克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
√
[解析] 抗体是由浆细胞产生，浆细胞是由B细胞或记忆细胞经抗原刺激产
生的，只能产生针对该抗原的抗体，一种浆细胞只能产生一种抗体，A错
误；灭活病毒诱导细胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与
细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和
脂质分子重新排布，细胞发生融合，因此灭活的病毒促融合的效率一般不
能达到100%，B正确；细胞筛选时获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛
选，细胞融合时所用的培养液需要再加入诱导剂，两者的成分上有差异，
C错误；杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，无接触抑制现象，因此该细胞
克隆化培养过程中不会出现接触抑制，D错误。
6.科研人员制备能产生双抗体的双杂交瘤细胞的实验过程是先制备两种杂交
瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体与抗原的结合情况如图甲、乙所示。
然后再使二者融合，经过筛选最终得到可以产生双抗体(同时抗α、β两种抗
原，如图丙)的双杂交瘤细胞。抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻
链均分为恒定区和可变区，
两条重链依赖于A1或B1进
行组装(A1与B1相同)，重
链与轻链的组装依赖于恒
定区A2、a或B2、b(a与b相同)。下列叙述错误的是( )
A.三种杂交瘤细胞的制备均可使用灭活病毒作为诱导剂
B.三种杂交瘤细胞的筛选均需要进行克隆化培养和抗体检测
C.双杂交瘤细胞产生的抗体可与两种抗原同时发生特异性结合
D.图丙中的1、2、3、4、5、6可以分别是A2、B2、a、b、β、α
√
[解析] 诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活
病毒诱导法等，因此三种杂交瘤细胞的制备均可使用灭活病毒作为诱
导剂，A正确；根据单克隆抗体的制备过程可知，三种杂交瘤细胞的
筛选均需要进行克隆化培养和抗体检测，B正确；根据题意可知，图
丙是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体，可与两种抗原同时发生特异
性结合，C正确；根据图甲、乙信息判断，1、2、3、4、5、6分别对
应A2、B2、a、b、α、β，D错误。
练习册
知识点一 动物细胞融合技术
1.动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的
技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
下列相关叙述错误的是( )
A.细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
B.动物细胞融合技术可以用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等
C.动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理是完全相同的
D.杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用，具有重要意义
√
[解析] 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，
A正确；动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生
物新品种培育的重要手段，B正确；动物细胞融合技术的原理是细胞
膜的流动性，植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物
细胞的全能性，二者的原理不完全相同，C错误；杂交瘤技术利用动
物细胞融合技术发展起来，为制造单克隆抗体开辟了新途径，D正确。
2.[2024·湖北鄂州期中]动物细胞融合是使两个或多个动物细胞结合
形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述，错误的是
( )
A.单克隆抗体制备的过程中需要进行动物细胞融合
B.动物细胞融合的原理与植物组织培养的原理不同
C.两个单倍体细胞融合后，形成的细胞中含有2个染色体组
D.若将两种细胞放置于培养基中进行两两细胞融合,共有3种融合类型
√
[解析] 单克隆抗体的制备需要骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,A正确;
动物细胞融合利用了细胞膜的流动性,植物组织培养利用的是植物细
胞的全能性，二者原理不同，B正确;如果单倍体细胞含多个染色体
组，那么融合后的细胞含多个染色体组,而不是2个染色体组，C错误;
若将两种细胞(假设为A型、B型) 放置于培养基中进行两两细胞融合，
会出现型、型、 型三种类型的融合细胞，D正确。
3.如图为动物细胞融合技术过程图，相关叙述错误的是( )
A.图中C为灭活的病毒，此外还可用
物理或化学方法诱导动物细胞融合
B.图中①过程发生了细胞膜的融合，
体现了细胞膜的选择透过性
C.图中②过程表示细胞核融合，形
成杂交细胞
D.可根据细胞中染色体数目和形态
的差异来鉴定杂交细胞
√
[解析] 图中C为灭活的病毒
(生物方法)，此外还可用物理
(如电融合法)或化学(如 融合法)
方法诱导动物细胞融合，A正确；
图中①过程发生了细胞膜的融合，
体现了细胞膜的流动性，B错误；图中②过程表示通过细胞核融合，产
生杂交细胞，C正确；细胞融合过程中可出现同种细胞融合和异种细胞
融合，因此，可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂交细胞，
D正确。
知识点二 单克隆抗体的制备
4.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁
殖，形成细胞群。其原因是( )
A.在体外培养条件下，B淋巴细胞可以无限增殖
B.在动物体内B淋巴细胞可产生超过百万种的抗体
C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
√
[解析] B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不能无限繁殖，A错误；动
物在免疫反应的过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种
以上，但是每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，因此，要想获
得大量的单克隆抗体，必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖形成的
细胞群，B错误，D正确；当有特定的抗原刺激机体时，B淋巴细胞
才能参与特异性免疫反应，C错误。
5.[2023·北京卷]甲状旁腺激素 水平是人类多种疾病的重要诊断
指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测 ，有关制备过程的
叙述不正确的是( )
A.需要使用动物细胞培养技术
B.需要制备用 免疫的小鼠
C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
√
[解析] 单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需
要使用动物细胞培养技术，A正确；该操作的目的是制备单克隆抗体
用于快速检测，故应用 刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，
B正确；抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原—抗体结合的原
理筛选杂交瘤细胞，C正确；由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通
常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗
体，D错误。
6.单克隆抗体为第一个用于临床的抗 细胞的单克隆抗体，
该抗体针对细胞上 抗原，能抑制免疫系统的功能，有利于器官
移植。下列有关叙述错误的是( )
A.利用细胞膜的流动性的生物学原理即可制备
B.将提纯的 抗原注入小鼠体内可产生免疫反应，分离出B淋巴细胞
C.制备 过程中使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液
