单元提优小测 基础过关
第1章 发酵工程
一、选择题(共20题,每题3分,共60分)
1.下列关于微生物纯化培养的叙述,错误的是( )
A.倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近进行
B.微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤
C.用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落
D.在平板划线过程中,灼烧接种环之后,应马上划线,防止接种环被杂菌污染
2.发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节,下列哪项不是发酵过程中要完成的事( )
A.随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度
B.不断添加菌种
C.及时添加必需的培养液组分
D.严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件
3.某同学在酿制果醋时,先进行酒精发酵,然后转入醋酸发酵,结果发现果醋产量较低,其原因不可能是( )
A.由酒精发酵转入醋酸发酵时调低了温度
B.在发酵过程中混入了其他微生物,造成了污染
C.酒精发酵后通入氧气,导致醋酸发酵受到抑制
D.酒精发酵产生的酒精浓度过高,抑制了醋酸发酵
4.含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用 该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖 由其作用可知,该培养基是一种( )
A.固体培养基
B.合成培养基
C.天然培养基
D.选择培养基
5.葡萄酒的制作离不开酵母菌 下列说法错误的是( )
A.无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖
B.自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌
C.葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的
D.制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
6.解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用 脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色 将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养 甲菌菌落周围呈现深蓝色,乙菌菌落周围不变色,下列说法错误的是( )
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
7.利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为:先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌,发酵6天后,再接入活化的醋酸杆菌,发酵5天 下列有关叙述错误的是( )
A.乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖
B.酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
C.酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气情况不同
D.接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度
8.下列关于制作泡菜的叙述,错误的是( )
A.添加陈泡菜水可明显缩短泡菜制作时间
B.泡菜盐水浓度过高会导致泡菜咸而不酸
C.制作泡菜的过程中有机物的种类将减少
D.传统泡菜制作利用的是天然乳酸菌发酵
9.某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌,进行了如下实验:取泡菜汁样品,划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基,经培养得到了单菌落 下列叙述正确的是( )
A.培养基pH需偏碱性
B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C.需在无氧条件下培养
D.分离得到的微生物均为乳酸菌
10.为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险,需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测 下列叙述错误的是( )
A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境极端微生物
B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀
C.组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品
