3.2基因工程的基本操作程序第一课时课件(共16张PPT1个视频)-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

文档属性

名称 3.2基因工程的基本操作程序第一课时课件(共16张PPT1个视频)-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3
格式 pptx
文件大小 51.4MB
资源类型 教案
版本资源 人教版(2019)
科目 生物学
更新时间 2025-10-18 16:29:09

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文档简介

(共16张PPT)
第3章 基因工程
第2节 基因工程的基本操作程序(第一课时)
2
1
通过小组合作,完成基因工程生产抗菌肽的设计方案,并尝试改造抗菌肽。(科学探究)
理解掌握基因工程的基本操作程序, 提高实验设计与操作能力、信息提取与分析能力、自主学习与合作的能力,提升学生科学素养(科学思维)
了解基因工程在现实生活中的应用,理性评价基因工程的优势与潜在风险,树立正确的价值观(生命观念、社会责任)
3
01
该怎么获得A基因呢
序列数据库(如GenBank)
一、目的基因的筛选和获取
从相关的已知结构和功能清晰的基因中筛选。
目的基因的筛选:
AAGGGGCTTTGGAGTAAAATAAAAGAAGTAGGAAAAGAAGCAGCAAAAGCTGCAGCAAAAGCTGCAGGAAAAGCGGCTTTAGGTGCAGTTTCTGAGGCGGTG
ADR基因
利用PCR获取和扩增A基因
一、目的基因的筛选和获取
PCR——聚合酶链式反应
根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
此处为视频1
【重温】DNA体内复制的过程及条件
合成子链
解旋
形成新DNA
条件 在DNA复制中的作用
DNA母链
4种脱氧核苷酸
解旋酶
DNA聚合酶
引物
提供DNA复制的模板
合成DNA子链的原料
打开DNA双链
催化合成DNA子链
使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸
一、目的基因的筛选和获取
高温
耐高温DNA聚合酶
一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。(长度通常为20-30个核苷酸)。
此处为视频2
思考:PCR技术获取目的基因时,至少要经过几次循环才能从DNA分子中间分离出A基因?
5’
3’
5’
5’
第一次循环
第二次循环
3’
5’
第三次循环
3’
3’
经过3次,可以产生两条单链等长的目的基因片段。
一、目的基因的筛选和获取
01
一、目的基因的筛选和获取
资料:若将抗菌肽(由34个氨基酸组成)中第27位的甘氨酸(密码子:GGG)替换为赖氨酸(密码子:AAG),则将解决该抗菌肽生物活性低等现状。
5’AAGG ┉ CGGGGAA ┉ CGTG 3’
3’TT CC ┉ GCCCCTT ┉ GCAC 5’
第27位
5’AAGG ┉ CGAAGAA ┉ CGTG 3’
3’TT CC ┉ GCTTCTT ┉ GCAC 5’
第27位
此处为视频3
01
大引物PCR
常用来研究蛋白质结构改变导致功能变化的一种定点诱变技术。该方法仅需进行两次PCR反应,第一次加突变引物和侧翼引物,第一次PCR的产物作为第二次PCR扩增的大引物,过程如右图。
任务一:请同学们仔细阅读资料,尝试利用大引物PCR技术在A基因中引入突变位点(GG替换为AA)。
要求:
1.利用准备好的材料把两次PCR的过程均展示在白板上。
红色磁片代表A基因,蓝色磁片代表引物, 绿色磁片代表延伸的子链。
2.在子链上写出对应的碱基序列,并标明5’和 3’。
02
思考:各种元件有什么作用?
二.基因表达载体的构建(核心步骤)
启动子:RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA。复制原点:DNA复制的起始位点终止子:终止转录标记基因:便于重组DNA分子的筛选二.基因表达载体的构建(核心步骤)目的:确保基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代;使目的基因能够表达和发挥作用。
02
任务二:为了让改造后的A基因更好的与所选质粒连接,构建基因表达载体。请结合质粒,优化之前设计的引物。
二.基因表达载体的构建(核心步骤)
5’AAGG ┉ CGAAGAA ┉ CGTG 3’
3’TT CC ┉ GCTTCTT ┉ GCAC 5’
3’GCAC 5’
5’AAGG 3’
5’AAGCTT
转录方向
A1基因(改造后的基因)序列
GGGCCC 5’
A 
智慧闯关
1.(单选)下列关于PCR技术的叙述正确的是( )
A.PCR技术所用TaqDNA聚合酶能耐高温,其最适温度是95℃
B.扩增的原料会依次连接到引物的5'端
C.在第2轮循环产物中开始出现目标DNA片段
D.每次循环都需经过变性、复性和延伸
D
2. (不定项)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,下列关于基因表达载体的叙述,错误的是(   )
A.基因表达载体上需要有启动子,启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点
B.终止子位于RNA上,是转录结束的信号
C.切割目的基因和载体的酶必须是同一种限制酶
D.常利用抗生素合成基因作为标记基因
A 
智慧闯关
BCD  
A 
课后延伸
在实际进行目的基因与质粒的连接时,是否能确保所有目的基因均与质粒成功连接?若连接过程并非 100% 成功,还可能出现哪些常见的异常情况?