D.经多次筛选才能获得既能产生特定抗体，又能无限增殖的细胞
√
[解析] 单克隆抗体的制备过程中依据的生物学原理有细胞增殖和细
胞膜的流动性，A错误；要制备,需要将 抗原注入小鼠体内，
使其发生免疫反应，才能从其体内分离出相应的B淋巴细胞，B正确；
制备 时，首先要将抗原注入小鼠体内，以获得相应的B淋巴细
胞，然后取小鼠的脾脏组织，用胰蛋白酶处理获得单细胞后，和小
鼠的骨髓瘤细胞在聚乙二醇的诱导下促进细胞融合，C正确；经过多
次筛选，最终获得既能产生针对 的抗体，又能无限增殖的杂交
瘤细胞，D正确。
7.[2024·山东济宁
月考]如图表示抗
人体胃癌的单克隆
A.抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合
B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙
C.用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞
不能生长
D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所
需抗体的丁
抗体的制备过程，有关叙述不正确的是( )
√
[解析] 甲属于抗原，因此，抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合，
A正确；利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电融合
(物理法)等方法可诱导细胞融合获得杂交细胞乙，B正确；用特定的
选择培养基对乙进行筛选，具有同种核的融合细胞和未融合细胞均
不能生长，只有杂交瘤细胞才能生长，C错误；丙表示杂交瘤细胞，
由于能产生抗体的B淋巴细胞有多种，因此需进行克隆化培养和抗体
检测，经多次筛选后才可获得大量能分泌所需抗体的丁，D正确。
8.某抗原有 四
个抗原决定簇，每个
抗原决定簇都只能刺
A.B淋巴细胞可来源于该抗原刺激后的动物脾脏
B.过程②需用选择培养基来筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C.该抗原部分结构改变后，可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
D.多抗可以从血清中直接分离，操作简单但不能大量制备
激机体产生一种抗体，由该抗原刺激产生的不同抗体统称为多克隆抗体。
下图是某同学绘制的制备该抗原单克隆抗体(单抗)和多克隆抗体(多抗)
的过程示意图，相关说法不正确的是( )
√
[解析] B淋巴细胞可
来源于该抗原刺激后
的动物脾脏，从小鼠
脾脏中取出的B淋巴细胞可能有多种类型，A正确；过程①需用选择培
养基来筛选出杂交瘤细胞，过程②利用抗原-抗体杂交筛选出能产生特
定抗体的杂交瘤细胞，B错误；单抗只是针对单一抗原，因此，该抗原
部分结构改变后，可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况，C正确；
多抗可从血清中直接分离，操作简单，但不可大量制备，因为浆细胞不
具有增殖的能力，D正确。
9.为了解决杂交瘤细胞在传代培
养中出现来自B淋巴细胞的染色
体丢失的问题，研究者除了用抗
原刺激之外，还用
(一种病毒颗粒)感染动物B淋巴细
胞，并使之成为“染色体核型稳定”
的细胞株。上述细胞株能够在培养基中存活，但对乌本苷 敏
感。下图为该实验操作示意图。相关分析不合理的是 ( )
A.杂交瘤细胞染色体丢失可能导
致抗体产生能力下降
B.B淋巴细胞来源于抗原刺激后
动物的淋巴结和脾脏等
C.骨髓瘤细胞应该无法在 选
择培养基中存活
D.杂交瘤细胞具有持续产生抗
抗体的能力
√
[解析] 杂交瘤细胞在传代培养中出
现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题，
可能会导致抗体产生能力下降，A正
确；造血干细胞在骨髓中发育成B淋
巴细胞，成熟的B细胞主要分布在淋
巴结和脾脏，因此可以从抗原刺激
后动物的淋巴结和脾脏等处获得B淋巴细胞，B正确；由图可知，在
培养基上培养，骨髓瘤细胞死亡，说明骨髓瘤细胞在 培养基中无法
存活，C正确；题中培养的是可分泌与注射的抗原相关的抗体的杂交瘤
细胞，不会产生抗 抗体，D错误。
10.[2024·江苏扬州中学月考]一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗
体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科学家通过动物细胞
融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞和 融合形成双杂交瘤细胞
。双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性
抗体 如图所示。下列相关说法错误的是( )
A.将杂交瘤细胞A、B混合并诱导融合后，利用选择培养基无法筛选
出双杂交瘤细胞
B.双杂交瘤细胞同时识别 、 抗原后，才能产生双特异性抗体
C.对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无须使用胰
蛋白酶处理
D.将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供糖类、氨基酸、
无机盐、维生素等营养条件
√
[解析] 单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选，第一次利用选择
培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次用抗原-抗体杂交的方法筛选出产
生特定抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞由两个杂交瘤细胞融合而
成，不能使用选择培养基筛选，A正确；杂交瘤细胞是由已免疫的B
细胞和骨髓瘤细胞融合而成，无须接触抗原就能产生抗体，B错误；
杂交瘤细胞是悬浮生长的细胞，若要传代培养，可直接离心收集细
胞，无须使用胰蛋白酶处理，C正确；将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔
中培养，腹水作为天然培养基，为细胞提供各种营养条件，D正确。
知识点三 单克隆抗体的应用
11.下列关于单克隆抗体的叙述，不正确的是( )
A.其化学本质是蛋白质
B.单克隆抗体自身也能用于疾病治疗
C.利用单克隆抗体制成诊断试剂，可用于疾病的诊断
D.单克隆抗体只能在体内生产，不能在体外生产
[解析] 单克隆抗体的化学本质是蛋白质，A正确；单克隆抗体自身
也能用于疾病治疗，B正确；单克隆抗体制成诊断试剂，可用于多种
疾病的诊断和病原体的鉴定，C正确；单克隆抗体既能在体内生产，
也能在体外生产，D错误。
√
12.[2024·山东菏泽月考]细胞
毒素类药物能有效杀伤肿瘤
细胞，但也会对健康细胞造
成伤害，科学家将细胞毒素
A. 中的抗体能特异性识别并杀死肿瘤细胞
B. 进入肿瘤细胞的过程需要蛋白质参与，但不消耗能量
C.含 的小泡与溶酶体融合后，溶酶体裂解释放药物引起细胞坏死
D.利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤等疾病
与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物(ADC)， 可选择性杀伤肿
瘤细胞，其作用机制如图所示。下列叙述正确的是( )
√
[解析] 中的抗体能特异性
识别肿瘤抗原， 中的细胞
毒素类药物才能杀死肿瘤细胞，
A错误； 进入肿瘤细胞的
过程，需要抗体与靶细胞膜上的特异性受体(蛋白质)结合，方式为胞吞，
需要消耗能量，B错误；进入靶细胞后，含 的小泡与溶酶体融
合，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡，实现了对肿瘤细
胞的选择性杀伤，C错误；利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体
可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，其原理是抗原—抗体特异性结合，
D正确。
13.[2024·福建福州期末]霉变的食物中含有20余种黄曲霉毒素，具有很强的致
癌性。为检测食物中黄曲霉毒素的含量，科研人员以黄曲霉毒素为抗原制备出
单克隆抗体，对食物进行检测。下列叙述正确的是( )
A.将20余种毒素共同免疫小鼠，可制备出1种与所有毒素结合的单克隆抗体
B.可用融合法、电融合法或者灭活的病毒诱导 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的
融合