D.采用平板划线法等分离培养微生物,观察菌落特征
11.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作 下列叙述正确的是( )
A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
12.β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质 从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产 下列叙述不正确的是( )
A.所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌
B.通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌
C.还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力
D.该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发
13.关于培养基的配制,说法错误的是( )
A.在配制培养乳酸杆菌的培养基时,需加入维生素
B.微生物的适应性强,配制培养基时可以不考虑pH
C.虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐
D.配制培养基时要注意各种营养物质的浓度和比例
14.如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节,下列相关叙述,正确的是( )
A.图示接种方法是平板划线法,也可在液体培养基中进行
B.图中每个划线区域均可形成单个菌落
C.除第一次划线外,以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端
D.该接种方法适用于细菌的计数
15.“每天喝一点,健康多一点”是某品牌枸杞果酒提出的消费理念 下图为生产该枸杞果酒的传统工艺流程,以下有关分析错误的是( )
选料→ →粉碎→灭菌→接种→发酵→ →果酒
A.流程中两处“ ”依次表示冲洗和过滤
B.制作枸杞果酒时,温度应该控制在18~30℃
C.在酒精发酵旺盛时,若因前期灭菌不合格导致容器中存有醋酸菌,则醋酸菌可将果汁中的糖分解为醋酸
D.可在酸性条件下用重铬酸钾溶液来检验是否有酒精产生
16.海洋中塑料污染日趋严重,科学家现已分离到高效降解普通塑料的微生物,并且发现了能大量产生“可降解的塑料”的微生物,以上成果有望持续解决海洋塑料污染问题 下列说法错误的是( )
A.寻找高效降解塑料的微生物,应该到塑料长期污染严重的海域牧集样品
B.样品中分解塑料的微生物数量过少,需要对采集的微生物进行富集培养
C.在筛选分解塑料的微生物时应使用只加入塑料颗粒、琼脂、NaCl和水的培养基
D.利用微生物产生的“可降解的塑料”来代替普通塑料,可有望缓解塑料污染
17.对微生物所需营养物质的描述,正确的是( )
A.氮源只作为合成蛋白质的原料
B.碳源只作为能源物质
C.无机盐可有可无
D.水是重要的营养要素之一
18.五味子果实成熟期在8、9月份,由于其鲜果挂果期短,常温下不易贮存 利用五味子干果酿酒可为五味子产业化调整提供一条新的途径,利用五味子生产果酒的流程是五味子→分选→烘干→去梗→清洗→加20倍水煮沸30min→加水→调整成分→接种酵母→发酵(带渣),过滤→五味子原酒→陈酿,过滤→调配→杀菌→成品 下列相关叙述错误的是( )
A.分选过程需把霉变的五味子剔除,防止影响果酒质量
B.加20倍水煮沸30min 的目的是把五味子中的成分释放出来从而有利于发酵
C.调整发酵液成分的目的之一是为酵母菌的繁殖及发酵提供适宜的pH
D.可将五味子原酒升高温度后,接种醋酸菌密封后即可得到五味子果醋
19.老面是指馒头发酵后剩下的含有酵母菌的生面团可用于再次发酵 老面发酵与酵母发酵的基本原理相同,但由于老面中混有杂菌,在酵母菌将葡萄糖分解成酒精后,部分酒精可进一步被氧化成乙酸,导致面有酸味 为了中和酸味,人们常往发面中加入适量食用碱,碱与乙酸发生反应的同时能产生CO 下列说法错误的是( )
A.葡萄糖分解生成酒精的过程属于放能反应
B.酒精氧化生成乙酸的过程不能使面团变得膨松
C.老面发酵时有酸味可能是因为醋酸菌在缺氧条件下将葡萄糖分解成乙酸
D.老面发酵时添加的食用碱可使面团更膨松
20.日常生活中保存食品的方法罐藏法、巴氏消毒法、冷藏法、干燥法、加防腐剂等,他们是如何阻止或抑制微生物生长的 下列有关叙述错误的是( )
A.罐藏法是将食品进行短时间的高温、高压处理,然后放入已经消毒的金属或玻璃罐中,并在真空下封口
B.巴氏消毒法,是采用较温和的物理化学因素,杀死一切对人体有害的致病菌
C.防腐剂法,食品中加入无毒副作用的防腐剂可以抑制微生物生长
D.干燥法,由于含水量低,可以抑制微生物生长
二、非选择题(共4大题,40分)
21.自然界中的微生物往往是混杂生长的 人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定 以下是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程,请回答有关问题
(1)为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用 的培养基进行分离,这种培养基属于______培养基(按功能分类)
