3.2.3《基因工程的基本操作程序-GFP 基因的导入与鉴定》教学课件(共19张PPT3个视频)-人教版高中生物（2019）选择性必修三

(共19张PPT)
“荧光大肠杆菌”的诞生日记
——GFP基因的导入与鉴定
生物 高三上学期
单元主题：基因工程
GFP基因导入大肠杆菌
大肠杆菌
GFP基因导入大肠杆菌
如何导入？
连接产物
GFP基因导入大肠杆菌
方法：Ca2+转化法
转化：是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
GFP基因导入大肠杆菌
方法：Ca2+转化法
Ca2+处理大肠杆菌
感受态细胞
连接产物与感受态细胞混合
细胞吸收DNA分子
Ca2+
大肠杆菌菌液
连接产物
GFP基因导入大肠杆菌
方法：Ca2+转化法
Ca2+处理大肠杆菌
感受态细胞
连接产物与感受态细胞混合
细胞吸收DNA分子
Ca2+
大肠杆菌菌液

连接产物
GFP基因的筛选鉴定与诱导
如何淘汰未被转化的大肠杆菌？
思考：

Kana
GFP基因的筛选鉴定与诱导
Kana
Kana
Kana
Kana
诱导？
启动子
终止子
卡那霉素抗性基因
阻遏蛋白基因
GFP基因的筛选鉴定与诱导
操纵基因
启动子

启动子
终止子
卡那霉素抗性基因
阻遏蛋白基因
GFP基因的筛选鉴定与诱导
操纵基因
启动子

IPTG
“荧光大肠杆菌” 的诞生日记
番外篇：荧光的进击
我们怎么通过转基因技术来实现这一效果？
番外篇：荧光的进击
我们怎么将GFP蛋白与微管蛋白EB3连接在一起？
番外篇：荧光的进击
GFP基因
MAPRE3基因
启动子
终止子
如何将拼接好的”融合基因”(以下简称MG基因)导入到细胞内？
番外篇：荧光的进击
农杆菌转化法（常用）
合作探究：
阅读课本81页“资料卡”，思考以下问题：
1、农杆菌侵染植物细胞时有怎样的特点？
2、用Ti质粒构建基因表达载体时，MG基因应插入到哪个位置？
3、构建好的重组Ti质粒是否可以直接导入植物细胞？
T-DNA
不可以，需要先将其转入农杆菌中，再通过农杆菌侵染的方式导入。
番外篇：荧光的进击
农杆菌转化法（常用）
请各小组用手中材料模拟农杆菌转化法的过程，将MG基因基因导入到植物细胞中。
MG基因：
农杆菌
Ti质粒
植物细胞
限制酶
DNA连接酶
番外篇：荧光的进击
Ti质粒
构建
MG基因重组质粒
转入
植物组织培养
农杆菌转化法（常用）
提取
含重组Ti质粒的农杆菌
筛选
导入
MG基因
显微镜观察
体视荧光
显微镜观察
番外篇：基因工程的应用
感谢观看