C.细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交瘤细胞体外增殖体现了细胞的全能性
D.单克隆抗体能检测出浓度很低的黄曲霉毒素体现了单克隆抗体灵敏度高的特
点
√
[解析] 抗体具有特异性，所以将20余种毒素共同免疫小鼠，不可制
备出1种与所有毒素结合的单克隆抗体，A错误；制备单克隆抗体时
诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，方法有电融合法、 融合法、
灭活病毒诱导法等，B错误；细胞融合体现了细胞膜的流动性，杂交
瘤细胞体外增殖并没有形成新个体或其他各种细胞，不能体现细胞
的全能性，C错误；单克隆抗体能检测出浓度很低的黄曲霉毒素体现
了单克隆抗体特异性强、灵敏度高的特点，D正确。
14.人绒毛膜促性腺激素 是
女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌
的一种糖蛋白，制备抗 单克
隆抗体可用于早孕的诊断。如图
是抗 单克隆抗体制备流程示
A.注射 的目的是使免疫动物产生抗体,过程①常用的方法和植物体细
胞杂交完全相同
B.过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗 抗体
C.过程③以 为抗原进行检测
D.过程④可以在体内进行，也可在体外进行
意图，下列有关说法错误的是 ( )
√
[解析] 注射 的目的是使动
物产生能分泌相应抗体的B淋巴
细胞，过程①常用灭活的病毒
或 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤
细胞融合，而植物体细胞杂交
不能使用灭活病毒诱导法，A错误；过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定
能产生抗 抗体，需要进行抗体检测，B正确；过程③进行抗体检测，
即以为抗原筛选出能分泌抗 抗体的杂交瘤细胞，C正确；过程
④为动物细胞培养，可以在体内进行，也可在体外进行，D正确。
15.[2024·黑龙江鸡西期中] 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构
不同的亚基组成，即肌钙蛋白、肌钙蛋白Ⅱ 和肌钙蛋
白，其中 在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。
为制备抗 的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分
析回答下列问题：
(1)动物细胞培养时，将培养的细胞置于含有_________________的混
合气体的 培养箱中进行培养。
空气
[解析] 动物细胞培养的气体环境为空气和混合气体，
是细胞代谢所必需的，的主要作用是维持培养液的 。
(2)为了防止有害代谢物的积累，可采用________________的方法，
以便清除代谢物。
定期更换培养液
[解析] 细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养
液，以便清除代谢物。
(3)每隔2周用 作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是
___________________________________________，最后一次免疫后
第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常
用的化学诱导因素是_______________。
加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞
聚乙二醇
[解析] 通过多次注射相应抗原，可加强免疫，刺激小鼠机体产生更
多的B淋巴细胞；取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导
融合，常用的化学诱导因素是聚乙二醇 。
(4)甲、乙、丙中，只含杂交细胞的是________，过程②表示将乙细
胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再
检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得_________________
_____________。
乙和丙
能产生抗抗体的杂交瘤细胞
[解析] 甲中含有未融合的细胞、同种细胞的融合细胞，获得杂交瘤
细胞时需要对甲进行筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细
胞；其中过程①代表用特定的选择培养基进行筛选，过程②表示将
乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体检测，之后稀释、培养、再
检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗 抗
体的杂交瘤细胞。
(5)单克隆抗体的优点是准确识别抗原的细微差异，_______________
______________________________。
与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
[解析] 单克隆抗体的优点：准确识别各种抗原物质的细微差异，跟
特定抗原发生特异性结合，并可大量制备。
16.[2024·安徽黄山期末] 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性
炎症坏死和纤维化，部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制
针对丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以
下实验流程。回答下列问题：
(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝
病毒结合的抗体，需要进行的操作是___________________________
___________。融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增
加数量的是____________。
给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应
骨髓瘤细胞
[解析] 用丙肝病毒对小鼠进行免疫后，小鼠的B淋巴细胞能产生抗
丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾脏中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。
B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增
殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量
的是骨髓瘤细胞。
(2)诱导细胞融合时利用
了病毒表面含有的糖蛋
白和一些酶，能够与细
胞膜上的________
糖蛋白
蛋白质分子和脂质分子
选择培养基
杂交瘤细胞
克隆化培养和抗体检测
能产生所需抗体的杂交瘤细胞
(填化学本质)发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的_____________
__________重新排布，细胞发生融合。筛选1利用_____________进行筛
选，目的是筛选出____________；而筛选2通过多次的_______________
________来完成，目的是筛选出____________________________。
[解析] 诱导细胞融合的
病毒表面含有的糖蛋白
和一些酶，能够与细胞
膜上的糖蛋白发生作用，
使得细胞互相凝聚，细胞膜具有一定的流动性，在灭活病毒的诱导下，
其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞会发生融合。单克隆抗体
制备过程中细胞融合方式有B细胞间的融合、骨髓瘤细胞间的融合及B
细胞和骨髓瘤细胞的融合，会产生三类融合细胞(只考虑两两融合)。
筛选1是指利用选择培养
基进行筛选得到杂交瘤
细胞。由于杂交瘤细胞
产生的抗体除了抗丙肝
病毒的抗体外，还可能
有其他类型，故筛选2是指进行多次克隆化培养和专一性抗体检测，以
得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞。
(3)得到大量针对丙肝
病毒的单克隆抗体的
方法之一是将杂交瘤
细胞在体外培养液中
进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响
因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路