(2)若取土样6 g,应加入_____mL的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液 因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,配制成101~107不同稀释倍数的土壤溶液 将103~107倍稀释的稀释液分别吸取0.2 mL加入固体培养基上,用涂布器将菌液铺平,每个稀释度下至少涂布3个平板,这种接种方法称为 将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24~48 h,观察并统计菌落数,结果如表,其中 倍的稀释比较合适,由此计算出每克土壤中的菌落数为
个
稀释倍数 103 104 105 106 107
菌落数/个 1号平板 478 367 277 26 5
2号平板 496 354 261 20 8
3号平板 509 332 254 29 3
(3)若研究尿素分解菌的群体生长规律,可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌 操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是 将分离纯化后的单个菌落进行液体培养,可采用定期取样的方法进行计数 若以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设5个中方格中总菌数为45,菌液稀释倍数为102,那么原菌液的菌群密度为 个/mL
22.微生物在生物技术的运用中具有非常重要的地位,回答下列问题
(1)微生物的培养和接种等环节都需要严格做好无菌操作,下列所列举的实验材料和用具中,需要灭菌的是_________(填数字),需要消毒的是_________(填数字)
①培养基 ②接种环 ③实验者的双手 ④培养皿 ⑤酒精灯
(2)接种微生物的方法很多,如图,划线的顺序为1→2→3→4→5 回答问题:
①是_________法示意图,图中所用的接种工具是__________,操作过程中共需灼烧________次
②如用该培养基培养霉菌,则需培养基的pH调至______性
③在获得某种微生物纯净培养物的过程中,操作的关键是_____________ 操作过程需在__________附近进行
④该方法________(填“能”或“不能”)对微生物进行计数 利用稀释涂布平板法时,统计的菌落数常比实际值偏________,原因是_______________________
23.蓝莓果实中富含花青素等营养成分,具有保护视力、防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人机体免疫等功能 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”、“口服化妆品”等 如图是以鲜蓝莓为原料发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图 回答下列问题:
(1)过程①中,去除蓝莓枝梗应在冲洗之后,目的是
(2)蓝莓酒发酵旺盛时,醋酸菌 (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸,原因是
(3)过程③在 条件下可直接发酵为蓝莓醋 过程⑤发生的反应是
(写出反应式)
(4)鉴定蓝莓酒的方法是在酸性条件下用 检测样液,如果颜色由橙色变为 色,则说明产生了酒精;鉴定蓝莓醋除了观察菌膜、尝、嗅之外,还可以通过检测 变化
24.中国科学家采集了某深海海域的沉积物样品,分离、鉴定得到其中的深海放线菌,以期获得具有前景的抗生素替代品 据此回答下列问题
(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究,取1g沉积物样品接种在液体培养基中培养,其目的是
(2)稀释后取菌液通过 法接种到高氏一号(加数滴质量分数为10%的酚)培养基表面以获得单菌落,其接种工具的灭菌方法是 培养基中的酚能抑制细菌等杂菌的生长,而放线菌能在该培养基上正常生长,这种培养基属于 (填“选择”或“鉴别”)培养基
(3)紫色杆菌的紫色菌素(一种毒素,致死率高)能使培养基呈紫色,已知味喃酮C30能明显抑制紫色菌素的产生 研究人员筛选出了放线菌菌株A,用甲醇将菌株A发酵产物提取后配制成溶液,对提取物能否抑制紫色菌素的产生进行了研究
①将紫色杆菌菌液均匀地涂布在培养基表面,待菌液干燥后,将无菌圆纸片贴于培养基表面,按图1所示在滤纸片上滴加溶液,并得到图1所示的实验结果 该实验以 组为对照,通过比较A、B、C三组的 可知提取物是否能抑制紫色菌素的产生
图1 提取物抑制紫色菌素产生的研究
图2 提取物对紫色杆菌提取的影响
②实验表明甲醇溶液不会影响紫色杆菌的繁殖,对培养基中A、B、C三组紫色杆菌的数量进行监测,结果如图2所示 深海放线菌A的提取物可作为抗生素的替代品,其优点是不会使致病菌产生耐药性,据图推测,其原因是
参考答案
1.D 【解析】倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近进行,这样操作的目的是一方面该温度为刚不烫手的温度,另一方面在精灯火焰旁的目的是保证无菌,A正确;微生物的纯化培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤,其目的是获得纯培养物,B正确;用平板划线法通过连续划线操作可得到单菌落,稀释涂布平板法在稀释倍数足够高的情况下,可通过涂布在培养基上获得单菌落,即平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落,C正确;灼烧接种环之后,应待其冷却后再划线,D错误