为 ____________________________________________________________
______________________________________________________________
________________________________ 。
将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组(可自设组数)。在不
同组别中接种不同量的能产生针对丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，
一定时间后测定培养液中的抗体含量
[解析] 实验的自变
量是培养液中接种杂
交瘤细胞的数量，因
变量为一定时间内抗
丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验
思路为将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组 (可自设组数)。在
不同组别中接种不同量的能产生针对丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细
胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量。第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
【预习梳理】
一、1.两个或多个
2.细胞膜具有一定的流动性
3.灭活病毒诱导法
4.杂交细胞 两个或多个
5.有性杂交
6.(1)细胞遗传
(2)单克隆抗体
二、1.(1)某种抗原 血清
(2)纯度低 特异性
3.大量制备
4.(1)诊断试剂
(2)运载药物 治疗疾病
【任务活动】
任务一
[情境]
(1)流动性
(2)酶解法去除细胞壁 电融合法、PEG融合法
(3)抗原
(4)糖蛋白 糖蛋白
(5)细胞膜
反馈评价
例1 C [解析] 动物细胞融合技术获得的是动物细胞,并不是完整的动物个体,没有体现细胞全能性,A错误;动物细胞的培养需要用液体培养基,植物体细胞杂交技术用的是固体培养基,B错误;植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术都需要在无菌条件下进行,C正确;植物细胞的培养不需要使用CO2培养箱,D错误。
例2 B [解析] 动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术,A正确;动物细胞融合技术不能获得新物种,B错误;杂交瘤细胞就是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的,所以杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的,C正确;灭活的病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶与细胞膜上糖蛋白发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,D正确。
任务二
[资料]
(1)①产生特定抗体 ②特定的选择培养基 ③杂交瘤细胞
④克隆化培养 ⑤腹腔 ⑥细胞培养液 ⑦腹水
(2)动物细胞融合、动物细胞培养 细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖
(3)3 未融合的亲本细胞 具有同种核
(4)既能大量增殖又能产生特定抗体
(5)图示过程生产出的单克隆抗体对人体来说是抗原,存在着免疫排斥反应
反馈评价
例3 D [解析] 向小鼠体内注射特定的抗原,小鼠会产生免疫反应,可以从小鼠血清中获得抗体,但此时的抗体不是单克隆抗体,A错误;经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力,无法通过体外培养获得单克隆抗体,B错误;诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,产生的融合细胞可能是B淋巴细胞—B淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞、B淋巴细胞—骨髓瘤细胞,C错误;单克隆抗体制备过程需要2次筛选:第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞还需进行抗体检测,筛选出呈阳性的杂交瘤细胞才能进行体内或体外培养,D正确。
例4 B [解析] 细胞甲是已免疫的B淋巴细胞,但种类很多,不一定能产生抗甘草酸抗体,A错误;细胞丁为杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生特定抗体,过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖,B正确;过程③用选择培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞,过程④用克隆化培养和抗体检测得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞,C错误;小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40,融合后形成的杂交瘤细胞染色体数目为80,由于杂交瘤细胞能发生分裂,故杂交瘤细胞的染色体数也可能为160(有丝分裂后期),D错误。
任务三
[资料]
(1)诊断时间提前、准确率高
(2)①抗体 接头 药物 ②抗体 药物 ③胞吞 ④选择性杀伤肿瘤细胞,避免伤害正常细胞 (3)特异
反馈评价
例5 C [解析] T-DM1由曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联形成,其中曲妥珠单抗可以与细胞膜表面的HER2+特异性结合,将DM1准确带至乳腺癌细胞,A正确;据图分析,T-DM1被乳腺癌细胞吞噬后释放DM1抑制微管聚合,进而导致细胞凋亡,B正确;DM1是细胞毒性药物,不能与HER2+特异性结合,所以不选择它作为制备单抗的抗原,C错误;曲妥珠单抗可以与HER2+特异性结合,因此可以利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗定位诊断HER2+,D正确。
【当堂自测】
1.(1)× (2)× (3)× (4)× (5)× (6)√ (7)×
[解析] (1)“灭活”是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力,但不破坏其抗原结构。
(2)若用抗原蛋白饲喂小鼠,抗原蛋白会被小鼠消化道中的蛋白酶水解而失去活性,因此应向小鼠注射特定的抗原蛋白,再从小鼠脾脏中分离出相应的B淋巴细胞。
(3)单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合,原理依次是细胞增殖、细胞膜具有一定的流动性。
(4)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞有多种,只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞才为杂交瘤细胞。
(5)为提高单克隆抗体制备成功率,往往需要多次给实验动物注射同一种抗原。
(7)抗体—药物偶联物中,单克隆抗体需携带抗癌药物才能定向杀死癌细胞。
2.C [解析] 融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体,即发生了遗传物质的改变,A正确;适当的培养基用来选择融合细胞,动物细胞融合时常用PEG、灭活病毒和电激来诱导融合,B正确;该过程没有将杂交细胞培养成个体,不能体现细胞的全能性,C错误;在丢失人的1号染色体的融合细胞中,不能合成人的尿苷单磷酸激酶,说明尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上, D正确。
3.D [解析] 根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测,双抗可同时与2种抗原结合,利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞,从而使药物发挥相应的作用,A、B正确;筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原—抗体检测,从而实现对双抗的筛选,C正确;同时注射2种抗原可刺激不同的B细胞分化形成不同的浆细胞,每种浆细胞只能产生一种抗体,D错误。
4.A [解析] 经过程①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体,需要经过抗体检测筛选出呈阳性的杂交瘤细胞,A错误;过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同,都是细胞膜具有一定的流动性,B正确;过程②需要采用抗体检测筛选出呈阳性的杂交瘤细胞即能产生特定抗体的杂交瘤细胞,然后进行培养(包括体内培养和体外培养),C正确;抗体的靶向作用(特异性地和抗原结合)使过程③具有高度特异性,D正确。第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
一、动物细胞融合技术
1.概念:使 动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理: 。
3.诱导动物细胞融合的常用方法:PEG融合法、电融合法、 等。
4.结果:形成 ,且具有原来 细胞的遗传信息。
5.意义:突破了 的局限,使远缘杂交成为可能。
6.应用
(1)成为研究 、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造 开辟了新途径。
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射 ,使动物产生抗体,然后从动物 中分离所需抗体。
(2)缺点:产量低、 、 差。
2.单克隆抗体制备思路:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合,所得到的融合细胞就可能大量增殖,产生足够数量的特定抗体。
3.单克隆抗体优点:能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以 。
4.单克隆抗体的应用
(1)作为 ,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
(2)用于 和 。
任务一动物细胞融合技术
【情境】灭活的病毒可诱导动物细胞融合,其发挥作用的示意图如下:
(1)动物细胞融合体现了细胞膜在结构上具有 的特点。
(2)与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合前不需要的步骤是 ,两者都可以使用的诱导方式是 ,灭活的病毒只适合诱导动物细胞融合。
(3)病毒灭活是指用物理或化学手段使之失去感染能力,但并不破坏它们的 结构。
(4)灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的 和一些酶能够与细胞膜上的 发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
(5)动物细胞融合的过程中,首先发生的是 (填“细胞膜”或“细胞质”)融合。
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 细胞膜的流动性
步骤 去壁→诱导原生质体融合→杂种细胞→杂种植株 分散成单个细胞→诱导细胞融合→杂交细胞
诱导 方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、灭活病毒
结果 形成杂种植株 形成杂交细胞
相同点 融合原理相同;都可以用物理、化学方法诱导融合
例1[2024·重庆期末]关于植物体细胞杂交技术和动物细胞融合技术的对比,正确的是()
A.都体现了细胞的全能性
B.都需要用液体培养基
C.都需要在无菌条件下进行
D.都需要使用CO2培养箱
例2下列关于动物细胞融合技术及其意义的叙述,错误的是()
A.动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术
B.可以打破生殖隔离,实现远缘杂交、获得新物种
C.杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的
D.灭活病毒可以诱导细胞融合与病毒表面的糖蛋白有关
任务二单克隆抗体的制备
【资料】阅读教材第48、49页图“米尔斯坦和科勒制备单克隆抗体过程的示意图”。
(1)补充完善单克隆抗体的制备流程图:
(2)该过程应用的动物细胞工程技术有 ;其原理是 。
(3)若只考虑细胞两两融合,诱导融合后会获得
种类型的细胞。经特定的选择培养基筛选后, 和融合的 的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
(4)体外培养和注射到小鼠体内进行培养的细胞具有的特点是 。
(5)图示过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是 。
单克隆抗体制备过程中的筛选过程
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选 原因 诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞
筛选 方法 用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长 用96孔板培养,在每个孔中只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群
筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
例3下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是()
A.将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
B.经特定抗原免疫过的B淋巴细胞可在体外培养时分泌单克隆抗体
C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞
D.筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定抗原再次筛选分泌单克隆抗体的细胞
例4[2024·天津滨海新区期中]甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如图。下列相关叙述正确的是()
A.细胞甲都是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞
B.过程⑤无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖
C.过程④是利用选择培养基筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D.若小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40,则杂交瘤细胞的染色体数也为40
任务三单克隆抗体的应用
【资料】阅读教材第50页思考·讨论“单克隆抗体的应用”,进行分析。
(1)资料1说明,单克隆抗体诊断试剂盒在应用上具有 的优势。
(2)分析资料2:
①抗体—药物偶联物(ADC)通常由 、 和 (如细胞毒素)三部分组成。
②杀伤肿瘤细胞的过程中,识别肿瘤细胞的是抗体—药物偶联物的 部分,发挥杀伤作用的是 。
③抗体—药物偶联物以 的方式进入肿瘤细胞,最终引起细胞凋亡。
④使用单克隆抗体制备抗体—药物偶联物杀伤肿瘤细胞的优势是 。
(3)单克隆抗体诊断试剂盒与单克隆抗体—药物偶联物都利用了抗体的 性。
例5[2024·广东六校联考]治疗最凶险乳腺癌“HER2+”的抗体—药物偶联物(T-DM1)被纳入2023年医保目录名单。T-DM1由曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联形成。T-DM1作用机制如下图,下列有关叙述错误的是()
A.曲妥珠单抗的作用是将DM1准确带至乳腺癌细胞
B.T-DM1被乳腺癌细胞吞噬后释放DM1抑制微管聚合进而导致细胞凋亡
C.曲妥珠单抗制备中可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫反应
D.利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗可定位诊断HER2+
1.正误辨析
(1)灭活会破坏病毒或细菌的抗原结构,使其失去感染能力。()
(2)制备单克隆抗体时,先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞。()
(3)单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性。()
(4)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。()
(5)为提高单克隆抗体制备成功率,往往需要多次给实验动物注射多种抗原。()
(6)需对抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行体内或体外培养。()