2.B 【解析】发酵过程中要随时取样,检测培养液的细菌数目、产物浓度等,以了解发酵进程,A正确;发酵罐内微生物在适宜的条件下会迅速繁殖,因此,发酵过程中不需要不断的添加菌种,B错误;在发酵过程中需要向装置中及时添加必需的培养液组分,以保证发酵的最佳条件,C正确;要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等环境因素,因为环境条件不仅会影响微生物的繁殖,还会影响发酵产物的形成,D正确
3.C 【解析】果醋的制作需要的温度比果酒制作的温度高,如果调低了温度,果醋的产量可能会降低,A错误;在发酵过程中混入了其他微生物,影响了果醋的发酵,果醋的产量可能会降低,B错误;制作醋酸的醋酸菌是需氧型微生物,所以酒精发酵后通入氧气,不会使醋酸发酵受到抑制,C正确;酒精发酵产生的酒精浓度过高,抑制了醋酸菌的生长,从而抑制了醋酸发酵,D错误
4.D 【解析】由题干可知,LB培养基中含有氨苄青霉素,只允许对氨苄青霉素具有抗性的细菌生长,其他种类的微生物生长均受到抑制或阻止,因此属于选择培养基,D正确
5.D 【解析】在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,但不能大量繁殖,而在有氧条件下,酵母菌可以有氧呼吸大量繁殖,A正确;在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌,B正确;在发酵过程中,随着酒精度数的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色,因此葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的,C正确;随着发酵不断进行,葡萄糖不断被消耗,因此发酵液中含糖量是减少的,D错误
6.B 【解析】根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”,说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色,因此甲菌属于解脂菌,A正确;乙菌落周围没有出现深蓝色,说明乙菌落不能产生脂肪酶,不能利用脂肪为其供能,但乙菌落也可以在培养基上生存,说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源,B错误;可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比,更加直观,C正确;可以利用该平板比较解脂菌分泌脂肪酶的能力,观察指标可以以菌落周围深蓝色圈的大小为标准,D正确
7.B 【解析】当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,在该过程中,乙醇既是醋酸发酵的底物,又可以抑制杂菌繁殖,A正确;酵母菌属于真核生物,而醋酸杆菌属于原核生物,原核生物不能以有丝分裂的方式进行增殖,而是以二分裂的方式增殖,B错误;酵母菌是兼性厌氧微生物,醋酸杆菌是好氧菌,酵母菌在发酵初期需要通入氧气,以促进酵母菌的繁殖,中后期需要保持无氧环境,而醋酸菌发酵时全程需要通入氧气,以确保醋酸菌的发酵,故它们发酵过程中控制通气的情况不同,C正确;酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25℃,而醋酸菌的最适生长温度为30~35℃,故在接入醋酸杆菌后,应适当升高发酵温度,D正确
8.C 【解析】添加陈泡菜水可增加乳酸菌的含量,从而明显缩短泡菜制作时间,A正确;泡菜盐水浓度过高会抑制乳酸菌的繁殖,从而导致泡菜咸而不酸,B正确;制作泡菜的过程中由于乳酸菌的分解作用,使有机物的总量减少,而在乳酸菌发酵过程中会产生很多中间产物,从而有机物的种类会增加,C错误;传统泡菜制作利用的是天然乳酸菌发酵,D正确
9.C 【解析】因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸,故其生活的环境是酸性,培养基pH需偏酸性,A错误;平板划线接种时不需要稀释,B错误;乳酸菌是厌氧型微生物,所以需在无氧条件下培养,C正确;参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等,所以分离得到的微生物除了乳酸菌,还会有其他耐高盐的微生物,D错误
10.D 【解析】航天器处于外太空等极端环境中,其上可能存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物,A正确;细菌形成菌膜可粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀,故需要洁净的组装车间,B正确;在组装车间地面和设备表面可采集环境微生物样品,C正确;航天器及洁净的组装车间微生物很少,不需要用到平板划线法分离微生物,D错误