(7)抗体—药物偶联物中,单克隆抗体作为抗癌药物能够定向杀死癌细胞。()
2.将人细胞与小鼠细胞融合,培养出的杂交细胞可能会随机丢失来自人细胞的染色体。在丢失人的1号染色体的融合细胞中,不能合成人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中不合理的是()
A.与人和小鼠细胞相比,融合细胞发生了遗传物质的改变
B.研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术
C.融合细胞经过培养,能实现细胞的全能性
D.尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上
3.[2022·山东卷]如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是()
A.双抗可同时与2种抗原结合
B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
4.[2024·山东师大附中月考]将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类某些癌细胞,其过程如图所示。下列有关叙述错误的是()
A.经过程①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体
B.过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同
C.过程②需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D.抗体的靶向作用使过程③具有高度特异性第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.C [解析] 细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,A正确;动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段,B正确;动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性,植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性,二者的原理不完全相同,C错误;杂交瘤技术利用动物细胞融合技术发展起来,为制造单克隆抗体开辟了新途径,D正确。
2.C [解析] 单克隆抗体的制备需要骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,A正确;动物细胞融合利用了细胞膜的流动性,植物组织培养利用的是植物细胞的全能性,二者原理不同,B正确;如果单倍体细胞含多个染色体组,那么融合后的细胞含多个染色体组,而不是2个染色体组,C错误;若将两种细胞(假设为A型、B型) 放置于培养基中进行两两细胞融合,会出现A-A型、B-B型、A-B型三种类型的融合细胞,D正确。
3.B [解析] 图中C为灭活的病毒(生物方法),此外还可用物理(如电融合法)或化学(如PEG融合法)方法诱导动物细胞融合,A正确;图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的流动性,B错误;图中②过程表示通过细胞核融合,产生杂交细胞,C正确;细胞融合过程中可出现同种细胞融合和异种细胞融合,因此,可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂交细胞,D正确。
4.D [解析] B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限繁殖,A错误;动物在免疫反应的过程中,体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上,但是每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,因此,要想获得大量的单克隆抗体,必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞群,B错误,D正确;当有特定的抗原刺激机体时,B淋巴细胞才能参与特异性免疫反应,C错误。
5.D [解析] 单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养,即需要使用动物细胞培养技术,A正确;该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH,故应用PTH刺激小鼠,使其产生相应的B细胞,B正确;抗原与抗体的结合具有特异性,可利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞,C正确;由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体,故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体,D错误。
6.A [解析] 单克隆抗体的制备过程中依据的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的流动性,A错误;要制备OKT3,需要将CD3抗原注入小鼠体内,使其发生免疫反应,才能从其体内分离出相应的B淋巴细胞,B正确;制备OKT3时,首先要将抗原注入小鼠体内,以获得相应的B淋巴细胞,然后取小鼠的脾脏组织,用胰蛋白酶处理获得单细胞后,和小鼠的骨髓瘤细胞在聚乙二醇的诱导下促进细胞融合,C正确;经过多次筛选,最终获得既能产生针对CD3的抗体,又能无限增殖的杂交瘤细胞,D正确。
7.C [解析] 甲属于抗原,因此,抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合,A正确;利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电融合(物理法)等方法可诱导细胞融合获得杂交细胞乙,B正确;用特定的选择培养基对乙进行筛选,具有同种核的融合细胞和未融合细胞均不能生长,只有杂交瘤细胞才能生长,C错误;丙表示杂交瘤细胞,由于能产生抗体的B淋巴细胞有多种,因此需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后才可获得大量能分泌所需抗体的丁,D正确。
8.B [解析] B淋巴细胞可来源于该抗原刺激后的动物脾脏,从小鼠脾脏中取出的B淋巴细胞可能有多种类型,A正确;过程①需用选择培养基来筛选出杂交瘤细胞,过程②利用抗原-抗体杂交筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,B错误;单抗只是针对单一抗原,因此,该抗原部分结构改变后,可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况,C正确;多抗可从血清中直接分离,操作简单,但不可大量制备,因为浆细胞不具有增殖的能力,D正确。
9.D [解析] 杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题,可能会导致抗体产生能力下降,A正确;造血干细胞在骨髓中发育成B淋巴细胞,成熟的B细胞主要分布在淋巴结和脾脏,因此可以从抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处获得B淋巴细胞,B正确;由图可知,在HAT培养基上培养,骨髓瘤细胞死亡,说明骨髓瘤细胞在HAT培养基中无法存活,C正确;题中培养的是可分泌与注射的抗原相关的抗体的杂交瘤细胞,不会产生抗EBV抗体,D错误。
10.B [解析] 单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选,第一次利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞,双杂交瘤细胞由两个杂交瘤细胞融合而成,不能使用选择培养基筛选,A正确;杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合而成,无须接触抗原就能产生抗体,B错误;杂交瘤细胞是悬浮生长的细胞,若要传代培养,可直接离心收集细胞,无须使用胰蛋白酶处理,C正确;将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中培养,腹水作为天然培养基,为细胞提供各种营养条件,D正确。
11.D [解析] 单克隆抗体的化学本质是蛋白质,A正确;单克隆抗体自身也能用于疾病治疗,B正确;单克隆抗体制成诊断试剂,可用于多种疾病的诊断和病原体的鉴定,C正确;单克隆抗体既能在体内生产,也能在体外生产,D错误。
12.D [解析] ADC中的抗体能特异性识别肿瘤抗原,ADC中的细胞毒素类药物才能杀死肿瘤细胞,A错误;ADC进入肿瘤细胞的过程,需要抗体与靶细胞膜上的特异性受体(蛋白质)结合,方式为胞吞,需要消耗能量,B错误;ADC进入靶细胞后,含ADC的小泡与溶酶体融合,引起靶细胞溶酶体膜的破裂,最后导致细胞凋亡,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤,C错误;利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病,其原理是抗原—抗体特异性结合,D正确。
13.D [解析] 抗体具有特异性,所以将20余种毒素共同免疫小鼠,不可制备出1种与所有毒素结合的单克隆抗体,A错误;制备单克隆抗体时诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,方法有电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法等,B错误;细胞融合体现了细胞膜的流动性,杂交瘤细胞体外增殖并没有形成新个体或其他各种细胞,不能体现细胞的全能性,C错误;单克隆抗体能检测出浓度很低的黄曲霉毒素体现了单克隆抗体特异性强、灵敏度高的特点,D正确。
14.A [解析] 注射HCG的目的是使动物产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞,过程①常用灭活的病毒或PEG 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,而植物体细胞杂交不能使用灭活病毒诱导法,A错误;过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体,需要进行抗体检测,B正确;过程③进行抗体检测,即以HCG为抗原筛选出能分泌抗HCG抗体的杂交瘤细胞,C正确;过程④为动物细胞培养,可以在体内进行,也可在体外进行,D正确。
15.(1)95%空气+5%CO2
(2)定期更换培养液
(3)加强免疫,刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 聚乙二醇(PEG)
(4)乙和丙 能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞
(5)与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备
[解析] (1)动物细胞培养的气体环境为95%空气和5%CO2混合气体,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。(2)细胞培养中,为防止有害代谢物的积累,需要定期更换培养液,以便清除代谢物。(3)通过多次注射相应抗原,可加强免疫,刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞;取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的化学诱导因素是聚乙二醇(PEG)。(4) 甲中含有未融合的细胞、同种细胞的融合细胞,获得杂交瘤细胞时需要对甲进行筛选,因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞;其中过程①代表用特定的选择培养基进行筛选,过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。(5)单克隆抗体的优点:准确识别各种抗原物质的细微差异,跟特定抗原发生特异性结合,并可大量制备。
16.(1)给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应 骨髓瘤细胞
(2)糖蛋白 蛋白质分子和脂质分子 选择培养基 杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 能产生所需抗体的杂交瘤细胞
(3)将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组(可自设组数)。在不同组别中接种不同量的能产生针对丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞,一定时间后测定培养液中的抗体含量
[解析] (1)用丙肝病毒对小鼠进行免疫后,小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体,从该小鼠的脾脏中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖,而骨髓瘤细胞能无限增殖,故融合之前的两种细胞中,能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。(2)诱导细胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶,能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使得细胞互相凝聚,细胞膜具有一定的流动性,在灭活病毒的诱导下,其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞会发生融合。单克隆抗体制备过程中细胞融合方式有B细胞间的融合、骨髓瘤细胞间的融合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合,会产生三类融合细胞(只考虑两两融合)。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外,还可能有其他类型,故筛选2是指进行多次克隆化培养和专一性抗体检测,以得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞。(3)实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量,因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量,除自变量外,其他条件要相同且适宜。所以实验思路为将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组(可自设组数)。在不同组别中接种不同量的能产生针对丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞,一定时间后测定培养液中的抗体含量。第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体
知识点一动物细胞融合技术
1.动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列相关叙述错误的是()
A.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
B.动物细胞融合技术可以用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等
C.动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理是完全相同的
D.杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用,具有重要意义
2.[2024·湖北鄂州期中]动物细胞融合是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述,错误的是()
A.单克隆抗体制备的过程中需要进行动物细胞融合
B.动物细胞融合的原理与植物组织培养的原理不同
C.两个单倍体细胞融合后,形成的细胞中含有2个染色体组
D.若将两种细胞放置于培养基中进行两两细胞融合,共有3种融合类型
3.如图为动物细胞融合技术过程图,相关叙述错误的是()
A.图中C为灭活的病毒,此外还可用物理或化学方法诱导动物细胞融合
B.图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的选择透过性
C.图中②过程表示细胞核融合,形成杂交细胞
D.可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂交细胞
知识点二单克隆抗体的制备
4.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。其原因是()
A.在体外培养条件下,B淋巴细胞可以无限增殖
B.在动物体内B淋巴细胞可产生超过百万种的抗体
C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