D 【解析】动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行,A错误;动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保证无菌环境,而微生物的培养基中不能加入抗生素,B错误;一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌,以防止杂菌污染,C错误;可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌,以防止杂菌污染,D正确
B 【解析】所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌,防止杂菌污染,A正确;通过配制培养基、灭菌、分离、接种、培养和挑选菌落和鉴定,才能获得该酵母菌,B错误;还需进行发酵实验检测该酵母菌产β﹣苯乙醇的能力,以确定筛选得到的酵母菌是高产β-苯乙醇的酵母菌,C正确;由题干信息可知,β﹣苯乙醇是能够赋予白酒特征风味的物质,故该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发,获得更多风味的白酒产品,D正确
B 【解析】培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外,还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求,如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,A正确、B错误;虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐,C正确;不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同,配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例,D正确
C 【解析】图示接种方法是平板划线法,该接种方法不能在液体培养基中进行,A错误;图中每次划线的菌种都来自上一次划线的末端,最后一次划线结束时(图中5区域)可形成单个菌落,B错误;在采用平板划线法对微生物进行接种时,除第一次划线外,以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端,C正确;该接种方法(平板划线法)可以分离出单个菌落,但不需要确定接种量和培养液浓度,因此不适用于细菌的计数,D错误
C 【解析】流程中两处“ ”依次表示清水冲洗和过滤,过滤的目的是除去果皮等杂质,A正确;由果酒制作的原理可知,制作枸杞果酒时,温度应该控制在18~25℃,B正确;在酒精发酵旺盛时,若因前期灭菌不合格导致容器中存有醋酸菌,由于此时为缺氧环境,而醋酸菌为需氧型微生物,在无氧条件下无法生存,因此,醋酸菌不能将果汁中的糖分解为醋酸,C错误;酒精在酸性条件下与重铬酸钾溶液发生颜色反应,由橙色变为灰绿色,以此原理可以来检验是否有酒精产生,D正确
16.C 【解析】塑料长期污染严重的海域中降解塑料的微生物比例较高,A正确;样品中分解塑料的微生物数量过少,欲使其数量变多可进行富集培养,B正确;该培养基中缺乏氮源,另外可以添加海水,C错误;普通塑料难以降解,“可降解的塑料”代替普通塑料,可有望缓解塑料污染,D正确
17.D 【解析】氮源除了用于合成蛋白质以外,还要参与合成核酸、ATP等物质,A错误;碳源主要用于构成微生物体细胞的物质和一些代谢产物,B错误;无机盐对微生物的生长是必须的,C错误;水是微生物生命活动必需的一种重要物质,D正确
18.D 【解析】霉变的五味子成分发生改变,在发酵过程中会产生不利于果酒品质的物质,A正确;若五味子不经煮沸,其内含有的物质不容易释放到水中,不利于发酵,B正确;经煮沸后得到的五味子汁酸度较高,利用柠檬酸和碳酸氢钠来调节果汁至pH3.0~5.0,有利于酵母菌的繁殖与发酵,C正确;对五味子原酒接种醋酸菌后需持续通气方可得到五味子果醋,D错误
19.C 【解析】葡萄糖分解生成酒精的过程释放能量,形成ATP,属于放能反应,A正确;酒精氧化生成乙酸的过程无气体释放,不能使面团变得膨松,B正确;老面发酵时有酸味可能是因为醋酸菌在氧气充足条件下将葡萄糖分解成乙酸,C错误;老面发酵时添加的食用碱,碱与乙酸发生反应的同时能产生CO2,可使面团更膨松,D正确
20.B 【解析】罐藏法是将食品进行短时间的高温、高压处理,然后放入已经消毒的金属或玻璃罐中,并在真空下封口,由于食品中的微生物已经被杀死,外界微生物又不能进入,因此可以阻止或抑制微生物生长,较长时间保存食品,A正确;
巴氏消毒法,是采用较温和的物理化学因素,杀死一部分对人体有害的致病菌,B错误;防腐剂法,食品中加入无毒副作的防腐剂可以抑制微生物生长,C正确;干燥法,由于含水量低,可以抑制微生物生长,D正确
21.(1)以尿素作为唯一氮源 选择
(2)54 稀释涂布平板法 105 1.32×108 低
(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得(不连续)单个菌落 2.25×108
【解析】(1)根据分解尿素的细菌的代谢特点可知,分离该菌应该用以尿素为唯一氮源的选择培养基,鉴定该菌的培养基中应该加入酚红作为指示剂 (2)若取土样6 g,应加入6×(10-1)=54 mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液;将103~107倍的稀释液分别吸取0.2 mL 加入到固体培养基上,用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上;菌落计数的范围应该在30~300之间,根据题表分析可知,105倍的稀释倍数比较合适,平板上菌落的平均数=(277+261+254)÷3=264个,因此每克土壤中的菌落数=264÷0.2×105=1.32×108个;(3)平板划线法中,第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,目的是将聚集的菌体逐步稀释,以便获得由单个细胞形成的菌落
(1)①②④ ③
(2)①平板划线 接种环 6 ②酸 ③防止外来杂菌的入侵 酒精灯火焰 ④不能 小 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落
【解析】无菌操作,包括灭菌和消毒两种方式,消毒的方法有巴氏消毒法、化学消毒法、煮沸消毒法和紫外线消毒法等;灭菌的方法有干热灭菌法、灼烧灭菌法和高压蒸汽灭菌法 微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,其中,平板划线法不能计数,稀释涂布平板法可用于统计活菌数目
(1)①培养基需要用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,②接种环需要进行灼烧灭菌,③实验者的双手需要用酒精等化学药品消毒,④培养皿等玻璃制品常用干热灭菌法进行灭菌,⑤酒精灯是进行灼烧灭菌的工具,既不需要消毒,也不需要灭菌,故需要灭菌的是①②④,需要消毒的是③ (2)①由图可知,该图是平板划线法示意图,所用的接种工具是接种环,每次划线前后都需要对接种环进行灼烧灭菌,图中共划线5次,因此操作过程中共需灼烧6次 ②霉菌生长所需要的pH是酸性,培养霉菌时应将pH调至酸性,在碱性情况下霉菌不易繁殖,甚至会导致霉菌死亡 ③在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 为避免杂菌污染,操作过程需在酒精灯火焰附近进行 ④平板划线法不能对微生物进行计数,稀释涂布平板法可用于微生物计数 利用稀释涂布平板法计数时,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数常比实际值偏小
23.(1)防止杂菌污染
(2)不能 醋酸菌是好氧细菌,果酒发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长
(3)氧气、糖源充足 C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
(4)重铬酸钾 灰绿 pH
【解析】(1)过程①中,在冲洗之前去除蓝莓枝梗杂菌可能从伤口处侵入,造成污染,故去除蓝莓枝梗应在冲洗之后 (2)果酒发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长,因此即使蓝莓果汁中已含有醋酸菌,在蓝莓果酒发酵旺盛时,醋酸菌也不能将果汁中的糖发酵为醋酸 (3)过程③是果醋发酵,醋酸菌为需氧型生物,在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋;过程⑤是在果酒基础上产生果醋的过程,该过程反应式是C2H5OH+O2CH3COOH+H2O (4)鉴定酒精产生的方法是在酸性条件下用重铬酸钾检测样液,如果颜色由橙色变为灰绿色,则说明产生了酒精;醋酸产生会导致发酵液pH变化,鉴定蓝莓醋的常用方法是检测发酵液前后的pH变化
(1)增大深海放线菌的数量;使深海放线菌大量繁殖,确保得到所需微生物;富集目的菌种
(2)稀释涂布平板灼烧灭菌 选择
(3)AC 透明(褪色)圈的直径大小 深海放线菌的提取物不会影响致病菌的生长,从而不会胁迫病菌产生耐药性(或不易对致病菌形成选择压力而导致其产生耐药性)
【解析】(1)液体培养基可用于菌种的培养,使目的菌种数量增加,故研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究,取1g沉积物样品接种在液体培养基中培养,其目的是增大深海放线菌的数量,使深海放线菌大量繁殖,确保得到所需微生物,富集目的菌种 (2) 分离和纯化微生物常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,题干信息提示菌液已经先经过稀释,推知该处的接种方法是稀释涂布平板法;稀释涂布平板法时接种工具的灭菌方法是灼烧灭菌;在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基,培养基中的酚能抑制细菌等杂菌的生长,而放线菌能在该培养基上正常生长,这种培养基起到选择作用,属于选择培养基 (3)①研究提取物的作用时,一般需要设置空白对照和阳性对照,由题干可知味喃酮C30能明显抑制紫色菌素的产生,推知阳性对照滴加5uL味喃酮C30,而菌株A发酵产物通过甲醇提取,推知空白对照滴加5uL甲醇溶液,即该实验以A、C组为对照;由于紫色菌素使得培养基呈紫色,若提取物能抑制紫色菌素产生,则会产生褪色圈(透明圈),根据褪色圈的直径即可推知其抑制作用大小 ②由图2可知,滴加味喃酮C30和菌株A提取物后,紫色杆菌的数量与空白对照组(滴加甲醇溶液)差别不大,推知提取物不会影响致病菌的生长,但是致病菌产生的紫色菌素却有区别,推知深海放线菌的提取物不会影响致病菌的生长,从而不会胁迫病菌产生耐药性或不易对致病菌形成选择压力而导致其产生耐药性