5.[2023·北京卷]甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH,有关制备过程的叙述不正确的是()
A.需要使用动物细胞培养技术
B.需要制备用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
6.CD3单克隆抗体(OKT3)为第一个用于临床的抗T细胞的单克隆抗体,该抗体针对T细胞上CD3抗原,能抑制免疫系统的功能,有利于器官移植。下列有关叙述错误的是()
A.利用细胞膜的流动性的生物学原理即可制备OKT3
B.将提纯的CD3抗原注入小鼠体内可产生免疫反应,分离出B淋巴细胞
C.制备OKT3过程中使用了胰蛋白酶和聚乙二醇等溶液
D.经多次筛选才能获得既能产生特定抗体,又能无限增殖的细胞
7.[2024·山东济宁月考]如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述不正确的是()
A.抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合
B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙
C.用特定的选择培养基对乙进行筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞不能生长
D.丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
8.某抗原有a~d四个抗原决定簇,每个抗原决定簇都只能刺激机体产生一种抗体,由该抗原刺激产生的不同抗体统称为多克隆抗体。下图是某同学绘制的制备该抗原单克隆抗体(单抗)和多克隆抗体(多抗)的过程示意图,相关说法不正确的是()
A.B淋巴细胞可来源于该抗原刺激后的动物脾脏
B.过程②需用选择培养基来筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C.该抗原部分结构改变后,可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
D.多抗可以从血清中直接分离,操作简单但不能大量制备
9.为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题,研究者除了用抗原刺激之外,还用EBV(一种病毒颗粒)感染动物B淋巴细胞,并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活,但对乌本苷(Oua)敏感。下图为该实验操作示意图。相关分析不合理的是()
A.杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
B.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
C.骨髓瘤细胞应该无法在HAT选择培养基中存活
D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力
10.[2024·江苏扬州中学月考]一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体,抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科学家通过动物细胞融合技术,将两株不同的杂交瘤细胞(A和B)融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖,产生的双特异性抗体AB如图所示。下列相关说法错误的是()
A.将杂交瘤细胞A、B混合并诱导融合后,利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB
B.双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后,才能产生双特异性抗体
C.对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时,无须使用胰蛋白酶处理
D.将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔,腹水能为细胞提供糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养条件
知识点三单克隆抗体的应用
11.下列关于单克隆抗体的叙述,不正确的是()
A.其化学本质是蛋白质
B.单克隆抗体自身也能用于疾病治疗
C.利用单克隆抗体制成诊断试剂,可用于疾病的诊断
D.单克隆抗体只能在体内生产,不能在体外生产
12.[2024·山东菏泽月考]细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞,但也会对健康细胞造成伤害,科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物(ADC),ADC可选择性杀伤肿瘤细胞,其作用机制如图所示。下列叙述正确的是()
A.ADC中的抗体能特异性识别并杀死肿瘤细胞
B.ADC进入肿瘤细胞的过程需要蛋白质参与,但不消耗能量
C.含ADC的小泡与溶酶体融合后,溶酶体裂解释放药物引起细胞坏死
D.利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤等疾病
13.[2024·福建福州期末]霉变的食物中含有20余种黄曲霉毒素,具有很强的致癌性。为检测食物中黄曲霉毒素的含量,科研人员以黄曲霉毒素为抗原制备出单克隆抗体,对食物进行检测。下列叙述正确的是()
A.将20余种毒素共同免疫小鼠,可制备出1种与所有毒素结合的单克隆抗体
B.可用PEG融合法、电融合法或者灭活的病毒诱导T淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合
C.细胞融合体现了细胞膜的流动性,杂交瘤细胞体外增殖体现了细胞的全能性
D.单克隆抗体能检测出浓度很低的黄曲霉毒素体现了单克隆抗体灵敏度高的特点
14.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,下列有关说法错误的是()
A.注射HCG的目的是使免疫动物产生抗体,过程①常用的方法和植物体细胞杂交完全相同
B.过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体
C.过程③以HCG为抗原进行检测
D.过程④可以在体内进行,也可在体外进行
15.[2024·黑龙江鸡西期中]人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白Ⅱ(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题:
(1)动物细胞培养时,将培养的细胞置于含有 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(2)为了防止有害代谢物的积累,可采用 的方法,以便清除代谢物。
(3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是 ,最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的化学诱导因素是 。
(4)甲、乙、丙中,只含杂交细胞的是 ,过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得 。
(5)单克隆抗体的优点是准确识别抗原的细微差异, 。
16.[2024·安徽黄山期末]丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制针对丙肝病毒的单克隆抗体,某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题:
(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体,需要进行的操作是 。融合之前的两种细胞中,能通过动物细胞培养大量增加数量的是 。
(2)诱导细胞融合时利用了病毒表面含有的糖蛋白和一些酶,能够与细胞膜上的 (填化学本质)发生作用,使得细胞互相凝聚,细胞膜上的 重新排布,细胞发生融合。筛选1利用 进行筛选,目的是筛选出 ;而筛选2通过多次的 来完成,目的是筛选出 。
(3)得到大量针对丙肝病毒的单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养,接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一,为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量,实验思路为 。
